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Desulfovibrio spp. dans la maladie parodontale : Interactions avec les cellules épithéliales KB et activité de l'amoxicilline libre ou complexée sur ces formes extracellulaires et intracellulaires / Desulfovibrio spp. in peridontal disease : interactions with KB epithelial cells and activity of free and complexed amoxillin on its extracellular formsBisson-Boutelliez, Catherine 05 November 2009 (has links)
Il a été suggéré que les Desulfovibrio, qui sont des bactéries anaérobies sulfato-réductrices, pourraient être impliqués dans les parodontites. Nous avons évalué le pouvoir invasif de Desulfovibrio vis-à-vis de cellules épithéliales et leur capacité à induire la production de cytokines par ces cellules. Nous avons montré que Desulfovibrio desulfuricans et Desulfovibrio fairfieldensis sont capables d'envahir et de se multiplier dans les cellules épithéliales buccales (cellules KB). La localisation intracytoplasmique de ces deux bactéries a été confirmée par microscopie confocale et électronique à transmission. L'internalisation de ces souches était dépendante de la polymérisation des microtubules mais pas de celle de l'actine. L'infection avec Desulfovibrio était responsable d'une augmentation de la production d'IL-6 et d'IL-8 par les cellules KB. La capacité de D. desulfuricans et de D. fairfieldensis à survivre dans les cellules épithéliales et à moduler leur réponse immunitaire pourrait contribuer au développement des maladies parodontales. Desulfovibrio ainsi que d'autres parodontopathogènes peuvent produire des ß-lactamases et sont capables d'envahir les cellules épithéliales. Il a été suggéré que l'hydrolyse de l'amoxicilline pourrait être évitée grâce à l'utilisation d'un complexe amoxicilline-ß-cyclodextrine (ßCD) et que la diffusion intracellulaire d'agents antimicrobiens pourrait être améliorée après complexation avec des ßCD. Un complexe stable amoxicilline-ßCD, caractérisé après analyse spectrale et thermique, n'a ni amélioré l'activité de l'amoxicilline vis-à-vis de souches produisant des ß-lactamases ni augmenté la diffusion intracellulaire de ce composé. / It has been suggested that Desulfovibrio, which are sulfate-reducing anaerobic bacteria, may be involved in periodontitis. We investigated the capacity of Desulfovibrio to invade epithelial cells and induce cytokine secretion from these cells. We showed that Desulfovibrio desulfuricans and Desulfovibrio fairfieldensis were able to invade and to multiply within oral epithelial cells (KB cells). Intracytoplasmic location of both bacteria was confirmed by confocal laser scanning and transmission microscopy. Invasion of these strains involved microtubule but not microfilament polymerization. Infection by Desulfovibrio resulted in an increase of the production of IL-6 and IL-8 by KB cells. The ability of D. desulfuricans and D. fairfieldensis to survive within oral epithelial cells and to modulate the epithelial immune response may contribute to the initiation and progression of periodontal diseases. Desulfovibrio as well as other periodontopathogens may produce ß-lactamases and have the capacity to invade epithelial cells. It has been suggested that the hydrolysis of amoxicillin might be prevented by using an amoxicillin-ß-cyclodextrin (ßCD) complex and that intracellular diffusion of antimicrobial agents might be enhanced after complexation with ßCDs. A stable [1:1] amoxicillin-ßCD complex, characterized by spectroscopic and thermal analysis, did neither improve the activity of amoxicillin against ß-lactamase producing strains nor enhance the intracellular diffusion of this compound.
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Étude et modélisation de la cinétique orale de l'amoxicilline chez le porceletBernier, Dave 12 1900 (has links)
Il est rapporté que la biodisponibilité orale de l’amoxicilline chez le porc est
environ trois fois moindre que chez l’homme. Pour élucider les raisons de cette
différence, la pharmacocinétique artérielle, veineuse porte et urinaire de cet
antibiotique a été caractérisée à des doses intragastriques de 4 à 30 mg/kg et
différents modèles compartimentaux physiologiques ont été conçus pour l’analyse
des données. La biodisponibilité orale de l’amoxicilline est maximale à 4 mg/kg, avec
une valeur moyenne de 52%. Les différences porto-systémiques de concentrations
plasmatiques d’amoxicilline et la clairance urinaire ont permis de démontrer une
augmentation de la clairance hépatique jusqu’à la dose de 30 mg/kg. Un modèle
compartimental comprenant deux voies parallèles d’absorption (de type Michaelis-
Menten d’accessibilité limitée dans le temps et d’ordre 1), deux compartiments de
distribution (central et périphérique) deux voies d’élimination (excrétions urinaire et
biliaire) est celui qui prédit le mieux les données observées. Ces résultats mettent en
évidence le rôle prépondérant du transporteur saturable PepT1 dans l’absorption orale
de l’amoxicilline administrée à faible dose, ainsi que l’importance croissante de
l’absorption passive lors d’administration à forte dose. / It was reported that the oral bioavailability of amoxicillin in swine is about three
times lower than in human beings. To elucidate the reasons for this difference,
arterial, portal venous and urinary pharmacokinetics was documented at intragastric
dose amounts ranging between 4 and 30 mg/kg, and several physiologic
compartmental models were developed for data analysis. The maximum oral
bioavailability of amoxicillin was recorded at 4mg/kg with a mean value of 52%. The
portal-systemic plasma concentration differences of amoxicillin and its urinary
clearance revealed an increase in hepatic clearance up to the 30 mg/kg dose. A
compartmental model with two parallel absorption route (time-constrained Michaelis-
Menten and first-order processes), two distribution compartments (central and
peripheral) two elimination pathways (urinary and biliary excretions) best fitted the
experimental data. These results highlight the paramount role of the PepT1 carriermediated,
saturable absorption at low oral amoxicillin doses, as well as the increasing
role of passive absorption at high doses.
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Étude et modélisation de la cinétique orale de l'amoxicilline chez le porceletBernier, Dave 12 1900 (has links)
Il est rapporté que la biodisponibilité orale de l’amoxicilline chez le porc est
environ trois fois moindre que chez l’homme. Pour élucider les raisons de cette
différence, la pharmacocinétique artérielle, veineuse porte et urinaire de cet
antibiotique a été caractérisée à des doses intragastriques de 4 à 30 mg/kg et
différents modèles compartimentaux physiologiques ont été conçus pour l’analyse
des données. La biodisponibilité orale de l’amoxicilline est maximale à 4 mg/kg, avec
une valeur moyenne de 52%. Les différences porto-systémiques de concentrations
plasmatiques d’amoxicilline et la clairance urinaire ont permis de démontrer une
augmentation de la clairance hépatique jusqu’à la dose de 30 mg/kg. Un modèle
compartimental comprenant deux voies parallèles d’absorption (de type Michaelis-
Menten d’accessibilité limitée dans le temps et d’ordre 1), deux compartiments de
distribution (central et périphérique) deux voies d’élimination (excrétions urinaire et
biliaire) est celui qui prédit le mieux les données observées. Ces résultats mettent en
évidence le rôle prépondérant du transporteur saturable PepT1 dans l’absorption orale
de l’amoxicilline administrée à faible dose, ainsi que l’importance croissante de
l’absorption passive lors d’administration à forte dose. / It was reported that the oral bioavailability of amoxicillin in swine is about three
times lower than in human beings. To elucidate the reasons for this difference,
arterial, portal venous and urinary pharmacokinetics was documented at intragastric
dose amounts ranging between 4 and 30 mg/kg, and several physiologic
compartmental models were developed for data analysis. The maximum oral
bioavailability of amoxicillin was recorded at 4mg/kg with a mean value of 52%. The
portal-systemic plasma concentration differences of amoxicillin and its urinary
clearance revealed an increase in hepatic clearance up to the 30 mg/kg dose. A
compartmental model with two parallel absorption route (time-constrained Michaelis-
Menten and first-order processes), two distribution compartments (central and
peripheral) two elimination pathways (urinary and biliary excretions) best fitted the
experimental data. These results highlight the paramount role of the PepT1 carriermediated,
saturable absorption at low oral amoxicillin doses, as well as the increasing
role of passive absorption at high doses.
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Rôle des lymphocytes cytotoxiques dans les hypersensibilités retardées cutanées / Role of cytotoxic cells in skin delayed hypersensitivitiesNosbaum, Audrey 23 September 2013 (has links)
Les hypersensibilités retardées (HSR) cutanées sont hétérogènes, à la fois par la nature des mécanismes impliqués (allergiques versus non allergiques) mais aussi par les différents degrés de sévérité rencontrés. Seules les HSR allergiques sont dues à la présence de lymphocytes T (LT), mal caractérisés chez l'homme. Le but de ce travail est d'étudier la contribution des LT CD8 cytotoxiques dans le développement et la sévérité des HSR cutanées chez l'homme, à partir de deux pathologies fréquentes : les toxidermies aux béta lactamines et l'eczéma allergique de contact à la para-phénylènediamine (PPD). Tout d'abord, la présence de LT spécifiques de médicament au sein des toxidermies aux béta lactamines a été recherchée in vivo et in vitro. Nous avons montré que les HSR sévères étaient plus souvent d'origine allergique que les HSR bénignes. Nous avons ensuite caractérisé le rôle des LT CD8 dans les HSR allergiques. Dans les toxidermies bénignes à l'amoxicilline, l'étude de la cinétique de recrutement des LT au niveau cutané ainsi que l'analyse des LT spécifiques du sang circulant ont permis de mettre en évidence le rôle essentiel des LT CD8 cytotoxiques dans l'initiation de ces réactions. Ensuite, dans l'eczéma allergique de contact à la PPD, un recrutement épidermique précoce des LT CD8 associés à des marqueurs de cytotoxicité, a été retrouvé, corrélé avec la sévérité des lésions. Ces résultats ont été confortés par ceux obtenus dans un modèle pré-clinique d'HSR allergique à la PPD chez la souris. En conclusion, ce travail montre que les LT CD8 cytotoxiques pourraient être les principales cellules effectrices des HSR cutanées allergiques chez l'homme / Skin delayed hypersensitivity (DHS) are heterogeneous, by the nature of the mechanisms involved (allergic versus non allergic) and also by their different degrees of severity. Only allergic DHS is due to T cells, poorly characterized in humans. The aim of this work is to study the contribution of cytotoxic CD8 T cells in the development and severity of skin DHS in humans, induced by two common diseases: cutaneous adverse drug reactions to beta lactam antibiotics and allergic contact dermatitis to para-phenylenediamine (PPD). First, the presence of drug specific T cells in cutaneous adverse drug reactions to beta lactams was investigated in vivo and in vitro. We showed that severe DHS were more often allergic than benign DHS. Then, we characterized the role of CD8 T cells in allergic DHS. In benign cutaneous adverse drug reactions to amoxicillin, the study of the kinetics of skin T cell recruitment as well as the analysis of circulating specific T cells highlight the essential role of cytotoxic CD8 T cells in the initiation phase of these reactions. In allergic contact dermatitis to PPD, early recruitment of epidermal CD8 T cells associated with cytotoxic markers was found, correlated with the severity of lesions. These results were supported by those obtained in a mouse model of allergic contact dermatitis to PPD. In conclusion, this work showed that cytotoxic CD8 T cells could be the main effector cells of allergic skin DHS in humans
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