Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-02-13T14:07:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) tese completa corrigida_junho (2016).pdf: 2219391 bytes, checksum: 7ac2338dbd07d9a53a3344311f51b5ce (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-13T14:07:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) tese completa corrigida_junho (2016).pdf: 2219391 bytes, checksum: 7ac2338dbd07d9a53a3344311f51b5ce (MD5) Previous issue date: 2014-05-26 / A artrite reumatóide (AR), é uma doença crônica inflamatória, em cuja etiologia estão envolvidos fatores genéticos, ambientais e infecções. Dentre as infecções se destacam as virais cujas proteínas modificam a função dos sinoviócitos como ocorre com o Parvovírus B19 (PVB19). Estudos tem mostrado a participação das citocinas IL-6 e L-10 na fisiopatogenia da AR. O diagnóstico da AR se baseia em critérios clínicos, radiológicos e laboratoriais.Dentre os auto- anticorpos, o fator reumatóide (FR) apresenta alta sensibilidade e baixa especificidade. Por lado, o anticorpo antipeptídeo citrulinado cíclico (ACCP) é um importante marcador para o diagnóstico e tem valor preditivo de um pior prognóstico. Sua detecção pelo ELISA, têm mostrado excelente desempenho diagnóstico, embora seja oneroso e mais demorado. Visando diagnósticos mais rápidos e práticos, os biossensores são ideais para testes tipo “point-of-care” devido à sua portabilidade. Os objetivos desta tese foram: avaliar a correlação dos niveis séricos de IL-10, IL-6 e a frequência do anti-IgG PVB19 com atividade clínica da AR mediante os índices compostos de atividade de doença (ICADs).em diferentes tratamentos e desenvolver um imunossensor eletroquímico label free para ACCP.Foi desenvolvido um estudo transversal para estimar a frequencia de anti-IgG PVB19 e determinar os níveis séricos da IL6 e IL10 pelo método ELISA.O imunossensor constituído por eletrodos screen printed de ouro,foi baseado no uso da SAM formada pela deposição do àcido tioglicólico.Oa antígenos foram imobilizadosde modo orientado via grupos carboxílicos do TGA. Os resultados mostraram uma frequencia de 73% (60/83) de IgG anti-PVB19 e uma correlação significativa entre os níveis de IL-6 e as medidas de atividade de AR nos pacientes com maior atividade inflamatória pelo EULAR. O maior contigente de pacientes IgG anti-PVB19 positivos estava com moderada e alta atividade pelo EULAR.O imunossensor eletroquímico apresentou uma resposta linear na curva de calibração, bom coeficiente de correlação e limite de detecção menor do que o método ELISA. / Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic inflammatory disease, whose etiology is influenced by genetics, the environment, and infections. Among the various types of infections, the ones that stand out are the viral infections whose proteins alter the function of synoviocytes as occurs with Parvovirus B19 (PVB19). Studies have shown the involvement of the IL-6 and IL-10 cytokines in the physiopathogenesis of RA. Diagnosis of RA is based on clinical, radiological, and laboratory criteria. In the autoantibodies, the rheumatoid factor (RF) has high sensitivity and low specificity. The Anti-cyclic Citrullinated Peptide (anti-CCP) is an important marker for the diagnosis and as a predictive value of a worst-case prognosis.Its detection by ELISA has shown excellent diagnostic performance, but it is expensive and takes longer.Aiming for faster and more practical diagnostics, biosensors are ideal for point-of-care testing, due to their portability. The objectives of this thesis were to evaluate the correlation of the serum levels of IL-10 and IL-6and the frequency of anti-IgG PVB19,with the clinical activity of RA, via composite indices of disease activity, under different treatments, in order to develop a labelfree electrochemical immunosensor for anti-CCP. A cross-sectional study was developed to estimate the frequency of anti-IgGPVB19and to determine the serum levels of IL-6 and IL-10 by the ELISA method. The immunosensor consisting of screen-printed gold electrodes was based on the use of the self-assembled monolayer (sam) formed by deposition of thioglycolic acid. The antigens were immobilized, driven via carboxylic groups of the TGA. The results showed a frequency of 73% (60/83) of IgG anti-PVB19 and a significant correlation between the levels of IL-6 and the activity measures of AR in the patients with higher inflammatory activity according to the EULAR. Most of the IgG anti-PVB19 positive patients had moderate and high activity according to the EULAR. The electrochemical immunosensor showed a linear response in the calibration curve, a good correlation coefficient, and a detection limit lower than the ELISA method.

Made available in DSpace on 2014-06-12T22:59:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6620_1.pdf: 2039878 bytes, checksum: 69b02afca59a7702032716d997bea58c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Objetivo: O propósito deste estudo foi avaliar o significado clínico de marcadores de atividade da artrite reumatóide (AR) em pacientes com Síndrome de Sjögren secundária (SSs). Materiais e Métodos: O estudo incluiu 118 pacientes distribuídos em 3 grupos: artrite reumatóide (46), AR com SSs (20) e controles saudáveis (52). Foram comparadas características clínicas e laboratoriais incluindo xerostomia, xeroftalmia, fluxo salivar em repouso (FSR), teste de Schirmer, número de articulações dolorosas e edemaciadas, escore de atividade da doença (DAS28) e dosagem de anti-CCP, Fator Reumatóide (FR), proteína C reativa (PCR), velocidade de hemossedimentação (VHS), além da análise histopatológica de glândulas salivares menores, Resultados: A dosagem anti-CCP foi detectada em 90% (18/20) dos pacientes com SSs à AR, 84,7% (39/46) dos pacientes com AR sem SSs e 1,9% (1/52) pacientes do grupo controle (p=0,181). O FR foi detectado em 75% (15/20) dos pacientes com SSs à AR, 63% (29/46) dos pacientes com AR sem SSs e em nenhum paciente do grupo controle (p=0,235). A média do número de articulações dolorosas em pacientes com SSs à AR foi de 3,53 e nos pacientes com AR sem SSs foi de 7,53 (p=0,054). Conclusões: Não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos AR em relação aos exames anti-CCP e FR. O número de articulações dolorosas nos pacientes com AR sem SSs foi maior do que nos pacientes com SSs à AR

Submitted by Edileide Reis (leyde-landy@hotmail.com) on 2015-04-08T22:07:57Z No. of bitstreams: 1 Isabella Vargas de Souza Lima.pdf: 9375405 bytes, checksum: a3d913a7254631a76ea5f2fc0da63ddc (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T22:07:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Isabella Vargas de Souza Lima.pdf: 9375405 bytes, checksum: a3d913a7254631a76ea5f2fc0da63ddc (MD5) Previous issue date: 2012 / É reconhecida a interface entre a reumatologia, particularmente no que diz respeito às doenças autoimunes, e a infectologia, seja pela hipótese de agentes infecciosos atuando como gatilho das disfunções imunológicas, seja pelo risco infeccioso atribuído aos tratamentos imunossupressores. Adicionalmente, tem sido observada a produção de alguns autoanticorpos no curso de infecções. Por exemplo: em pacientes com tuberculose (TB), foi demonstrada a produção de anticorpos descritos como de alta especificidade para artrite reumatóide (AR) como os anticorpos antipeptídeos citrulinados (ACPAs) e, do mesmo modo, foi demonstrada a presença de anticorpos anticitoplasma de neutrófilos (ANCA) dentre os quais antiproteinase 3 (anti-PR3) e antimieloperoxidase (anti-MPO), que são marcadores de vasculites sistêmicas. Objetivos: a) revisar as publicações sobre positividade dos ACPAs em doenças infecciosas, b) pesquisar a prevalência destes anticorpos assim como do ANCA em uma população de portadores de tuberculose. Métodos: a) inicialmente foi realizada uma revisão sistemática sobre os estudos avaliando a presença de ACPAs em doenças infecciosas; b) posteriormente, um grupo de 50 pacientes com TB pulmonar não tratada ou com até 30 dias do início do tratamento foi avaliado quanto à presença de sintomas reumatológicos e, principalmente, quanto à positividade de anticorpos ACPAs, incluindo antipeptídeo citrulinado cíclico (anti-CCP) e antivimentina citrulinada modificada (anti-MCV) e quanto à positividade de ANCA por imunofluorescência indireta (IFI) e anticorpos anti-PR3 e anti-MPO por enzimaimunoensaio (ELISA). Resultados: a) a revisão sistemática foi publicada e encontra-se apresentada “Revisão de literatura” com o título Antibodies against cyclic citrullinated peptides in infectious diseases – a systematic review. Clin Rheumatol 2010, Dec 29(12): 1345-51. b) encontrou-se positividade de ACPAs em apenas dois (4%) dos 50 pacientes com TB e não houve positividade de ANCA por IFI ou a presença de anticorpos anti-PR3 ou anti-MPO por ELISA no soro desses pacientes. Estes resultados estão apresentados em dois artigos que foram submetidos para a revista Clinical Rheumatology (Canadá, fator de impacto 2011: 1,996), aguardando o parecer do corpo editorial. As versões submetidas encontram-se na sessão “Artigos”. Conclusões: embora estudos prévios tenham relatado a presença de ACPAs e ANCA em pacientes com TB, no presente estudo a positividade dos ACPAs foi baixa e não foi observada positividade para ANCA, anti-PR3 e anti-MPO, confirmando a alta especificidade destes testes para AR e vasculites sistêmicas, respectivamente.

To diagnose rheumatoid arthritis (RA) during the early stages of the disease is often difficult. The disease course shows great inter-individual variation from mild, self-limiting to very severe destruc-tive disease with extra-articular manifestations. Early aggressive treatment with potentially toxic drugs has been shown to improve the long-term outcome. Thus, it is desirable to make an early reliable di-agnosis and to identify those patients who would benefit from being treated most aggressively. The aim of this thesis was to evaluate laboratory and clinically markers of inflammation as predic-tors of disease course, to compare dual-energy X-ray absorptiometry (DXA) and conventional radiog-raphy (CR) as measures of joint destruction and to investigate the significance of antibodies against cyclic citrullinated peptide (anti-CCP antibodies), rheumatoid factors (RFs) and HLA shared epitope (SE) alleles for the relative risk of future development of RA and as predictors of disease severity in patients with early RA. Patients with RA of recent onset are included in the early RA programme at the Department of Rheumatology, University Hospital, Umeå and are followed longitudinally. The prediction of markers of inflammation for bone loss and radiological outcome was analyzed in the first 43 patients recruited. Radiographs of hands and feet (Larsen score) and bone mineral density (BMD) in hands (DXA), were assessed at baseline, after 1 and 2 years. The disease activity was evaluated clinically and by labora-tory tests. Radiological damage increased significantly during the study and was particularly corre-lated with Larsen score at baseline. BMD in hands decreased significantly in postmenopausal women and the decrease was greater than in healthy matched controls. Radiological progression and bone loss in hands was retarded by an early response to therapy. In a case-control study within the Medical Biobank and the Maternity cohort of Northern Sweden, patients from the early RA programme were identified among blood donors from whom samples had been collected years before onset of symptoms. The prevalence of anti-CCP antibodies and RFs (IgA-RF, IgG-RF and IgM-RF) was investigated in samples from 83 individuals (pre-patients) and com-pared with matched controls. SE alleles were assessed in a sub-group of 59 individuals. Anti-CCP antibodies and RFs preceded onset of RA by several years and increased in prevalence closer to dis-ease onset. Anti-CCP antibodies and IgA-RF significantly predicted the onset of RA. The combination of anti-CCP antibodies and SE alleles was associated with a high relative risk for future development of RA. In a later co-analysis between the register of patients in the early RA programme (n=138) and the Medical Biobank and the Maternity cohort, 93 pre-patient samples were identified. The significance of SE alleles and of the presence of anti-CCP antibodies and RFs before and at disease onset for disease activity and severity was studied. Radiographs of hands and feet were assessed at baseline and after 2 years (Larsen score). The presence of anti-CCP antibodies in pre-patient samples and at baseline was associated with radiological damage, as was presence of all RFs at baseline. A higher titre of anti-CCP antibodies was associated with greater radiological progression. The titre was lowered by a therapeutic response. In multiple logistic regression analyses anti-CCP antibodies, IgA-RF, ESR and swollen joint count predicted greater radiological progression, whilst a therapeutic response predicted a lesser pro-gression. In conclusion, anti-CCP antibodies and IgA-RF are predictors for future onset of RA and for radio-logical destruction and progression. The combination of anti-CCP antibodies and SE alleles is associ-ated with a high relative risk for future RA. Therapeutic response decreases the radiological progres-sion and the bone loss in hands and lowers the titre of anti-CCP antibodies. Conventional radiography is a better measure of joint destruction than DXA.