Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2017 / Made available in DSpace on 2017-09-19T04:11:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 347967.pdf: 2166309 bytes, checksum: 7f1eead160573b68c02a94c31a97c6be (MD5) Previous issue date: 2017 / Introdução: a asma é uma doença inflamatória das vias aéreas complexa e heterogênea. O conhecimento dos diferentes perfis inflamatórios é necessário para a identificação de possíveis endótipos. A partir do conceito de vias aéreas unidas é plausível que as medidas do processo inflamatório das vias aéreas inferiores possam ser avaliadas a partir de espécimes das vias aéreas superiores obtidos por meio de uma matriz sintética absortiva Objetivos: investigar a exequibilidade, a correlação e o poder discriminativo das medidas de um painel de interleucinas do fluido nasal e do escarro induzido obtidas por meio de uma matriz sintética absortiva. Métodos: estudo transversal que avaliou asmáticos sem uso de corticóide inalatório ou oral (n=32) e indivíduos normais (n=21). Espécimes do fluido nasal e do escarro induzido obtidos por meio de uma matriz sintética absortiva foram processados e analizados em uma plataforma multiplex. As medidas de um painel de interleucinas (IL-1ß, IL-5, IL-8, IL-10, IL-13, IL-17, IFN-y, Eotaxina-1, IP-10 e TNF-a) do fluido nasal foram comparadas ao painel de interleucinas do escarro induzido. A contagem diferencial de células do escarro induzido foi também determinada para avaliar o padrão inflamatório das vias aéreas.Resultados: o método de coleta por matriz sintética absortiva foi exequível em mensurar as interleucinas do fluido nasal e do escarro induzido de indivíduos asmáticos e normais sem estímulo provocatório prévio. Houve correlações positivas entre as medidas do fluido nasal e escarro induzido para as interleucinas IL-5 (r 0,6; p valor < 0,001), IL-10 (r 0,5; p valor < 0,001), IP-10 (r 0,6; p valor < 0,001), IFN-y (r 0,6; p valor < 0,001) e TNF-a (r 0,4; p valor 0,002), e correlações positivas entre a contagem de eosinófilos do escarro e a IL-5 nasal (r 0,7; p valor < 0,001). A análise de componentes principais identificou 2 padrões inflamatórios distintos, um com citocinas padrão Th1/Th17 e outro com citocinas predominantemente Th2. A análise de regressão multivariada logística permitiu identificar a IL-5 e IL-8 do fluido nasal como preditoras do escarro eosinofílico. Conclusão: o método de coleta por matriz sintética absortiva foi exequível e permitiu detectar as correlações entre o perfil inflamatório do fluido nasal e do escarro induzido, bem como discriminar grupos de indivíduos com perfis inflamatórios distintos.<br> / Abstract: Introduction: asthma is a complex and heterogeneous inflammatory disease of the airways. Assessment of different inflammatory patterns is necessary for the identification of endotypes of the disease. According to the united airways concept it is plausible that the measurements of the inflammatory process of the lower airways can be studied in specimens of the upper airways sampled by means of a synthetic absorptive matrix Objectives: to investigate the feasibility, correlation and discriminative properties of a method of sampling nasal lining fluid and induced sputum using a synthetic absorptive matrix for the measurement of a panel of interleukins Methods: this cross-sectional study evaluated steroid naive asthmatics (n = 32) and normal subjects (n = 21). Specimens of the nasal fluid obtained by a synthetic absorptive matrix and induced sputum were processed and analized in a multiplex plataform. A panel of nasal interleukins (IL-1ß, IL-5, IL-8, IL-10, IL-13, IL-17, IFN- y, Eotaxin-1, IP-10 and TNF-a) was compared to the panel of induced sputum interleukins. Sputum differential cell count was also determined to access the inflammatory profile of the airways. Results: the synthetic absorptive matrix sampling method was feasible to measure nasal lining fluid and induced sputum interleukins of asthmatic and normal individuals without previous challenge. We found positive correlations between nasal and sputum interleukins, such as IL-5 (R 0.6, p value <0.001), IL-10 (r 0.5, p value <0.001), IP-10 (r 0.6, p value <0.001), IFN-y (r 0.6; p valor < 0,001) and TNF-a (r 0.4, p value 0.002), and positive correlations between sputum eosinophil counts and nasal IL-5 (r 0.7; p value <0.001). Principal component analysis identified two major components; one Th1 / Th17 driven and the other mostly driven by Th2 interleukins. Logistic regression analysis allowed the identification of two predictors of eosinophilic sputum; IL-5 and IL-8. Conclusion: the method of sampling specimens of the nasal lining fluid and induced sputum by means of a SAM for the measurement of interleukins was feasible, allowed to detect positive correlations between the inflammatory profile of the nasal fluid and induced sputum, as well as discriminated groups of individuals with different inflammatory patterns.

Tese de Doutorado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, para obtenção do título de Doutor em Ciências da Saúde. / A asma representa um problema de saúde publica, e tradicionalmente é classificada como uma doença atópica, onde o contato ao alérgeno pode desencadear sinais clínicos como inflamação das vias aéreas, hiperresponsividade brônquica e obstrução reversível do fluxo aéreo. Após a instalação do processo inflamatório característico da asma, ocorre a migração de células inflamatórias para o pulmão e vias aéreas. Estudos demonstram a presença de Linfócitos T auxiliar no pulmão de pacientes com asma, estas células estão envolvidas na produção de citocinas que regulam a síntese de imunoglobulinas como a IgE. Sabendo que a interação de células do sistema imune e contato com antígenos representam um ponto crucial na fisiopatologia de doenças inflamatórias, o propósito do presente estudo foi avaliar o potencial antiasmático do Canabidiol (CBD) neste cenário, por já ter sido relatado o seu papel como antiinflamatório, imunomodulador e antioxidante. Para tal, utilizamos dois modelos animais, camundongos Balb/c e ratos Wistar, ambos expostos a ovalbumina. Os animais foram avaliados quando a mecânica respiratória, níveis de citocinas, expressão de CB1, CB2, MMP-2 e MMP-9, no pulmão, lavado broncoalveolar e sangue. Os animais avaliados tratados com o CBD apresentaram grande diminuição no perfil inflamatório pulmonar quando comparados com os animais expostos ao modelo de asma, com a diminuição de citocinas (IL-4,IL-5, IL-13, eotaxina), mostraram também melhora quanto a elasticidade do pulmão quando diminuíram a elastância estática pulmonar dos animais que receberam o tratamento, confirmando tal potencial com a diminuição de células polimorfonucleares e da hiperresponsividade das vias aéreas, reforçando estudos que também apresentam com esse papel anti-inflamatório. Contudo, faz-se necessária a realização de mais trabalhos para avaliar se essa terapia pode ser realmente estendida para a prática clínica.