Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El Virus Diarrea Viral Bovina (VDVB) es el agente causal del complejo Diarrea Viral Bovina / Enfermedad de las Mucosas (DVB/EM), que afecta productiva y reproductivamente al bovino, provocando grandes pérdidas económicas en la industria bovina mundial. El virus se presenta en todo el mundo, con prevalencias que van del 50 al 90%, diseminándose vía horizontal y vertical. En las infecciones prenatales se puede observar muerte fetal, momificación, aborto, alteraciones teratogénicas o generación de animales persistentemente infectados (PI); y en las infecciones posnatales, generalmente cursa en forma subclínica, pero también hay problemas reproductivos, inmunosupresión y cuadros más severos (incluso letales) como la diarrea viral bovina, enfermedad de las mucosas y síndrome hemorrágico. El VDVB presenta una gran variabilidad genómica, antigénica y biológica. El VDVB se clasifica en dos genogrupos o genotipos: el genotipo VDVB1 (con actualmente 15 subgrupos) y el genotipo VDVB2. Antigénicamente, aunque presenta sólo un serotipo tiene una gran variabilidad antigénica. Biológicamente presenta dos biotipos: biotipo citopático (cp) y no citopático (ncp) y diversos estudios evidencian la presencia de virus de distinta virulencia. En esta memoria de título se determinó la variabilidad genética de aislados chilenos del VDVB por filogenia molecular de la región E2 del genoma viral. Para ello, se analizaron genéticamente virus obtenidos desde animales con signología sospechosa de infección por VDVB, como así también de animales aparentemente normales, que en su conjunto provenían de la Región Metropolitana, VIII y X regiones. También se analizaron algunos virus aislados entre los años 1993-2001, que se mantenían guardados a -20°C. De dieciocho virus analizados, catorce pertenecen al genotipo VDVB-1 y cuatro al genotipo VDVB-2. En los virus del genotipo VDVB-1, 6 pertenecen al subgrupo 1a, 7 al subgrupo 1b, y 1 al subgrupo 1e. En los virus del genotipo VDVB-2, todos corresponden al período 1993-2001, no siendo aislado el VDVB-2 en las muestras posteriores al 2001. Esto concluye que el perfil genético de los aislados virales chilenos del VDVB analizados en esta memoria presenta una alta variabilidad, distinto a lo reportado en el estudio anterior, pero muy similar al perfil genético reportado en Argentina. / Proyecto FONDECYT 1060581

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El objetivo de este estudio fue detectar la presencia de anticuerpos neutralizantes para el virus diarrea viral bovina (VDVB) en sueros de vicuñas de la Región de Tarapacá de Chile. Asumiendo que el 3,5% de las vicuñas del altiplano chileno, poseen anticuerpos neutralizantes para el VDVB, se obtuvo un total de 90 muestras de sueros de vicuñas durante el año 2005, de las localidades de Caquena y Chislluma, comuna de Putre y General Lagos, respectivamente, Provincia de Parinacota, Región de Tarapacá. La detección de anticuerpos neutralizantes se realizó mediante la prueba de seroneutralización (SN), en donde se enfrentaron diluciones del suero de vicuñas, en base dos, con 100 dosis infectantes cultivo de tejido 50% (DICT50) de la cepa de referencia NADL del VDVB. En ninguna de las muestras analizadas se detectó la presencia de anticuerpos neutralizantes para el VDVB o para algún otro virus antigénicamente relacionado. Los resultados permiten concluir que menos del 3,5% de las vicuñas de las localidades estudiadas, podrían estar infectadas por un pestivirus que comparte antígenos comunes con la cepa de referencia NADL del VDVB

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / El virus de la diarrea viral bovina (VDVB) es de distribución mundial y afecta a rumiantes domésticos como bovinos, ovinos, caprinos y camélidos sudamericanos (CSA). En ganadería, produce grandes pérdidas económicas sobre todo por los problemas reproductivos que genera. El VDVB, presenta una gran diversidad genética que se traduce en variaciones en el comportamiento antigénico y patogénico, produciendo una diversidad de síndromes clínicos que se manifiestan, con mayor o menor intensidad, dependiendo de varios factores asociados al hospedador o al virus. Uno de los factores del virus, asociados a la severidad de los cuadros clínicos es la virulencia. El objetivo de esta memoria de título fue conocer la eficiencia replicativa de aislados pertenecientes a distintos subgrupos genómicos del VDVB, obtenidos de CSA con diferentes manifestaciones clínicas, mediante la determinación de cinética de crecimiento viral en cultivos celulares. Para ello, se analizó diferentes variables de crecimiento viral utilizando 11 aislados de diferentes subgrupos genómicos (dos VDVB-1b, seis VDVB-1e y tres VDVB-2a). Considerando las variables periodo de eclipse, producción máxima de viriones, liberación máxima de viriones y velocidad de crecimiento, los aislados del VDVB-1e resultaron ser significativamente más eficientes que los aislados de los subgrupos VDVB-1b y VDVB-2a. Este resultado sugiere que el genotipo VDVB-1e presenta una mayor virulencia, lo que se traduciría en cuadros clínicos de mayor consideración con respecto a los otros subgrupos analizados / FONDECYT Nº 1080130 “Análisis genómico, antigénico y de virulencia de pestivirus obtenidos de rumiantes domésticos”

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / El Virus Diarrea Viral Bovina (VDVB) infecta al ganado biungulado generando considerables pérdidas productivas y reproductivas. Análisis filogenéticos segregan al VDVB en dos genotipos dentro del género Pestivirus, VDVB genotipo 1 (VDVB-1) y VDVB genotipo 2 (VDVB-2). Análisis filogenéticos posteriores han demostrado la existencia de subgrupos dentro de los dos genotipos. Al menos 15 subgrupos para el VDVB-1 (de a hasta o) y dos subgrupos para el VDVB-2 (a y b) han sido identificados. Estudios previos han demostrado que en el ganado de Chile se han aislado los subgrupos VDVB-1a, VDVB-1b, VDVB-1i, VDVB-1j y VDVB-2a en bovinos, VDVB-1b, VDVB-1j y VDVB-2a en camélidos sudamericanos y VDVB-1j en ovinos y caprinos. Para conocer si existen diferencias antigénicas entre aislados chilenos del VDVB de los subgrupos VDVB-1j obtenidos de ovinos y caprinos, frente a aislados chilenos del VDVB de los subgrupos VDVB-1j y VDVB-1b obtenidos de bovinos, VDVB-2a obtenidos de camélidos sudamericanos y frente a cepas de referencia del subgrupo VDVB-1a, se produjeron sueros policlonales en conejos mediante inoculaciones de los aislados y cepas de referencia. Con los sueros inmunes se realizaron pruebas de seroneutralización cruzada enfrentando cada suero con los virus homólogos y heterólogos. Los resultados demostraron que no hubo diferencias antigénicas significativas entre los aislados virales de ovinos, caprinos y bovinos del subgrupo VDVB-1j, y que hubo diferencias antigénicas significativas entre los virus de los subgrupos VDVB-1j, VDVB-1b, VDVB-2a y VDVB-1a. Esta es la primera identificación antigénica de aislados de VDVB obtenidos de ovinos y caprinos de Chile, que puede tener implicaciones importantes en la epidemiología de la VDVB y debería ser considerada en programas de inmunización, prevención de infecciones dentro o entre especies y en el empleo de virus y sueros hiperinmunes como materiales de diagnóstico en los laboratorios / proyecto FONDECYT Nº 1080130

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El Virus Diarrea Viral Bovina (VDVB) es un patógeno de gran importancia, puesto que es responsable de importantes pérdidas económicas en la industria del bovino, debido a que causa disminución en la producción, trastornos reproductivos y, en algunos casos, puede provocar la muerte del animal. El VDVB pertenece al género Pestivirus de la familia Flaviviridae. Es un virus cuyo genoma es un ARN de hebra simple y polaridad positiva, que presenta dos regiones no codificantes en sus extremos (5’NCR y 3’NCR) y una única región codificante entre ambas, la cual codifica para una poliproteína que contiene todas las proteínas virales. Una de estas proteínas es la glicoproteína Erns, que posee actividad RNasa. Esta actividad enzimática no es necesaria para la multiplicación del virus y se reconoce como un factor de virulencia, dado que su inhibición produce atenuación de los signos clínicos en el hospedero. En la presente memoria se midió la actividad RNasa de cuatro aislados nacionales del VDVB, pertenecientes a los subgenotipos 1b (CH/113 y CH/1025) y 1j (CH/511 y CH/1087), los subgenotipos más predominantes en el país; y la cepa de referencia internacional, NADL, perteneciente al subgenotipo 1a. Ambos virus del subgenotipo 1j presentan una mutación en el sitio activo de la actividad RNasa de la glicoproteína Erns, correspondiente a la sustitución del aminoácido Histidina por Tirosina, mientras que los otros virus estudiados poseen la secuencia silvestre del VDVB. Los resultados obtenidos muestran que los virus del subgenotipo 1j presentan una baja ostensible de su actividad RNasa. Por el contrario, las cepas del subgenotipo 1b presentan niveles de actividad RNasa comparables a los de la cepa de referencia NADL. Al comparar las diferencias en actividad enzimática entre las cepas que presentaron o no la mutación, utilizando el método de Scheffé, se determinó que estas diferencias son estadísticamente significativas. / Proyecto Fondecyt 1060581

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El Virus Diarrea Viral Bovina (VDVB) está ampliamente distribuido a nivel mundial y afecta tanto a rumiantes domésticos (bovinos, caprinos, ovinos, etc.) como silvestres (ñu, jirafa, búfalo, etc.), siendo una de las principales causas de pérdidas económicas en el ganado bovino, debido principalmente a problemas reproductivos. El VDVB presenta una alta variabilidad genómica, que se manifiesta en sus características biológicas y antigénicas. La manifestación clínica de la enfermedad también presenta importantes diferencias, que van desde cuadros subclínicos (la mayoría de los casos) hasta presentaciones con un 100% de mortalidad. Estas diferencias se deben a una serie de factores, tanto del virus como del hospedador, siendo uno de los factores importantes la virulencia del aislado viral, que se asocia a la eficiencia replicativa del VDVB. El objetivo de esta Memoria de Título fue determinar la eficiencia replicativa de diez aislados del VDVB, obtenidos de bovinos naturalmente infectados con diferentes manifestaciones clínicas y pertenecientes a los distintos genotipos y subgenotipos presentes en Chile, ocho pertenecientes al genotipo 1 (VDVB1a, 1b, 1i y 1j) y dos al genotipo 2 (VDVB2a). Para ello, se determinó la cinética de multiplicación viral en cultivos de células Madin-Darby Bovine Kidney y la eficiencia replicativa se estimó ocupando los siguientes indicadores: Producción máxima de viriones (DICT50/ml) (P), Período de multiplicación viral (horas) (T), Velocidad de síntesis de viriones (V), en que V=P/T y la Pendiente durante la fase exponencial de la multiplicación viral (M). De acuerdo a los indicadores, los virus de los subgenotipos 1a y 1j tendrían una alta eficiencia replicativa, principalmente por la capacidad de completar su ciclo infectivo a 12 horas post-infección y los menores tiempos para concluir la multiplicación viral. Por otra parte, los virus del subgenotipo 1b y 1i serían los virus con la menor eficiencia replicativa, considerando su baja producción máxima de viriones, velocidad de síntesis de virus infecciosos y la pendiente durante la fase exponencial de la multiplicación viral

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El virus diarrea viral bovina (VDVB) es el agente causal del complejo Diarrea Viral Bovina/ Enfermedad de las Mucosas y otros cuadros clínicos, que generan importantes pérdidas económicas en la industria del bovino. El VDVB presenta una gran variabilidad genómica, que ha llevado a clasificarlo en dos genotipos (1 y 2). En el genotipo VDVB-1 se identifican 15 subgrupos virales (1a-1o) y en el genotipo VDVB-2 sólo dos (2a y 2b). En Chile, el virus presenta una amplia diseminación, con prevalencias serológicas de un 69,2% en la Región de la Araucanía, De los Ríos y De los Lagos y de un 59,7% y 86% en bovinos de leche y de carne de la Región Metropolitana respectivamente. El objetivo de esta memoria fue determinar la composición genética de los virus del VDVB que infectan a los bovinos en Chile. Para ello, a cuarenta y cinco virus obtenidos desde distintas regiones de Chile se procedió a establecer su parentesco genético por filogenia molecular de la región 5´ no codificante (5´NCR) del genoma viral. Los resultados indican que cuarenta virus pertenecen al genotipo VDVB-1 y cinco al genotipo VDVB-2. En el genotipo VDVB-1, 2 virus pertenecen al subgrupo VDVB-1a, quince al VDVB-1b, veinte al VDVB-1j y tres al VDVB-1i, siendo este último subgrupo detectado por primera vez en Chile. Todos los virus del genotipo VDVB-2 pertenecen al subgrupo VDVB-2a. Los resultados permiten concluir que los virus del VDVB que circulan actualmente en el ganado bovino de Chile presentan una alta variabilidad genómica y su composición genética es muy similar a la de los virus presentes en Argentina. / Proyecto FONDECYT 1060581

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La diarrea viral bovina (DVB) es una de las enfermedades que afecta cuantiosamente la producción del ganado bovino, responsabilizándosele de producir significativas pérdidas económicas. Es producida por el virus diarrea viral bovina (VDVB) un virus del género Pestivirus que infecta naturalmente a los animales ungulados del orden Artiodactila. Dentro de este orden se ubican los camélidos sudamericanos (CS) constituidos por dos especies de camélidos sudamericanos silvestre (CSS), el guanaco y la vicuña, y dos especies de camélidos sudamericanos domésticos (CSD), la alpaca y la llama. En Chile, se ha detectado la presencia de CSD, que habitan la Región Metropolitana, infectados con el VDVB, pero, se desconoce si los CS del Altiplano de la Región de Tarapacá (lugar donde se concentra sobre el 90% de la población de alpacas, llamas y vicuñas de Chile) están infectados con pestivirus. Los CSD alpacas y llamas, son animales muy importantes para la sobrevivencia de los habitantes de la zona altiplánica del país, razón por la cual es necesario que estas especies estén en óptimas condiciones sanitarias. El objetivo de este estudio es conocer si los CSD del altiplano chileno están infectados con pestivirus a través de la pesquisa de animales que han respondido inmunológicamente a la infección de campo del agente viral. Considerando que un 1% de los animales poseen anticuerpos seroneutralizantes contra Pestivirus y trabajando con un 95% de confianza para detectar la presencia de un animal positivo, se analizó un total de 136 muestras de suero de llamas y 30 sueros de alpacas, de 12 localidades del altiplano de la Región de Tarapacá. En la prueba de seroneutralización se enfrentó diluciones en base dos del suero de cada animal con 100 dosis infecciosas cultivo de tejido 50% (DICT50) de la cepa citopatogénica NADL del VDVB. Los resultados mostraron que ningún suero de los animales estudiados presentó anticuerpos neutralizantes para la cepa NADL del VDVB. Se concluye que menos del 1% de los CSD procedentes de las 12 localidades del altiplano de la Región de Tarapacá, de donde se obtuvieron las muestras de suero, podrían estar infectadas con el VDVB o con algún otro Pestivirus que compartan antígenos neutralizables comunes con el VDVB

El presente estudio tuvo como objetivo determinar la seroprevalencia del virus de la diarrea viral bovina (VDVB), en bovinos mayores a 6 meses, provenientes de 114 pequeños productores de 3 diferentes comunidades de la microcuenca de Ccañipía, provincia de Espinar, Cusco, con esta finalidad se obtuvieron muestras de sangre de 406 animales para la detección de anticuerpos contra el VDVB mediante la prueba de neutralización viral. El 56.2% ± 4.8 (228/406) de los animales presentaron anticuerpos contra el VDVB. Animales seropositivos fueron detectados en todos los grupos etarios, sin embargo el 65.4% (149/228) de los animales seroreactores pertenecieron al grupo de vacas en producción y en seca (mayores a 24 meses de edad). El 51.3% (20/39) de los toros y toretes presentaron anticuerpos contra el VDVB. El 86.8% (99/114) de los propietarios tuvieron al menos un animal seropositivo a anticuerpos contra el VDVB. Los títulos de anticuerpos variaron entre 2 a >256. No se detectaron animales persistentemente infectados (PI). Los resultados indican que el VDVB tiene una amplia distribución en la población bovina de los hatos de la microcuenca de Ccañipía. / --- The objective of the present study was to determine the seroprevalence of bovine viral diarrhea virus (BVDV) in bovines over 6 months old, originating of 114 small producers from 3 different communities of Ccañipia dairy microregion, Espinar province, Cusco, with this purpose were obtained blood samples of 406 animals for the detection of antibodies against BVDV by means of viral neutralization test. 56.2% ± 4.8 (228/406) of the animals showed antibodies against BVDV. The seropositive animals were detected in all age groups, however 65.4% (149/228) of seroreative animals belonged to group of dairy, and dry cows (over 24 months old). 51.3% (20/39) of bulls and young bulls showed antibodies against BVDV. 86.8% (99/114) of owners had at least one seropositive animal to antibodies against BVDV. The antibody titles varied between 2 to >256. No persistently infected (PI) animals were detected. The results suggest that BVDV has a broad distribution in the bovine population of the herds of Ccañipia dairy microregion.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El virus de la diarrea viral bovina (VDVB) pertenece al género Pestivirus de la familia Flaviviridae. Se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza infectando a animales silvestres y domésticos del orden Artiodactyla. Es el agente causal del complejo diarrea viral bovina/enfermedad de las mucosas, ocasiona enfermedad digestiva y respiratoria, es inmunosupresor y genera importantes pérdidas económicas asociadas a problemas reproductivos como pérdida embrionaria, abortos, mortinatos, defectos congénitos y el nacimiento de animales persistentemente infectados (PI). Presenta una gran variabilidad genómica; dos genotipos (VDVB-1 y VDVB-2), y varios subgrupos genómicos dentro de cada genotipo, han sido identificados. Existen dos biotipos, citopático (CP) y no citopático (NCP), y aunque no presentan serotipos, existen varias variantes antigénicas del virus. En esta memoria se buscó establecer si se manifiestan diferencias significativas a nivel antigénico entre cepas de referencia (NADL, Singer y Oregon) del subgrupo 1a del VDVB-1 y aislados virales de diferentes genotipos y subgrupos del VDVB (VDVB-1b, VDVB-1e y VDVB-2a) recolectados de 3 bovinos, 6 alpacas y 5 llamas de la Zona Central de Chile, y que provenían de rebaños sanos y de rebaños con antecedentes de signos clínicos atribuibles a la enfermedad (abortos, mortinatos, y muerte en adultos). Los aislados de alpacas y llamas corresponden a virus de los subgrupos 1b y 1e del genotipo 1 del VDVB (VDVB-1b y VDVB-1e), y al subgrupo 2a del genotipo 2 (VDVB-2a); mientras que los aislados de bovinos pertenecen a los subgrupos VDVB-1b y VDVB-1e. Para determinar el grado de similitud antigénica entre los aislados y cepas de los distintos subgrupos se realizaron pruebas de neutralización cruzada, empleando antisueros policlonales (elaborados en conejos). Mediante el cálculo del coeficiente de similitud antigénica (R) se pudo detectar la presencia de diferencias antigénicas significativas entre aislados de subgrupos distintos, mientras que los ubicados dentro de un mismo subgrupo mostraron valores de R indicativos de similitud antigénica en casi todos los casos, excepto en la combinación de un virus de alpaca y uno de bovino, ambos del subgrupo 1b, que mostraron diferencias antigénicas significativas / Proyecto Fondecyt 1080130