Orientador: Paulo Câmara Marques Pereira / Banca: Jussara Marcondes Machado / Banca: Hilton Coimbra Borgo / Banca: Manoel Armando Azevedo dos Santos / Banca: Sergio Aparecido Torres / Resumo: O ecossistema gastrintestinal é caracterizado por interações recíprocas e dinâmicas entre o epitélio gastrintestinal, células do sistema imunológico e sua microbiota intestinal (MI), a qual desempenha atividades metabólicas importantes locais (mucosa intestinal) e sistêmicas. Avaliar a MI de crianças com malformação craniofacial atendidas em um hospital especializado e verificar a influência da antibioticoprofilaxia com cefazolina em palatoplastia foi o objetivo desse trabalho. Foram isoladas e quantificadas as bactérias anaeróbias intestinais dos gêneros Bacteroides sp, Bifidobacterium sp e Lactobacillus sp nas fezes de 11 crianças sem fissura de palato (C) e de 50, com fissura de palato (FP), no período compreendido entre maio de 2007 a setembro de 2008. Foi avaliada a MI de 18 crianças com fissura de palato após 24 horas de tratamento, em dose única na indução anestésica, com cefazolina para palatoplastia. Observou-se que a frequência de Bacteroides sp foi maior no grupo FP (p < 0,001). Para Lactobacillus sp, houve tendência a maior quantidade (p = 0,086) no grupo FP. Não houve diferença na frequência de Bifidobacterium sp entre os dois grupos de crianças (p = 0,495). Houve diminuição do número de UFCs de Bacteróides sp (p = 0,031) e Lactobacillus sp (p = 0,004) em crianças com fissura tratadas com cefazolina em cirurgia de palato. Para o gênero Bifidobacterium sp, houve tendência à diminuição nas UFCs (p = 0,063). A dificuldade de ingestão de nutrientes, aleitamento materno insuficiente, otites recorrentes, entre outras ocorrem com frequência em indivíduos com malformação craniofacial, o que pode ter influenciado na composição da MI. A associação da palatoplastia e o uso de antibiótico... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The gastrointestinal ecossystem is characterized by reciprocal and dynamic interactions between the host and the intestinal microbiota (IM), which performs local important metabolic (intestinal mucosa) and systemic activities. The purposes of this study are the assessment of the IM in children with craniofacial malformation attended at a specialized hospital and the verification of the influence of the antibiotic prophylaxis with cefazolin on palatoplasty. The intestinal anaerobic bacteria Bacteroides sp, Bifidobacterium sp and Lactobacillus sp were isolated and quantified in the feces of 11 non-cleft children (NC) and 50 cleft children (CP), from May 2007 to September 2008. After a 24-hour treatment, the IM in 18 cleft children was evaluated - in a single dose - by means of anesthetic induction with cefazolin, in palatoplasty. It was observed that the Bacteroides sp occurred more often in the CP group (p < 0.001). Regarding the Lactobacillus sp, the largest quantity (p = 0.086) tended towards the CP group. There was no frequency difference for the Bifidobacterium sp between the two groups of children (p = 0.495). There was a reduction in the number of Colony-Forming Units (CFUs) for the Bacteroides sp (p = 0.031) and the Lactobacillus sp (p = 0.004) in cleft children treated with cefazolin, in palate surgeries. Regarding the Bifidobacterium sp, there was a reduction tendency in the CFUs (p = 0.063). The difficulty to ingest nutrients, the insufficient breastfeeding, the recurrent otitis - among other things - are frequent in individuals with craniofacial malformation, which may have influenced the IM composition. The association between palatoplasty and the use of antibiotics has intensified the IM changes. New investigations must be performed in order to verify which factors related to the craniofacial malformation, the surgical treatment and the use of antimicrobians would... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: Objetivos: Dois estudos controlados cegos aleatórios foram realizados para avaliar os resultados clínicos e microbiológicos iniciais e a longo prazo, da tetraciclina aplicada com o microbrush no tratamento de sítios com bolsa periodontal persistente 5mm e sangramento à sondagem, tratados previamente por raspagem e alisamento radicular (RAR). Material e método: Quarenta e dois pacientes com pelo menos 4 dentes com bolsas periodontais 5 mm e sangramento à sondagem foram divididos em 2 grandes grupos: tetraciclina e controle. Nos grupos tetraciclina, dois dentes receberam aplicação de solução de cloridrato de tetraciclina (100mg/mL) com microbrush uma vez por semana por 4 semanas (grupo T) e os outros dois dentes receberam o mesmo tratamento associado a uma sessão de RAR na primeira consulta (grupo RAR+T). Nos grupos controle, dois dentes receberam uma sessão de RAR (grupo RAR) e outros dois dentes receberam aplicação de solução salina com microbrush uma vez por semana por 4 semanas associada a uma sessão de RAR na primeira consulta (grupo RAR+S). Medidas clínicas de índice de placa visível (IP), índice de sangramento gengival (IG), sangramento à sondagem (SS), profundidade de sondagem (PS), nível de inserção clínica (NIC), recessão gengival (RG), e coletas microbiológicas para identificação das bactérias Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Actinobacillus actinomycetemcomitans), Porphyromonas gingivais, Prevotella intermédia, Prevotella nigrescens, Tannerella forsythia, e Treponema denticola foram tomadas no baseline, 30, 90 e 180 dias após o tratamento. Amostras de biofilme subgengival foram analisadas por reação de polimerase em cadeia. Resultados: Todas as terapias resultaram em melhora na PS, NIC e SS, embora as diferenças clínicas entre os grupos não tenham alcançado significância estatística. (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objectives: Two randomized controlled single-blind studies were carried out to evaluate the initial and the long term clinical and microbiological results of tetracycline applied with a microbrush in treatment of sites with persistent periodontal pockets 5mm and bleeding on probing previous treated by scaling and root planning (SRP). Methods: For each patient in the test groups, two teeth received 4 applications of tetracycline solution (100mg/ml) with a microbrush once a week (T group) while the other two teeth received the same treatment plus one session of SRP at the first appointment (SRP+T group). For each patient in the control groups, two teeth received one session of SRP (SRP group) and the other two received 4 applications of saline with a microbrush once a week plus one session of SRP (SRP+S group). Clinical measurements were taken at baseline, 30, 90 and 180 days after last treatment. Subgingival biofilme samples were analyzed by polymerase chain reaction for Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Actinobacillus actinomycetemcomitans), Porphyromonas gingivais, Prevotella intermédia, Prevotella nigrescens, Tannerella forsythia, e Treponema denticola identification. Results: All therapies provided significant improvement in probing depth, clinical attachment level and bleeding on probing, although the clinical difference did not reach statistically significance. At 1 month post-therapy the prevalence of P. gingivalis was significantly reduced in groups that received SRP plus additional therapy and T. forsythia was significantly reduced in only test groups. Until 6 months P. gingivalis, T. forsythensis,and A. actinomycetemcomitans significantly decrease in prevalence only for tetracycline groups. Conclusion: The results of the present study suggest that tetracycline solution applied with a microbrush may be an alternative in management of persistent periodontal pockets with further microbiologic benefits. / Orientador: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Coorientador: Denise Madalena Palomari Spolidorio / Banca: Adriana Campos Passanezi Sant'Ana / Banca: José Roberto Cortelli / Banca: Sérgio Luiz de Souza Salvador / Banca: Silvana Regina Perez Orrico / Doutor

Resumo: A xilanase de Thermoascus aurantiacus codificada pelo gene xynA é uma enzima termofílica com uma promissora aplicação industrial. Neste trabalho, foi realizada a clonagem desse gene, que foi isolado pela técnica de RT-PCR, seguido de expressão heteróloga em Pichia pastoris. Realizada a caracterização da enzima nativa no extrato bruto do fungo filamentoso assim como da enzima recombinante antes e depois da purificação parcial, a qual foi realizada pelo processo de troca iônica. A atividade ótima das enzimas foi em pH 5,0 e as mesmas foram estáveis diante de ampla faixa de pH (3,5- 10,5, por 24h). Em relação à temperatura ótima e termoestabilidade houve algumas diferenças entre as três condições da xilanase. A xilanase nativa apresentou-se mais ativa a 75°C sendo estável na faixa de 35°C a 75°C após 1 hora de incubação, a xilanase recombinante antes e depois do processo de purificação apresentou temperatura ótima em 60°C, no entanto antes da purificação permaneceu estável entre 35°C e 80°C, e após a purificação entre 35°C e 65°C, em ambos os casos após a incubação por 1 hora. Esse foi o primeiro relato de expressão do gene xynA em P. pastoris. Com a purificação da enzima recombinante serão viabilizados estudos estruturais que requerem grandes quantidades da enzima. Além disso as características observadas de XynA em nossas análises mostraram-se bastante interessantes do ponto de vista biotecnológico. Nossos dados permitirão então outros estudos para adequação a aplicação dessa xilanase em processos industriais / Abstract: A xilanase de Thermoascus aurantiacus codificada pelo gene xynA é uma enzima termofílica com uma promissora aplicação industrial. Neste trabalho, foi realizada a clonagem desse gene, que foi isolado pela técnica de RT-PCR, seguido de expressão heteróloga em Pichia pastoris. Realizada a caracterização da enzima nativa no extrato bruto do fungo filamentoso assim como da enzima recombinante antes e depois da purificação parcial, a qual foi realizada pelo processo de troca iônica. A atividade ótima das enzimas foi em pH 5,0 e as mesmas foram estáveis diante de ampla faixa de pH (3,5- 10,5, por 24h). Em relação à temperatura ótima e termoestabilidade houve algumas diferenças entre as três condições da xilanase. A xilanase nativa apresentou-se mais ativa a 75°C sendo estável na faixa de 35°C a 75°C após 1 hora de incubação, a xilanase recombinante antes e depois do processo de purificação apresentou temperatura ótima em 60°C, no entanto antes da purificação permaneceu estável entre 35°C e 80°C, e após a purificação entre 35°C e 65°C, em ambos os casos após a incubação por 1 hora. Esse foi o primeiro relato de expressão do gene xynA em P. pastoris. Com a purificação da enzima recombinante serão viabilizados estudos estruturais que requerem grandes quantidades da enzima. Além disso as características observadas de XynA em nossas análises mostraram-se bastante interessantes do ponto de vista biotecnológico. Nossos dados permitirão então outros estudos para adequação a aplicação dessa xilanase em processos industriais / Orientador: Eleni Gomes / Coorientador: Fernando Araripe Gonçalves Torres / Banca: Fabio Squina / Banca: Mara Corrêa Lelles Nogueira / Mestre

Resumo: Este trabalho teve como objetivo avaliar a produção de lipase pelo fungo Myceliophthora sp F 2.1.4, por fermentação em estado sólido (FES), fermentação submersa (FS) e fermentação semi-sólida. Alguns testes foram realizados para a obtenção do meio nutricional que melhor proporciona a produção da lipase. Nas condições encontradas foi possível a obtenção de 21 U/mL de lipase na FES, enquanto que para a FS, a produção caiu bruscamente tendo conseguido somente 0,20 U/mL, indicando que a FES foi mais adequada para a produção de lipase por Myceliophthora sp F 2.1.4. As mesmas condições também foram testadas para a fermentação semi-sólida com o uso de buchas vegetais e, dessa forma, a produção enzimática voltou a aumentar com aproximadamente 9 U/mL. A caracterização parcial da lipase produzida pelo fungo Myceliophthora sp. F 2.1.4 por fermentação em estado sólido indicou que a enzima atua em seu máximo em pH entre 5,0 e 7,0 e a temperatura de 35ºC sendo estável entre 35 e 50ºC e em faixa de pH 4,0 e 9,0. A enzima foi sensível a SDS, Al 3+ e Hg 2+ e tolerante a etanol e metanol, solventes utilizados na produção de biodiesel. Quanto à especificidade aos substratos, a lipase apresentou atividade crescente com o aumento da cadeia acila dos substratos sintéticos, conseguindo atuar em substratos com cadeia superior a 10 carbonos, critério utilizado para classificar uma enzima como lipase. Além disso, ela atuou bem em todos os substratos naturais testados, mostrando sua eficiência para aplicações de digestão de óleos. A lipase foi imobilizada em alginato de cálcio e em quitosana sendo possível uma reutilização da enzima por 6 e 12 vezes consecutivas, respectivamente. Estes resultados mostram que as propriedades físico-químicas da lipase de Myceliophthora sp F 2.1.4 possuem um grande potencial para aplicações industriais / Abstract: This study aimed to evaluate the production of lipase by the fungi Myceliophthora sp F 2.1.4, by solid-state fermentation (SSF), submerged fermentation (SmF) and semisolid fermentation. Several tests were made in order to obtain the best nutritional media to lipase production. This conditions were tested for SSF, SmF and semisolid fermentation. The results of the tests showed that for SSF it was possible to obtain 21 U/mL of lipase. On the other hand, for SmF, the production declined brusquely having obtained only 0,20 U/mL, indicating that the SSF was more appropriate for the production of lipase by Myceliophthora sp F 2.1.4 than SmF. In addition, for semisolid fermentation, using loofa sponges, the enzymatic production increased again with approximately 9 U/mL. Partial characterization of lipase produced SSF showed that this enzyme has maximum activity in both pH between 5,0 and 7,0 and temperature of 35 ºC, being stable between 35 and 50 ºC and in range of pH 4,0 and 9,0. The enzyme was sensible to SDS, Al 3+ and Hg 2+ , and tolerant to ethanol and methanol, solvent used for biodiesel production. Regarding the substrate specificity, the tests proved that the enzyme studied seems to be a real lipase since it could act in long-chain substrate. Moreover, it acted effectively for all natural substrates tested, being efficient for applications of oil digestion. Lipase was immobilized in alginate of calcium and chitosan, with the possibility of reuse of 6 and 12 consecutive times, respectively. These results imply that the physicochemical properties of lipase produced by Myceliophthora sp F 2.1.4 make it a great potential for industrial applications / Orientador: Eleni Gomes / Coorientador: Gustavo Orlando Bonilla Rodriguez / Banca: Maurício Boscolo / Banca: Humberto Márcio Santos Milagre / Mestre

Orientador: João Neudenir Arioli Filho / Banca: Sérgio Sualdini Nogueira / Banca: Vinícius Pedrazzi / Resumo: Vários protocolos de desinfecção podem ser usados para romper a cadeia de infecção cruzada entre o consultório odontológico e o laboratório de prótese. A inclusão de agentes antimicrobianos à composição do gesso ou a manipulação do gesso com soluções desinfetantes podem ser usados com esta finalidade. O propósito deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana de dois agentes desinfetantes (digluconato de clorexidina 2% e cloridrato de clorexidina 98%) incorporados ao gesso IV (FujiRock - GC Europe, Leuven, Bélgica) durante sua manipulação. No teste microbiológico de difusão em Agar foram uti l izados os seguintes microorganismos: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacilus subtilis e Candida albicans. Amostras com 5 mm de diâmetro e 3 mm de espessura foram separadas em quatro grupos: 1) gesso manipulado com água destilada esterilizada (controle positivo); 2) discos de papel embebidos com solução de digluconato de clorexidina 2% (controle negativo); 3) gesso manipulado com solução de digluconato de clorexidina 2%; 4) gesso com a incorporação de cloridrato de clorexidina 98% em pó, na proporção de 1% da massa do gesso, e manipulado com água destilada esterilizada. Após 1 hora e 24 horas do vazamento do gesso, as amostras foram posicionadas em placas de Petri com meios de cul tura específicos inoculados com as suspensões microbianas. A atividade antimicrobiana dos desinfetantes foi avaliada pelo diâmetro médio dos halos de inibição do crescimento microbiano. Os valores foram analisados pela ANOVA Aninhada (p<0,05) e teste de Tukey para comparações específicas. Os resultados encontrados demonstraram que os agentes desinfetantes analisados apresentaram atividade antimicrobiana quando misturados ao gesso, com exceção para Candida albicans, na qual não houve efeito da solução de clorexidina nos dois períodos de análise... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Many protocols for disinfection procedures can be used to break the chain of cross-contamination between dental office and dental laboratory. The inclusion of antimicrobial agent to the composition of gypsum or the manipulat ion of gypsum with disinfectant substances can be used to that aim. The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial activity of two disinfectant agents (2% chlorhexidine digluconate and 98% chlorhexidine hydrochloride) incorporated into type IV dental stone (FujiRock - GC Europe, Leuven, Belgium) at the time of mixing. The microbiological test used was the Agar diffusion test to the following microorganisms: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacilus subtilis and Candida albicans. Samples of 5 mm in diameter and 3 mm in length were separated in four groups: 1) dental stone mixed wi th steri le distilled water (positive control); 2) paper disk soaked wi th solution of 2% chlorhexidine digluconate (negative control); 3) dental stone mixed with solution of 2% chlorhexidine digluconate; 4) dental stone wi th incorporation of chlorhexidine hydrochloride 98% powder, in proportion of 1% of the dental stone mass, and mixed with sterile distilled water. The samples were placed, 1 hour and 24 hours after pouring of dental stone, in Petri plates with specific cul ture medium wich were inoculated with the microbial suspensions. The antimicrobial activity of disinfectant was evaluated by the average diameter of microbial growth inhibi tion zones. The data were analyzed with a Nested ANOVA (p<0,05) and Tukey test for specific comparisons. The disinfectant agents analyzed demonstrated antimicrobial effect against microorganisms used in this study, in exception to Candida albicans, against wich there was not effect from chlorhexidine digluconate at two periods of analysis. Significant difference between disinfectantes were found to all microrganisms... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Elerson Gaetti Jardim Júnior / Banca: Alvimar Lima de Castro / Banca: Luis Fernando Landucci / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de microrganismos exógenos e oportunistas (bactérias entéricas, pseudomonados, leveduras e Helicobacter pylori) na cavidade bucal de pacientes submetidos à radioterapia para tratamento de câncer de cabeça e pescoço. Cincoenta pacientes que iria receber radioterapia foram examinados antes, durante e 30 dias após radioterapia. Amostras de saliva, mucosa e biofilme foram coletadas e os microrganismos foram detectados por cultura e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Candida albicans, C. tropicalis, C. krusei, C. glabrata e C. parapsilosis foram as leveduras mais prevalentes nos pacientes submetidos a radioterapia. Gêneros Citrobacter, Enterobacter, Enterococcus, Klebsiella, Proteus, e Pseudomonas forma as bactérias mais frequentemente cultivadas. As bactérias alvo foram cultivadas de 77.8% dos pacientes edêntulos e 46.9% dos pacientes dentados 30 dias após a radioterapia. Por PCR, estes microrganismos foram detectados em todos os pacientes edêntulos e 78.1% dos pacientes dentados. Bactérias não orais e espécies de Cândida foram mais prevalentes nestes pacientes. Modificações no meio ambiente oral devido a radioterapia parecem facilitar a colonização por estes microrganismos. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the occurrence of opportunistic and exogenous microrganisms (enteric bacteria, pseudomonads, yeasts and Helicobacter pylori) in the oral cavity of patients undergoing radiotherapy (RT) for treatment of head and neck cancer. Fifty patients receiving RT were examined before, during and 30 days after RT. Saliva, mucosa, and biofilm samples were collected and microorganisms were detected by culture and Polymerase Chain Reaction (PCR). Candida albicans, C. tropicalis, C. krusei, C. glabrata and C. parapsilosis were the most prevalent yeasts in patients submitted to RT. Genera Citrobacter, Enterobacter, Enterococcus, Klebsiella, Proteus, and Pseudomonas were the most frequently cultivated bacteria. Targeted bacteria were cultivated from 77.8% edentulous and 46.9% dentate patients 30 days after RT. By PCR, these microorganisms were detected from all edentulous patients and from 78.1% of dentate patients. Non-oral bacteria and Candida species were prevalent in these patients. Modifications of the oral environment due to RT seem to facilitate the colonization of these microorganisms. / Mestre

Resumo: Os objetivos deste estudo foram comparar as condições clínicas periodontais e a prevalência de periodontopatógenos entre mulheres com periodontite crônica severa e seus filhos. Participaram deste estudo vinte mães com idade média de 36,6 anos (desvio padrão = 6,7) e um filho de cada uma destas com idade média de 11,8 anos (desvio padrão = 3,4). Foram analisadas as correlações entre a presença de placa visível (PV), sangramento marginal (SM), profundidade de sondagem >= 6mm e nível de inserção clínico >= 5mm das mães e PV e SM dos filhos e a associação da extensão e severidade da doença periodontal nas mães com a presença de perda de inserção clínica de 4 mm nos filhos. A avaliação microbiológica foi realizada através de cultura bacteriana de amostras colhidas de sítios periodontais para comparar a prevalência de Porphyromonas gingivalis, Prevotella sp., Fusobacterium sp., Peptostreptococcus micros, Capnocytophaga sp., Campylobacter sp. e Eikenella corrodens nas mães e nos filhos. Não foi observada nenhuma correlação significante entre os parâmetros clínicos das mães e dos filhos assim como não foi encontrada associação significante entre a presença de perda da inserção clínica de 4 mm nos filhos e a extensão e severidade da doença das mães. A presença dos periodontopatógenos nas mães não esteve associada com a presença destes em seus filhos. / Abstract: The aims of this study were to compare the periodontal clinical conditions and the prevalence of periodontopathogens in mothers with chronic servere periodontitis and their children. Twenty women (mean age = 36,6; SD = 6,7) and one child of each (mean age = 11,8; SD = 3,4) participated in this study. Correlations between the following clinical parameters of the mothers: presence of visible plaque (VP), marginal bleeding (MB), probing depth >= 6 mm and clinical attachment loss >= 5mm and the presence of VP and MB on their sons were assessed, as well as the association between the extent and severity of the periodontal disease present in the mothers with the presence of CAL of at least 4 mm in the children. The microbiological evaluation was performed by culturing samples of subgingival bacterial plaque collected both from mothers and children in order to compare the prevalence of Porphyromonas gingivalis, Prevotella sp., Fusobacterium sp., Peptostreptococcus micros, Capnocytophaga sp., Campylobacter sp. and Eikenella corrodens. No significant correlations were found neither between clinical parameters of mothers (VP, MB, PD, CAL) and children (VP, MB), nor between the extent and severity of periodontal disease in the mothers and presence of CAL of at least 4 mm in the children. The prevalence of any of the periodontopathogens screened in this study in the plaque samples from mothers was also not associated with its presence in plaque samples from their children. / Orientador: Joni Augusto Cirelli / Coorientador: Sérgio Luiz S. Salvador / Banca: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Banca: Márcia Pinto Alves Mayer / Mestre

Orientador: Pedro de Oliva Neto / Banca: Dario Abel Palmieri / Banca: Crispin Humberto Garcia Cruz / Resumo: A necessidade mundial por tecnologias não poluidoras ou "limpas" obtidas de fontes renováveis e uso racional da terra, a produção de insumos cada vez mais deverá ser baseada na biotecnologia com emprego de resíduos agroindustriais. A polpa cítrica obtida da laranja (Citrus sinensis) é um importante resíduo que somente no Estado de São Paulo se estima em 7,693x106 toneladas produzidas pelas indústrias cítricas. Este trabalho teve como objetivo principal o estudo da sacarificação biotecnológica e química da polpa cítrica. A produção de extrato bruto enzimático usando a polpa cítrica proveniente da indústria cítrica foi estudada para a produção de celulases e poligalacturonases por fermentação em processo de batelada simples com reciclo de células e caldo usando os fungos Trichoderma reesei e Aspergillus niger. O resíduo proveniente dessa fermentação foi avaliado quanto à proteína bruta incorporada durante a fermentação. A polpa cítrica se mostrou um substrato eficiente na produção enzimática. Neste trabalho a atividade de poligalacturonase atingiu o pico de produção de 8,05 UI/mL com 72 h. de cultivo em seu terceiro ciclo com 12% de polpa cítrica, usando como inoculante o A. niger. Já a produção de celulase ocorreu tanto com o A. niger quanto com o T. reesei, com picos de 0,57 e 0,72 FPU/mL respectivamente. Quanto ao enriquecimento proteico da polpa cítrica após o cultivo com A. niger e T. reesei houve uma elevação de 7,97% para 22,8% e 26,8% respectivamente, através do processo com reciclo da biomassa e caldo fermentativo. Um estudo comparativo de sacarificação da polpa cítrica por via ácida também foi feito com 0,1% de H2SO4 a 121ºC e 1 atm em diferentes tempos. Os melhores tempos foram de 60 e 120 min. com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The global need for clean technologies, renewable, and efficient use of land, more and more production will be based on the use of biotechnology with agribusiness residues. The citrus pulp obtained from orange (Citrus sinensis) is an important residue that only in the State of São Paulo is estimated at 7.693 x 106 tonnes produced by the citrus industry. This study aimed the evaluation of the biotechnological and chemical saccharification of citrus pulp peel. The production of crude enzyme extract using citrus pulp from the citrus industry has been studied to produce cellulase and polygalacturonase by fermentation in a simple batch procedure with cell and broth recycle using the fungi Trichoderma reesei and Aspergillus niger. The fermented residues were evaluated for the incorporated protein during fermentation. The citrus pulp proved to be an efficient substrate in enzyme production. In this work the results of polygalacturonase production peaked at 8.05 U/mL in 72 h. cultivation in its third cycle with 10% citrus pulp, using as inoculum A. niger. The production of cellulase occurred both with A. niger and T. reesei with, with peaks of 0.57 and 0.72 FPU/mL, respectively. As for the protein enrichment of citrus pulp after cultivation with A. niger and T. reesei there was an increase of 7.97% to 22.8% and 26.8%, respectively, through the process with recycling of biomass and fermented broth. A comparative study of the citrus pulp saccharification by acid was also done with 0.1% H2SO4 at 121 °C and 1 atm at different times. The best times were 60 and 120 min. with 43.8 grams of sugar and 42.1 respectively per 100 g of dried citrus pulp. This technique is fast and efficient, but the cost was not competitive when compared to the cost of sucrose from sugar cane. But the use of citrus pulp as a substrate for production... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: João Cláudio Thoméo / Banca: José Teixeira Freire / Banca: Maria Aparecida Mauro / Resumo: O objetivo geral deste trabalho foi contribuir no projeto de um biorreator rotativo para aplicação de Fermentação em Estado Sólido (FES), visando à produção do fungo entomopatogênico M. anisopliae, empregando arroz como substrato. O desenvolvimento do projeto foi realizado em duas etapas. A primeira etapa consistiu em visualizar a homogeneidade e a movimentação de partículas de arroz, em um protótipo construído em acrílico. Isto, com o objetivo de avaliar as melhores configurações dos componentes internos do reator. O método empregado na análise de homogeneidade foi a técnica de traçadores coloridos, utilizando uma concentração de 10% em massa de arroz tingido de preto e 90% de arroz branco. A concentração da mistura foi determinada de duas maneiras: (i) manualmente, por separação e pesagem das amostras e, (ii) por análise de imagem mediante o software Lenseye (E&CS Programs). Além disso, foram determinadas as velocidades das partículas em três regiões do leito: na superfície, centro do leito e do lado da parede do cilindro, e foram estabelecidos os regimes de escoamento e os graus de enchimento trabalhados. As variáveis estudadas foram massa total de arroz (5, 10 e 15 Kg), velocidade de rotação (1, 4 e 7 RPM) e a presença e ausência de tubos simuladores de alimentação dentro do tambor. Posteriormente, no mesmo equipamento, foi analisada a molhabilidade do leito, por determinação da umidade em três pontos do leito, na seção longitudinal do tambor. O material particulado empregado nestes experimentos foram esferas de sílica gel de 6mm de diâmetro. As variáveis avaliadas foram quantidade de água aspergida (0,1 e 0,05 mL/g material), vazão de água (1600, 2000 e 2400 mL/min) e carga total de material (5,8 e 12,6 Kg). A segunda etapa consistiu em analisar o comportamento térmico do reator, empregando o equipamento construído em aço... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work is aimed to contribute to the development of a rotary drum bioreactor for Metarhiziun anisopliae spore production by Solid State Fermentation, using rice as a substrate. This work is comprised of two parts, one corresponding to particle moving analysis and another on thermal aspects. The first part assesses both the mixture and the movement of particles of rice in a Plexiglas rotary drum, in order to identify the optimal operational conditions for the best particle mixture. Tracer method was applied to assess the particle mixture and two techniques were applied to assess the mixture: manual sampling and image analysis using Lenseye (E&CS Programs) software. The flow regime and particle velocities were also identified by filming the bed while rotating. For particle measurements three regions were analyzed: wall, core and surface. Rice load (5, 10, and 15 kg), rotation velocity (1, 4, and 7 RPM), and the presence or absence of inner tubes within the bed were the independent variables for all the tests. Afterwards, the bed wetability was analyzed in the same equipment, using 6mm diameter silica gel particles. Water was sprinkled over the particles in three axial positions. The selected variables were the volume of water by the bed mass ratio (0,1 and 0,05 mL/g), the water flow rate (1600, 2000, and 2400 mL/min), and the particle load (5,8, and 12,6 kg). The second part assessed the thermal behavior of a glass beads bed, 3mm diameter, in a stainless steel rotary drum. The main purpose of this step was to identify the optimal operational conditions for the best thermal homogeneity. The selected variables were the air flow rate, the bed load, and the rotational conditions (static or mobile). From the first part, the results showed that a complete mixture was obtained after 5, 9, and 11 drum revolutions for 5, 10, and 15 kg loads, respectively, independently from the tracer... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Roberto da Silva / Banca: Adriane Maria Ferreira Milagres / Banca: Heloisa Ferreira Alves do Prado / Resumo: A ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase) é uma enzima microbiana que converte o amido em ciclodextrinas (CDs). Estes compostos são moléculas cíclicas, formadas por monômeros de D-glicoses unidas por ligações glicosídicas do tipo a-1,4. As CDs podem ser uma alternativa para controlar o escurecimento de batatas e frutas devido a sua capacidade de formar complexo de inclusão com substratos da reação de escurecimento. Alimentos contendo amido, quando adicionados da CGTase são também, potencialmente capazes de sofrer a ação da enzima formando CD localmente. Esse trabalho teve por finalidade estudar a aplicação direta da enzima CGTase em batatas e a aplicação de ciclodextrina comercial em batatas, maçãs, bananas e pêras visando controlar as reações de escurecimento enzimático ou não enzimático, destes alimentos. A formação de complexos com ciclodextrina foi determinada por calorimetria diferencial de varredura (DSC). Este trabalho mostrou pela primeira vez que tanto a CGTase produzida por Bacillus clausii E16 quanto a CGTase comercial (Toruzyme., Novozymes), foram capazes de controlar o escurecimento químico de batata e enzimático de batata e maçã. A utilização da CD mostrou efeito similar a ação das CGTases para batata e maçã, reduzindo dessa forma o escurecimento enzimático causado pela enzima polifenoloxidase. Pode-se inferir que ocorreu a produção da CD pela ação da CGTase em presença do substrato natural (amido de batata e maçã) e por conseqüência sua ação complexante junto aos agentes responsáveis pelo escurecimento, inibindo assim a efetivação das reações. Essa possível encapsulação foi demonstrada pela análise de DSC referente à diminuição do pico da amostra de batata tratada com CGTase. / Abstract: The cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) is a microbial enzyme that converts starch to cyclodextrins (CDs). These compounds are cyclical molecules, formed by D-glucose monomers linked by a-1,4-glycosidic linkages type. The CDs can be an alternative to control the potato and fruits browning due its capacity to form complexes of inclusion with substrate of the browning reaction. Foods containing starch, when added of the CGTase are also potentially able to the action from the enzyme, then forming CD. This work had the purpose to study the direct application of the CGTase enzyme in potatoes and the commercial cyclodextrin application in potatoes, apples, bananas and pears aiming to control the browning enzymatic or no enzymatic reactions of these foods. The cyclodextrin complexes formation was determined by differential scanning calorimetry (DSC). This work showed for the first time that as the CGTase produced for Bacillus clausii E16 as the commercial CGTase (Toruzyme., Novozymes), were capable to control the chemical browning of potato and enzymatic browning of potato and apple. The use of the CD showed to similar effect to the action of CGTases for potato and apple, reducing in both the enzymatic browning caused by polyphenoloxidase enzyme. It can be concluded that the production of CD occurred by CGTase action in presence of the natural substrate (starch of potato and apple) and for consequence it’s action to form complexes next to the responsible agents for the browning, thus inhibiting effectively the reactions. This possible encapsulation was demonstrated by analysis of DSC referring to the reduction of the peak of the potato sample treated with CGTase. / Mestre