A esquistossomose, doença causada pelo parasito Schistosoma mansoni, é um problema de saúde mundial. A paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica humana, causada pelo fungo Paracoccidioides brasiliensis, e pode coinfectar o hospedeiro portador de S. mansoni. Na confecção por S. mansoni, o sistema imune do hospedeiro pode estar suprimido, o que acarreta uma defesa insuficiente para eliminação de outros microrganismos. Até o momento, existem poucos trabalhos que descrevem a evolução da esquistossomose e da paracoccidioidomicose em casos de coinfecção. Além disto, devido a correntes migratórias, indivíduos de áreas endêmicas para esquistossomose podem se instalar em áreas endêmicas para PCM e vice versa. Considerando estes antecedentes, este trabalho teve como objetivo analisar aspectos histopatológicos e imunológicos do desenvolvimento do granuloma esquistossomótico durante a coinfecção Para isto, camundongos Swiss fêmeas foram separados em 4 grupos para fase aguda e 4 grupos para fase crônica, com 10 animais em cada: controle não infectado - CNI, infectado com S. mansoni - Sm, infectado com P. brasiliensis - Pb, coinfectado - Sm+Pb, ambos em fase crônica, e coinfectados sendo Sm fase crônica e Pb fase aguda - Sm(c)+Pb(a). Os camundongos foram necropsiados após 50 (fase aguda) e 120 dias (fase crônica) para análise quanto ao peso, sobrevida, desenvolvimento do granuloma e produção de citocinas. Em relação ao peso, observou-se que não houve alterações no peso dos camundongo após 50 dias. Já para a fase crônica, foi observado ganho significativo de peso no grupo Pb. Para a sobrevida, em fase aguda, observou-se 10% de óbitos no grupo Sm. Já para fase crônica, 50% de óbitos para o grupo Sm, 60% do grupo Sm+Pb e 50% do grupo Sm(c)+Pb(a) foram observados ao final do experimento. A ocorrência da coinfecção foi evidenciada a partir da visualização de granulomas no fígado e no pulmão, e a presença de fungo no epiplon. A contagem de granulomas no fígado (fase aguda e crônica) e pulmão (fase crônica), não apresentou diferenças significativas. Em relação ao diâmetro dos granulomas no fígado em fase aguda, estes foram significativamente maiores no grupo Sm (0,08±0,05 mm²) quando comparado ao grupo Sm+Pb (0,06±0,05mm²). Na fase crônica, o diâmetro foi significativamente maior quando comparados os grupos Sm+Pb (0,03±0,01mm²) ao Sm(c)+Pb(a) (0,02±0,01mm²). Em relação ao pulmão, houve diferenças significativas elevadas quando comparados os grupos Sm (0,01±0,009mm²) com Sm+Pb (0,03±0,01mm²) e Sm(C)+Pb(A) (0,03±0,02mm²). Foram evidenciadas células mononucleares e polimorfonucleares nos granulomas de fígado e pulmão em todos os grupos estudados, tanto em fase aguda e crônica. Em fase aguda, a contagem de eosinófilos e neutrófilos não obteve diferenças significativas em relação aos tipos celulares, apesar de um número maior de neutrófilos serem observados no grupo Sm+Pb (7,82±5,95). Na fase crônica, verificamos que no grupo Sm houve um predomínio significativo de eosinófilos (17,34±6,71), enquanto nos grupos Sm+Pb e Sm(c)+Pb(a) o predomínio foi de neutrófilos (18,82±8,18 e 12,72±4,44, respectivamente). No pulmão, não houve diferença em relação ao número de eosinófilos presentes nos granulomas, já o número de neutrófilos no grupo Sm(c)+Pb(a) (2,66±2,71) que foi significativamente menor em comparação aos grupos Sm (9,62±7,76) e Sm+Pb (8,06±5,40). Os resultados da análise de citocinas nos diferentes grupos mostram um aumento significativo de IFN-γ nos grupos Sm (8,05±3,52ng/ml) e Pb (10,40±3,549ng/ml) em relação ao CNI (1,14±0,48 ng/ml). A citocina IL-2 apresentou níveis significativamente mais elevados nos grupos Sm (6,71±1,50ng/ml), Pb (10,40±3,54ng/ml) e Sm+Pb (7,32±2,93ng/ml), quando comparados ao grupo CNI (2,01± 0,39ng/ml). Para IL-4, houve diferenças significativas elevadas entre os grupo Sm (10,45±3,67ng/ml) quando comparados ao grupo CNI (0,85±0,15ng/ml). Para IL-5, diferenças significativas foram encontradas nos grupos Sm (3,91±0,61ng/ml), Pb (3,98±1,76 ng/ml) e Sm+Pb (4,28±2,22ng/ml), quando comparados ao CNI (0,67±0,21ng/ml). Em fase crônica, foram observados níveis significativamente elevados de IFN-γ no grupo Sm (10,45± 3,67ng/ml) comparado ao CNI (1,14±0,48ng/ml). Para IL-2, houve diferenças significativas elevadas nos grupos Sm (7,90±3,16ng/ml) e Pb (7,54±1,41ng/ml), quando comparados ao CNI (2,01±0,39ng/ml). Para IL-4 e IL-5, diferenças significativas elevadas foram observadas para o grupo Sm (8,46±3,71ng/ml e 4,47±1,88ng/ml, respectivamente) quando comparados ao CNI (0,85±0,15ng/ml e 0,67± 0,21 ng/ml, respectivamente). Em relação a MIP-2, não foram observados diferenças significativas entre os grupos, tanto para fase aguda e crônica. Sendo assim, os dados sugerem que a coinfecção por P. brasiliensis pode influenciar na composição celular dos granulomas esquistossomóticos e nos níveis de citocinas. / Schistosomiasis, also known as snail fever, a disease caused by the parasite Schistosoma mansoni, is a worldwide health issue. Paracoccidioidomycosis (PCM) is a human systemic mycosis caused by the fungus Paracoccidioides brasiliensis and it may coinfect the bearing host of S. mansoni. In the coinfection by S. mansoni, the host immune system may be suppressed which results in an insufficient defense in order to obliterate other microorganisms. There are few studies so far describing the evolution of schistosomiasis and paracoccidioidomycosis in the case of coinfection. Furthermore, due to migration, people from schistosomiasis endemic areas may settle down in PCM endemic areas and vice versa. Considering the given background, this study had as main goal the analysis of histopathological and immunological aspects of the development of schistosomotic granuloma under the coinfection. Thereunto, Swiss female mice were separated in four groups for acute phase and five groups for chronic phase containing ten animals each: control not infected - CNI, infected with S. mansoni - Sm, infected with P. brasiliensis - Pb, coinfected – Sm+Pb, both in chronic phase, and coinfected Sm in chronic phase and Pb in acute phase – Sm(c)+Pb(a). The mice were necropsied after 50 days (acute phase) and 120 days (chronic phase) for analysis concerning their weight, survival rate, granuloma development and cytokine production. Regarding the weight, it was observed the Pb group had gained significantly weight (26,23±5,36g). Concerning the survival rate, in acute phase, it was observed 10% of deaths in the Sm group; as for the chronic phase, 50% of deceased for Sm group, 60% for Sm+Pb group and 50% for Sm(c)+Pb(a) by the end of the experiment. The coinfection occurrence was demonstrated by granuloma visualization in the liver and lung, and presence of the fungus in the omentum. The granuloma count in the liver (acute and chronic phases) and lung (chronic phase) did not display any meaningful differences. Regarding the diameter of the granulomas in the liver in acute phase, it was meaningfully bigger than Sm group (0,08±0,05 mm²) when compared to Sm+Pb group (0,06±0,05mm²). In the chronic phase, the diameter was quite bigger when compared to Sm+Pb (0,03±0,01mm²) and Sm(c)+Pb(a) (0,02±0,01mm²) groups. Toward the lung , there were high significant differences when compared Sm groups (0.01 ± 0,009mm²) with Sm+Pb (0.03 ± 0,01mm² ) and Sm(C)+Pb(A) (0.03 ± 0,02mm²) .Mononuclear and polymorphnuclear cells of liver and lung granulomas were evidenced in all groups both in acute and chronic phases. In acute phase, the eosinophil and neutrophils counts did not have meaningful distinctions regarding the cell types, although a bigger number of neutrophils were observed in Sm+Pb group (7,82±5,95). In chronic phase, it was verified a distinguished prevalence of eosinophils (17,34±6,71) in Sm group, whilst Sm+Pb and Sm(c)+Pb(a) groups neutrophils prevailed (18,82±8,18 e 12,72±4,44, respectively). In the lung, there were not any differences in regard of eosinophil number in granulomas, while the number of neutrophils in Sm(c)+Pb(a) group (2,66±2,71) was really smaller than Sm (9,62±7,76) and Sm+Pb (8,06±5,40) groups. The results of cytokine analysis from those different groups display a distinguished augmentation of IFN-γ in Sm (8,05±3,52ng/ml) and Pb (10,40±3,549ng/ml) groups regarding the CNI (1,14±0,48 ng/ml), however this increase observed in Sm+Pb group (4,96±1,73ng/ml) wasn’t meaningful at all. The cytokine IL-2 displayed notably higher levels in Sm (6,71±1,50ng/ml), Pb (10,40 3,54±ng/ml) and Sm+Pb groups (7,32±2,93ng/ml) when compared to CNI (2,01± 0,39ng/ml). As for IL-4, there were expressive high differences between Sm (10,45±3,67ng/ml), Pb (3,98±1,76 ng/ml) and Sm+Pb groups (4,28±2,22ng/ml) regarding CNI (0,67±0,21ng/ml). For IL-5, significant differences were found in groups Sm (3.91 ± 0,61ng / ml), Pb (3.98 ± 1.76 ng / ml) and Sm + Pb (4.28 ± 2,22ng / ml) compared to the CNI (0.67 ± 0,21ng / ml). In chronic phase, it was observed denoting high levels of IFN-γ in Sm group (10,45± 3,67ng/ml) when compared to CNI (1,14±0,48ng/ml). Concerning IL-2, there were compelling differences from Sm (7,90±3,16ng/ml) and Pb groups (7,54±1,41ng/ml), in regard of CNI (2,01±0,39ng/ml). As for IL-4 and IL-5, expressively high distinctions were observed in Sm (8,46±3,71ng/ml and 4,47±1,88ng/ml, respectively) concerning CNI (0,85±0,15ng/ml and 0,67± 0,21 ng/ml, respectively). Regarding MIP-2, it was not observed any important differences among the groups as for the acute or chronic phases, nevertheless these display higher levels in acute phase rather than in chronic phase. Thus, the data suggest the coinfection by P. brasiliensis may affect the cellular composition from schistosomotic granulomas and cytokine levels.

A esquistossomose mansoni é uma das principais doenças parasitárias no mundo e é conhecida por ser endêmica em aproximadamente 54 países nos continentes americano e africano. No Brasil o número de pessoas infectadas é estimado em 7 milhões. Em suas diversas formas clínicas, a esquistossomose mansoni assemelha-se a muitas outras doenças; portanto, essa inespecificidade e a variação nos sintomas dificultam o seu diagnóstico apenas pelo exame clínico do paciente. A doença é diagnosticada por métodos parasitológicos de fezes. A técnica de Kato/Katz é o procedimento internacionalmente recomendado pela Organização Mundial da Saúde (OMS) para o diagnóstico do Schistosoma mansoni, porque associa baixo custo à facilidade de execução. Atualmente, estão disponíveis Kits comerciais, a fim de minimizar as dificuldades de operacionalização e melhorar a sensibilidade do diagnóstico parasitológico, principalmente em áreas de baixa endemicidade. Este estudo avaliou comparativamente a efetividade de quatro técnicas parasitológicas de fezes em diagnosticar casos de esquistossomose mansoni. As amostras fecais foram examinadas pelas técnicas Kato/Katz, Sedimentação espontânea e pelos Kits Midi Parasep® e Paratest®. Foi coletada 1 amostra de cada indivíduo e para cada amostra foram preparadas 2 lâminas das quatro metodologias. Um total de 442 exames coproparasitológicos foram realizados em migrantes de áreas endêmicas para a esquistossomose, de três municípios sob jurisdição da Superintendência Regional de Saúde de Alfenas (SRS). A taxa de positividade da esquistossomose mansoni detectada pela técnica Kato/Katz foi de 1,8%. Pela técnica de Sedimentação espontânea e pelo Kit Paratest® foi detectada uma positividade de 0,45%. Pelo Kit Midi Parasep® a positividade foi de 0,23%. A menor efetividade da técnica de sedimentação espontânea e dos Kits Midi Parasep® e Paratest® pode ser comprovada pelo baixo grau de concordância diagnóstica com o exame referência (técnica Kato/Katz). As técnicas Kato/Katz e sedimentação espontânea apresentam os menores custos para realizar o exame de fezes, cerca de R$ 0,82/exame e R$ 0,48/exame, respectivamente. Entretanto, são as que apresentam o maior grau de exposição do analista à amostra biológica. Os Kits Midi Parasep® e Paratest® apresentam o menor grau de exposição à amostra fecal, mas são relativamente mais caros para realização do exame de fezes, cerca de R$ 3,10/exame e R$ 1,65/exame, respectivamente. Com relação as parasitoses intestinais, pelo “Padrão Ouro”, foram encontrados 97 (21,9%) indivíduos parasitados. As taxas de positividade das parasitoses intestinais detectadas pelas técnicas Kato/Katz, sedimentação espontânea, Midi Parasep® e Paratest®, foram respectivamente, 5,2%, 19,5%, 17,6% e 18,3%. Os resultados mostraram que a técnica de Kato/Katz apresentou melhor desempenho dos quatro testes no diagnóstico da esquistossomose mansoni. Assim, a vigilância epidemiológica através do exame censitário de todos os migrantes pela técnica Kato/Katz, deve ser implementada com o propósito de impedir o estabelecimento da transmissão da esquistossomose. / Schistosomiasis mansoni is a major parasitic disease in the world and is known to be endemic in about 54 countries in the American and African continents. In Brazil the number of infected is estimated at 7 million. In different clinical forms, schistosomiasis mansoni resembles many other diseases. So this lack of specificity and symptoms variety hinder its diagnosis only by clinical examination. The disease is diagnosed using stool examinations. The Kato/Katz technique is the procedure recommended by the World Health Organization (WHO) for the diagnosis of Schistosoma mansoni, because it associates low cost and easy execution. Currently, there are commercial Kits available, in order to minimize the operational difficulties and improve the sensitivity of parasitological diagnosis, especially in areas of low endemicity. This study comparatively evaluated the effectivity of four stool parasitological techniques in diagnosing cases of schistosomiasis. Stool samples were examined by the Kato/katz and spontaneous sedimentation techniques, Midi Parasep® and Paratest® kits. One sample was collected from each individual and for each sample were prepared two slides of the four methods. A total of 442 coproparasitological exams were accomplished with migrants from endemic areas for schistosomiasis, of three cities under Health Superintendence Office of Alfenas (HSO) jurisdiction. The positivity rate of Kato/Katz technique for schistosomiasis was 1,8%. The positivity rate schistosomiasis by the spontaneous sedimentation technique and Paratest® was of 0,45%. By Midi Parasep® Kit the positivity rate was of 0,23%. The lower effectivity of spontaneous sedimentation and Midi Parasep® and Paratest® can be demonstrated by low agreement diagnostic with the reference examination (Kato/Katz). Kato/Katz and spontaneous sedimentation techniques showed low cost for the exam stool, about R$ 0,82 per exam and R$ 0,48 per exam, respectively. However, are those with greatest degree of exposure of the expert to biological samples. Midi Parasep® and Paratest® Kits showed the lowest degree of exposure to fecal sample, but are relatively more expensive for perform the fecal exam, about R$ 3,10 per exam and R$ 1,65 per exam, respectively. Regarding intestinal parasites, by the "gold standard" were found 97 (21,9%) individuals parasitized. The positivity rates of intestinal parasitosis detected by the Kato/Katz, spontaneous sedimentation, Midi Parasep® and Paratest®, were respectively, 5,2%, 19,5%, 17,6% e 18,3%. The results showed that the Kato/Katz technique presented best of performance diagnosising of schistosomiasis mansoni. Thus, epidemiological surveillance should implement the Kato/Katz technique in order to prevent the establishment of transmission of schistosomiasis. / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

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Esse cenario reflete as transformações sociais ocorridas nas ultimas décadas, caracterizadas pela urbanização acelerada, comunicação entre os continentes, entre outros fatores que contribuiram para o delineamento do atual perfil epidemiologico das doenças infecciosas e parasitarias em todo mundo. A esquistossomose mansoni é uma parasitose grave causada pelo trematódeo Schistosoma mansoni. A justificativa para novas alternativas terapêuticas está pautada no fato de que, atualmente, o praziquantel (PZQ) é o único medicamento capaz de tratar todas as diferentes formas da esquistossomose. Assim, torna-se relevante a busca por novas moléculas esquistossomicidas e, nesse contexto, pesquisas com compostos sintéticos consistem numa alternativa viável. As imidazolidinas são representadas por um grupo de substâncias heterocíclicas pentagonais possuidoras de diversas atividades biológicas, inclusive atividade esquistossomicida. O primeiro objetivo deste trabalho é a investigação a atividade esquistossomicida de novos derivados tioxo-imidazolidínicos. Diante disso, foram obtidos 24 novos compostos imidazolidinicos e apos a utilização da analise de componentes principais (PCA) para a escolha dos derivados mais (dis)similares 11 derivados foram avaliados em relação às suas atividades biologicas. Dentre os compostos sintetizados o derivado indolico-imidazolidinico, LPSF/PTS-14, apresentou os resultados mais promissores, induzindo 100 % dos vermes à morte, em 24 h numa concentração de 5 g/mL, e uma toxicidade abaixo de 5 g/mL. Tais resultados, superiores aos do PZQ, estimularam o desenvolvimento de um modelo de farmacoforo através do software FLAP, assim como a avaliação do modo de ação através da reação de Adição de Michael, e desenvolvimento de um modelo de previsão de citotoxicidadeJa em relação as infecçoes bacterianas, o aparecimento de superbactérias resistentes volta a chamar a atenção para a necessidade de um uso racional e o desenvolvimento de antibióticos de novas gerações e novas classes, tanto no tratamento de pessoas como na aplicação em animais. Os aminoglicosídeos constituem uma família de susbtâncias, de origem natural ou semisintética, eficazes contra bactérias Gram (+) e Gram (-), como a Pseudomonas aeruginosa. Sendo assim, outro objetivo deste trabalho foi realização da sintese de analogos da Neamina à partir da N-acetil-D-glicosamina e o uso de reações de metatese. Apesar de nenhum dos derivados propostos terem sido sintetizados no tempo habil, importantes avanços foram realizados nas rotas propostas, e intermediarios chaves foram obtidos. Também foi possivel o desenvolvimento de um estudo de avaliação entre a compatibilidade os grupamentos protetores utilizados nos derivados e a ocorrência das reações de metatese. Tais estudos permetiram a proposição de uma rota de sintese compativel com os grupamentos protetores, iniciada no fim deste trabalho, a ser concluida posteriormente. / The epidemiological situation of infectious and parasitic diseases has presented significant changes worldwide. This group of diseases continues to pose challenges to prevention programs, such as the ebola virus epidemic, which is responsible for more than 11,000 deaths in 2015, the emergence of the zika virus in Brazil, the cases of schistosomiasis in the region of Corsica, France, in 2014, not including the exposure of patients to endemic areas in tropical countries. This scenario reflects the social transformations that have occurred in the last decades, characterized by accelerated urbanization, communication between continents, among other factors that contributed to the delineation of the current epidemiological profile of infectious and parasitic diseases worldwide. Schistosomiasis mansoni is a severe parasitosis caused by the Schistosoma mansoni trematode. Currently, praziquantel (PZQ) is the only drug capable of treating all the different forms of schistosomiasis. The imidazolidines are represented by a group of pentagonal heterocyclic substances possessing diverse biological activities, among them the schistosomicidal activity. The first objective of this work is the investigation of the schistosomicidal activity of new thioxoimidazolidine derivatives. In this context, 24 new arylidene-3-(2-chloro, 6-fluoro)-benzyl-imidazolidin-2-thioxo-4-one derivatives of (PTS) were obtained. After principal component analysis (PCA), the most dissimilar derivatives were evaluated biologically. The indolyl-imidazolidinic derivative, LPSF / PTS-14, presented greater results than PZQ, 100% death of worms in 24 h at 5 μg / mL, and a toxicity below 5 μg / mL against BALB splenocytes / C mice. These results, combined with low cytotoxicity, stimulated the development of a pharmacophor model using FLAP software, as well as the evaluation of the mode of action by the Michael Addition reaction, and the development of a prediction model for cytotoxicity. The second objective of this work was the accomplishment of a bibliographic study about the PZQ, making it possible to propose a model relating chemical structure and biological activity. Then, in works still under development, a model of pharmacophores will be proposed, and prediction of activity through chemometric methods made. In relation to bacterial infections, the appearance of superbugs, such as the Escherichia coli strain resistant to all antibiotics available in the clinic in 2016, again calls attention to the development of new antibiotics. Aminoglycosides, such as Neamine, are a family of substances of natural or semi-synthetic origin that are effective against Gram (+) and Gram (-) bacteria. The third objective of this work was the synthesis of analogues of Neamine from N- Acetyl-D-glucosamine and the use of metathesis reactions. Although none of the proposed derivatives were synthesized in the allotted time, important advances were made in the proposed routes, and key intermediaries were obtained. It was also possible to develop an evaluation study between the compatibility of protective groups used in derivatives and the occurrence of metathesis reactions. These studies led to the proposition of a synthetic route compatible with the protective groups, initiated at the end of this work, and to be concluded in the future.