Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-07-15T17:09:25Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Cristiane Ferraz de Oliveira Santos.pdf: 1189344 bytes, checksum: 09af6d1fb3294c928ed1db6fbb006e3a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-15T17:09:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Cristiane Ferraz de Oliveira Santos.pdf: 1189344 bytes, checksum: 09af6d1fb3294c928ed1db6fbb006e3a (MD5) / CAPES;FAPESB;CNPq / A anemia falciforme é uma doença que é caracterizada pela presença da hemoglobina S (HbS). A doença apresenta quadro clínico heterogêneo, caracterizado por vaso-oclusão e eventos infecciosos, o que leva há um estado pró-inflamatório crônico. A Bahia é o estado que possui a freqüência mais elevada de HbS e maior prevalência da anemia falciforme. Desta forma vários estudos vêm sendo realizados visando a identificação de fatores que possam influenciar no prognóstico clínico da doença. A haptoglobina (Hp) é uma proteína de fase aguda que se liga ao heme, e possui função antioxidante. O objetivo desse trabalho foi investigar uma provável influência de polimorfismos gênicos na Hp nos aspectos fenotípicos e imunológicos de portadores de anemia falciforme de Salvador-Bahia. Foi realizado um estudo ambispectivo em 141 pacientes, 118 em estado estável (PE) e 23 hospitalizados por vaso-oclusão (PC). Também foi incluído no estudo um grupo de referência composto por 171 indivíduos controles normais provenientes da cidade do Salvador. A talassemia a23.7Kb, os haplótipos ligados ao grupo de genes da globina bS e os polimorfismos da Hp foram investigados por PCR e PCR-RFLP; os níveis séricos do TNF- , IL-1 e IL-6 foram detectados por ELISA e a história clínica dos pacientes foi obtida dos prontuários médicos. Os valores médios de volume corpuscular médio apresentaram-se mais elevados entre os pacientes portadores do haplótipo Ben/Ben no grupo PE (p<0,05). Pacientes do grupo PE portadores do haplótipo CAR/Ben apresentaram freqüência elevadas de eventos vaso-oclusivos (37,8%) em comparação aos demais haplótipos (p<0,05). A freqüência de infecções por broncopneumonia e pneumonia no grupo PC foi mais elevada nos portadores do haplótipo CAR/Ben em comparação ao CAR/CAR. Os pacientes do grupo PC portadores de talassemia 23.7 Kb em homozigose do grupo apresentaram os níveis médios de hematócrito mais elevados (p<0,05). O grupo PE apresentou freqüências mais elevadas dos alelos HP1S e HP1F (p=0,0041, OR=2,27, IC95%= 1,27-4,08); p<0,000, RP=2,99, IC= 1,65-5,41) e menores do alelo HP2 (p<0,0000, OR=0,31, IC95%:0,17-0,59) quando comparados ao grupo controle. O grupo PC apresentou freqüência maior do alelo HPIF (p= 0,0050, OR=3,83, IC95%: 1,4-10,3) e menor do alelo HP2 (p= 0,0427, OR=0,34, IC95%:0,34-0,97) quando comparado ao grupo controle. Os indivíduos do grupo PC portadores do genótipo Hp1S-1S e do grupo PE portadores do genótipo Hp2-1S apresentaram níveis mais elevados de IL-6 que os demais genótipos da Hp (p<0,05). Estudos adicionais são necessários para estabelecer o papel dos níveis de IL - 6, bem como a influência dos genótipos da haptoglobina sobre o quadro clínico de pacientes com anemia falciforme, uma vez que estes podem se constituir em marcadores de prognóstico que poderão ser utilizados futuramente no acompanhamento clínico destes indivíduos. / Salvador

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-15T14:50:01Z No. of bitstreams: 2 Dissertação RAFAEL RAMOS DA SILVA.pdf: 4228890 bytes, checksum: 2deabaf8e128457a177c31297e46db51 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-15T14:50:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação RAFAEL RAMOS DA SILVA.pdf: 4228890 bytes, checksum: 2deabaf8e128457a177c31297e46db51 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / FACEPE / As úlceras de membros inferiores (UMIs) representam uma das causas principais de morbidade na anemia falciforme (AF). Esta manifestação tem sido relacionada a hemólise, predisposição e inflamação que acarretam a secreção de citocinas. Neste contexto, nosso estudo objetivou avaliar citocinas relacionadas a via Th17 (IL-6, IL-17A, IL-22 e IL-23) no soro e em sobrenadantes de cultura de células mononucleares periféricas com e sem estimulação linfoproliferativa (anti-human CD3 e anti-human CD-28). Os níveis das citocinas também foram correlacionados aos parâmetros clínicos, hematológicos e bioquímicos nos pacientes AF com e sem histórico de UMIs (AFUMI e AFSU) bem como controles sadios. Nos pacientes SCALU, os altos níveis de IL-17A foram associados a ausência da síndrome torácica aguda (STA, p=0.0328). Os outros parâmetros clínicos analisados (osteonecrose, priapismo, esplenectomia e histórico de transfusão de sangue) não foram significantemente relacionados com outros níveis de citocinas. Nos pacientes AFUMI foi observado que os níveis aumentados de IL-17A foram associados aos altos níveis de LDH (p = 0.0130), o mesmo padrão de associação foi encontrado na IL-6 (0.0160) e IL-22 (p=0.0165) no mesmo grupo. Interessantemente, não encontramos correlações estatísticas no grupo AFSU. Os outros parâmetros hematológicos (hemoglobina, contagem de leucócitos e reticulócitos) e bilirrubina indireta não mostraram nenhuma correlação com as citocinas analisadas. Então, pela primeira vez, mostramos que a IL-17A presente nos pacientes AFUMI pode exercer um papel preventivo no desenvolvimento da STA. Além do mais, IL-6, IL-17A e IL-22 acompanharam os níveis de LDH apenas nos pacientes AFUMI sugerindo como marcadores adicionais a hemólise ou estar relacionados com a resposta imune contra patógenos extracelulares.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-26Bitstream added on 2014-06-13T18:29:22Z : No. of bitstreams: 1 jacob_ma_me_sjrp.pdf: 1262459 bytes, checksum: 7bde47cc7e532096f30ddf3b74ef0606 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Ministério da Saúde / A Doença Falciforme é caracterizada por anemia hemolítica e eventos vaso-oclusivos que resultam em crises de dor aguda, com danos crônicos e progressivos nos tecidos e órgãos. Pacientes com Doença Falciforme mostram ativação da coagulação sanguínea e sistema fibrinolítico, bem como aumento da atividade plaquetária e consumo de inibidores da coagulação, especialmente durante as crises vaso-oclusivas. A hiper-homocisteinemia, resultante de mutações no gene da metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) e no gene da cistationinabeta- sintase (CBS), constituem fatores de risco isolados para doenças vasculares. Diante da importância em se identificar fatores de risco para doenças tromboembólicas, a complexidade da fisiopatologia vascular na da Doença Falciforme e a associação de polimorfismo como potenciais modificadores genéticos, objetivamos avaliar a frequência de polimorfismos nos genes CBS e MTHFR em Doentes Falciformes. Foram pesquisados 300 pacientes de várias localidades do país, com hemoglobinopatia S (Hb SS, Hb SC, Hb S/Beta talassemia) para a presença da mutação C677T no gene da MTHFR e 844ins68, no gene da CBS. Foram coletados 5 mL de sangue venoso em EDTA, após consentimento informado. As metodologias clássicas para o diagnóstico de hemoglobinopatias foram realizadas para a confirmação do fenótipo de cada portador. O DNA foi extraído dos leucócitos pelo método fenol/clorofórmio. As detecções das mutações referentes aos genótipos de Hemoglobina e dos polimorfismos pesquisados foram realizadas por amplificação de um segmento gênico, com iniciadores que flanqueiam a região de inserção e análise por RFLP e AE. Posteriormente foi feita a revelação em gel de agarose, corado com... / Sickle Cell Disease is an inflammatory condition with dependent pathophysiology of vaso-occlusive episodes. Mutations in methylenetetrahydrofolate reductase gene (MTHFR) and cystathionine beta-synthase (CBS) gene are risk factors for vascular disease. Given the importance of identifying risk factors for vasoocclusive events in sickle cell patients, aimed to evaluate the frequency of mutations C677T in the MTHFR gene and 844ins68 in the CBS gene in these patients.We evaluated 300 sickle cell patients, HbSS, HBSC, HbS/Beta thalassemia, from Brasília, Goiânia, Rio de Janeiro, São Jose do Rio Preto and São Paulo. Were collected 5mL of venous blood in EDTA after informed consent. The classical methods were performed to confirm the phenotype of hemoglobin. The mutations to the genotypes of hemoglobin and polymorphisms studied were evaluated by Restriction Fragment Length Polymorphism and Allele Specific. The results showed that 93 patients (31.00%) were heterozygous and 13 (4.33%) homozygous for the C677T mutation and 90 were heterozygotes (30.00%) and 8 homozygous (2.66%) for the 844ins68 mutation, both with significant difference for genotypic frequency between the locatities. The allelic frequencies are in Hardy-Weinberg equilibrium for both mutations. Analyzing punctually the patients of the city of Goiania The frequence of mutations were significant and the presence of related vaso-occlusive events was more incident in patients with HbSS (p=0007). The 844ins68 mutation was approximately three times higher in patients with the presence of vaso-occlusive complications (p=0011). The C677T mutation didn´t show association with the risk for vaso-occlusive manifestations (p=0,193) in patients. The C677T/844ins68 interaction occurred in 12.08% of patients and showed an increase of twice the risk of vaso-occlusive manifestations (RR:2.16). The frequencies of mutations... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-20T21:34:48Z No. of bitstreams: 1 Larissa Carneiro Rocha.pdf: 1632038 bytes, checksum: 82deed6171da78f07c96b948629b2896 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-20T21:34:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Larissa Carneiro Rocha.pdf: 1632038 bytes, checksum: 82deed6171da78f07c96b948629b2896 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A doença falciforme (DF) possui prevalência mundial elevada e manifestação clinicamente variável, sendo que as infecções constituem risco elevado e causa de óbito nas crianças diagnosticadas com anemia falciforme (HbSS). A colonização da nasofaringe pode ser fator importante para a ocorrência de doença local ou sistêmica. O Streptococcus pneumoniae é um patógeno de importância epidemiológica mundial e causador de infecções entre os pacientes com DF. A prevalência da colonização pelo pneumococo em nasofaringe varia de acordo com a população estudada e condições ambientais. O Staphylococcus aureus também pode colonizar a nasofaringe, além de causar infecção de pele e tecidos moles, pneumonia, septicemia e infecções ósteo-articulares. Diferentes biomarcadores têm sido associados à modulação clínica na DF e eles são comumente associados à hemólise e inflamação. O presente estudo teve como objetivo estabelecer o perfil de biomarcadores em indivíduos com DF associando-os ao perfil de colonização nasofaríngea e orofaríngea, com ênfase para os marcadores de infecção e hemólise que possam estar associados ao prognóstico clínico dda doença. As análises bioquímicas foram realizadas para a avaliação do perfil lipídico, hepático, inflamatório e hemolítico; marcadores clássicos de biologia molecular, como a talassemia α, os haplótipos ligados aos genes da globina beta e os polimorfismos no gene da mieloperoxidase foram também investigados. Desta forma, foi desenvolvido um estudo de corte transversal, com casuística composta por 154 pacientes com DF em idade pediátrica e em estado estável da doença, sendo 68,2% (105/154) HbSS e 31,8% (49/154) com doença SC (HbSC), todos provenientes do estado da Bahia. As crianças HbSS apresentaram diferenças significativas na grande maioria das variáveis laboratoriais analisadas e associadas ao metabolismo lipídico, renal, hepático e à hemólise e inflamação, quando comparadas ao grupo HbSC e ao controle saudável. A colonização em nasofaringe/orofaringe pelo S. pneumoniae esteve presente em 14 (9,6%) pacientes e pelo S. aureus em 81(56,6%) pacientes. Quanto ao perfil de sensibilidade dos isolados de pneumococos da população estudada, não foi observado o aumento da resistência pneumocócica à penicilina. A avaliação de modelos de análise multivariada demonstrou que a presença de colonização nasofaríngea e orofaríngea esteve associada à ocorrência de infecção juntamente com a contagem de leucócitos, sendo que o genótipo exibido pelo paciente foi fator de risco para a ocorrência de pneumonia. Os mesmos modelos apontaram o envolvimento dos polimorfonucleares neutrófilos na ocorrência de vaso-oclusão. Os resultados demonstram que os pacientes colonizados em nasofaringe pelo S. pneumoniae e pelo S. aureus apresentaram elevação dos valores de HCM, VCM, AST, ALT e Ferritina; investigações rotineiras de biomarcadores clássicos associados ao estudo da colonização de nasofaringe e orofaringe podem ter papel importante no acompanhamento da evolução clinica de indivíduos com DF, uma vez que os achados significativos sugerem que a presença de colonização tem papel importante na modulação dos eventos hemolítico, inflamatório e infeccioso presentes na doença. / The sickle cell disease (SCD) has a high prevalence worldwide and a variable clinical manifestation and infections are considered an event of high risk and cause of death in children diagnosed with sickle cell anemia (HbSS). The colonization of nasopharynx and oropharynx can be an important factor for the occurrence of local or systemic disease. The Streptococcus pneumoniae is a pathogen of epidemiological importance worldwide and cause of infection among SCD patients. The Staphylococcus aureus may also colonize the nasopharynx and may be cause of infection of skin and soft tissue infections, pneumonia, sepsis and osteo-articular infections. Different biomarkers have been associated with clinical modulation in SCD and they are commonly associated with hemolysis and inflammation. This study aimed to establish a profile of biomarkers in individuals with SCD in association with the profile of oropharyngeal and nasopharyngeal colonization, with emphasis on infection and hemolysis markers that may be associated with clinical prognosis. Biochemical analysis were performed to evaluate the lipid profile, liver, hemolytic and inflammatory markers and classical molecular biology, such as α-thalassemia, the haplotypes linked to the beta globin genes and polymorphisms in the myeloperoxidase gene were also investigated. Thus, it was developed a cross-sectional study and the casuistic was composed of 154 children with SCD in a steady-state, with 68.2% (105/154) HbSS and 31.8% (49/154) with SC disease (HbSC), all from the state of Bahia. HbSS children showed significant differences in almost every mean values analyzed for variables associated with lipid metabolism, kidney, liver and hemolysis and inflammation when compared to HbSC and control group. In the present study there was colonization in the nasopharynx / oropharynx by S. pneumoniae in 14 (9.6%) patients and by S. aureus in 81 (56.6%) patients. The profile of sensitivity of pneumococcal isolated from the studied population did not show an increase in pneumococcal resistance to penicillin. The evaluation of models of multivariate analysis showed that the presence of oropharyngeal and nasopharyngeal colonization was associated with the occurrence of infection and white blood cell count, and the patient genotype was a risk factor for the occurrence of pneumonia. The same models indicated the involvement of polymorphonuclear neutrophils in the occurrence of vaso-occlusion. The results presented in this study demonstrate that patients colonized in the nasopharynx by S. pneumoniae and S. aureus have elevated values of MCH, MCV, AST, ALT and ferritin, suggesting that a routine investigation of biomarkers associated with the classic study of the colonization of the nasopharynx and oropharynx may play a role in monitoring the clinical course of patients with SCD, once that significant findings described here suggest that the presence of colonization plays an important role in modulation of hemolytic events, inflammatory state, and infectious presented by patients.