Heat exposure causes several physiological and metabolic alterations. Although lipids are vital in sustaining energy production, heat-induced alterations in lipid metabolism have not been clearly established. CHAPTER 1 reviews the known metabolic alterations resulting from heat stress, with a specific focus on changes in whole-body lipid utilization and plasma lipids. CHAPTER 1also outlines the physiological changes caused by heat stress, and their role in reducing exercise performance. The study presented in CHAPTER 2 has shown that, compared to thermoneutral conditions, NEFA concentrations were 37% higher following passive heating and 34% higher following exercise in the heat, without significant changes in whole-body lipid utilization. In addition, the level of hyperthermia attained during passive pre-heating and exercise in the heat resulted in a 13% decrease in total external work and a significantly higher rate of perceived exertion. CHAPTER 3 summarizes the study results and presents the limitations and applications of the study.

Reduced bioavailability in some formulations of phytosterols accounts for the variable results observed in LDL- C- lowering efficacy among trials. This study examined the effects of a water-dispersible formulation of free phytosterols (WD-PS) versus phytosterol esters (PS-esters) on plasma lipid and fat soluble vitamins concentrations in hypercholesterolemic individuals. Using a double-blind, randomized, crossover study, 47 hypercholesterolemics were provided for 4 wk: WD-PS-enriched yogurt (2g/d), PS-esters-enriched yogurt (2g/d), or yogurt alone (placebo), in a random order. Each study phase was separated by 4 wk washout intervals. Supplementation of WD-PS or PS-esters similarly decreased serum TC (7.7% and 6.3%, respectively) and LDL-C levels (11.7% and 11.6%, respectively, p<0.001). The ratio of TC/ HDL-C decreased for WD-PS (10.6%, p<0.05) but not for PS-esters. Moreover, WD-PS reduced serum TG (13.9%, p<0.05) as compared to PS-esters (0.6%). The results of the current study confirm the importance of the formulation of phytosterols in their bioavailability and efficacy.

Heat exposure causes several physiological and metabolic alterations. Although lipids are vital in sustaining energy production, heat-induced alterations in lipid metabolism have not been clearly established. CHAPTER 1 reviews the known metabolic alterations resulting from heat stress, with a specific focus on changes in whole-body lipid utilization and plasma lipids. CHAPTER 1also outlines the physiological changes caused by heat stress, and their role in reducing exercise performance. The study presented in CHAPTER 2 has shown that, compared to thermoneutral conditions, NEFA concentrations were 37% higher following passive heating and 34% higher following exercise in the heat, without significant changes in whole-body lipid utilization. In addition, the level of hyperthermia attained during passive pre-heating and exercise in the heat resulted in a 13% decrease in total external work and a significantly higher rate of perceived exertion. CHAPTER 3 summarizes the study results and presents the limitations and applications of the study.

Reduced bioavailability in some formulations of phytosterols accounts for the variable results observed in LDL- C- lowering efficacy among trials. This study examined the effects of a water-dispersible formulation of free phytosterols (WD-PS) versus phytosterol esters (PS-esters) on plasma lipid and fat soluble vitamins concentrations in hypercholesterolemic individuals. Using a double-blind, randomized, crossover study, 47 hypercholesterolemics were provided for 4 wk: WD-PS-enriched yogurt (2g/d), PS-esters-enriched yogurt (2g/d), or yogurt alone (placebo), in a random order. Each study phase was separated by 4 wk washout intervals. Supplementation of WD-PS or PS-esters similarly decreased serum TC (7.7% and 6.3%, respectively) and LDL-C levels (11.7% and 11.6%, respectively, p<0.001). The ratio of TC/ HDL-C decreased for WD-PS (10.6%, p<0.05) but not for PS-esters. Moreover, WD-PS reduced serum TG (13.9%, p<0.05) as compared to PS-esters (0.6%). The results of the current study confirm the importance of the formulation of phytosterols in their bioavailability and efficacy.

Heat exposure causes several physiological and metabolic alterations. Although lipids are vital in sustaining energy production, heat-induced alterations in lipid metabolism have not been clearly established. CHAPTER 1 reviews the known metabolic alterations resulting from heat stress, with a specific focus on changes in whole-body lipid utilization and plasma lipids. CHAPTER 1also outlines the physiological changes caused by heat stress, and their role in reducing exercise performance. The study presented in CHAPTER 2 has shown that, compared to thermoneutral conditions, NEFA concentrations were 37% higher following passive heating and 34% higher following exercise in the heat, without significant changes in whole-body lipid utilization. In addition, the level of hyperthermia attained during passive pre-heating and exercise in the heat resulted in a 13% decrease in total external work and a significantly higher rate of perceived exertion. CHAPTER 3 summarizes the study results and presents the limitations and applications of the study.

The determination of non-esterified fatty acids (NEFA) in plasma is possible by many routine biochemical methods. For more detailed metabolic studies it is required to analyse the fatty acid (FA) profile. The NEFA profile determination is usually performed by the capillary gas chromatography (GC), but the sample preparation is not uniform. NEFA may be isolated by the extraction process or by the preparative thin-layer chromatography (TLC). The aim of this study was to compare these two separation procedures. The samples of pooled plasma from volunteer donors were analyzed by capillary GC after previous separation procedure by the TLC and the liquid-liquid extraction. The results were compared by the t-test for both the absolute concentration of individual FA provided by the internal standard (margaric acid) method and the relative abundance (Rel%). The reproducibility of the results was significantly better for the liquid-liquid extraction method than the TLC. The relative standard deviations (RSD) of the FA groups (unsaturated, monosaturated and polysaturated) were from 4.3 to 11.3 % vs. 8.6 to 33.8 % for the relative abundance and from 16.5 to 25.5% vs. 15.4 to 47.4% for the absolute concentration. For each FA, which were represented by more than 0.1 Rel %, RSD ranged from 4.5 to 47.8% vs. 9.5 to...

Este estudo enfocou a mediação por íons metálicos divalentes da solvólise da ligação éster formada entre peptídeos e resinas, método desenvolvido por nós para a preparação de peptídeos C-modificados. Os objetivos foram: i) adaptá-lo para a estratégia Fmoc de síntese, ii) buscar resinas adequadas para tal propósito, iii) verificar qual íon metálico é mais eficiente para mediar tal reação; iv) investigar o possível mecanismo pelo qual os íons metálicos mediam as reações estudadas. Para isso, foram testadas as resinas derivadas do ácido p-hidroximetilbenzóico (HMBA-AM, HMBA-PEGA, HMBA-TG) e do álcool p-benziloxibenzílico (Wang), os mediadores metálicos Ca2+ e Zn2+, condições reacionais determinadas em estudos anteriores do nosso grupo de pesquisa (50% nucleófilo/ DMF) e os solventes nucleófilos metanol, etanol, propan-1-ol, propan-2-ol, butan-1-ol, álcool benzílico, butilamina e hexilamina. O desligamento de aminoácidos e peptídeos esterificados das resinas ocorreu com altos rendimentos (72 - 98%). A resina HMBA-AM e o íon Zn2+ demonstraram ser a combinação mais eficiente. Análises de espectroscopia de infravermelho na presença e ausência do íon metálico indicaram um mecanismo de reação no qual a coordenação do íon Zn2+ com o álcool facilita a formação do íon alcóxido, o qual é um nucleófilo melhor que o álcool e com capacidade de atacar o carbono da carbonila da ligação éster entre o peptídeo e a resina. / The present study was focused on divalent metal ions-mediated solvolysis of the ester linkage formed between peptides and resins, a method developed by us for the preparation of C-modified peptides. The aims were: i) to adapt it for the Fmoc synthesis strategy; ii) to search resins suitable for such purpose; iii) to determine which divalent metal ion is the most efficient reaction mediator; iv) to investigate the mechanism by which the metal ion mediates the solvolysis reactions studied. Therefore, we employed the resins p-hydroxymethylbenzoic acid (HMBA-AM, HMBA-PEGA, HMBA-TG) and p-benzyloxybenzyl (Wang) alcohol, the metal ions Ca2+ and Zn2+, the optimized solvolysis conditions found in our previous studies (50% nucleophile/DMF) and the nucleophilic solvents methanol, ethanol, propan-1-ol, propan-2-ol, butan-1-ol, benzyl alcohol, butylamine and cyclohexylamine. Detachment of esterified amino acids or peptides from resins gave high yields (72-98%). HMBA-AM resin and Zn2+ ion showed to be the most effective combination of resin and metal ion. Infrared spectroscopy analysis of the peptide-resins in absence and presence of such metal ion suggested a mechanism of reaction where the coordination of Zn2+ ion with the alcohol promotes its deprotonation to give the alkoxide ion, which is a better nucleophile and can attack the carbonyl carbon of the ester linkage formed between the amino acid and the resin.

Introduction et objectifs La microchirurgie des pathologies cordales bénignes est une chirurgie fonctionnelle dont le but est daméliorer les caractéristiques mécaniques du vibrateur laryngé. Une connaissance approfondie de la structure cordale normale, de ses altérations pathologiques et des implications bio-mécaniques de la structure tissulaire, est indispensable à la réalisation dune microchirurgie cordale de qualité. Cest grâce aux connaissances de plus en plus approfondies de la structure cordale normale et surtout de son tissu conjonctif, la lamina propria, que la microchirurgie cordale a évolué dune chirurgie de résection pure et simple à une chirurgie fonctionnelle. Cest la partie la plus superficielle de la lamina propria, lespace de Reinke, qui joue le rôle le plus important dans la production du son. Cest aussi lespace de Reinke qui est occupé, détruit ou remanié en cas de pathologie cordale bénigne. La microchirurgie vise à le libérer du processus pathologique. Cest en augmentant la souplesse tissulaire et la fermeture glottique en phonation que le micro-chirurgien espère améliorer les caractéristiques du son laryngé émis. Loriginalité de ce travail est de tenter, non seulement de libérer lespace vibrant de la lésion cordale, mais aussi de modifier les processus cicatriciels post-opératoires par lutilisation dun implant résorbable dacide hyaluronique estérifié. Les objectifs de ce travail sont : - de contribuer à la connaissance des résultats fonctionnels laryngés et vocaux que lon peut attendre dune microchirurgie cordale - dévaluer limpact fonctionnel, sur ces résultats, de lutilisation dun implant résorbable dacide hyaluronique estérifié, en fin dintervention chirurgicale. Caractéristiques méthodologiques Ce travail est une étude clinique, prospective et comparative. Lutilisation dun implant résorbable dacide hyaluronique estérifié en fin dintervention microchirurgicale est une technique originale développée depuis février 2003 et que nous continuons à pratiquer. Les arguments qui ont conduit à implanter de lacide hyaluronique estérifié au sein de lespace de Reinke de certaines cordes opérées, sont été exposés. Le résultat fonctionnel laryngé et vocal obtenu chez 33 patients opérés de différentes lésions cordales bénignes et traités par implantation dacide hyaluronique estérifié dans la plaie microchirurgicale en fin dintervention (groupe implanté), est comparé à celui de 50 patients également opérés de lésions cordales bénignes mais qui ne bénéficient pas dune implantation dacide hyaluronique estérifié (groupe non-implanté). Les patients ont été opérés entre février 2003 et décembre 2006. Deux études statistiques distinctes ont été pratiquées : 1) une analyse de variance comparant les données préopératoires aux données postopératoires immédiates 2) Les observations différées (en dehors de la période post-opératoire immédiate) sont analysées par une étude statistique corrélationnelle. Résultats La microchirurgie cordale des lésions bénignes savère être une chirurgie fonctionnelle efficace : elle améliore rapidement, dès le premier examen post-opératoire, la qualité vocale et le rendement phonatoire des patients opérés, et ce dans les deux groupes. Nos observations vidéo-stroboscopiques postopératoires précoces plaident en faveur de caractéristiques visco-élastiques favorables de limplant dacide hyaluronique estérifié. Si ce dernier sétait avéré trop visqueux ou trop rigide, nous aurions observé une absence dondulation muqueuse ou une détérioration de celle-ci lors du premier contrôle postopératoire. Mais une des originalités de notre travail est de réaliser un suivi clinique à long terme de lévolution vocale et laryngée de nos patients. Celle-ci est analysée par une étude statistique corrélationnelle non paramétrique. Un comportement très différent est observé: le groupe de patients implantés continue daméliorer 10 variables sur les 20 variables évaluées et quantifiées, alors que le groupe non-implanté naméliore significativement quune seule variable. Autrement dit, le groupe implanté manifeste une évolution significative et favorable au fil du temps, bien au-delà de la période post-opératoire immédiate. Le groupe contrôle, quant à lui, ne témoigne daucune évolution des paramètres vocaux et laryngés quantifiés lors de ce suivi à long terme. Lexplication de cette évolution différente pourrait être une atteinte plus sévère du groupe implanté, et donc une amélioration plus lente des paramètres vocaux et laryngés. Cela pourrait expliquer partiellement lévolution de G, R, S, I et des caractéristiques stroboscopiques droites qui étaient moins bonnes au sein du groupe implanté lors de lexamen pré-opératoire. Mais cette vision nous paraît insuffisante et réductrice : certaines variables étaient altérées de manière équivalente dans les deux groupes lors de lexamen préopératoire et névoluent favorablement quau sein du groupe implanté. Mais surtout, les deux groupes évoluent de la même manière lors du premier examen post-opératoire (analyse de variance des résultats post-opératoires immédiats, cf plus haut). Le groupe contrôle nest certes pas « normalisé » après la microchirurgie et sil ne sagissait que dune évolution retardée, elle devrait également sobserver dans le groupe contrôle. On peut donc raisonnablement envisager une action favorable de lacide hyaluronique estérifié sur le processus de cicatrisation intratissulaire : une lente amélioration de la souplesse de la couverture cordale se fait jour, grâce à une reconstitution au moins partielle dune matrice extracellulaire par des fibroblastes dont le phénotype a été modifié par la présence dun taux élevé dacide hyaluronique au sein de la plaie microchirurgicale. Nous pourrions donc expliquer lévolution particulière de notre groupe implanté par un véritable processus régénératif au sein de lespace de Reinke. Ce processus ne peut être que lent, connaissant le caractère pauci-cellulaire de cette couche tissulaire, et donc nest pas perceptible lors du premier contrôle post-opératoire : à ce moment, les deux groupes évoluent de manière identique. Conclusions Loriginalité de notre travail réside dans lutilisation dun dérivé dacide hyaluronique afin de moduler le processus de cicatrisation post-opératoire : cest la première fois que ce type de technique est mis en oeuvre, les travaux précédemment publiés par dautres auteurs ne portant que sur des études in vitro ou sur modèles animaux. Notre travail constitue dès lors un premier pas vers une microchirurgie cordale non pas seulement fonctionnelle, mais aussi régénérative. En effet, nous nous sommes appuyés sur linfluence bénéfique que peut exercer la composition de la matrice extracellulaire sur le fonctionnement cellulaire cordal. Les résultats obtenus sont très intéressants puisquils montrent une amélioration post-opératoire, non seulement précoce mais aussi retardée, chez des patients implantés dont la souplesse cordale était, en phase pré-opératoire, sévèrement altérée. Lamélioration continue observée, au fil dune longue période de temps, chez les seuls patients implantés, est à nos yeux le résultat le plus surprenant et le plus enthousiasmant. Cette observation constitue un argument important en faveur dun processus de cicatrisation régénératif dans lespace de Reinke traité par notre technique originale dimplantation dacide hyaluronique estérifié. Notre travail nous a permis dappréhender la complexité de la structure et de la physiologie tissulaire cordale. Il soulève aussi de nombreuses questions qui dans lavenir, doivent faire lobjet de projets de recherches fondamentales : quels sont les mécanismes de lhoméostasie de la composition de la matrice extracellulaire du tissu cordal sain ? quelles sont les dérégulations à lorigine du développement des pathologies cordales bénignes ? quelle est linfluence des contraintes mécaniques sur la composition matricielle cordale ? quelle est linfluence du bagage génétique sur le développement des lésions bénignes ? quels sont les processus de cicatrisation du tissu cordal humain ? De la même manière que par le passé, ce sont les connaissances approfondies de la structure laminaire cordale qui ont modifié le geste microchirurgical, ce sont les réponses à ces questions qui permetteront certainement à la microchirurgie cordale dévoluer vers une chirurgie de plus en plus régénérative.

Este estudo enfocou a mediação por íons metálicos divalentes da solvólise da ligação éster formada entre peptídeos e resinas, método desenvolvido por nós para a preparação de peptídeos C-modificados. Os objetivos foram: i) adaptá-lo para a estratégia Fmoc de síntese, ii) buscar resinas adequadas para tal propósito, iii) verificar qual íon metálico é mais eficiente para mediar tal reação; iv) investigar o possível mecanismo pelo qual os íons metálicos mediam as reações estudadas. Para isso, foram testadas as resinas derivadas do ácido p-hidroximetilbenzóico (HMBA-AM, HMBA-PEGA, HMBA-TG) e do álcool p-benziloxibenzílico (Wang), os mediadores metálicos Ca2+ e Zn2+, condições reacionais determinadas em estudos anteriores do nosso grupo de pesquisa (50% nucleófilo/ DMF) e os solventes nucleófilos metanol, etanol, propan-1-ol, propan-2-ol, butan-1-ol, álcool benzílico, butilamina e hexilamina. O desligamento de aminoácidos e peptídeos esterificados das resinas ocorreu com altos rendimentos (72 - 98%). A resina HMBA-AM e o íon Zn2+ demonstraram ser a combinação mais eficiente. Análises de espectroscopia de infravermelho na presença e ausência do íon metálico indicaram um mecanismo de reação no qual a coordenação do íon Zn2+ com o álcool facilita a formação do íon alcóxido, o qual é um nucleófilo melhor que o álcool e com capacidade de atacar o carbono da carbonila da ligação éster entre o peptídeo e a resina. / The present study was focused on divalent metal ions-mediated solvolysis of the ester linkage formed between peptides and resins, a method developed by us for the preparation of C-modified peptides. The aims were: i) to adapt it for the Fmoc synthesis strategy; ii) to search resins suitable for such purpose; iii) to determine which divalent metal ion is the most efficient reaction mediator; iv) to investigate the mechanism by which the metal ion mediates the solvolysis reactions studied. Therefore, we employed the resins p-hydroxymethylbenzoic acid (HMBA-AM, HMBA-PEGA, HMBA-TG) and p-benzyloxybenzyl (Wang) alcohol, the metal ions Ca2+ and Zn2+, the optimized solvolysis conditions found in our previous studies (50% nucleophile/DMF) and the nucleophilic solvents methanol, ethanol, propan-1-ol, propan-2-ol, butan-1-ol, benzyl alcohol, butylamine and cyclohexylamine. Detachment of esterified amino acids or peptides from resins gave high yields (72-98%). HMBA-AM resin and Zn2+ ion showed to be the most effective combination of resin and metal ion. Infrared spectroscopy analysis of the peptide-resins in absence and presence of such metal ion suggested a mechanism of reaction where the coordination of Zn2+ ion with the alcohol promotes its deprotonation to give the alkoxide ion, which is a better nucleophile and can attack the carbonyl carbon of the ester linkage formed between the amino acid and the resin.

Le récepteur CD36 est impliqué dans le transport des acides gras libres non estérifiés (AGNE) au niveau des tissus cardiaque et périphériques. Les dommages tissulaires et la dysfonction cardiaque observés après une ischémie-reperfusion (I/R) du myocarde sont en partie liés à l’internalisation et au métabolisme oxydatif accrus des AGNE dont la concentration sanguine augmente transitoirement après un infarctus du myocarde, contrairement à ce qui est observé chez des souris déficientes en CD36. Nous avons émis l’hypothèse selon laquelle le EP 80317, un ligand synthétique du récepteur CD36, exercerait un effet cardioprotecteur contre les dommages induits par une ischémie transitoire du myocarde. Nos objectifs étaient 1) de vérifier l’effet cardioprotecteur du EP 80317 et 2) de définir son mécanisme, plus précisément de documenter l’effet du traitement sur le métabolisme lipidique. À cette fin, des souris de type sauvage ont été traitées par le EP 80317 (289 nmol/kg) par voie sous-cutanée pendant 14 jours avant d’être soumises à 30 minutes d’ischémie suivant la ligature de l’artère coronaire gauche descendante et de sa reperfusion pendant une période de 6 ou 48 heures. Le cœur et les tissus périphériques (foie, muscle squelettique et dépôts adipeux) ont été prélevés pour déterminer le profil de certains gènes impliqués dans la régulation du métabolisme lipidique. Nos travaux ont montré que l’effet cardioprotecteur d’un traitement préventif par le EP 80317 est associé à une augmentation transitoire du stockage des triglycérides et d’une réduction des AGNE circulants. / The CD36 receptor is involved in the transport of non-esterified fatty acids (NEFA) in cardiac and peripheral tissues. Tissue injury and cardiac dysfunction are in part due to acute internalization and oxidative metabolism of NEFA which concentration rises transiently in the blood following myocardial infarction, in opposition to what is observed in CD36-deficient mice. We hypothesized that EP 80317, a synthetic ligand of the CD36 receptor, provides cardioprotective effect against injuries induced by transient myocardial ischemia. Our objectives were 1) to verify the cardioprotective effect of EP 80317 and 2) to define its mechanism, more precisely to investigate the mechanisms of the treatment on lipid metabolism. For this purpose, wild-type mice were treated with EP 80317 (289 nmol/kg) subcutaneously for 14 days before being submitted to 30 minutes of ischemia following left anterior descending coronary artery ligature and reperfusion for a period of 6 or 48 hours. Heart and peripheral tissues (liver, skeletal muscle and adipose tissue) were harvested to determine the profile of selected genes involved in the regulation of lipid metabolism. Our work has shown that the cardioprotective effect of a pretreatment with EP 80317 is associated with a transient increase of triglycerides storage and reduced circulating NEFA.