Thèse (M.Sc.) -- Université Laval, 1997. / Bibliogr.: f. 57-73. Publié aussi en version électronique.

Les petites protéines de stress/Small heat shock proteins (sHsps) sont des chaperons moléculaires ATP-indépendants ubiquitaires retrouvées chez les procaryotes et eucaryotes. Elles sont dynamiques structurellement et la majorité d’entre elles possèdent la capacité de former de gros complexes oligomériques. Également, elles protègent les cellules du stress protéotoxique causé par divers facteurs de stress abiotiques en prévenant l’agrégation des protéines dénaturées et en promouvant leur repliement par les chaperons moléculaires ATP dépendants tels que Hsp70/DnaK. Récemment, la présence de gènes de sHsp (HspSP-ShM2) chez des virus marins et plus précisément chez des cyanophages infectant le genre Synechococcus sp. et Prochlorococcus sp ont été caractérisés in silico. Au niveau de sa séquence, la sHsp de 18 kDa de Synechococcus sp. montre un domaine alpha crystallin de 92 acides aminés hautement conservé au sein des sHsps, une région C-terminale contenant le motif CAM canonique de type (L-X-I/L/V) et une région N-terminale relativement courte. Nous avons établi grâce à la chromatographie par exclusion stérique (SEC) et le système de Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC) sa capacité à former des complexes oligomériques de haut poids moléculaires (600 kDa et 200kDa). De plus, nous avons démontré qu’elle prévient l’agrégation de la citrate synthase, la malate dehydrogenase et la luciférase en condition de stress thermique suggérant qu’elle possède une faible spécificité et un large spectre de protéines clientes/substrats. La prévention complète de l’agrégation a été obtenue à différents ratios (sHsp:substrat) selon le substrat, ce qui indique qu’il y aurait possiblement des interactions différentes et uniques avec chacun d’eux. Nous avons ensuite mis en évidence la formation d’hétéro-oligomères stables et solubles entre HspSP-ShM2 et son substrat dans les mêmes conditions, ce qui est en accord avec les caractéristiques des sHsps en général. Quant à elle, la sHsp de la cyanobactérie Synechococcus WH7803 (HspS-WH7803) possède un poids moléculaire de 15 kDa et montre une capacité à former des tétramères (60 kDa) sur essai de SEC par FPLC en présence de Triton™X-100 pour le maintien de sa solubilité. Contrairement à HspS-ShM2, HspS-WH7803 ne démontre aucune activité protectrice sur l’agrégation des substrats mentionnés précédement à différents ratios molaires. Finalement, des analyses par SEC/FPLC suggèrent la formation de complexes hétéro-oligomériques entre HspSP-ShM2 et celle de son hôte, HspS-WH7803 de Synechococcus WH7803. Cette interaction entre les sHsps pourrait soit optimiser ou inhiber l’activité de chaperon moléculaire et la réponse au stress de son hôte dans le but de favoriser le cycle viral. / Small heat shock proteins (sHsps) are ubiquitous ATP-independent molecular chaperones found in prokaryotes and eukaryotes. They are structurally dynamic and most of them have the ability to form large oligomeric complexes and to protect cells from proteotoxic stresses by preventing aggregation of non-native proteins and promoting their refolding via ATP-dependent chaperones such as Hsp70/DnaK. Recently, the presence of a sHsp gene (HspSP-ShM2) in marine viruses has been reported using bioinformatics tools. More precisely, the gene has been found in cyanophages infecting cyanobacteria of the genre Synechococcus sp. and Prochlorococcus sp. The Synechococcus phage sHSP has a MW of 18 kDa and shows the highly conserved core alpha crystalline domain of 92 amino acids and relatively short N- and C-terminal arms, the later containing the classical CAM domain (L-X-I/L/V). We established its oligomeric profile using a size exclusion chromatography (SEC) and Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC) system and demonstrated its ability to form large oligomeric complexes in native conditions (600 kDa and 200kDa). Furthermore, we report its capacity to prevent the aggregation of citrate synthase, malate dehydrogenase and luciferase suggesting that it has a weak specificity and wide range of protein substrates. The complete prevention of aggregation was achieved at different ratios (sHsp:substrate) depending on the substrate indicating that the sHSP may have different and unique interactions with each of its clients. We also showed the formation of a stable and soluble hetero-oligomeric complex of the phage sHSP and its substrates under heat stress, which is in accordance with the characteristics of sHSP in general. The cyanobacteria Synechococcus WH7803 15 kDa sHSP (HspS-WH7803) shows the ability to form tetramers in the presence of Triton™X-100 for the maintenance of its solubility using the SEC/FPLC method. For its capability to prevent the aggregation of different substrates, HspS-WH7803 demonstrates no chaperon like activity in all the assays and molar ratios used. Finally, SEC/FPLC results indicate the possible formation of a hetero-oligomeric complex between the sHSP of the phage and the one from its host Synechococcus WH7803 (HspS-WH7803). This interaction could either optimize the chaperone activity and the stress response of its host or inhibit the host sHSP to facilitate the viral life cycle.

Une coagulopathie aigüe traumatique est constatée chez environ un tiers des patients traumatisés sévères. Ce trouble précoce, endogène et spécifique nécessite l’association d’importantes lésions tissulaires et d’une hémorragie. La phase initiale est caractérisée par l’expression d’un phénotype hémorragique responsable d’une mortalité précoce, la phase tardive par l’expression d’un profil pro-thrombotique responsable d’une mortalité retardée. La physiopathologie de ce phénomène est encore mal comprise. Celle-ci pourrait impliquer une dysrégulation de la voie de la protéine C, une CIVD fibrinolytique, une diminution des stocks en fibrinogène, une altération de la fonction plaquettaire et une agression endothéliale. Plusieurs auteurs ont relevé l’absence de modèle animal pertinent pour vérifier ces hypothèses. Les objectifs de ce travail de thèse ont été la mise au point d’un modèle animal de coagulopathie aigüe traumatique et l’étude de sa physiopathologie. Une première étude a été réalisée, permettant la mise au point d’un modèle murin de coagulopathie traumatique. Celle-ci a mis en évidence un trouble de la coagulation précoce, endogène et spécifique associé à l’expression d’un phénotype hémorragique et répondant à tous les critères clinico-biologiques d’une coagulopathie aigue traumatique. Une deuxième étude basée sur ce modèle a été réalisée afin de mettre en évidence les mécanismes généraux intervenant dans la physiopathologie de la coagulopathie aigüe traumatique. Le rôle protecteur du fibrinogène a été confirmé dans cette étude. Le profil clinicobiologique observé associait une génération de thrombine normale, une discrète thrombopénie et un phénotype hémorragique. Celui-ci infirmait l’hypothèse d’une CIVD mais était compatible avec celle d’une fibrinolyse médiée par une production accrue de protéine C activée. / An acute traumatic coagulopathy is observed in about one-third of severely traumatized patients. This early, endogenous and specific disorder occurs when tissue damages are combined with hemorrhage. The early phase of this condition is characterized by the expression of a bleeding phenotype and a lengthening in prothrombin time.The late phase is characterized by a pro-thrombotic profile leading to multiple organ failure. The physiopathology of this phenomenon is still poorly understood. This could involve a dysregulation of the protein C pathway, fibrinolytic DIC, a decrease in fibrinogen, impairment in platelet function and endothelial damages. Various authors have emphasized the lack of relevant animal model to study this phenomenon.The objective of this work was to develop an animal model of acute traumatic coagulopathy to study its pathophysiology. A first study was performed and led to the development of a murine model of traumatic coagulopathy. This study revealed a hemostasis disorder that meets all the criteria of acute traumatic coagulopathy. Then, a second study based on this model was performed to observe general hemostasis disorders occurring in the context of traumaassociated hemorrhage. This study confirmed the protective role of fibrinogen against ATC. The clinicalbiological profile observed in the case of ATC combining normal thrombin generation, subtle thrombocytopenia and hemorrhagic phenotype observed in the case of ATC invalidated the hypothesis of DIC but was compatible with fibrinolysis mediated by an increase in activated protein C.

Th. doct.--Université d'Orléans, 2002. / Bibliogr. p. 145-156. Résumé en français et en anglais. L'ouvrage porte par erreur : ISSN 0078-3780.

Texte remanié de: Thése de doctorat--Université de Provence Aix-Marseille 1, 2005. / Bibliogr. p. 151-156 Résumé en français et en anglais. ISSN exact de la collection : 0078-3781.

Thèse de doctorat : Génie des procédés : Vandoeuvre-les-Nancy, INPL : 2006. / Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr.

Thèse de doctorat : Mécanique des fluides : Evry-Val d'Essonne : 2008. / Titre provenant de l'écran-titre.

Thèse de doctorat : Mécanique. Biomécanique : Strasbourg 1 : 2006. / Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr. p. 271-277.

Thèse doctorat : Acoustique : Ecully, Ecole centrale de Lyon : 2008. / 136 références.

Thèse doctorat : Acoustique : Ecully, Ecole centrale de Lyon : 2008. / Titre provenant de l'écran-titre. 136 références.