As junções comunicantes medeiam a comunicação entre células e são fundamentais para o desenvolvimento e homeostase em organismos multicelulares. Nos invertebrados as junções são formadas por proteínas transmembrana denominadas inexinas. As junções permitem a passagem de pequenas moléculas através de um canal intercelular, entre uma célula e outra adjacente. O díptero Rhynchosciara americana tem contribuído para o estudo da biologia dos invertebrados, bem como para o estudo da interação entre genes, regulação gênica e desenvolvimento biológico. A partir de um banco de ESTs foram identificadas algumas mensagens com homologia as inexinas. Deste modo, o presente trabalho pretende estudar a inexina-2 de R. americana pela: caracterização molecular; análise do perfil expressão; e localização celular. Os nossos resultados de caracterização confirmam que a mensagem é de uma proteína de junção comunicante e as análises do perfil de expressão e localização celular mostram que a inexina-2 pode participar de diversos processos fisiológicos ao longo do desenvolvimento de R. americana. / The gap junctions mediate communication between cells and are fundamental to the development and homeostasis in multicellular organisms. In invertebrates the gap junctions are formed by transmembrane proteins called innexins. The gap junctions allow the passage of small molecules through an intercellular channel, between a cell and other adjacent. The dipteran Rhynchosciara americana has contributed to the study of the biology of invertebrates, as well as for the study of the interaction between genes, gene regulation and biological development. As from a ESTs bank identified some messages with homology connexins. Therefore, this paper aims to study the innexin R. americana by: molecular characterization; analysis of the expression profile; and cellular localization. Our molecular characterization results confirm that the message is from a gap junction protein and analysis of the expression and cellular localization profile show that innexin can participate in many physiological processes during the development of R. americana.

Com a idéia de identificar proteínas envolvidas no processo de enovelamento das proteínas sintetizadas na glândula salivar de Rhynchosciara americana, no início deste projeto adotou-se como estratégia o seqüenciamento de uma biblioteca de cDNA. Esta biblioteca foi construída utilizando-se glândulas salivares de Rhynchosciara americana do período de seu desenvolvimento onde tem início a síntese de seu casulo. Mensagens de proteínas envolvidas no processo de enovelamento, transporte e proteólise foram isoladas, alguns exemplos são hsc70, hsp83, hip, hop, dnaJ, trap1 e prolil isomerase, sec61α/β, sec23, peptidase de sinal, rab7, partícula reconhecedora de sinal (srp), enzima conjugadora de ubiquitina e complexo regulatório proteassomo 26, cop 1 e ubiquitina ligase. A identificação destes genes permitiu o isolamento de clones genômicos através de triagem em banco de fagos e caracterização dos genes hsc70 e hsp83 para verificação de sua organização em Rhynchosciara americana. A expressão dos seus respectivos mRNAs foi avaliada em vários períodos do último estágio larval. A localização por hibridização in situ mostrou que estes genes estão localizados em regiões dos cromossomos politênicos próximas a dois pufes de DNA, C3 e C8. O estudo dos níveis de expressão das proteínas codificadas pelos genes hsc70 e hsp83 mostrou a diferença de comportamento destes genes sob condições de estresse térmico e que a expressão destas proteínas deve ser regulada pelo período de desenvolvimento das larvas de Rhynchosciara americana. Quando evidenciada por imunofluorescência a proteína Hsc70 mostra localização predominantemente no citoplasma. / With the idea of identify some of these proteins involved in the folding process of the proteins synthesized on the Rhynchosciara salivary gland, this project started adopting the shotgun cDNA sequencing strategy. This cDNA library was constructed utilizing salivary glands of Rhynchosciara americana at a developmental period where the cocoon construction begins. Messengers of important proteins involved in the folding, transport and proteolysis process were isolated, some examples are hsc70, hsp83, hip, hop, sec61 α/β, sec23, signal peptidase, rab7, signal recognition particle (srp), ubiquitin conjugating enzyme e 26 proteasome regulatory complex, cop 1 and ubiquitin ligase. Identification of these genes allowed the screening of genomic clones from a phage library; hsc70 and hsp83 characterization was carried out to verify the arrangement of these genes on genome of Rhynchosciara americana. The study of these genes will contribute with phylogenetic information about the specie. The mRNA expression of these genes was analyzed during several periods of the last larval developmental stage. In situ localization showed that these genes are located in polytene chromosomes regions near two DNAs puffs, C3 and C8. The expression levels of the proteins codified by genes hsc70 and hsp83 showed different behaviors of these genes under heat stress conditions and mainly, that the regulation of the proteins Hsc70 and Hsp83 can be related to the period of development of the larvae of Rhynchosciara americana. When revealed by immunofluorescence, Hsc70 protein shows localization predominantly on the cytoplasm.

O estudo do díptero Rhynchosciara americana forneceu informações importantes sobre a biologia cromossômica, por apresentar cromossomos politênicos e amplificação gênica em diferentes órgãos. Dentre os órgãos que apresentam especializações do ciclo celular, o ovário é um dos mais interessantes, possuindo características únicas, como o desenvolvimento sincrônico dos folículos ovarianos e o fato de apresentar uma única e gigante célula nutridora conectada ao ovócito através de um canal citoplasmático. Une em si: meiose no ovócito, célula nutridora com poliploidia seguido de politenia e células foliculares com mitose. Células poliplóides e politênicas possuem cópias extras de DNA genômico através de repetidos ciclos de fase S sem que ocorra a divisão celular, um processo denominado endoreplicação. Os ciclos celulares, são dirigidos pela oscilação da ativação de complexos ciclina/Cdk. Estudos mostraram que a ciclina A atua em células endoreplicativas em Drosophila e a ciclina B inibe ciclos endoreplicativos induzindo a divisão celular. Torna-se relevante investigar a associação dessas moléculas reguladoras do ciclo celular com os ciclos endoreplicativos que ocorrem na ovogênese de R. americana. Perfis de expressão das ciclinas A e B foram detectados nos ovários por RT-PCR ao longo do desenvolvimento. Ensaios de incorporação do nucleosídeo timidina mostraram elevada atividade proliferativa das células foliculares para formar o folículo e o fim da atividade endoreplicativa nas células nutridoras em pupas de 4 dias. Preparações de imunolocalização proteica em ovários na fase de pupa revelaram acúmulo de ciclina A no citoplasma das células nutridoras e dos ovócitos, e acúmulo de ciclina B no citoplasma e na vesícula germinal do ovócito, atuando nos mecanismos meióticos. O estudo de proteínas relacionadas ao ciclo celular nesse modelo é importante para um melhor entendimento dos ciclos celulares incomuns presentes em diferentes órgãos de insetos. / Study of the diptera Rhynchosciara americana has provided important information about chromosome biology, for it displays polytene chromosomes and gene amplification in different organs. Among the organs that possess cell cycle specializations, the ovary is one of the most interesting ones, showing unique characteristics, such as the synchronous development of follicles and the presence of a single giant nurse cell connected to the oocyte through a cytoplasmic channel. This organ gathers: meiosis in the oocyte, nurse cell with polyploidy followed by polyteny, and follicle cells in mitosis. Polyploid and polytene cells have extra copies of genomic DNA obtained via sequential cycles of S phase not followed by cell division, a process called endoreplication. Cell cycles are driven by the oscilation in the activation of different cyclin/CDK complexes. Studies have shown that Cyclin A acts in endoreplicating cells in Drosophila and Cyclin B inhibits endoreplicative cycles, inducing cell division. Thus, it is relevant to investigate the association between these cell cycle-regulating proteins and the endoreplication cycles that occur during the oogenesis of R. americana. Expression profiles of cyclins A and B were evaluated in the ovary via RT-PCR throughout the development. Thymidine nucleoside incorporation assays showed high proliferative activity in follicle cells to build the follicle and the end of endoreplicative activity in nurse cells of 4-day-old pupae. Protein immunolocalization in ovary at the stage of pupa has shown accumulation of Cyclin A in the cytoplasm of nurse cells and oocytes, and accumulation of Cyclin B in the cytoplasm and germinal vesicle of the oocyte, acting on meiosis mechanisms. The study of proteins related to cell cycle in this model is important for a better understanding of uncommon cell cycle in different insect organ.

Trabalho apresentado para Defesa em nível de Mestrado. Área de concentração em Integração, Cultura e Sociedade da Universidade Federal da Integração Latino-Americana, como requisito parcial à obtenção do título de Mestre em Integração Contemporânea da América Latina. Orientador: Prof. Dra. Clara Agustina Suárez Cruz / Submitted by Nilson Junior (nilson.junior@unila.edu.br) on 2017-11-14T17:39:36Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Final Mestrado_Com Ficha Catalográfica_Iconografia Plástica Latino-americana_Antonio Berni.pdf: 7560563 bytes, checksum: eda98dfddbc7d3b4b6b0cd83f804b69e (MD5) / Approved for entry into archive by Nilson Junior (nilson.junior@unila.edu.br) on 2017-11-14T17:39:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Final Mestrado_Com Ficha Catalográfica_Iconografia Plástica Latino-americana_Antonio Berni.pdf: 7560563 bytes, checksum: eda98dfddbc7d3b4b6b0cd83f804b69e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-14T17:39:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Final Mestrado_Com Ficha Catalográfica_Iconografia Plástica Latino-americana_Antonio Berni.pdf: 7560563 bytes, checksum: eda98dfddbc7d3b4b6b0cd83f804b69e (MD5) Previous issue date: 2017 / The Art, in its different languages, becomes an element of integration, releasing and an opportunity for comprehension for communities and individuals. Through art, it may be shortened distances and consolidate paradigms. This project has as object of research, recognize part of the Latin American iconography through the work of Antonio Berni, an Argentinian artist that in his artistic discourse emphasizes to the discourse on social inequality in Argentina and leads to reflection and analysis of historical, social and political processes the countries of Latin America. Semiotics, the science that takes into account the study and full comprehension of the language through the signs, assists in the connection of the hypotheses for this study. It creates paths of analysis and synthesis for understanding complex systems of languages, cultures and societies. It is through Peirce's semiotics, which aims to analyse and expose the aspects of Berni`s works, establishing relations between art, culture, history, society and politics and considering cultural and human aspects in their uniqueness and singularity. Through this work, it is expected to indicate the relevance of aesthetic shaping, that assists in the cultural and social expansion and comprehension in an artistic process. And, that provides the elements of meaningfulness for the individual, clarifying about their skills and capabilities through knowledge of its origins / A Arte, em suas diversas linguagens, torna-se elemento integrador, libertador e de oportunidade de compreensão a povos e indivíduos. Por meio dela, consegue-se encurtar distâncias e alicerçar paradigmas. A presente pesquisa tem como objeto reconhecer parte da iconografia latino- americana através da obra de Antonio Berni, artista argentino que, em seu discurso plástico, salienta a desigualdade social na Argentina e conduz à reflexão e à análise dos processos históricos, sociais e políticos nos países da América Latina. A Semiótica, ciência que leva em consideração o estudo e a compreensão integral das linguagens através dos signos, auxilia na conexão das hipóteses levantadas para este estudo, criando meios de análise e síntese para compreensão de sistemas complexos de linguagens, culturas e sociedades. É através da Semiótica peirceana que pretende-se analisar e expor as facetas da obra de Berni, estabelecendo relações entre arte, cultura, história, sociedade e política, ponderando aspectos culturais e humanos, únicos e singulares. Por meio deste trabalho, espera-se indicar a relevância da formação estética, que auxilia na ampliação e compreensão cultural e social do processo artístico, e que provê elementos de significância ao indivíduo, esclarecendo sobre suas capacidades e potencialidades através do conhecimento de suas origens

Orientador: Luiz Gonzaga Marchezan / Banca: Karin Volobuef / Banca: Rauer Ribeiro Rodrigues / Resumo: O espaço e o tempo são elementos estruturais de fundamental importância na narrativa literária, podendo assumir funções diversas. Os métodos e os recursos narrativos de que o escritor dispõe são variados. A sua instauração gera uma relação entre ambos de valores estéticos e narrativos muitas vezes diferentes para cada obra. Cada escritor projeta-os segundo a sua concepção estético-literária e ao seu estilo. Partindo deste axioma, que é a existência do espaço e do tempo como categorias narrativas, analisamos duas obras literárias específicas: o conto "O gato preto", de Edgar Allan Poe, e o romance O Processo, de Franz Kafka. A partir da análise das respectivas obras, verificamos como ambas as categorias narrativas se apresentam em um conto e em um romance e como elas auxiliam na obtenção de efeitos pré-definidos, como, por exemplo, os efeitos elencados na filosofia da composição e no realismo fantástico, respectivamente. Objetivamos ressaltar as especificidades de como Poe e Kafka retratam o espaço e o tempo em ambas narrativas. Pretendemos estudar, desta forma, os principais aspectos narrativos do conto e do romance em questão de modo a ressaltar as suas especificidades, elencando as suas funções narrativas, para tanto trabalhamos com os conceitos de espaço tópico e descrito, além dos aspectos do tempo a partir do nível narrativo e do nível diegético / Abstract: Space and Time are structural elements of fundamental importance in literary narrative, and may take several functions. The methods and narrative procedures the writer arranges are diverse. Their establishment generate a relationship between them which aesthetic and narrative values are often different for each work. Each writer designs them according to their style, as well as their aesthetic-literary conceptions. From this axiom, which is the existence of space and time as narrative categories, we analyze two specific literary works: the short story called "The Black Cat" by Edgar Allan Poe, and the novel The Judgment by Franz Kafka. Drawing on the analysis of their works, we see how both categories are presented in a short story and in a novel and how they assist in achieving predefined effects, such as the ones listed in "The Philosophy of Composition" and in the Fantastic Realism, respectively. Our aim is to highlight the specificities of how Poe and Kafka portray Space and Time in both narratives. By doing so, we intend to study the main narrative aspects of the short story and the novel in question so as to highlight their specific features, listing their narrative functions. Therefore, the concepts of topic and described Space, in addition to the aspects of Time from the narrative and diegetic levels are focused / Mestre

Com a idéia de identificar proteínas envolvidas no processo de enovelamento das proteínas sintetizadas na glândula salivar de Rhynchosciara americana, no início deste projeto adotou-se como estratégia o seqüenciamento de uma biblioteca de cDNA. Esta biblioteca foi construída utilizando-se glândulas salivares de Rhynchosciara americana do período de seu desenvolvimento onde tem início a síntese de seu casulo. Mensagens de proteínas envolvidas no processo de enovelamento, transporte e proteólise foram isoladas, alguns exemplos são hsc70, hsp83, hip, hop, dnaJ, trap1 e prolil isomerase, sec61α/β, sec23, peptidase de sinal, rab7, partícula reconhecedora de sinal (srp), enzima conjugadora de ubiquitina e complexo regulatório proteassomo 26, cop 1 e ubiquitina ligase. A identificação destes genes permitiu o isolamento de clones genômicos através de triagem em banco de fagos e caracterização dos genes hsc70 e hsp83 para verificação de sua organização em Rhynchosciara americana. A expressão dos seus respectivos mRNAs foi avaliada em vários períodos do último estágio larval. A localização por hibridização in situ mostrou que estes genes estão localizados em regiões dos cromossomos politênicos próximas a dois pufes de DNA, C3 e C8. O estudo dos níveis de expressão das proteínas codificadas pelos genes hsc70 e hsp83 mostrou a diferença de comportamento destes genes sob condições de estresse térmico e que a expressão destas proteínas deve ser regulada pelo período de desenvolvimento das larvas de Rhynchosciara americana. Quando evidenciada por imunofluorescência a proteína Hsc70 mostra localização predominantemente no citoplasma. / With the idea of identify some of these proteins involved in the folding process of the proteins synthesized on the Rhynchosciara salivary gland, this project started adopting the shotgun cDNA sequencing strategy. This cDNA library was constructed utilizing salivary glands of Rhynchosciara americana at a developmental period where the cocoon construction begins. Messengers of important proteins involved in the folding, transport and proteolysis process were isolated, some examples are hsc70, hsp83, hip, hop, sec61 α/β, sec23, signal peptidase, rab7, signal recognition particle (srp), ubiquitin conjugating enzyme e 26 proteasome regulatory complex, cop 1 and ubiquitin ligase. Identification of these genes allowed the screening of genomic clones from a phage library; hsc70 and hsp83 characterization was carried out to verify the arrangement of these genes on genome of Rhynchosciara americana. The study of these genes will contribute with phylogenetic information about the specie. The mRNA expression of these genes was analyzed during several periods of the last larval developmental stage. In situ localization showed that these genes are located in polytene chromosomes regions near two DNAs puffs, C3 and C8. The expression levels of the proteins codified by genes hsc70 and hsp83 showed different behaviors of these genes under heat stress conditions and mainly, that the regulation of the proteins Hsc70 and Hsp83 can be related to the period of development of the larvae of Rhynchosciara americana. When revealed by immunofluorescence, Hsc70 protein shows localization predominantly on the cytoplasm.

A dissertação apresenta um estudo sobre as questões da Identidade e da Linguagem na obra de Toni Morrison, Song of Solomon. Procura-se mostrar de que forma(s) o grupo afro-americano faz uma apropriação muito própria da linguagem escrita que aliada à palavra oral adquire sentidos alternativos, em especial um mundo de multiplicidades como a América. pretende-se, afinal sugerir formas de entender a América como "home" através dessa apropriação da(s) linguagem(ns) e também através da afirmação da identidade afro-americana.

Orientador: Cláudia Maria Ceneviva Nigro / Banca: Emerson da Cruz Inácio / Banca: Flávia Andrea Rodrigues Benfatti / Resumo: O propósito deste trabalho é o estudo da intersecção entre raça/etnia e gênero, mais especificamente identidades negras-gay masculinas, construídas a partir dos poemas de autoria de Thomas Grimes, compilados na antologia Milking Black Bull: 11 Gay Black Poets [Tirando leite de touros negros: 11 poetas negros-gay] (1995). Interessa-nos verificar como esse cruzamento de múltiplas instâncias identitárias se adensa, ganhando corpo e voz nos poemas, instigando visões mais plurais e desbravando leituras mais ajustadas da identidade negra-gay masculina, secularmente sufocada, suprimida e subjugada ao anonimato e ao ostracismo por/em uma sociedade pronunciadamente branca e cis-heteronormativa. Defendemos a hipótese de que Grimes usa a escrita de modo a revolver as raízes íntimas daqueles que carregam o peso opressor de um fardo, no mínimo, duplo: serem negros e gays; sujeitos que, hostilizados pelo racismo e pela homofobia, fazem frente ao autoritarismo agenciador de estereotipias heteronormativas e raciais, perseguindo, ao mesmo tempo, a extenuante tarefa de encontrar um chez soi, um lugar ao qual possam pertencer. As reflexões aqui propostas estão em consonância com as analíticas queer e quare e com as perspectivas críticas que concebem o sujeito como performativo e reivindicador de posições e o processo de construção identitária como um mosaico provisório. O aparato teórico sob o qual este projeto está embasado e sustentado abarca, portanto, obras como as de Bauman (2001, 2005),... / Abstract: The main focus of this work is the study of the intersection between race/ethnicity and gender, more specifically black gay male identities, forged from Thomas Grimes' poems, compiled in the anthology Milking Black Bull: 11 Gay Black Poets (1995). We are interested in verifying how this layering of multiple identities gains body and voice in the poems, inciting more pluralistic visions and exploring more accurate readings of the black gay male identities, which have been stifled, suppressed, and subjected to anonymity and ostracism by/in an overtly white and cis-heteronormative society. We defend the hypothesis that Grimes makes use of his writing in order to go through the intimate roots of those who carry the oppressive weight of an, at least, double burden: to be black and gay; subjects who, oppressed by racism and homophobia, defy the limits of racial and heteronormative hegemony in pursuit of finding a chez soi, a place where they can belong. The reflections proposed here are in line with both queer and quare analytics and the critical perspectives that conceive the subject as performative, and the process of identity construction as a provisional mosaic. The theoretical framework under which this study is conducted is based mainly on the contributions of Bauman (2001, 2005), Butler (2000, 2002, 2008, 2016), Crenshaw (1995), Hall (2003, 2005), Hooks (1995, 2001), Jagose (1996), Johnson (2005), Wilchins (2004) and Woodward (1997) / Mestre

Biogene Amine sind eine Substanzklasse, die bei Vertebraten und Invertebraten eine wichtige Komponente des endokrinen Systems darstellen. Sie binden an spezifische Rezeptoren der Gruppe der G-Protein gekoppelten Rezeptoren. In dieser Arbeit wurden zwei neue Rezeptoren aus der Schabe Periplaneta americana kloniert. Durch verschiedene Ansätze konnten zwei vollständige cDNA-Sequenzen isoliert werden. Die Aminosäuresequenzen weisen die größte Ähnlichkeit zu bereits bekannten Tyraminrezeptoren aus Locusta/Bombyx bzw. zu Dopaminrezeptoren aus Apis/Drosophila auf. Entsprechend wurden diese Rezeptoren Pea (P. americana) TYR1 und PeaDOP2 genannt. Deutliche Hinweise auf ihre Funktion lassen sich an den abgeleiteten Aminosäuresequenzen ablesen. Aminosäuren, die wichtig bei der Bildung der Bindungstasche, der Rezeptoraktivierung und der Kopplung eines G-Proteins sind, treten bei beiden Rezeptoren auf. Sequenzalignments stellen die Rezeptoren in die Gruppe anderer Tyraminrezeptoren bzw. der Invertebraten-Typ Dopaminrezeptoren. Das Transkript der beiden Rezeptoren konnte durch RT-PCR in verschiedenen Geweben nachgewiesen werden. Ein Ziel der Arbeit war die Gewinnung eines polyklonalen Antiserums gegen PeaTYR1. Dieses Serum detektiert im Homogenat von Gehirnen mehrere Banden, darunter auch eine mit der kalkulierten Masse von PeaTYR1. Präabsorption des Serums mit dem Peptid, welches zur Reinigung verwendet wurde, zeigt dessen Spezifität. An Gehirnschnitten markiert das Serum große Teile des Protocerebrums aber auch feinere Strukturen der Antennalloben, der optischen Loben und des Zentralkomplexes. Ein weiteres Serum gegen Tyramin führte zu einer Markierung von mehreren Neuronengruppen, welche sich in die optischen Loben und den Zentralkomplex verzweigen. Der αPeaTYR1-CPL3 Antikörper markierte die Plasmamembran von transfizierten HEK293-Zellen. Die Lokalisierung von Rezeptor und Ligand deuten darauf hin, dass Tyramin die optische und olfaktorische Wahrnehmung beeinflussen könnte. / Biogenic amines form a group of substances which play an important role in the endocrine system of invertebrates and vertebrates. They bind to specific receptors of the G-protein coupled type. In this work two new receptors from Periplaneta americana were cloned. By several approaches two full-length cDNA sequences were obtained. The amino acid sequence is very similar to known tyramine receptors of Locusta/Bombyx or dopamine receptors from Apis/Drosophila, respectively. Therefore they were named PeaTYR1 and PeaDOP2. Residues which are important for forming the binding pocket, activation of the receptor or G-protein coupling could be identified in both receptors. Sequence alignments group them together with other tyramine receptors or insect-type dopamine receptors. The corresponding mRNA can be detected in different tissues by RT-PCR. One aim of this work was the preparation of a polyclonal antiserum against PeaTYR1. This serum detects several bands in a brain homogenate; one has the calculated mass of PeaTYR1. Its specificity was proven by praeabsorption. On brain slices the serum labels large regions in the protocerebrum, but also fine structures in the antennal lobes, the optic lobes or the central complex. Another serum against tyramine labels several cell clusters, which ramify within the optic lobes and the central complex. On transfected HEK293 cells the receptor can be detected on the plasma membrane. The localization of receptor and ligand may indicate a role of tyramine in optical/olfactory perception.

Thesis--Wisconsin. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 250-259).