Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-10T11:30:57Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vinicius Caixeta de Sousa - 2016.pdf: 6443318 bytes, checksum: 09bb12a456ef519b05b09ed648a75811 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-10T11:31:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vinicius Caixeta de Sousa - 2016.pdf: 6443318 bytes, checksum: 09bb12a456ef519b05b09ed648a75811 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T11:31:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vinicius Caixeta de Sousa - 2016.pdf: 6443318 bytes, checksum: 09bb12a456ef519b05b09ed648a75811 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Abstract: Objective: To evaluate the effectiveness of complementary protocols of sanitization in the decontamination of infected root canals. Methods: Fifty uniradicular maxilary anterior human teeth were selected. The crowns were removed and the lengths standardized at 16 mm. The specimens were inoculated with Enterococcus faecalis and incubated at 37 °C for sixty days. Thirty teeth were performed with BioRace instruments until diameter corresponding to #60.02, and then complemented with Self-Adjusting File (SAF); XP-endo Finisher (XPF) and passive ultrasonic irrigation (PUI). Ten samples were used as positive control and 10 were not contaminated. Initial and final samples were collected and incubated at 37 °C for a period of 48 hours. The bacterial growth was analyzed in culture, determining the presence or absence of bacteria. The optical density of the culture medium was interpreted by UV spectrophotometry. The specimens were sectioned and prepared for evaluation in SEM. The images of the root surfaces were analyzed and classified by scores according to the presence of debris. The Kruskal-Wallis test was used for statistical analysis. The level of significance was 5%. Results: The mean optical density (μm) of the sanification protocols showed bacterial reduction in all groups. The experimental groups did not present statistically significant differences (p = 0.196). The analysis of SEM images revealed no significant difference (p = 0.414) between the scores of the groups. Conclusion: Complementary sanitization protocols reduced bacterial contamination. / Resumo: Objetivo: Avaliar a efetividade de protocolos complementares de sanificação na descontaminação de canais radiculares infectados. Materiais e métodos: Cinquenta dentes humanos anteriores superiores unirradiculares foram selecionados. As coroas foram removidas e os comprimentos padronizados em 16 mm. Os espécimes foram inoculados com Enterococcus faecalis e incubados a 37°C por sessenta dias. Trinta dentes foram preparados com instrumentos BioRace até alcançar o diâmetro correspondente ao #60.02, e a seguir complementados com Self-Adjusting File (SAF); XP-endo Finisher (XPF) e irrigação ultrassônica passiva (PUI). Dez amostras foram usadas como controle positivo e 10 não foram contaminadas. Amostras inicial e final foram coletadas e incubadas a 37°C por um período de 48 horas. O crescimento bacteriano foi analisado em cultura, determinando a presença ou ausência de bactérias. A densidade óptica do meio de cultura foi interpretada por espectrofotometria UV. Os espécimes foram seccionados e preparados para avaliação em MEV. A análise das imagens das superfícies radiculares foram analisadas e classificadas em scores de acordo com a presença de debris. O teste de Kruskal-Wallis foi utilizado para as análises estatísticas. O nível de significância foi 5%. Resultados: A média da densidade óptica (μm) dos protocolos de sanificação revelou redução bacteriana em todos os grupos. Os grupos experimentais não apresentaram diferenças estatisticamente significante (p=0,196). A análise das imagens de MEV revelou ausência de diferença significante (p=0,414) entre os scores dos grupos. Conclusão: Os protocolos complementares de sanificação favoreceu a redução da contaminação bacteriana.

The genus Senecio (Asteraceae) constitutes a group of cosmopolitan plants formed by more than 2000 species. Although most of these plants are considered to be toxic due to the presence of pyrrolizidine alkaloids, several of them are used in folk medicine. Their medicinal use can be attributed to other secondary metabolites, amongst them the terpenoids, with known antimicrobial activity. This work describes the isolation and identification of three compounds present in the CH2Cl2 extract of fresh aerial parts of Senecio platensis Arech., a species that showed the presence of peroxides in a phytochemical screening. Additionally, the the antibacterial activity of the isolated secondary metabolites has been evaluated. The aerial parts of Senecio platensis were collected in Capão Novo RS, Brasil and identified by Prof. Dr. Nelson Ivo Matzenbacher. Voucher specimen SMDB 9522 is preserved in the Herbarium of the Departamento de Botânica, UFSM. The fresh aerial parts of S. platensis (350.0 g) were extracted by maceration with CH2Cl2. The CH2Cl2 extract was evaporated to obtain an viscous residue (6.0 g), which approximates a yield of 1.71%. The crude extract was fractionated by flash chromatography over silica gel, using CH2Cl2 and CH2Cl2:EtOH mixtures of increasing polarity to yield 29 fractions. After two cycles of column chromatography (column: silica gel impregnated with AgNO3 (10%), eluents: hexane:acetone (95:5) and hexane:ethyl ether (99:1) 13.3 mg of PP1 were isolated from fraction 1 and later identified as germacrene D. After successive column chromatography over silica gel impregnated with AgNO3 (10%), eluting with hexane:acetone (9:1), hexane:ethyl acetate (95:5) and hexane:acetone (93:7), fraction 5 yielded 17.0 mg of AB1 (dehydrofukinone) and 30.6 mg of AB2 (spathulenol). The compounds were analyzed by GC-EI-MS, 1H and 13C NMR and were identified by comparison of their spectroscopic data with the literature. The fraction containing germacrene D, which is considered to be a precursor of several other sesquiterpene derivatives, was submitted to photooxidation process using Bengal Rose as sensitizer agent. By this reaction it was possible to confirm the formation of germacrene-D-1-hydroperoxide by its precursor. The antibacterial evaluation of the isolated compounds was accomplished by the broth microdilution method based on M7-A6/CLSI. In relation to Bacillus cereus ATCC 14579, dehydrofukinone showed MIC of 256 μg/mL and MBC of 4096 μg/mL. The spathulenol presented MIC and MBC of 64 μg/mL. Against the clinical isolate of B. cereus, dehydrofukinone showed MIC of 256 μg/mL and MBC > 8192 μg/mL while spathulenol showed MIC 32 μg/mL and MBC > 8192 μg/mL. Dehydrofukinone and spathulenol are inactive against Pseudomonas aeruginosa at the tested concentrations (until 8192 μg/mL). / O gênero Senecio (Asteraceae) constitui um grupo de plantas cosmopolitas, formado por mais de 2000 espécies. Embora grande número tenha toxicidade reconhecida devido à presença de alcalóides pirrolizidínicos, várias delas são empregadas na medicina popular. Seu uso medicinal pode ser atribuído à presença dos demais metabólitos secundários, entre eles os terpenóides, com atividade antibacteriana reconhecida. Este trabalho descreve o isolamento e a identificação de três constituintes presentes no extrato CH2Cl2 das partes aéreas de Senecio platensis Arech., espécie na qual foi detectada a presença de peróxidos em um screening fitoquímico. Adicionalmente, os metabólitos secundários isolados tiveram sua atividade antimicrobiana avaliada. As partes aéreas de S. platensis foram coletadas em abril de 2004, no município de Capão Novo RS, Brasil. A espécie foi localizada e identificada pelo Prof. Dr. Nelson Ivo Matzenbacher, do Programa de Pós-Graduação em Botânica da UFRGS. Material testemunha encontra-se depositado no Herbário do Departamento de Biologia da UFSM sob o registro SMDB 9522. As partes aéreas frescas de S. platensis (350,0 g) foram extraídas por maceração em CH2Cl2., seguido de evaporação do solvente, resultando num resíduo pastoso (6,0 g), com rendimento de 1,71%. O extrato bruto foi fracionado por cromatografia em coluna flash sobre gel de sílica, usando CH2Cl2 e misturas de CH2Cl2: EtOH, em gradiente, sendo obtidas 29 frações. A partir da fração 1, após duas cromatografias em coluna com gel de sílica impregnado com AgNO3 (10%), eluídas com hexano:acetona (95:5) e hexano:éter etílico (99:1), foram obtidos 13,3 mg da substância codificada como PP1 e posteriormente identificada como germacreno D. A fração 5 da coluna flash também foi fracionada e, após sucessivas cromatografias em coluna sobre gel de sílica impregnado com AgNO3 (10%), eluídas com hexano:acetona (9:1), hexano:acetato de etila (95:5) e hexano:acetona (93:7), foram isolados 17,0 mg de AB1 (deidrofuquinona) e 30,6 mg de AB2 (espatulenol). Os compostos foram analisados por CG-EM, RMN 1H e RMN 13C e foram identificados pela comparação de seus dados espectroscópicos com os obtidos da literatura. A fração contendo o germacreno D, considerado precursor de vários outros derivados de esqueleto sesquiterpênico, foi submetida a uma reação de foto-oxidação utilizando o corante Rosa de Bengala como agente sensibilizante. Através desta reação foi possível confirmar a formação do germacreno-D-1-hidroperóxido a partir de seu precursor. A avaliação da atividade antibacteriana das substâncias isoladas foi realizada através do método de microdiluição em caldo, baseado nos documentos M7-A6/CLSI, antigo NCCLS. Em relação ao Bacillus cereus ATCC 14579, a deidrofuquinona exibiu uma CIM de 256 μg/mL e CBM de 4096 μg/mL, sendo que o espatulenol apresentou CIM e CBM de 64 μg/mL. Frente à cepa hospitalar de B. cereus, a deidrofuquinona exibiu uma CIM de 256 μg/mL e CBM > 8192 μg/mL, enquanto que o espatulenol apresentou uma CIM 32 μg/mL e CBM > 8192 μg/mL. Tanto a deidrofuquinona quanto o espatulenol não apresentaram atividade contra Pseudomonas aeruginosa até a concentração de 8192 μg/mL.