Orientador: Arnaldo Yoshiteru Kuaye / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-01T15:02:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Naldini_MariaCarlaMendes_M.pdf: 16441728 bytes, checksum: 1ea7253fbbf4d54759952d950606c3c4 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo; Atualmente, muitos laticínios vêm utilizando o processo de acidificação direta, com ácido lático, substituindo o fermento lático, na elaboração do queijo Minas Frescal, para melhorar a textura e sabor e aumentar o rendimento. Entretanto, o emprego exclusivo do processo de acidificação direta pode proporcionar queijos mais susceptíveis a proliferação de microrganismos contaminantes, incluindo Usteria monocytogenes, reconhecido como um perigoso patógeno associado a doenças de origem alimentar e, particularmente, envolvendo queijos com características semelhantes ao tipo Minas Frescal. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a influência da utilização da acidificação direta no comportamento de L. monocytogenes artificialmente inoculada em comparação ao método convencional, com fermento lático na elaboração do queijo Minas Frescal durante armazenamento refrigerado a 5°C e 10°C, por 25 dias. Os queijos foram inoculados artificialmente com L. monocytogenes ('10 GRAUS' UFC/g). Foi utilizado o ágar Oxford Modificado (MOX) para a contagem de L. monocytogenes e o ágar de Man, Rogosa e Sharp para a contagem de bactérias láticas em queijos depois de 1, 6, 12, 18 e 25 dias de armazenamento. Os resultados das contagens de L. monocytogenes para os primeiros dias de monitoramento apresentaram valores em torno de '10 POT. 4'-'10 POT. 5' UFC/g. O queijo produzido pelo processo convencional apresentou contagens de L. monocytogenes praticamente inalteradas durante todo período de armazenamento, sugerindo uma ação inibitória ao crescimento do patógeno no produto. Para o queijo elaborado por acidificação direta, os resultados das contagens de L. monocytogenes para armazenamento a 5°C e 10°C após os 25 dias de monitoramento foram semelhantes, observando-se um aumento expressivo da ordem de 2-3 ciclos logarítimicos, mas com velocidade de crescimento maior para os queijos armazenados a 10°C. Os resultados sugerem que a mudança na tecnologia de fabricação do queijo Minas Frescal, embora pareça ser uma boa solução para a melhoria das características sensoriais, não é tão adequada do ponto de vista de segurança alimentar, necessitando novos estudos que aliem os benefícios estruturais e sensoriais aos microbiológicos. / Abstract: Currently, many cheese factories have been substituting the bacteria starter for lactic acid to improve the yield and texture of the finished products. However, the use of the direct acidification process can produce cheese products more susceptible to spoilage by contaminating microorganisms, including Listeria monoytogenes, recognized as a potentially dangerous food-borne pathogen. Since 1985, some cases of listeriosis involving cheese contamination and the recognition of the hazard caused by this microorganism has led to a tightening of hygiene control in cheese factories. Because this, the objective of this work was to evaluate the behaviour of L. monocytogenes ScoUA in Minas Frescal cheese manufactered by the traditional procedure with the addition of mesophilic starter as compared to the direct acidification with lactic acid at 5°C and 10°C during 25 days. The cheeses were artificially inoculated with L. monocytogenes culture '10 POT. 9' cfu/ml. Modified Oxford agar (MOX) was used for L. monocytogenes counts and de Man, Rogosa, Sharpe agar (M.R.S.) was used for mesophilic starter counts in the cheeses afier 1, 6, 12, 18, and 25 days of incubation. The initial counts of L. monocytogenes obtained for the finished cheeses artificially inoculated were about 104 - 105 cfu/g. Using the traditional method, with mesophilic starter, the counts in cheese samples along the storage remained almost unchanged, whereas, the direct acidified cheeses with lactic acid presented an increase in the counts up to '10 POT. 8'cfu/g, that represents 2-3 log cycles. The profiles of the counts of lactic bacteria, during the storage of cheeses, associated with those of L. monocytogenes show a strong negative influence of the competitive starter culture over L. monocytogenes survivor. This fact allow us to believe that the addition of starter culture is an efficient way to control L. nocytogenes growth in these products. Despite the improvement of sensorial (flavour, texture and color) characteristics of cheeses obtained by direct acidification with lactic acid, it would be suggested that this technological procedure would not be recommended from a sanitary viewpoint. New studies would be necessary allying sensorial benefits with the microbiological ones. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Celso Aparecido Bertran / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:31:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_NidinalvaTamaciada_D.pdf: 3698476 bytes, checksum: b63da640a8aa752e1ebdf73282269b0a (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado

Memoria para optar al Título de Químico / En la industria de los surfactantes es cada vez mayor el interés en la producción y aplicación de compuestos derivados de fuentes renovables, entre los cuales se pueden destacar los ésteres de sacarosa. Estos surfactantes son compuestos biodegradables de baja toxicidad, no sensibilizantes, no alergénicos, adecuados como emulsificantes, emolientes y humectantes. La utilización de diferentes tipos de surfactantes en la extracción de lípidos o como agentes solubilizantes de membranas lipídicas, involucra también el empleo de liposomas como modelos de membrana. En este contexto, es de especial relevancia conocer cómo interactúan los ésteres de sacarosa con la bicapa de vesículas o liposomas. Los liposomas o vesículas son agregados coloidales formados por una o más bicapas cerradas que incluyen en su interior una pequeña fracción del medio acuoso en el que se encuentran dispersos. Debido a sus características morfológicas y estructurales, los liposomas son utilizados comúnmente como modelos de membrana celular. Por esta razón, la obtención de sistemas que simulen el medio biológico involucra la síntesis de membranas compuestas por mezclas de fosfolípidos y colesterol. Los esteroles son esenciales a nivel regulatorio y estructural en la organización lateral de las membranas celulares. Su presencia afecta de manera importante las propiedades físicas de membranas sintéticas, observándose comportamientos que han sido asociados a la existencia de microdominios en las membranas celulares. En este trabajo se estudiaron las interacciones entre un éster de sacarosa, surfactante no iónico, y liposomas de distinto tamaño, origen y diferente actividad superficial: 1-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina, POPC, de origen natural y carácter zwitteriónico y cloruro de dioctadecildimetilamonio, DODAC, molécula anfipática de origen sintético y carga positiva. El éster de sacarosa seleccionado fue el β-D-fructofuranosil-6-O-miristil-α-D-glucopiranósido (MMS), monoéster de sacarosa derivado del ácido mirístico. Todos los sistemas fueron caracterizados en presencia y ausencia de diferentes proporciones de colesterol. Además, se realizaron estudios cinéticos de extracción de colesterol desde membranas para conocer como la presencia del éster de sacarosa afecta la estructuración y permeabilidad de la bicapa. También se estudió el proceso de solubilización de los distintos sistemas para evaluar el efecto de la presencia de colesterol sobre los fenómenos de saturación y solubilización de la vesícula por el éster de sacarosa seleccionado. Finalmente, se siguió el proceso de solubilización en modelos reales utilizando eritrocitos humanos. Los liposomas fueron preparados utilizando técnicas de electroformación, ultrasonicación y extrusión. Para la determinación de las propiedades físicas de la membrana se emplearon metodologías de emisión convencional y de microscopía multifotónica, utilizando como sonda fluorescente el 6-dodecanoil-2-dimetilaminonaftaleno, Laurdan, molécula sensible a los cambios de polaridad de su microentorno, por lo que permite caracterizar bicapas de sistemas microcompartimentalizados. Los resultados obtenidos permitieron descartar la influencia del radio de curvatura sobre las variaciones en la fluidez de la membrana, en las condiciones de temperatura y composición estudiadas. La presencia de colesterol en los sistemas de trabajo mostró el comportamiento esperado, rigidizando la membrana tanto en el estado líquido-cristalino como en el estado gel. En la mayor parte de las experiencias realizadas, la adición de miristil sacarosa permitió observar efectos diferentes en cada uno de los sistemas estudiados, liposomas de POPC y vesículas de DODAC. Como consecuencia, es posible inferir una ubicación distinta de la sacarosa en la interfase, que dependería fundamentalmente del tamaño de la cabeza de la molécula anfipática que conforma el microagregado / A great interest in the production and application of compounds derived from natural resources has been shown by the industry of surfactants, among them sucrose esters are outstanding. These are biodegradable compounds of low toxicity, no sensitizing, hypoallergenic and very good as emulsifiers, emollients and humectants. One of the most interesting applications of these compounds is its use in lipid extraction or as solubilizing agents of lipidic membranes. In this field, liposomes are commonly used as a comprehensive tool of many biological mechanisms, as consequence, is necessary to understand the interactions of these kind of surfactants with different bilayers. Liposomes or vesicles are colloidal aggregates conformed by one or more concentric bilayers that enclose part of the aqueous medium where they are dispersed. Due to their structural characteristics, the liposomes are commonly used mimicking cellular membranes. The obtention of systems that mimics the biological medium involve the preparation of membranes composed by mixtures of phospholipids and cholesterol. The sterols presence is essentials at the regulator and structural level in the lateral organization of cellular membranes. Its presence strongly affects the physical properties of synthetic membranes, the experimentally observed behaviors have been associated to the existence of rafts in cellular membranes. In this work, the interactions between a sucrose ester, nonionic surfactant, and liposomes of different size, origin and different superficial properties were studied: 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine (POPC) of natural origin and zwitterionic surface, and Dioctadecyldimethylammonium Chloride (DODAC), amphiphilic molecule of synthetic origin and positive charge. The sucrose ester selected was β-D-fructofuranosyl-6-O-miristyl-α-D-glucopyranoside (MMS), sucrose monoester derivate of miristic acid. All systems were characterized in the presence and absence of different proportions of cholesterol. Furthermore, kinetic studies of cholesterol extraction from membranes were made, in order to distinguish the effect of the presence of sucrose ester on the permeability and structure of the bilayer. Also, the solubilization process of the different systems was studied, with the aim of evaluate the effect of the cholesterol presence on the saturation and solubilization phenomena. Finally, the solubilization process was followed in real models, using human red blood cells. Liposomes were prepared using electroformation, ultrasonication and extrusion techniques. To determine the physical properties of the membrane, conventional emission and multiphotonic microscopy methodologies were employed, with 6-dodecanoyl-2-dimethylaminonaphtalene (Laurdan) as fluorescent probe, this compound is able to sense changes in the microenvironment, allowing characterize compartmentalized systems. According obtained results there is no effect of surface curvature and membrane fluidity, at the temperature and composition studied. The cholesterol presence yields the expected results making more rigid the gel and liquid crystalline phases. Both studied systems (POPC liposomes and DODAC vesicles) behave in different manner in the presence of MMS, so a dissimilar spatial arrangement of sucrose heads can be proposed for each system, being the location in principle function of the lipidic head size

Doctora en Ciencias de la Ingeniería, Mención Química / Cada día hay un mayor interés por generar productos con valor agregado a partir de diferentes tipos de residuos. Uno de estos productos es el ácido hialurónico (hyaluronic acid, HA), polímero con variados usos en la medicina y la cosmetología. El HA es sintetizado a partir de una enzima llamada Hialuronan Sintasa o HAS. Esta enzima es una proteína de membrana que sintetiza HA a partir de 2 precursores: Ácido UDP-Glucurónico y UDP-N-Acetilglucosamina, compuestos que se encuentran naturalmente en las bacterias Escherichia coli. El presente trabajo tuvo como objetivo la construcción de una Escherichia coli recombinante capaz de sintetizar HA a partir de xilosa como fuente de carbono alternativa a la glucosa. Este azúcar es uno de los más abundantes en los residuos hemicelulósicos de la industria forestal chilena. Para mejorar el consumo de xilosa por parte de la bacteria nativa E. coli Top10 se usó la técnicade la Evolución Adaptativa de Laboratorio de Palsson (Adaptive Laboratory Evolution, ALE). Este proceso se realizó mediante un cultivo continuo en medio R2 y xilosa como única fuente de carbono. La cepa evolucionada fue transformada con el gen hasA de Streptococcus equisimilis (sehasA) obteniendo la cepa Top10 Evo:pMBAD-sseAB. Para el análisis del cambio generado por la ALE se realizó un Análisis de Balance de Flujos (Flux Balance Analysis, FBA) a partir de un Modelo a Escala Genómica (Genome Scale Model, GSM) del microorganismo. Además, se optimizó el cultivo de la cepa Top10 Evo:pMBAD-sseAB en cuanto a las siguientes condiciones: tiempo de adición de inductor y su concentración concentración, control de pH, temperatura de crecimiento post-inducción y concentración de azúcar suplementada. El ALE realizado tuvo una duración de 48 días. Como resultado se obtuvo que la velocidad especí fica de crecimiento en xilosa de la cepa E. coli Top10 aumentó un 36%: de 0,24 h-1 a 0,33 h-1. Se determinó que un mayor rendimiento de HA se obtiene al hacer 2 adiciones de inductor al cultivo. Anteriormente en la literatura se había observado este fenómeno, pero nunca en una expresión recombinante de proteína asociada a un vector regulado con el promotor PBAD, correspondiente al del presente trabajo. Una temperatura de crecimiento post-inducción de 28,5 °C presentó los mejores rendimientos. Además, se de nió que la adición de xilosa a una concentración de 20 g/L 2 horas después de la inducción, y de 12 g/L a las 24 horas de cultivo (el doble de lo presentado en la literatura) aumenta el rendimiento de HA en cultivos en xilosa. Finalmente, las condiciones de cultivo seleccionadas fueron: inducción con 2 adiciones de 0,05 g/L de L-arabinosa, temperatura de crecimiento post-inducción de 28,5 C y concentración de azúcar suplementada de 20 g/L después de la inducción y 12 de g/L a las 24 horas de cultivo. El rendimiento de HA obtenido en estas condiciones fue de 195,8 mg/g.cel, más del doble que el rendimiento obtenido en condiciones basales, el que fue de 92,6 mg/g.cel. Con el FBA realizado fue posible corroborar que la cepa evolucionada tenía mejoras metabólicas en comparación con la cepa no evolucionada, cambio producido por el ALE. Estas mejoras permitieron que los ujos asociados a las vías de las pentosas fosfato, la glicólisis y el ciclo de ácidos tricarboxílicos fueran mayores en la cepa evolucionada en un 12% y 29% en promedio, durante el consumo de xilosa y manosa, respectivamente. Además, dado que las diferencias observadas entre las cepas evolucionada y no evolucionada se observaron tanto en xilosa como en manosa, y permitieron una mayor producción de HA y de biomasa, se in rió que la ALE impactó alguna enzima de la glicólisis.

Orientador: Vanderlei Perez Canhos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-24T07:00:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_AndreLuizBispo_M.pdf: 3335424 bytes, checksum: 7d7969eeda0e5f45445e4087e5e9088e (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Neste estudo foram testadas 38 linhagens de Lactobacillus fermentum através de metodologia de triagem orientada para probióticos, com ensaios de resistência a sais de bile, a antibióticos comumente utilizados em rações para suínos, a pH ácido e a presença de oxigênio. Para a seleção dos probióticos, foram utilizadas dosagens de inibidores menores do que aquelas definidas em literatura para ensaios de resistência não cinéticos. As dosagens foram padronizadas utilizando-se três linhagens de Lactobacillus fermentum, aleatoriamente escolhidas dentre as 38 testadas, através do método da dose mínima inibitória adaptada a microplacas. A análise das curvas de crescimento das 38 linhagens de Lactobacillus fermentum foi realizada por comparação do crescimento simultâneo das linhagens em meios com e sem o inibidor. Três linhagens de Lactobacillus acidophilus, utilizadas em probióticos disponíve.is no mercado, foram empregadas como controle positivo. Para cada inibidor, foram realizados 82 ensaios cinéticos simultâneos em microplacas, perfazendo um total de 492 curvas de crescimento, analisadas com metodologia baseada no tempo de indução (1-i1t) em comparação à variação da velocidade específica de crescimento (1-J.l%) das linhagens. Os resultados levaram à seleção de quatro linhagens para estudos posteriores por apresentarem resistência simultânea a pelo menos 4 dos 6 inibidores testados (sais de bile, virginiamicina, colistina, bacitracina de Zn, pH 3.0 e presença de oxigênio) / Abstract: in the present study, 38 Lactobacillus fennentum strains were screened applying a methodology designed to identify potentiàl probiotics using trials based on their resistance to bile salts, antibiotics commonly used in porcine feed, low pH and oxygen. Probiotics, were screened at a defined concentration of inhibitor, below the value stated by the literature for non kinetical assays, determined by growing three randomly selected Lactobacillus fennentum strains with a Minimum Inhibitory Dose Method adapted to microplate. The analysis of the 38 Lactobacillus fennentum strains was performed by comparison of their simultaneous growth in a medium with and without the inhibitor. Three commercially available probiotic strains of Lactobacillus acidophilus, were used as positive controls. For each inhibitor, 82 kinetic results were simultaneously obtained from microplates. The four inhibitors tested generated a total of 492 growth curves analysed by two methods, based on the induction time (1-Llt) and growth rate (1-J.l%). The methodology developed allowed the selection of four Lactobacillus fermentum strains with high probiotic potential for future studies, wich presented simultaneous resistance to four of the 6 tested inhibitors (bile salts, virginiamicin, colistin, zinc bacitracin, pH 3.0 and oxygen) / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador : José Hugo Sabatino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-13T21:43:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Giraldo_PauloCesar_D.pdf: 1674249 bytes, checksum: 1d0eb9f21cba627fa7ae3f1d9fde18fc (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: As condições de saúde de 62 recém-nascidos de mães que tiveram seus partos em posição de cócoras foram avaliadas por meio da determinação do equilíbrio ácido-básico do sangue dos vasos do cordão umbilical. Para tanto, estabeleceu-se os padrões gasométricos desta amostragem através das medidas de pH, DB, pCO2 e pO2 obtidas por punção individualizada das artérias e veias do cordão em condições de anaerobiose, logo após o desprendimento do RN. Os partos em posição de cócoras deste estudo foram acompanhados na Maternidade do Departamento de Tocoginecologia da Faculdade de Ciências Médicas da UNICAMP no período compreendido entre 24/07/82 a 23/11/85, com a participação voluntária de mulheres organicamente sadias e que não apresentavam qualquer risco gestacional. Para que as modificações do equilíbrio ácido-básico do RN ficassem apenas sob a influência da posição de cócoras, eliminou-se todos os casos de sofrimento fetal agudo do período de dilatação, diagnosticados por meio de monitorização eletrônica contínua dos BCF. Os critérios de seleção utilizados levaram à formação de um grupo homogêneo de parturientes, representativo de mulheres de baixa idade e paridade. (...continua) / Abstract: The acid-base balance found in blood samples extracted from the umbilical cord of sixty-two newborn infants, delivered of birth in a squatting position, was analysed to assess the infant's state of health. For such, gasometric standards of the samples, obtained through individualized puncturing were established based on the levels of pH, BD, pCO2 and pO2 present immediately following birth. These births carried out with the parturient women in a squatting position, were attended by the Medical Staff of the Gynecology and Obstetrics Departa.ment, School of Medical Science, Campinas State University from 24/07/82 to 23/11/85. The parturients were volunteers who were organically healtbland offered no risk during pregnancy. With the intention of allowing the acid-base balance to be influenced by none other than the squatting position, the cases which during dilation presented signs of fetal suffering, diagnosed by electric continuous monitoring of the fetal heartbeats, were thereby eliminated . The criteria of selection used, led to the formation of a homogeneous group of parturients, represented by women from a low age bracket and low parity. (...continue) / Doutorado / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Jose Claudio Moura / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Campinas / Made available in DSpace on 2018-07-15T18:38:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santana_MariaHelenaAndrade_D.pdf: 2558233 bytes, checksum: 03a72441d2b236b9f23f2056d98929a7 (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: Este trabalho é um estudo da oxidação catalítica do etanol a ácido acético, em fase vapor, usando catalisadores suportados à base de paládio. Os catalisadores foram preparados a partir dos sais precursores Cloreto e nitrato de paládio, e os suportes foram constituídos de alumina, dióxido de titânio e suas misturas. A atividade dos materiais catalíticos foi testada para a reação de oxidação em instalação de bancada, contendo um reator tubular de leito fixo, imerso num banho de areia flui dizada com ar. Os melhores resultados foram obtidos com os catalisadores que tiveram o nitrato de paládio corno sal precursor da espécie ativa, impregnado em suporte de alumina com 20% em peso de dióxido de titânio. A decomposição e redução do metal sobre a superfície, foi feita através de tratamento térmico à 400°C e ativação com hidrogênio à 300°C. A coleta de dados cinéticos foi feita na faixa de temperaturas de 120 a 180°C e razões molares oxigênio/etanol de 1 a 5, usando o catalisador que apresentou melhores resultados durante os testes. Foram propostos mecanismos de reação e deduzidas equações para as taxas de reação utilizando-se as aproximações usuais em análises de dados cinéticos. A validade dos mecanismos propostos foi testada com conjunto de dados experimentais obtidos, e a estimação dos parâmetros cinéticos foi feita utilizando o sistema de programas SAS(Statistical Analysis Sistems). Os resultados obtidos demonstram a aplicabilidade da equação da taxa, na faixa de temperaturas de 120 a 165°C, proveniente de um mecanismo do tipo oxidação-redução, Redox, com adsorção dissociativa do oxigênio. Para a predição da distribuição dos produtos,foram propostas equações lineares empíricas que melhor representaram os dados experimentais. / Abstract: The main objective of this study was to examine the vapor phase catalitic oxidation of ethanol conducting to acetic acid as main product by using palladium based support catalysts. The starting salts for the catalysts preparation were the palladium nitrate and chloride, being the supports constituted by alumina, titanium dioxide and mixtures of both. The main objective of this study was to examine the vapor phase catalitic oxidation of ethanol conducting to acetic acid as main product by using palladium based support catalysts. The starting salts for the catalysts preparation were the palladium nitrate and chloride, being the supports constituted by alumina, titanium dioxide and mixtures of both. The metal decomposing and reduction above the surface as done by thermal treatment at the temperature of 400°C followed by activation with hidrogen at 300°C. The kinetic data measurements covered a temperature range from 120 to 1800C and a molar ratio of oxigen/ethanol from 1 to 5, being the data obtained with the material that exibited the best results on the previous tests. The usual kinetics analysis approximations were used to obtain the reactor rate equations from proposed mechanisms. The vality of the mechanisms were tested using the whole set of experimental data and the statistical software SAS (Statistical Analysis Sistems) in order to estimate the Kinetic parameters from the reaction. The results showed the aplicability of the proposed rate equation on the temperature range from 120 to 165°C. This equation resulted from a oxidation-reduction a mechanism with dissociative oxigen adsorption. Empirical linear equations based on best fitting of the experimental data was proposed to predict product distribution. / Doutorado / Doutor em Engenharia Mecânica

Orientador : Nelson E. Duran Caballero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-16T15:17:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcucci_MariaCristina_D.pdf: 11251332 bytes, checksum: df4d73814510400eee18b38cc9d2a93a (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: O malonaldeído e o ácido indol-3-acético são oxidados aerobicamente pela peroxidase, produzindo oxigênio singlete em ambos os processos, e no último caso também indol-3-aldeído excitado. Estes processos são chamados de biofotoenergizados. Entretanto, existem outras vias de geração de oxigênio singlete como processos fotoquímicos, pelo uso de sensibilizadores. Foi comprovada a similaridade entre os efeitos de oxigênio singlete gerado fotoquimica e enzimaticamenle sobre o ácido ribonucleico de transferência de Escherichia coli. Os métodos de luminescência, dicroísmo circular e absorção no ultra-violeta, foram utilizados neste estudo. Estes efeitos foram comprovados pela proteção por histidina, pelo aumento da fotodegradação na presença de água deuterada, e o uso de supressores específicos. A estrutura do ácido ribunucleico de transferência é protegida destas espécies pelos íons Mg A oxidação de 4-tiouridina nestes processos tanto por auto-sensibiIização ou por transferência de energia de sistemas biofotoenergizados, produz uridina. O indol-3-aldeído triplete transfere sua energia à 4-tiouridina no ácido ribonucleico. A 4-tiouridina excitada sofre dois processos importantes: a) transfere sua energia ao oxigênio, gerando oxigênio singlete, que volta a reagir com a 4-tiouridina formando uridina e b) interage com a citidina na posição 13 do ácido ribonucleico,formando um fotoaduto [8-13]. Estes processos descritos anteriormente no ácido ribonucleico de transferência e 4-tiouridina isolada foram estudados em diferentes cepas de Escherichia coli. As linhagens de Escherichia coli deficientes em 4-tiouridina apresentaram maior sobrevivênica do que o tipo selvagem, que contém a 4-tiouridina, quando submetidas ao tratamento com o indol-3-aldeído biofotoenergizado. Estes resultados sugerem que a energia de ex- citação do indol-3-aldeído triplete pode ser transferida do ácido ribonucleico de transferência ao ácido desoxirribonucleico, originando quebras de fitas simples.A possibilidade de que estados excitados atuem em sistemas celulares indica o avanço das pesquisas nesta área para esclarecimento de processos mutagênicos espontâneos. / Abstract: Both malonaldehyde and indole-3-acetic acid undergo aerobic peroxidase-catalysed oxidation to produce singlet oxygen, while in lhe second reaction, excited indole-3-aldehyde is algo produced. These reactions occur by means of biophotoenergetic processes another means to produce singlet oxygen is by use of sensitzers in a photochemical process. Singlet oxygen produced by both processes (namely the biophotoenergized and photochemical processes) interact similarly on transfer ribonucleic acid from Escherichia coli. In these studies, luminescence, circular dichroism and ultra-violet absorption techniques were used. The singlet oxygen effect on tRNA was shown by way of measurements: a) protection by histidine; b) observed increases in photodegration in the presence of D2O and c) lnfluence of specific scavengers. The tRNA is protected from these species by Mgions. The oxidation of 4-thiouridine, auto-sensitized, photo-sensitized or through energy transfer, produces uridine. Energy transfer from triplet indole-3-aldehyde to 4-thiouridine on tRNA was observed. The excited 4-thiouridine undergoes two important processes: (a) energy transfer to oxygen, generating singlet oxygen which may then reinitiation the 4-thiouridine transformation to urldine. (b) interaction with cytidine on the 13th position of tRNA resulting in [8-13] photoadduct formation. These processes, which occur in tRNA and in isolated 4-thiouridine, were studied in different strains of E. coli mutant. A mutant strain of E.coli difficient in 4-thiouridine exhibited a higher survival factor than the wild type, when treated with biophotoenergized idole-3-aldehyde. These results suggest that the energy from excited triplet indole-3-aldehyde might be transfered to tRNA and then, to DNA, producing single strand breaks, with subsequent mortality. The possibility that these biophotonergyzed processes participate in cellular species indicates an important step describing the processes of spontaneous mutagenesis. / Doutorado

Orientador : Eva Gonçalves Magalhães / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-19T03:12:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cito_AntoniaMariadasGracasLopes_D.pdf: 11816956 bytes, checksum: 7a6aeacceb8036c642ef2f0241838f60 (MD5) Previous issue date: 1994 / Doutorado

Orientador: Cassio Odnei Garcia Munhoz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-19T06:21:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beraldo_LuizFernando_M.pdf: 1150153 bytes, checksum: e36d9ebc0425ffdd1bfe51315122c5c3 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Neste estudo, procurou-se, através do método radioautográfico, observar os efeitos do EDT A a 4,13% e do TCA a 5% sobre as proteínas contidas nas secreções das células acinosas do pâncreas, nas células seromucosas da glândula submandibular e sobre a ultra-estrutura dessas glândulas de camundongos injetados com uma única dose de 3H-glicina e sacrificados uma hora após a injeção. As glândulas de cada animal foram divididas em pequenos fragmentos e estes, separados em 3 grupos: controles (não tratados), tratados pelo TCA e tratados com EDTA. As reações radioautográficas foram quantificadas mediante a contagem de grãos de prata reduzida sobre a secreção localizada na porção apical das células pancreáticas e sobre a secreção das células seromucosas da glândula submandibular. Os dados obtidos após as contagens dos grãos de prata mostraram, após a análise de variânciB, que não há diferenças significantes entre os três grupos. Conclui-se, assim, que tanto o TCA como o EDT A não provocam extrações de proteínas marcadas nas secreções. O TCA tem sobre o EDT A a vantagem de remover os sais minerais num intervalo de tempo mais curto, porém, a obtenção dos cortes semi-fmos no material tratado por ele é bem mais dificil. Ao microscópio eletrônico, o material tratado pelo EDT A apresenta o mesmo aspecto do controle. O TCA, ao contrário, provocou muitas alterações da ultra-estrutura de vários componentes celulares. Ao contrário do EDT A, seu uso como agente desmineralizador de tecidos duros em estudos ultra-estruturais não deve ser recomendado / Abstract: The aim of this study was to observe radioautographicaIly the effects of TCA and EDT A on the secretory proteins of the serous pancreatic cells, on the seromucous submandibular gland cells and on the ultrastructure of these glands of mice sacrificed lh afier the injection of a single dose of 3H-glicine by intracardiac fixation with 4% p-formaldehyde solution. The glands of each animal were divided in smaIl fragments (about lmm3) which were separated in three groups: control (non treated), treated with TCA and 1reated with EDT A. The radioautographic reactions were quantified by counting the reduced silver grains over the secretion of the serous pancreatic and seromucous submandibular gland cells. The counting data, afier statistical variance analysis, showed that both TCA and EDT A did not extract the labelled proteins of the acinar cells secretions of pancreas and submandibular glands. Although TCA removed the mineraIs faster than the EDT A it was more difficult to obtain ul1ra-thin and semi-thin sections in the gland fragments treated with it. Also the staining of the acinar cells with methilene blue was impaired. . The fragments treated by the EDT A did not present significant ul1rastructural differences when compared with controls. The TCA, on the other hand, caused some damage to the fine structure of various cellular components. Therefore, its use as a decalcitier of hard tiSsues on ultrastructural studies should not be recommended. / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental