Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-07-26T17:29:42Z No. of bitstreams: 1 MarceloAndersonBarbosaNascimento_TESE.pdf: 2038745 bytes, checksum: 1d85461112edc92cb7035c7e72456c87 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-07-27T19:29:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MarceloAndersonBarbosaNascimento_TESE.pdf: 2038745 bytes, checksum: 1d85461112edc92cb7035c7e72456c87 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T19:29:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarceloAndersonBarbosaNascimento_TESE.pdf: 2038745 bytes, checksum: 1d85461112edc92cb7035c7e72456c87 (MD5) Previous issue date: 2018-02-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Os dentes desenvolvem-se a partir de interações sequenciais entre o epitélio e o mesênquima derivado da crista neural em diferentes estágios de histodiferenciação e morfodiferenciação. Ao final da odontogênese, espera-se que as estruturas que participaram da formação destes tecidos desapareçam ou permaneçam quiescentes. Não é incomum que os remanescentes epiteliais da odontogênese originem lesões, como cistos e tumores odontogênicos. No desenvolvimento dentário precoce, a manutenção das células-tronco é regulada por uma série de fatores de transcrição específicos, que inclui OCT-4, SOX-2, Nanog, Stat-3 e c-Myc e diversos outros genes Homeobox e vias de transcrição (SHH, Wnt/β-catenina, FGF, BMP) contribuem para o destino e diferenciação celular. No entanto, há a participação destes genes e vias na patogênese de vários tipos de tumores. O objetivo do presente estudo foi avaliar a imunoexpressão de SOX2, FGF-10 e Wnt-1 em uma série de casos de lesões odontogênicas e alguns espécimes de germes dentários. A amostra consistiu de 20 Ceratocistos Odontogênicos (CO), 20 Ameloblastomas sólidos (AM), 20 Tumores odontogênicos adenomatoides (TOA), 10 Tumores odontogênico epitelial calcificante (TOEC) e 05 casos de germes dentários usados comparativamente. A imunoexpressão foi avaliada de acordo com o percentual de células epiteliais imunomarcadas e intensidade de células positivas resultando na pontuação de imunomarcação total (PIT) que variou de 0 a 7. A análise da imunoexpressão da SOX2 revelou positividade na maioria dos casos das lesões estudadas. A pontuação de imunomarcação para SOX2 revelou haver diferença estatisticamente significativa entre os grupos de lesões estudadas, com maior frequência em CO e TOEC (p <0,001). Após o pareamento, observou-se diferença significativa entre AM e CO, AM e TOEC, CO e TOA, CO e TOEC e, TOA e TOEC (p <0,05). A análise da imunoexpressão da FGF-10 e Wnt-1 revelou positividade em todos os casos das lesões estudadas, mas sem diferença estatisticamente significativa entre os grupos de lesões estudadas (p = 0,628). Houve diferença significativa em relação aos escores de positividade para Wnt-1 (p <0,001) com maior frequência em CO e TOA. Após o pareamento, observou-se existir diferença estatisticamente significativa entre AM e CO, AM e TOEC, CO e TOEC e, TOA e TOEC (p <0,05). O padrão de expressão de SOX2, FGF-10 e Wnt-1, em germes dentários e nas lesões odontogênicas aqui avaliadas, confirma a participação destas vias na odontogênese e também no desenvolvimento das lesões odontogênicas. / Dental development occurs from sequential interactions between the epithelium and the mesenchyme derived from the neural crest at different stages of histodifferentiation and morphodifferentiation. At the end of tooth development, the structures that participated in the formation of these tissues are expected to disappear or remain quiescent. It is not uncommon that the epithelial remnants of the tooth development originate lesions such as odontogenic cysts and tumors. In early tooth development, stem cell maintenance is regulated by specific transcription factors, which includes OCT-4, SOX-2, Nanog, Stat-3 and c-Myc and several other Homeobox genes and transcription pathways (SHH, Wnt/β-catenin, FGF, BMP) contribute to cell fate and differentiation. However, there is involvement of these genes and pathways in the pathogenesis of several types of tumors. The aim of the present study was to evaluate the immunoexpression of SOX2, FGF-10 and Wnt-1 in a case series of odontogenic lesions and some specimens of dental germs. The sample consisted of 20 Odontogenic Keratocysts (OK), 20 solid ameloblastomas (AM), 20 adenomatoid odontogenic tumors (AOT), 10 calcifying epithelial odontogenic tumors (CEOT) and 5 dental gerns for comparison. Immunoexpression was evaluated according to the percentage of immunostained epithelial cells and intensity of the positive cells resulting in total immunostaining score (PIT) ranging from 0 to 7. The analysis of SOX2 immunoexpression revealed positivity in most cases of the lesions studied. The immunostaining score for SOX2 revealed a statistically significant difference between the groups of lesions studied, with a higher frequency in OK and CEOT (p < 0.001). After pairing, we observed a significant difference between AM and OK, AM and CEOT, OK and AOT, OK and CEOT, and AOT and CEOT (p <0.05). Analysis of the FGF-10 and Wnt-1 immunoexpression revealed positivity in all cases of the lesions studied, with no statistically significant difference between the groups of lesions studied (p = 0.628). There was a significant difference in relation to the positivity scores for Wnt-1 (p <0.001) with higher frequency in OK and AOT. After pairing, there was a statistically significant difference between AM and OK, AM and CEOT, OK and CEOT and, AOT and CEOT (p <0.05). The expression pattern of SOX2, FGF-10 and Wnt-1 in dental germs and odontogenic lesions evaluated here confirms the participation of these pathways in the tooth development as well as in the development of odontogenic lesions.

As lesões fibro-ósseas da região maxilomandibular constituem um grupo heterogêneo de patologias que incluem lesões de desenvolvimento, reativas (displásicas) e neoplásicas, sendo que as duas principais entidades incluídas neste grupo são a displasia fibrosa e o fibroma ossificante. Devido a grande similaridade histológica entre estas patologias a avaliação das características clínicas e imaginológicas, juntamente com os aspectos histopatológicos, são o principal método de diagnóstico diferencial, porém devido a presença de diferentes níveis de maturidade destas patologias, em diversos casos os componentes histológicos assim como seu ordenamento são muito semelhantes. A busca por um processo de diagnóstico histológico mais fundamentado, hoje inexistente, é justificada pela diferença do curso clínico assim como pela eleição do tratamento entre a displasia fibrosa e o fibroma ossificante. Desta forma o propósito deste trabalho foi realizar uma análise retrospectiva descritiva das características clínico-demográficas e histopatológicas, e estabelecer um critério de diagnóstico diferencial que associe algumas características histopatológicas padronizadas juntamente com uma análise imunoistoquímica dos fatores de atividade de remodelação óssea destas lesões. Desta forma foram aplicados diferentes marcadores proteicos e moleculares em casos previamente diagnosticados de displasia fibrosa e fibroma ossificante, objetivando direcionar um critério de diagnóstico mais preciso. Nesse estudo retrospectivo foram avaliados 54 casos, sendo 30 casos de displasia fibrosa e 24 casos de fibroma ossificante, definidos após uma revisão nas análises das lâminas seguindo um padrão com algumas particularidades histomorfológicas para o diagnóstico diferencial. As características histológicas utilizadas para essa diferenciação, baseadas na revisão da literatura, foram: 1- limite entre a lesão e o tecido ósseo adjacente; 2- depósitos esféricos basofílicos (calcificações cementóides); 3- espaços negativos limítrofes entre o tecido ósseo e o tecido conjuntivo; 4- intensidade da celularidade do estroma e; 5- paralelismo das trabéculas ósseas lesionais. Após a reavaliação das lâminas seguindo a padronização de diferenciação com os cinco critérios histológicos mencionados anteriormente, foram reconsiderados os diagnósticos de 7 lâminas, ou seja 12,96% das amostras apresentaram alteração no diagnóstico anatomopatológico inicial. Posteriormente foram utilizados os seguintes imunomarcadores proteicos e moleculares do metabolismo ósseo em 9 lâminas de fibroma ossificante e em 7 lâminas de displasia fibrosa: interleucina 6 (IL-6), osteoprotegerina (OPG), osteocalcina (OCN) e o ligante do receptor do ativador do fator nuclear Kappa B (RANKL). A imunoexpressão destes marcadores foi observada nos seguintes locais: osteócitos, osteoblastos, osteoclastos e no estroma. Apenas a osteoprotegerina apresentou significância estatística nos osteócitos, osteoblastos e osteoclastos. A osteoprotegerina no estroma e os demais marcadores não apresentaram significância estatística em nenhum dos locais. / The fibro-osseous lesions of the maxillomandibular region constitute a heterogeneous group of pathologies that include developmental, reactive (dysplastic) and neoplastic lesions, and the two main entities included in this group are fibrous dysplasia and ossifying fibroma. Due to the great histological similarity between these pathologies the evaluation of the clinical and imaging characteristics, together with the histopathological aspects, are the main method of differential diagnosis, however due to the presence of different levels of maturity of these pathologies, in several cases the histological components as well as their arrangement are very similar. The search for a more substantiated histological diagnosis process, which does not exist today, is justified by the difference in the clinical course as well as by the choice of treatment between fibrous dysplasia and ossifying fibroma. Therefore, the purpose of this study was to perform a descriptive retrospective analysis of the clinical-demographic and histopathological characteristics and to establish a differential diagnosis criterion that associates some standard histopathological characteristics together with an immunohistochemical analysis of the bone remodeling activity factors of these lesions. In this way different molecular and protein markers were applied in previously diagnosed cases of fibrous dysplasia and ossifying fibroma, aiming at directing a more precise diagnosis criterion. In this retrospective study, 54 cases were evaluated, 30 cases of fibrous dysplasia and 24 cases of ossifying fibroma, defined after a review in the analysis of the slides following a pattern with some histomorphological peculiarities for the differential diagnosis. The histological characteristics used for this differentiation, based on the literature review, were: 1- border between the lesion and the adjacent bone tissue; 2- basophilic spherical deposits (cementoid calcifications); 3 - borderline negative spaces between the bone tissue and connective tissue; 4- intensity of stroma cellularity; 5- parallelism of lesionous trabeculae. After the reassessment of the slides following the standardization of differentiation with the five histological criteria mentioned above, the diagnoses of 7 slides were reconsidered, that is, 12.96% of the samples presented alterations in the initial anatomopathological diagnosis. Subsequently, the following protein and molecular biomarkers of bone metabolism were used on 9 ossifying fibrous slides and on 7 fibrous dysplasia slides: interleukin 6 (IL-6), osteoprotegerin (OPG), osteocalcin (OCN) and the activator receptor ligand Of nuclear factor Kappa B (RANKL). Immunoexpression of these markers was observed at the following sites: osteocytes, osteoblasts, osteoclasts and in the stroma. Only osteoprotegerin presented statistical significance in osteocytes, osteoblasts and osteoclasts. The osteoprotegerin in the stroma and the other markers did not present statistical significance in any of the sites.

As lesões fibro-ósseas da região maxilomandibular constituem um grupo heterogêneo de patologias que incluem lesões de desenvolvimento, reativas (displásicas) e neoplásicas, sendo que as duas principais entidades incluídas neste grupo são a displasia fibrosa e o fibroma ossificante. Devido a grande similaridade histológica entre estas patologias a avaliação das características clínicas e imaginológicas, juntamente com os aspectos histopatológicos, são o principal método de diagnóstico diferencial, porém devido a presença de diferentes níveis de maturidade destas patologias, em diversos casos os componentes histológicos assim como seu ordenamento são muito semelhantes. A busca por um processo de diagnóstico histológico mais fundamentado, hoje inexistente, é justificada pela diferença do curso clínico assim como pela eleição do tratamento entre a displasia fibrosa e o fibroma ossificante. Desta forma o propósito deste trabalho foi realizar uma análise retrospectiva descritiva das características clínico-demográficas e histopatológicas, e estabelecer um critério de diagnóstico diferencial que associe algumas características histopatológicas padronizadas juntamente com uma análise imunoistoquímica dos fatores de atividade de remodelação óssea destas lesões. Desta forma foram aplicados diferentes marcadores proteicos e moleculares em casos previamente diagnosticados de displasia fibrosa e fibroma ossificante, objetivando direcionar um critério de diagnóstico mais preciso. Nesse estudo retrospectivo foram avaliados 54 casos, sendo 30 casos de displasia fibrosa e 24 casos de fibroma ossificante, definidos após uma revisão nas análises das lâminas seguindo um padrão com algumas particularidades histomorfológicas para o diagnóstico diferencial. As características histológicas utilizadas para essa diferenciação, baseadas na revisão da literatura, foram: 1- limite entre a lesão e o tecido ósseo adjacente; 2- depósitos esféricos basofílicos (calcificações cementóides); 3- espaços negativos limítrofes entre o tecido ósseo e o tecido conjuntivo; 4- intensidade da celularidade do estroma e; 5- paralelismo das trabéculas ósseas lesionais. Após a reavaliação das lâminas seguindo a padronização de diferenciação com os cinco critérios histológicos mencionados anteriormente, foram reconsiderados os diagnósticos de 7 lâminas, ou seja 12,96% das amostras apresentaram alteração no diagnóstico anatomopatológico inicial. Posteriormente foram utilizados os seguintes imunomarcadores proteicos e moleculares do metabolismo ósseo em 9 lâminas de fibroma ossificante e em 7 lâminas de displasia fibrosa: interleucina 6 (IL-6), osteoprotegerina (OPG), osteocalcina (OCN) e o ligante do receptor do ativador do fator nuclear Kappa B (RANKL). A imunoexpressão destes marcadores foi observada nos seguintes locais: osteócitos, osteoblastos, osteoclastos e no estroma. Apenas a osteoprotegerina apresentou significância estatística nos osteócitos, osteoblastos e osteoclastos. A osteoprotegerina no estroma e os demais marcadores não apresentaram significância estatística em nenhum dos locais. / The fibro-osseous lesions of the maxillomandibular region constitute a heterogeneous group of pathologies that include developmental, reactive (dysplastic) and neoplastic lesions, and the two main entities included in this group are fibrous dysplasia and ossifying fibroma. Due to the great histological similarity between these pathologies the evaluation of the clinical and imaging characteristics, together with the histopathological aspects, are the main method of differential diagnosis, however due to the presence of different levels of maturity of these pathologies, in several cases the histological components as well as their arrangement are very similar. The search for a more substantiated histological diagnosis process, which does not exist today, is justified by the difference in the clinical course as well as by the choice of treatment between fibrous dysplasia and ossifying fibroma. Therefore, the purpose of this study was to perform a descriptive retrospective analysis of the clinical-demographic and histopathological characteristics and to establish a differential diagnosis criterion that associates some standard histopathological characteristics together with an immunohistochemical analysis of the bone remodeling activity factors of these lesions. In this way different molecular and protein markers were applied in previously diagnosed cases of fibrous dysplasia and ossifying fibroma, aiming at directing a more precise diagnosis criterion. In this retrospective study, 54 cases were evaluated, 30 cases of fibrous dysplasia and 24 cases of ossifying fibroma, defined after a review in the analysis of the slides following a pattern with some histomorphological peculiarities for the differential diagnosis. The histological characteristics used for this differentiation, based on the literature review, were: 1- border between the lesion and the adjacent bone tissue; 2- basophilic spherical deposits (cementoid calcifications); 3 - borderline negative spaces between the bone tissue and connective tissue; 4- intensity of stroma cellularity; 5- parallelism of lesionous trabeculae. After the reassessment of the slides following the standardization of differentiation with the five histological criteria mentioned above, the diagnoses of 7 slides were reconsidered, that is, 12.96% of the samples presented alterations in the initial anatomopathological diagnosis. Subsequently, the following protein and molecular biomarkers of bone metabolism were used on 9 ossifying fibrous slides and on 7 fibrous dysplasia slides: interleukin 6 (IL-6), osteoprotegerin (OPG), osteocalcin (OCN) and the activator receptor ligand Of nuclear factor Kappa B (RANKL). Immunoexpression of these markers was observed at the following sites: osteocytes, osteoblasts, osteoclasts and in the stroma. Only osteoprotegerin presented statistical significance in osteocytes, osteoblasts and osteoclasts. The osteoprotegerin in the stroma and the other markers did not present statistical significance in any of the sites.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-20Bitstream added on 2014-06-13T19:42:42Z : No. of bitstreams: 1 bellini_mf_dr_sjrp.pdf: 4712849 bytes, checksum: eaed69017a355062338fd2f384e1c381 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O carcinoma de esôfago apresenta um modelo de progressão tumoral a partir da seqüência esofagite, atrofia, displasia, carcinoma in situ e carcinoma invasivo, com algumas alterações genéticas bem estabelecidas nos estágios iniciais e avançados da carcinogênese.Contudo em lesões benignas precursoras como o megaesôfago e esofagite crônica os estudos genéticos são escassos. Portanto, com o objetivo de identificar o envolvimento de algumas proteínas que participam da regulação do ciclo celular e apoptose, no presente estudo foi avaliada a expressão das proteínas p53, p16, Fhit, caspase-3 e do antígeno Ki67, por imuno-histoquímica. Foram utilizados cortes histológicas de mucosa de pacientes chagásicos crônicos sem (CD) e com megaesôfago (CM), este último grupo por apresentar maior risco de desenvolvimento de carcinoma esofágico, e pacientes com esofagite crônica (CE), devido à relação entre o processo inflamatório e carcinogênese. Estas amostras foram comparadas com carcinoma de células escamosas de esôfago (ESCC) e mucosa esofágica histologicamente normal (NM). Também se avaliou a ocorrência de concordâncias utilizando o Teste Kappa, entre os casos com a expressão alterada das proteínas nos diferentes grupos, assim como a ocorrência de associações, entre padrões alterados de expressão das proteínas com sexo, idade, hábitos tabagistas e etilistas. Outro objetivo do estudo foi avaliar o padrão de perdas e ganhos cromossômicos de genes freqüentemente descritos como relacionados com a carcinogênese esofágica, FHIT, TP63, PIK3CA, EGFR, FGFR1, MYC, CDKN2A, YES1, NCOA3, e centrômeros 3, 7 e 9, como controles, por FISH. A avaliação imuno-histoquímica revelou que a proporção de casos positivos para a proteína p53 aumentou progressivamente de acordo com a severidade da lesão, CD (7,7%), CM (26,1%), CE (52,2%) and ESCC (100%)... / Esophagus carcinoma presents a tumor progression model from the sequence esophagitis, atrophy, dysplasia, carcinoma in situ and invasive carcinoma, with some well-established genetic changes in early and advanced stages of carcinogenesis. In benign precursor lesions such as megaesophagus and chronic esophagitis genetic studies are scarce. Therefore, to identify the involvement of certain cell cycle and apoptosis regulatory proteins, the present study evaluated the expression of p53, p16, Fhit, caspase-3 and Ki67 antigen by immunohistochemistry. Histological sections of esophageal mucosa were obtained from chronic chagasic patients without (CD) and megaesophagus (CM), the latter group presents higher risk of developing esophageal cancer, and patients with chronic esophagitis (CE), because the relationship between the inflammatory process and carcinogenesis. These samples were compared with squamous cell carcinoma of the esophagus (ESCC) and histologically normal esophageal mucosa (NM). It also assessed the occurrence of agreement using the Kappa test, among the cases with altered expression of proteins in different groups as well as the occurrence of associations, and altered patterns of protein expression with sex, age, smoking and alcohol habits. Another aim of the study was to evaluate the pattern of chromosomal gains and losses of genes frequently described as related to esophageal carcinogenesis, FHIT, TP63, PIK3CA, EGFR, FGFR1, MYC, CDKN2A, YES1, NCOA3 and centromere 3, 7 and 9, as controls for FISH. The immunohistochemical evaluation showed that the proportion of cases positive for p53 protein increased progressively according to the severity of the injury, CD (7.7%), CM (26.1%), CE (52.2%) and ESCC (100%). However, the proteins p16 and Fhit showed no statistically significant differences between groups, but also in CE was observed a greater number... (Complete abstract click electronic access below)