Resumo: Dos vírus que infectam o maracujazeiro no Brasil, atualmente o Cowpea aphid borne mosaic virus (CABMV), é considerado fator limitante à cultura. Dependendo da velocidade de disseminação e idade com que as plantas são infectadas no campo, a cultura torna-se comercialmente improdutiva. O presente estudo teve como objetivo, avaliar a diversidade e a dinâmica populacional dos afídeos na região da Alta Paulista, SP e a possibilidade de transmissão do vírus pela semente. Assim, quatro locais (Leste e Oeste da cidade de Marília e Municípios de Ocauçú e Guaimbê) foram monitorados durante 24 meses com armadilhas amarelas de água do tipo Moericke. Constatou-se nas quatro regiões a predominância do gênero Aphis. Outras espécies coletadas foram Myzus persicae, Geopenphigus flocculosus, Brevicoryne brassicae, Rhopalosiphum spp, Dysaphis spp e Lipaphis erysimi. A flutuação populacional de formas aladas do gênero Aphis, caracterizou-se por apresentar maiores revoadas em maio, junho, agosto e setembro. As espécies de Aphis (A. fabae, A. gossypii, A. spiraecola) devem ser os principais vetores do CABMV na região. Plantios novos, ao lado de plantações infectadas, tornam-se infectadas em três meses. Nos testes de transmissão através de sementes, do total de 13056 semeadas oriundas de plantas doentes, germinaram 10592, e em avaliações visuais dois meses após a germinação, não foram observadas plantas sintomáticas, indicando a não transmissão pela semente. / Abstract: From the viruses were described infecting passionfruit plants in Brasil, and the Cowpea aphid borne mosaic virus (CABMV), is considered the most hazardous. Depending on the spread velocity of aphids and the age that the plants are infected, the crops doesn’t produce commercial fruits. The present study was designed to evaluate the diversity and dynamic population of aphids in the Alta Paulista, SP region and aspects of seed transmission. For this, four regions (East and West of Marília city, Guaimbê and Ocauçú) were monitored for 24 months using yellow water Moerick trap. The predominance of the genus Aphis was observed in the four evaluated areas. Other species founded in the area were: Myzus persicae, Geopenphigus flocculosus, Brevicoryne brassicae, Rhopalosiphum spp, Dysaphis spp and Lipaphis erysimi. The population curve of alate Aphis spp showed the highest frequency of flights during May, June, August and September. The Aphis spp (A. fabae, A. gossypii, A. spiraecola) probably is the most important vector of the CABMV in the region. New crops near old infected plants, were infected in three months. To evaluate properties of seed transmission, from 13056 collected from infected plants, 10592 were germinated and evaluated during two months for the presence of visual symptoms. No plants with simptoms were observed indicating no seed transmission. / Orientador: Marcelo Agenor Pavan / Coorientador: Valdir Atsushi Yuki / Banca: Renate Krause Sakate / Banca: Aloisio Costa Sampaio / Banca: Alexandre Levi R. Chaves / Banca: Hugo Kuniyuki / Doutor

Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrência dos principais microrganismos periodontopatogênicos e dois viruses herpéticos na saliva e no biofilme microbiano supra e subgengival de 50 crianças e adolescentes com Síndrome de Down, através de métodos moleculares, comparando com um grupo de indivíduos de um grupo controle que não apresentam a síndrome. Espécimes clínicos foram coletados desses pacientes após avaliação das condições sócio-econômicas e comportamentais. A microbiota bucal dos pacientes foi caracterizada através da obtenção de amostras do biofilme subgengival, supragengival e saliva, as quais foram transportadas para o laboratório de Microbiologia e Imunologia da FOA-UNESP para detecção dos principais patógenos por PCR. As características de saúde periodontal foram avaliadas segundo índices específicos. A possibilidade de inter-relações entre os diferentes microrganismos foi determinada através dos testes de Qui-quadrado, teste exato de Fisher e Mann-Whitney. Verificou-se que as condições de saúde periodontal das crianças e adolescentes portadores de Síndrome de Down não diferia significativamente do grupo controle. A ocorrência das espécies microbianas anaeróbias e microaerófilas mais associadas ao ambiente periodontal foi semelhante nos dois grupos de crianças e adolescentes, independentemente da condição gengival, com modesto aumento na ocorrência de Prevotella intermedia e Enterobacteriaceae na saliva dos pacientes sindrômicos, o mesmo ocorrendo com Enterobacteriaceae, Campylobacter rectus, Prevotella nigrescens e gênero Pseudomonas no biofilme supragengival e P. intermedia no biofilme subgengival de pacientes sindrômicos sadios e pseudomonados naqueles com gengivite. A microbiota associada às diferentes condições periodontais nos dois grupos também evidenciou pequenas diferenças, mas confirma o papel... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to evaluate the occurrence of the major periodontal pathogens and two herpetic viruses in saliva and dental biofilm from 50 children and adolescents with Down's syndrome through molecular tools, comparing with those of individuals of a control group who did not present this syndrome. Clinical samples were collected from patients soon after evaluation of socioeconomic and behavioral conditions. The oral microflora was characterized by mean of samples of supragingival and subgingival biofilm and saliva, which were transferred to Microbiology and Immunology Laboratory at FOA-UNESP for detection of the major pathogens by PCR. Periodontal conditions were evaluated through specific indexes. The possibility of relationship between different microorganisms and clinical conditions were determined through Chi-Square test, Fisher's exact test and Mann-Whitney test. It was verified that periodontal conditions of children and adolescents with Down's syndrome did not differ significantly from the control group conditions. The occurrence of anaerobes and microaerophiles associated with periodontal environment was similar in both groups of children and adolescents, regardless of the gingival condition, with modest increase in the occurrence of Prevotella intermedia and Enterobacteriaceae in the saliva of patients syndromic patients, the same occurred with Enterobacteriaceae, Campylobacter rectus, Prevotella nigrescens and genus Pseudomonas in the supragingival biofilm and P. intermedia in subgingival biofilm of periodontally healthy patients and pseudomonads in syndromic patients with gingivitis. The microbiota associated with different periodontal conditions in both groups showed minor differences, but confirms the role of strict anaerobes in this process as well as the role of and cytomegalovirus and Epstein-Barr virus, while in syndromic patients, besides these... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Elerson Gaetti Jardim Júnior / Coorientador: Sandra Maria Herondina Coelho Ávila de Aguiar / Banca: Denise Pedrini Ostini / Banca: Luís Fernando Landucci / Mestre

Orientador: José Osmar Gaspar / Banca: Júlio César Borges / Banca: Jorge Alberto Marques Rezende / Banca: Marinônio Lopez Cornelio / Banca: Roberto da Silva / Resumo: A expressão de proteínas recombinantes em Escherichia coli produz proteínas que se acumulam como agregados insolúveis conhecidos como corpos de inclusão (CI). As proteínas na forma de CI são biologicamente ativas e com estrutura semelhante à proteína nativa quando a expressão é induzida a baixa temperatura. Estas características e a facilidade em purificar os CIs podem representar uma possibilidade de utilização dos CIs como antígenos para a produção de anticorpos policlonais. O gene da proteína capsidial (CP) do Southern bean mosaic virus (SBMV), um Sobemovirus, foi clonado no vetor pET 28a e a proteína expressa em E. coli a 25 º C. Uma análise comparativa entre a CP recombinante presente na forma de corpos de inclusão e a proteína nativa presente nas partículas virais purificadas foi realizada utilizando a técnica de espectroscopia de infravermelho (FT-IR). Os conteúdos de estruturas secundárias identificados diferiram nos percentuais de folha-β enquanto os percentuais hélices-α foram preservados. Uma estrutura tridimensional foi gerada por modelagem molecular por homologia e comparada com os dados obtidos nas análises de FT-IR. Os percentuais obtidos por FT-IR da CP nativa foram condizentes com os dados gerados por modelagem molecular por homologia. Mesmo com algumas diferenças nos conteúdos de folha- β da CP recombinante foi possível verificar um estado conformacional semelhante à proteína nativa. Os corpos de inclusão contendo a proteína recombinante expressa foram utilizados como antígenos para a imunização de coelhos. O antissoro obtido mostrou ser específico e compatível a um antissoro previamente preparado com partículas virais purificadas do SBMV na detecção do vírus em extratos de feijoeiros infectados utilizando imunoensaios por Western blot, PTA-ELISA, Dot Blot e Tissue Printing... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The production of recombinant proteins in Escherichia coli yields proteins that accumulate as insoluble aggregates known as inclusion bodies (IBs). Biologically active with native-like structure is trapped inside IBs when the expression is induced at low temperature. These features, and the facility to purify the IBs, can represent a possibility to use the IBs as an antigen for the production of polyclonal antibodies. The coat protein gene of Southern bean mosaic virus, a Sobemovirus, was cloned in the vector pET 28a and expressed in Escherichia coli at 25 ºC. The inclusion bodies containing the recombinant protein were isolated and purified. A comparative analysis between recombinant protein present in the form of inclusion bodies and native coat protein present in the purified virus particles was performed using Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR). The secondary structure contents identified differences in the percentage of β-sheets while α-helices content was much preserved. The three-dimensional structure was generated using molecular modeling and was compared to the data obtained from FT-IR analysis. The percentages obtained from FT-IR analyses of the native CP were consistent with the structure generated through homology molecular modeling. Nevertheless, some differences were present on the content of β-sheets structure of the recombinant CP indicating that the protein conformational state is found in a native like condition. The IBs containing the expressed protein were used as an antigen to immunize rabbits. The antiserum obtained showed to be specific and comparable to one previously prepared with purified SBMV particles, in the virus detection in leaf extracts of infected bean plants using Western blot, PTA-ELISA, Dot Blot and Tissue Printing assays. So, the use of IBs containing recombinant viral proteins to immunize rabbits is a new, easy and very... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Elerson Gaetti Jardim Júnior / Banca: Marcelo Coelho Goiato / Banca: Roberta Okamoto / Banca: Marco Antonio Hungaro Duarte / Banca: Milton Carlos Kuga / Resumo: A dependência de drogas traz sérias conseqüências sistêmicas, econômicas e sociais. Assim, o presente estudo objetivou avaliar a ocorrência de enfermidades em pacientes do gênero feminino com dependência química e a possibilidade da cavidade bucal dessas pacientes se converter em reservatório de microrganismos oportunistas.. Para tanto, foram obtidos dados referentes às condições de saúde sistêmicas, socioeconômicas, consumo de medicamentos, uso de drogas lícitas ou ilícitas de 50 pacientes com dependência química mantidas internadas em clínica de desintoxicação, o mesmo ocorrendo com igual número de pacientes não dependentes. A seguir, foram realizados exames clínicos intra e extrabucais. Amostras de biofilme supra e subgengivais, saliva e das mucosas foram transferidas para água ultrapura. A ocorrência da família Enterobacteriaceae, Enterococcus sp., E. faecalis, E. faecium, Pseudomonas sp., P. aeruginosa e Candida spp., Helicobacter e H. pylori, bem como os viruses HSV-1, CMV e EBV-1 foi avaliada por PCR ou nested PCR. Verificou-se que 94% das pacientes do grupo teste eram usuárias de mais do que uma única droga, sendo o tabaco (92%), bebidas alcoólicas (68%), crack (66%) e cocaína (52%) as mais consumidas, quase sempre em múltiplas associações. Verificou-se maior freqüência de alterações comportamentais e/ou psicológicas no grupo teste, além de dores articulares, infecções oportunistas, cefaléia, fadiga, xerostomia, formigamento das extremidades, anemia, periodontite, perda de peso, retardo do processo de reparo, entre outras. Observou-se freqüência significavente mais elevada de Candida sp., C. albicans, família Enterobacteriaceae, Enterococcus sp., Helicobacter sp., H. pylori, vírus CMV e vírus EBV-1 na saliva das pacientes com dependência química, enquanto no biofilme supragengival verificou-se... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Drug addiction frequently causes serious systemic, economic and social consequences. Thus, the present study aimed at evaluating the occurrence of illnesses in female chemically dependent patients as well as the possibility of their oral cavity becoming potential reservoir for opportunistic microorganisms. For this purpose, data regarding systemic health and socioeconomic status, medication consumption, legal or illegal drug use were obtained from 50 female chemically dependent patients undergoing inpatient detoxification treatment; while the same procedure was carried out with 50 non-addicted females. Subsequently, intra and extra-oral clinical tests were done. Samples from the supra- and subgingival biofilms, saliva and oral mucosa were transferred to ultrapure water. The occurrence of Enterobacteriaceae family, Enterococcus sp., E. faecalis, E. faecium, Pseudomonas sp., P. aeruginosa and Candida sp., Helicobacter and H. pylori, as well as viruses HSV-1, CMV and EBV-1 was evaluated by using PCR or nested PCR. It was verified that 94% of the patients from the chemically dependent group were multiple drug users, being tobacco (92%), alcohol (68%), crack (66%) and cocaine (52%) the most consumed ones. A higher frequency of behavioral and/or psychological alterations was verified in the chemically dependent group, besides articular pain, opportunistic infections, headaches, fatigue, xerostomy, tingling extremities, anemia, periodontitis, weight loss, delay in the repair process, among others. A higher frequency of Candida sp., C. albicans, Enterobacteriaceae family, Enterococcus sp., Helicobacter sp., H. pylori, CMV and EBV-1 viruses was observed in the saliva from the chemically dependent group; while in the supragingival biofilm a higher proportion of positive samples to Candida sp., C. albicans, Enterobacteriaceae family, Enterococcus sp., E. faecalis, Helicobacter... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor