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Separação imunomagnética associada a bacteriófago para diagnóstico de Salmonella enterica em carne de frango /

Corrêa, Isadora Mainieri de Oliveira. January 2015 (has links)
Orientador: Raphael Lucio Andreatti Filho / Banca: Adriano Sakai Okamoto / Banca: Julio Lopes Sequeira / Banca: Maristela Lovato / Banca: Guilherme Augusto Marietto Gonçalves / Resumo: Utilizou-se o método de Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago para detectar os seguintes sorovares: Salmonella Heidelberg, Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium, em amostras de sobrecoxas de frango contaminadas artificialmente. Para certificarmo-nos da eficiência do método, comparamos esta técnica com os testes de diagnóstico usuais para este patógeno: a análise bacteriológica padrão, que inclui a etapa de pré-enriquecimento, enriquecimento seletivo, realização de testes bioquímicos de triagem e sorologia, e a reação em cadeia da polimerase (PCR). Na avaliação da capacidade dos testes na detecção de Salmonella em carne de frango, submetemos amostras de sobrecoxas de frango à contaminação artificial com 5, 10 e 100 UFC/25mL de bactéria, para cada um dos sorovares listados anteriormente, totalizando 270 análises, divididas em 90 testes para cada um dos três sorovares, e assim comparamos os resultados obtidos com a análise bacteriológica, PCR e o teste de Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago. Ao aferirmos os resultados constatamos que a Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago é equiparável ao método bacteriológico recomendado pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e com a técnica de PCR, pois 99,6% das amostras foram positivas ao realizarmos o teste de Separação Imunomagnética associado a Bacteriófago e apenas uma amostra de Salmonella Enteritidis foi negativa neste ensaio, na concentração de 5 UFC/25mL. Já no método bacteriológico verificamos 95,5% de positividade, com nove amostras negativas para S. Heidelberg, duas negativas para S. Enteritidis e duas no ensaio com S. Typhimurium. Na técnica de PCR obtivemos 98,5% de positivos, com uma amostra negativa para S. Enteritidis na concentração de 5 UFC/25mL e três negativas para S. Typhimurium. O tempo despendido para a realização de cada teste foi aferido e constatamos... / Abstract: We used the Immunomagnectic Separarion Assay associated with Bacteriophage to detect the following serovars: Salmonella Enteritidis, Salmonella Heidelberg and Salmonella Typhimurium, in poultry drumstick samples artificially contaminated. We compared the efficiency of this technique to the usual diagnostic tests for Salmonella in food samples: the standard bacteriological analysis, which includes the step of pre-enrichment and selective enrichment, biochemical and serological screening tests, and polymerase chain reaction (PCR). To evaluate the tests capability of Salmonella detection poultry meat samples were submitted to artificial contamination with 5, 10 and 100 CFU/25mL of bacteria, for each of the serovars listed above, totaling 270 analyzes divided into 90 tests for each of the three serovars, and so compare the results obtained with the bacteriological analysis, PCR and Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay. We found that the Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay was comparable to bacteriological method recommended by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA) and the PCR technique, because 99.6% of the samples were positive to accomplish Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay and only a sample of Salmonella Enteritidis was negative in this test, in the concentration of 5 CFU/25mL. The bacteriological method check 95.5% positivity, with nine samples negative for S. Heidelberg, two negative for S. Enteritidis and two in the test with S. Typhimurium. In PCR 98.5% positives samples were obtained, with one S. Enteritidis negative sample in the concentration of 5 CFU/25ml and three negative samples for S. Typhimurium. The time for performing each test was measured and the Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay was the most rapid test for Salmonella diagnosis, since 20 hours, the conventional bacteriological took 88h and PCR 44h approximately. In this study we confirm the effectiveness of the ... / Doutor
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Avaliação do perfil bacteriológico no setor de cirurgia de pequenos animais de um hospital veterinário de Santa Catarina, Brasil / Evaluation of the bacteriological profile in the sector of surgery of small animals of a veterinary hospital of Santa Catarina, Brazil

Balsini, Jairo Nunes January 2017 (has links)
Antibiotic resistance is currently a major global challenge. The misuse of antimicrobials favors the formation of multiresistant strains, directly implicating the installation of the hospital infection and the surgical site. Thus, constant monitoring of bacterial flora present in surgical centers and knowledge about the sensitivity and resistance profile of bacteria in surgical environments is essential. This study aimed to evaluate the bacteriological profile in the Small Animals surgery sector of a Veterinary Hospital in the South of Santa Catarina. 19 animals submitted to elective surgical procedures were evaluated. Samples were collected with suabe in the region of the surgical incision after antisepsis and through plates positioned under the surgical center bench during the whole procedure. Colonies from bacterial growth were counted and identified. The isolated bacteria were cultivated in Müller Hinton Agar and performed three times for resistance and sensitivity research by McFarland standards. 56 different genres of bacteria from the surgical environment were identified. There was no post-asepsis bacterial growth in any sample. As for sensitivity, all bacteria were sensitive to the tested antimicrobials. It can be concluded that in the hospital under study there was no bacterial resistance to the antibiotics tested and the asepsis technique in the patients was effective. However, it is necessary to pay more attention to the procedures performed in the disinfection of the surgical sector, as well as the inclusion of measures that reduce levels of contamination in these places. / Submitted by Jairo Nunes Balsini (jairo.balsini@unisul.br) on 2018-02-27T14:02:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 805 bytes, checksum: c4c98de35c20c53220c07884f4def27c (MD5) Dissertacao_Jairo Final 0412 (2).pdf: 1126586 bytes, checksum: 63f32b9a3abf05d669177ca35b3fc6a4 (MD5) / Approved for entry into archive by Silvane Cauz (silvane.cauz@unisul.br) on 2018-02-27T19:19:04Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 805 bytes, checksum: c4c98de35c20c53220c07884f4def27c (MD5) Dissertacao_Jairo Final 0412 (2).pdf: 1126586 bytes, checksum: 63f32b9a3abf05d669177ca35b3fc6a4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-27T19:19:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 805 bytes, checksum: c4c98de35c20c53220c07884f4def27c (MD5) Dissertacao_Jairo Final 0412 (2).pdf: 1126586 bytes, checksum: 63f32b9a3abf05d669177ca35b3fc6a4 (MD5) Previous issue date: 2017 / A resistência aos antibióticos é atualmente um grande desafio global. O uso indevido de antimicrobianos favorece a formação de cepas multirresistentes, implicando diretamente sobre a instalação da infecção hospitalar e do sítio cirúrgico. Deste modo, o monitoramento constante da flora bacteriana presente nos centros cirúrgicos e o conhecimento sobre o perfil de sensibilidade e resistência de bactérias em ambientes cirúrgicos é imprescindível. Este estudo teve como objetivo avaliar o perfil bacteriológico no setor de cirurgia de Pequenos Animais de um Hospital Veterinário no Sul de Santa Catarina. Foram avaliados 19 animais submetidos a procedimentos cirúrgicos eletivos. As amostras foram coletadas com suabe na região da incisão cirúrgica após a anti-sepsia e através de placas posicionadas sob a bancada do centro cirúrgico durante todo o procedimento. As colônias provenientes do crescimento bacteriano foram contadas e identificadas. As bactérias isoladas foram cultivadas em Ágar Müeller Hinton e realizado triplicata para a pesquisa de resistência e sensibilidade por meio dos padrões de McFarland. Foram identificados 56 gêneros distintos de bactérias provenientes do ambiente cirúrgico. Não houve crescimento bacteriano pós-assepsia em nenhuma amostra. Quanto à sensibilidade, todas as bactérias apresentaram-se sensíveis aos antimicrobianos testados. Pode-se concluir que no hospital em estudo não houve resistência bactéria aos antibióticos testados e a técnica de assepsia nos pacientes foi eficaz. Entretanto faz-se necessário dar mais atenção aos procedimentos realizados na desinfecção do setor cirúrgico, assim como a inclusão de medidas que diminuam níveis de contaminação nestes locais.

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