As sementes do gênero Brachiaria apresentam desuniformidade de maturação, degrana natural e dormência, causando problemas para a colheita e estabelecimento de estande uniforme de plantas em campo; a desuniformidade de maturação acarreta a produção de sementes com grau de dormência diferenciado. Por outro lado, o condicionamento fisiológico é uma opção interessante para uniformizar o processo germinativo. O objetivo desta pesquisa foi verificar os efeitos do condicionamento fisiológico com bioestimulantes, em sementes de Brachiaria humidicola colhidas de diferentes maneiras, armazenadas sob diferentes condições de temperatura e umidade relativa do ar, procurando, também, identificar a possível superação da dormência e verificar a atividade enzimática das sementes durante esse período. As sementes foram obtidas mediante dois procedimentos de colheita: a) sementes colhidas das inflorescências inteiras e b) sementes caídas ao solo. Após a colheita foi realizada a escarificação com H2SO4, obtendo sementes sem escarificação e escarificadas de cada procedimento de colheita. Foram realizados cinco tratamentos nas sementes escarificadas ou não, para os dois procedimentos de colheita: 1- sem condicionamento e papel umedecido com água; 2- sem condicionamento e papel umedecido com KNO3; 3- biocondicionamento com 24-EpiBL, na concentração de 10-8 M; 4- biocondicionamento com GA3, na concentração de 10-4 M e 5- biocondicionamento com 24-EpiBL + GA3, nas concentrações de 10-8 e 10-4 M, respectivamente. Após os tratamentos as sementes foram armazenadas em câmara fria e seca e ambiente natural e realizadas avaliações em quatro épocas (zero, três, seis e nove meses de armazenamento), mediante os testes de germinação e vigor (primeira contagem, velocidade de germinação e, análise computadorizada de imagens de plântulas - SVIS®) e emergência de plântulas, além da determinação da atividade das enzimas α-amilase e polifenoloxidase no início e aos nove meses de armazenamento. Os resultados indicam que o armazenamento das sementes de Brachiaria humidicola, em câmara fria e seca reduz a porcentagem de sementes dormentes; o biocondicionamento com ácido giberélico e 24-EpiBL + ácido giberélico, favorece a velocidade de germinação e o crescimento de plântulas; o condicionamento fisiológico com ácido giberélico isolado ou combinado com 24-epibrassinolídeo, é vantajoso para sementes de Brachiaria humidicola, armazenadas em câmara fria e seca ou ambiente natural e, a atividade da enzima α-amilase aumenta e da polifenoloxidase diminui à medida que a dormência das sementes de Brachiaria é superada durante o armazenamento. / Seeds from the genus Brachiaria present uneven maturation, natural threshing and dormancy, leading to issues during harvest and in the establishment of a uniform plant stand; the uneven maturation entails to the production of seeds with different degrees of dormancy. On the other hand, physiological priming is an interesting option to uniform the germination process. The aim of this research was to verify the effects of physiological priming with biostimulants, on seeds of Brachiaria humidicola harvested by different methods, stored under different conditions of temperature and air relative humidity, also looking to identify the possibility of dormancy breakage and verify seed enzymatic activity during this period. Seeds were obtained through two harvest procedures: a) seeds harvested from whole inflorescences and b) dropped seeds on the ground. After harvest, scarification was performed with H2SO4, obtaining seeds with or without scarification for each harvest procedure. Five treatments were performed on seeds scarified or not, for the two harvest procedures: 1- without priming and paper moistened with water; 2- without priming and paper moistened with KNO3; 3- Bio-priming with 24-EpiBL, in the concentration of 10-8 M; 4- Bio-priming with GA3, in the concentration of 10-4 M and bio-priming with 24-EpiBL + GA3, in the concentrations of 10-8 and 10-4 M, respectively. After treatment seeds were stored in a dry cold chamber and natural environment and evaluations were performed on four periods (zero, three, six and nine months of storage), through germination and vigor tests (first count of germination, speed of germination, computerized image analysis of seedlings - SVIS® and seedling emergence), besides the determination of the activity of the α-amylase and polyphenol oxidase enzymes at the beginning and at the ninth month of storage. The results indicate that the storage of Brachiaria humidicola seeds, in a dry cold chamber reduces the percentage of dormant seeds; bio-priming with 24-EpiBL + gibberellic acid accelerates germination and favors seedling growth; the physiological priming with gibberellic acid alone or combined with 24-epibrassinolide is advantageous for Brachiaria humidicola seeds, stored in dry cold chambers or natural environments and, the activity of the α-amylase enzyme increases and of the polyphenol oxidase decreases as the dormancy of Brachiaria seeds is broken during storage.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_cristina_larre.pdf: 291548 bytes, checksum: b01c0fd3c6e2185e8da8574384127853 (MD5) Previous issue date: 2008-05-30 / The objective of the research was evaluate the importance 24-epibrassinolide in physiological performance of rice seeds, for this two experiments were conducted in laboratory and a greenhouse. The first assessed the performance of different concentrations of 24-epibrassinolide in physiological quality of seeds and seedlings grow th in tw o lots of rice cv. IRGA 422CL. The seeds of both lots were treated with increasing concentrations of 24-epibrassinolide, zero, 0.01, 0.1, 0.4 and 1.0 µM, for a period of two hours and evaluated through the tests of germination, the first counting of germination, the speed of germination index , emergency , speed of emergency index , length of shoot and root and fresh and dry mass of shoot and root. Generally in all characteristics determined, concentrations less than or equal to 0.4 µM 24- epibrassinolide produced a positive response in physiological quality seeds of rice cv. IRGA 422CL. The second ex periment w as conducted w it h seed rice of tw o cultivars, BRS Querência, genoty pe susceptible to salinity and BRS Bojurú, tolerant to salt, in order to determine the effect of the 24-epibrassinolide on the germination, seedling grow th, leaf area and concentration of chlorophy ll under salt stress condition. Seeds w ere soaked for tw o hours in w ater, 100mM NaCl and solutions of 100 mM NaCl supplemented w ith 24-epibrassinolide at concentrati ons of 0.01, 0.1 and 1.0 µM. The viability and vigor of rice seeds of cv. BRS Querên cia w ere reduced by salinity and w ere restored by the application of the 24-epibrass inolide in concentration 1.0 µM. While in cv. BRS Bojurú the vigor w as reduced by th is concentration. The application of the 24-epibrassinolide in cv. BRS Querência incr eased the concentration of chlorophy ll, leaf area, length of root and shoot, f resh and dry mass of root and shoot, reducing the deleterious effects caused by salinity. H ow ever, in cv. BRS Bojurú, tolerant to salinity , the application of the 24-epi brassinolide 0.01 µM reversed or did not affect the characteristics of grow th, although, concentrations of 0.1 e 1,0 µM reduced the characteristics of grow th, but did not affect the chlorophy ll concentration. Based on the results, it can be inferred that the supplementation of saline solution w ith 24-epibrassinolide improves the q uality of see d varieties susceptible to salinity , not acting the same w ay in more tolerant cultivars. / O objetivo da pesq uisa foi avaliar a importância do 24-epibrassinolídeo no desempenho fisiológico de sementes de arroz, sendo realizados dois ex perimentos, em laboratório e casa de vegetação. O primeiro aval iou o desempenho de diferentes concentrações de 24-epibrassinolídeo na q ualidade f isiológica de sementes e no crescimento de plâ ntulas de arroz em dois lotes da cv. IRGA 422CL. As sementes de ambos os lotes foram tratadas com concentrações crescentes de 24- epibrassinolídeo (zero; 0,01; 0,1; 0,4 e 1,0 µM), por um período de duas horas e avaliadas por meio dos testes de germinação, primeira contagem da germinação, índice de velocidade de germinação, índice de velocidade de emergência, emergência, comprimento de parte aérea e raiz e massas fresca e seca de parte aérea e raiz. De modo geral em todas as características determinadas, concentrações menores ou iguais a 0,4 µM de 24-epibrassinolídeo produziram respostas positivas na q ualidade fisiológica das se mentes de arroz cv. IRGA 422CL. O segundo ex perimento foi conduzido com sementes de arroz de duas cultivares, BRS Querência, genótipo suscetível a salinidade e B RS Bojurú, tolerante ao sal, de modo a determinar o efeito do 24-epibrassinolídeo na germinação, crescimento de plântulas, área foliar e concentração de clorofila em condição de estresse salino. As sementes foram embebidas, por duas horas, em água, NaCl 100 mM e soluções de NaCl 100 mM suplementadas com 24-epibrassinolídeo nas concentrações de 0,01; 0,1 e 1,0 µM. A viabilidade e o vigor das sementes de arroz da cv. BRS Querência, foram reduzidos pela salinidade e restabelecidos pela aplicação do 24- epibrassinolídeo na concentração 1,0 µM. Enq uanto, na cv. BRS Bojurú, a aplicação desta concentração reduziu o vigor. Na cv. BRS Quer ência, suscetível ao sal, a aplicação do 24-epibrassinolídeo incrementou a concentração de clorofila, área foliar, comprimento de raiz e parte aérea, massas fresca e seca de raiz e parte aérea, reduzindo os efeitos deletérios causados pela salinidade. No entanto, na cv. BRS Bojurú, tolerante a salinidade, a aplicação do 24-epibrassinolídeo 0,01 µM reverteu ou não afetou as características de crescimento, porém, concentrações de 0,1 e 1,0 µM reduziram as características de cresci mento, mas não afetaram a concentração de clorofila. Com base nos resultados, pode-se inferir q ue a suplementação da solução salina com 24-epibrassinolídeo melhora a q ualidade das sementes de cultivares suscetíveis a salinidade, não atuando da mesma forma em cultivares mais tolerantes.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_cristina_ferreira_larre.pdf: 314474 bytes, checksum: 7bcfb3b381c500d52e92c9e1a37d5d9b (MD5) Previous issue date: 2008-05-30 / The objective of the research was evaluate the importance 24-epibrassinolide in physiological performance of rice seeds, for this two experiments were conducted in laboratory and a greenhouse. The first assessed the performance of different concentrations of 24-epibrassinolide in physiological quality of seeds and seedlings growth in two lots of rice cv. IRGA 422CL. The seeds of both lots were treated with increasing concentrations of 24-epibrassinolide, zero, 0.01, 0.1, 0.4 and 1.0 μM, for a period of two hours and evaluated through the tests of germination, the first counting of germination, the speed of germination index, emergency, speed of emergency index, length of shoot and root and fresh and dry mass of shoot and root. Generally in all characteristics determined, concentrations less than or equal to 0.4 μM 24- epibrassinolide produced a positive response in physiological quality seeds of rice cv. IRGA 422CL. The second experiment was conducted with seed rice of two cultivars, BRS Querência, genotype susceptible to salinity and BRS Bojurú, tolerant to salt, in order to determine the effect of the 24-epibrassinolide on the germination, seedling growth, leaf area and concentration of chlorophyll under salt stress condition. Seeds were soaked for two hours in water, 100mM NaCl and solutions of 100 mM NaCl supplemented with 24-epibrassinolide at concentrations of 0.01, 0.1 and 1.0 μM. The viability and vigor of rice seeds of cv. BRS Querência were reduced by salinity and were restored by the application of the 24-epibrassinolide in concentration 1.0 μM. While in cv. BRS Bojurú the vigor was reduced by this concentration. The application of the 24-epibrassinolide in cv. BRS Querência increased the concentration of chlorophyll, leaf area, length of root and shoot, fresh and dry mass of root and shoot, reducing the deleterious effects caused by salinity. However, in cv. BRS Bojurú, tolerant to salinity, the application of the 24-epibrassinolide 0.01 μM reversed or did not affect the characteristics of growth, although, concentrations of 0.1 e 1,0 μM reduced the characteristics of growth, but did not affect the chlorophyll concentration. Based on the results, it can be inferred that the supplementation of saline solution with 24-epibrassinolide improves the quality of seed varieties susceptible to salinity, not acting the same way in more tolerant cultivars. / O objetivo da pesquisa foi avaliar a importância do 24-epibrassinolídeo no desempenho fisiológico de sementes de arroz, sendo realizados dois experimentos, em laboratório e casa de vegetação. O primeiro avaliou o desempenho de diferentes concentrações de 24-epibrassinolídeo na qualidade fisiológica de sementes e no crescimento de plântulas de arroz em dois lotes da cv. IRGA 422CL. As sementes de ambos os lotes foram tratadas com concentrações crescentes de 24- epibrassinolídeo (zero; 0,01; 0,1; 0,4 e 1,0 μM), por um período de duas horas e avaliadas por meio dos testes de germinação, primeira contagem da germinação, índice de velocidade de germinação, índice de velocidade de emergência, emergência, comprimento de parte aérea e raiz e massas fresca e seca de parte aérea e raiz. De modo geral em todas as características determinadas, concentrações menores ou iguais a 0,4 μM de 24-epibrassinolídeo produziram respostas positivas na qualidade fisiológica das sementes de arroz cv. IRGA 422CL. O segundo experimento foi conduzido com sementes de arroz de duas cultivares, BRS Querência, genótipo suscetível a salinidade e BRS Bojurú, tolerante ao sal, de modo a determinar o efeito do 24-epibrassinolídeo na germinação, crescimento de plântulas, área foliar e concentração de clorofila em condição de estresse salino. As sementes foram embebidas, por duas horas, em água, NaCl 100 mM e soluções de NaCl 100 mM suplementadas com 24-epibrassinolídeo nas concentrações de 0,01; 0,1 e 1,0 μM. A viabilidade e o vigor das sementes de arroz da cv. BRS Querência, foram reduzidos pela salinidade e restabelecidos pela aplicação do 24- epibrassinolídeo na concentração 1,0 μM. Enquanto, na cv. BRS Bojurú, a aplicação desta concentração reduziu o vigor. Na cv. BRS Querência, suscetível ao sal, a aplicação do 24-epibrassinolídeo incrementou a concentração de clorofila, área foliar, comprimento de raiz e parte aérea, massas fresca e seca de raiz e parte aérea, reduzindo os efeitos deletérios causados pela salinidade. No entanto, na cv. BRS Bojurú, tolerante a salinidade, a aplicação do 24-epibrassinolídeo 0,01 μM reverteu ou não afetou as características de crescimento, porém, concentrações de 0,1 e 1,0 μM reduziram as características de crescimento, mas não afetaram a concentração de clorofila. Com base nos resultados, pode-se inferir que a - x - suplementação da solução salina com 24-epibrassinolídeo melhora a qualidade das sementes de cultivares suscetíveis a salinidade, não atuando da mesma forma em cultivares mais tolerantes.

Os peptídeos hormonais vegetais, que vêm sendo caracterizados em plantas desde a década de 90, podem estar relacionados com defesa, reprodução, crescimento e desenvolvimento de plantas. O peptídeo RALF (Rapid Alkalinization Factor), ubíquo no reino vegetal, está envolvido com o desenvolvimento de plantas. Em arabidopsis há 37 genes que codificam peptídeos RALF (AtRALFs). A isoforma mais estudada é a AtRALF1, a qual regula de maneira negativa a expansão celular, inibindo o crescimento de raiz primária e o alongamento de hipocótilo quando aplicado exogenamente. Recentemente, demonstrou-se a existência de uma relação antagônica entre AtRALF1 e a via de brassinosteróides (BRs) no desenvolvimento de raízes. Quando mutantes da via de sinalização do BR foram avaliados quanto a sua resposta ao peptídeo AtRALF1, descobriu-se que mutantes para o receptor quinase1 associado ao BRI1 (bak1) são insensíveis a AtRALF1. Experimentos utilizando o sistema de duplo híbrido em levedura, a co-imunoprecipitação e a indução de genes marcadores em mutantes bak1 foram realizados e confirmaram o envolvimento da proteína BAK1 na percepção do peptídeo. Plantas transgênicas que superexpressam AtRALF1 apresentam um fenótipo semi-anão, no entanto, quando as mesmas foram cruzadas com o mutante bak1, suas progênies apresentaram um fenótipo similar ao de plantas selvagens. Ainda, quando plantas deste cruzamento foram novamente cruzadas com plantas selvagens, plantas com fenótipo semi-anão foram observadas na prole. Ensaios de ligação usando o peptídeo AtRALF1 marcado com éster de acridínio foram realizados e mostraram que em mutantes bak1, a ligação do AtRALF1 é menor em aproximadamente 30% quando comparada com plantas selvagens. Os dados obtidos mostram que a proteína BAK1 interage fisicamente com o AtRALF1, está envolvida na percepção do peptídeo, é essencial para a inibição do crescimento da raiz primária causada pelo AtRALF1 e é necessária para a indução dos genes responsivos ao AtRALF1. / The plant peptides, which have been characterized in plants since the 90\'s, can be related to defense, reproduction, growth and development of plants. The RALF (Rapid Alkalinization Factor) peptide, ubiquitous in the plant kingdom, is related to the development of plants. In arabidopsis plants, there are 37 genes encoding RALF peptides (AtRALFs). AtRALF1 is the most studied isoform, which negatively regulate cell expansion, inhibiting primary root growth and hypocotyl elongation when it is applied exogenously. Recently, an antagonistic relationship between AtRALF1 and the brassinosteroids (BRs) to control root development had been demonstrated. When the response of mutants related to the BR signaling pathway to AtRALF1 peptide was investigated, it was found that mutants lacking the BRI1-associated receptor kinase1 (bak1) are insensitive to AtRALF1. Experiments using the two-hybrid system in yeast, co-immunoprecipitation, and the induction of marker genes in bak1 mutants were carried out, and confirmed the involvement of the BAK1 protein in the perception of AtRALF1 peptide. Transgenic plants overexpressing AtRALF1 are semi-dwarf. However, when those transgenic plants were crossed with bak1 mutant, their progeny showed a wild-type phenotype. Besides, when plants from this progeny were crossed again with wild-type plants, semi-dwarf phenotype plants were obtained in the offspring. Binding assays using AtRALF1 labeled with acridinium-ester were performed, and showed that in bak1 mutants, the AtRALF1 binding was reduced approximately 30% when compared to wild-type plants. All data indicate that BAK1 protein interacts physically with AtRALF1, it\'s involved with the peptide perception, essential for the primary root growth inhibition caused by AtRALF1, and required to the induction of genes responsive to AtRALF1.

Os peptídeos hormonais vegetais, que vêm sendo caracterizados em plantas desde a década de 90, podem estar relacionados com defesa, reprodução, crescimento e desenvolvimento de plantas. O peptídeo RALF (Rapid Alkalinization Factor), ubíquo no reino vegetal, está envolvido com o desenvolvimento de plantas. Em arabidopsis há 37 genes que codificam peptídeos RALF (AtRALFs). A isoforma mais estudada é a AtRALF1, a qual regula de maneira negativa a expansão celular, inibindo o crescimento de raiz primária e o alongamento de hipocótilo quando aplicado exogenamente. Recentemente, demonstrou-se a existência de uma relação antagônica entre AtRALF1 e a via de brassinosteróides (BRs) no desenvolvimento de raízes. Quando mutantes da via de sinalização do BR foram avaliados quanto a sua resposta ao peptídeo AtRALF1, descobriu-se que mutantes para o receptor quinase1 associado ao BRI1 (bak1) são insensíveis a AtRALF1. Experimentos utilizando o sistema de duplo híbrido em levedura, a co-imunoprecipitação e a indução de genes marcadores em mutantes bak1 foram realizados e confirmaram o envolvimento da proteína BAK1 na percepção do peptídeo. Plantas transgênicas que superexpressam AtRALF1 apresentam um fenótipo semi-anão, no entanto, quando as mesmas foram cruzadas com o mutante bak1, suas progênies apresentaram um fenótipo similar ao de plantas selvagens. Ainda, quando plantas deste cruzamento foram novamente cruzadas com plantas selvagens, plantas com fenótipo semi-anão foram observadas na prole. Ensaios de ligação usando o peptídeo AtRALF1 marcado com éster de acridínio foram realizados e mostraram que em mutantes bak1, a ligação do AtRALF1 é menor em aproximadamente 30% quando comparada com plantas selvagens. Os dados obtidos mostram que a proteína BAK1 interage fisicamente com o AtRALF1, está envolvida na percepção do peptídeo, é essencial para a inibição do crescimento da raiz primária causada pelo AtRALF1 e é necessária para a indução dos genes responsivos ao AtRALF1. / The plant peptides, which have been characterized in plants since the 90\'s, can be related to defense, reproduction, growth and development of plants. The RALF (Rapid Alkalinization Factor) peptide, ubiquitous in the plant kingdom, is related to the development of plants. In arabidopsis plants, there are 37 genes encoding RALF peptides (AtRALFs). AtRALF1 is the most studied isoform, which negatively regulate cell expansion, inhibiting primary root growth and hypocotyl elongation when it is applied exogenously. Recently, an antagonistic relationship between AtRALF1 and the brassinosteroids (BRs) to control root development had been demonstrated. When the response of mutants related to the BR signaling pathway to AtRALF1 peptide was investigated, it was found that mutants lacking the BRI1-associated receptor kinase1 (bak1) are insensitive to AtRALF1. Experiments using the two-hybrid system in yeast, co-immunoprecipitation, and the induction of marker genes in bak1 mutants were carried out, and confirmed the involvement of the BAK1 protein in the perception of AtRALF1 peptide. Transgenic plants overexpressing AtRALF1 are semi-dwarf. However, when those transgenic plants were crossed with bak1 mutant, their progeny showed a wild-type phenotype. Besides, when plants from this progeny were crossed again with wild-type plants, semi-dwarf phenotype plants were obtained in the offspring. Binding assays using AtRALF1 labeled with acridinium-ester were performed, and showed that in bak1 mutants, the AtRALF1 binding was reduced approximately 30% when compared to wild-type plants. All data indicate that BAK1 protein interacts physically with AtRALF1, it\'s involved with the peptide perception, essential for the primary root growth inhibition caused by AtRALF1, and required to the induction of genes responsive to AtRALF1.