Resumo não disponível.

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Orientador: Osmir Batista de Oliveira Junior / Banca: Alessandra Nara de Souza Rastelli / Banca: Rodrigo de Castro Albuquerque / Resumo: O presente estudo avaliou a suscetibilidade geral de patógenos da flora salivar à terapia fotodinâmica (TFD) após a sensibilização com curcumina e exposição ao LED (Light Emitting Diode) de 450 nm (± 10) para evitar contaminação direta e cruzada nos consultórios odontológicos. Para isso, uma amostra de 10 ml de saliva não estimulada foi coletada a partir de um voluntário para a contagem de bactérias após a fase experimental, e os resultados foram analisados. Quatorze diferentes grupos foram avaliados: G1) L-FS (1,5g/l) + por 1min; G2) L-FS (1,5g/l) + por 5 min; G3) L-FS (3,0g/l) + por 1 min; G4) L-FS (3,0g/l) + por 5min; G5) L+ FS-por 1 min; G6) L+ FS-por 5 min; G7) L+ FS (1,5g/l) + por 1 min; G8) L+ FS (1,5g/l) + por 5 min; G9) L+ FS (3,0g/l)+por 1 min ; G10 ) L+ FS(3,0g/l)+ por 5 min; G11) Clorexidina 0,12% por 1 min; G12) Clorexidina 0,12% por 5 min; G13) Salina por 1 min; G14) Salina por 5 min. Salina foi o grupo controle negativo e clorexidina, o controle positivo. Após cada teste efetuadoforam realizadas diluições seriadas e as amostras resultantes foram semeadas em placas de ágar sangue para depois serem levadas a estufa em condições de microaerofilia onde houve o crescimento microbiológico. Um pesquisador treinado e calibrado determinouo número de unidades formadoras de colônia (UFC) por cálculo matemático. A análise estatística (ANOVA e TUKEY HSD) foi realizada para analisar se houve ou não diferença estatística significante entre os grupos, e de acordo com os resultados, a TFD para redução quantitativa dos patógenos encontrados na cavidade oral é eficaz, no entanto a clorexidina continua sendo considerada o padrão ouro quando se trata de descontaminação oral geral e consequente diminuição do risco de transmissão de doenças infecto- contagiosas seja de forma direta ou indireta / Abstract: The present study assessed the general susceptibility of pathogens salivary flora to the photodynamic therapy (PDT) after sensitization with curcumin and exposure to the LED (Light Emitting Diode) of 450 nm (± 10) to avoid direct and cross contamination in dental offices. For this, a sample of 10 ml of unstimulated saliva was collected from a volunteer for the bacterial count after the experimental phase and the results were recorded. Fourteen different groups were evaluated: G1) L-PS (1,5g/l) + for 1min ; G2 ) L-PS (1,5g/l)+ for 5 min ; G3) L-PS( 3,0g/l)+ for 1 min ; G4) L-PS( 3,0g/l)+ for 5min ; G5) L+ PS-for 1 min ; G6) L+ PS-for 5 min ; G7)L+ PS (1,5g/l)+ for 1 min ; G8) L+ PS (1,5g/l)+ for 5 min; G9) L+ PS (3,0g/l)+ for 1 min ; G10 ) L+ PS(3,0g/l)+ for 5 min; G11) Chlorhexidine 0,12% for 1 min; G12) Chlorhexidine 0,12% for 5 min; G13) Saline for 1 min; G14) Saline for 5 min. Saline was thenegative control group and chlorhexidine, the positive control. After each test, serial dilutions were performed and the resulting samples were plated on blood agar plates. Thereafter, the plates were placed in the stove under microaerophilic conditionsfor microbial growth. A trained and calibrated researcher determined the number of colony forming units (CFU) by mathematical calculation. Statistical analysis (ANOVA and TUKEY HSD) was realized to examine if there was or there was not a statistically significant difference between groups, and according to the results, PDT to quantitative reduction of pathogens found in the oral cavity is effective, however, chlorhexidine still considered the gold standard to oral decontamination and subsequent reduction of the overall risk of transmission of infectious diseases either directly or indirectly / Mestre

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-05-08Bitstream added on 2014-08-13T18:01:09Z : No. of bitstreams: 1 000737321_20150508.pdf: 458900 bytes, checksum: 37734b9c708dcabe02230f14146dcf69 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-05-11T13:13:20Z: 000737321_20150508.pdf,Bitstream added on 2015-05-11T13:13:54Z : No. of bitstreams: 1 000737321.pdf: 921005 bytes, checksum: a5bf7910d36287fe4d0b08c8e8ad1e65 (MD5) / A Terapia Fotodinâmica (TFD) tem sido proposta como terapia auxiliar no tratamento da periodontite, onde um corante não-tóxico (fotossensibilizador, FS) reage com o oxigênio dos tecidos e que, na presença de luz, é capaz de eliminar ou reduzir os microorganismos presentes nos sítios da doença. A hipericina (HY) é um pigmento fotoativo natural muito potente. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da TFD com HY no tratamento da doença periodontal in vivo. Para isso, 84 ratos foram submetidos à indução de peridontite por inserção de ligaduras em torno dos 2os molares superiores. Após 7 dias, as ligaduras foram removidas e os animais foram randomicamente distribuídos em 4 grupos e submetidos aos seguintes procedimentos: Grupo I - Controle, doença sem tratamento; Grupo II - RAR, raspagem e alisamento radicular manual com curetas periodontais; Grupo III - TFD, emprego de HY (10μg/ml) por 5 minutos na bolsa periodontal seguido de irradiação com LED 630nm por 4 minutos/dente (35,15J/cm2); Grupo IV- RAR+TFD, associação dos tratamentos dos grupos II e III. Sete, 15 e 30 dias após os procedimentos, os animais foram sacrificados. Avaliação tridimensional por microCT e análise histométrica revelou diferenças significativas entre o grupo controle e os demais grupos aos 7 e 15 dias pós-tratamento. Análise imunohistoquímica por TRAP e RANKL apresentou marcação semelhante nos grupoI, III e IV. Dentre os limites deste estudo, podemos concluir que a TFD com hipericina foi capaz de reduzir a progressão da periodontite induzida in vivo de modo similar ao tratamento mecânico. / Photodynamic therapy (PDT) has been proposed as an auxiliary therapy on the treatment of peridontitis. This technique uses a non-toxic dye (photosensitizer, PS) that reacts with oxygen of the tissues in the presence of light, and is able to eliminate or reduce microorganisms on the sites of the disease. Hypericin (HY) is a very potent photoactive natural pigment. The aim of this study was evaluate the effects of HY-PDT in the treatment of periodontal disease induced in vivo. Thus, 84 rats were submitted to peridontitis induction by placing ligatures around superior 2nd molars. After 7 days, ligatures were removed and animals were randomically distributed in 4 groups and submitted to the following procedures: Group I – Control, disease without treatment; Group II – SRP, scaling and root planning with manual periodontal curettes; Group III – PDT, application of HY (10μg/ml) for 5 minutes in the periodontal pocket followed by 4 minutes of 630 nm irradiation per tooth (35,15J/cm2); Group IV - SRP+PDT, association of the treatments of groups II and III. Seven, 15 and 30 days post-treatment the animals were sacrificed. MicroCT tridimensional evaluation and histometric analysis showed statistical differences between Control and treatments groups at 7 and 15-days post treatment. TRAP and RANKL immunohistochemistry analysis showed similar marking on groups I, III and IV. Therefore, HY-PDT was able to reduce periodontitis progression in vivo in a similar way to mechanical treatment.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-28Bitstream added on 2014-06-13T18:35:07Z : No. of bitstreams: 1 alves_f_me_arafo.pdf: 1240558 bytes, checksum: 9e6bcc073e00b4586c16678cef950d5e (MD5) / Este estudo avaliou os efeitos da Terapia Fotodinâmica (PDT), mediada pelo Photodithazine® (PDZ) e luz LED, sobre Candida albicans resistente a fluconazol em um modelo de candidose oral induzida. Para isso, camundongos fêmeas de 6 semanas foram imunussuprimidos e inoculados com C. albicans (107 células/mL). Em seguida, aplicou-se 100 mg/L de PDZ (diluído em salina ou hidrogel) na cavidade bucal por 20 min e o dorso lingual foi iluminado (37,5 J/cm² dose de luz). Animais adicionais foram tratados somente com LED ou PDZ. O grupo controle positivo não recebeu nenhum tratamento e, adicionalmente, animais saudáveis receberam tratamento com PDT (n=5). Em seguida, foi feita a recuperação do micro-organismo da língua dos animais. O número de colônias viáveis foi quantificado e os valores de UFC/mL foram determinados. Os animais foram sacrificados e as línguas foram removidas cirurgicamente para análise histológica. Duas colônias de cada animal foram isoladas da placa de cultura para avaliação dos fatores de virulência: adesão e formação de biofilme em superfície abiótica, formas filamentares de crescimento e produção de exoenzimas. Os dados foram analizados por ANOVA (P < 0,05). Os resultados demonstraram que a PDT resultou em redução significativa de C. albicans resistente a fluconazol (1,91 e 1,96 log10) em relação ao grupo controle positivo. Somente a aplicação da luz ou PDZ não reduziu a viabilidade celular. A PDT não ocasionou efeitos adversos no tecido lingual dos animais e reduziu apenas a produção de fosfolipase. A PDT foi efetiva na inativação da C. albicans resistente a fluconazol, sem causar efeitos adversos no tecido lingual. / This study evaluated the effects of Photodynamic Therapy (PDT), mediated by Photodithazine® (PDZ) and LED light, on fluconazole-resistant Candida albicans in a murine model of oral candidosis. For this, six-week-old female mice were immunosuppressed and inoculated with C. albicans (107 células/mL). Then, 100 mg/L of PDZ (diluted in saline or hydrogel) was applied on the oral cavity for 20 min and the dorsum of the tongue was illuminated (37.5 J/cm2 of fluence). The use of PDZ or light only was also investigated. Additionally, healthy animals received treatment with PDT. Positive control animals did not receive any treatment and negative control animals were not inoculated (n=5). After treatment the dorsum of the tongue was swabbed to recover C. albicans. The yeast colony counts were quantified and the number of CFU/mL was determined. The animals were killed and the tongues were surgically removed for histological analysis. Two yeast colony of each group were isolated from the culture plate for the evaluation of virulence factors: adhesion and biofilm formation in abiotic surface, filamentous forms of growth and production of exoenzymes. Data were analyzed by ANOVA (P < 0.05). PDT resulted in a significant reduction of fluconazole-resistant C. albicans (1.91 e 1.96 log10). The application of PDZ or LED only did not reduce the cell viability. PDT did not cause adverse effects in the local mucosa and it was able to reduce only phospholipase production. PDT was effective in the inactivation of fluconazole-resistant C. albicans without harming the tongue tissue.

FROTA, Bruna Marjorie Dias. Terapia fotodinâmica antimicrobiana aplicada em espécimes de resina acrílica confeccionados em diferentes laboratórios de prótese dentária. 2012. 71 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-04-29T12:52:27Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_bmdfrota.pdf: 679182 bytes, checksum: ff032f2b0d04e061fcfa2e3981f63bf8 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-04-29T16:29:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_bmdfrota.pdf: 679182 bytes, checksum: ff032f2b0d04e061fcfa2e3981f63bf8 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-29T16:29:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_bmdfrota.pdf: 679182 bytes, checksum: ff032f2b0d04e061fcfa2e3981f63bf8 (MD5) Previous issue date: 2012 / This study evaluated the effect of photodynamic therapy on acrylic resin specimens made in different dental prosthetic laboratories. Six laboratories (L), registered in the Regional Council of Dentistry of Ceará, were randomly selected and were not identified to the operator of the experiments. The therapy used erythrosine 22 µM as photosensitizer (P) associated with irradiation with LED of 520 nm, at 38 J/cm2 (L). Fifty specimens of each laboratory were divided into 5 groups (n: 10): sterile positive control in Ethylene Oxide (EO); negative control (P-L-), untreated; control (P+L-) only stained with erythrosine; control (P-L+) only irradiated with 520 nm LED; experimental (P+L+). The specimens were placed in individual tubes containing saline solution and the obtained suspension was diluted and plated on Blood Agar, Sabouraud Dextrose and CHROMagar Orientation®, for incubation within 48 hours at 37°C. The number of colony- forming-units of viable bacteria and yeasts was obtained. The statistical tests of Kruskal-Wallis and Dunn were carried out, which showed a significant difference between the groups (P-L-) and (P+L+) (p <0.0001), identifying contamination with different microorganisms in the six laboratories, such as Enterococcus spp, Pseudomonas spp, Staphylococcus aureus, Klebsiella, Escherichia coli and Staphylococcus saprophyticus. Viable bacteria were eliminated by 100% in laboratories L1, L2, L4 and L5. In laboratories L3 and L6 elimination of viable bacteria was 99%. The viable yeasts were completely eliminated after PDT for laboratories L1, L2, L4 and L5. In the laboratory L3, viable yeast count was reduced by 97% after PDT, whereas in the L6, the reduction was 94%. It was concluded that PDT was effective in microbial removal from the surfaces of the acrylic resin specimens. / Infecção cruzada entre consultório odontológico e laboratório de prótese pode ocorrer quando procedimentos de biossegurança não são executados adequadamente. A desinfecção dos trabalhos protéticos é uma etapa importante para prevenir a contaminação cruzada entre pacientes, dentistas e técnicos de laboratório. Este estudo avaliou a eficácia da terapia fotodinâmica (TFD) sobre espécimes de resina acrílica confeccionados em seis diferentes laboratórios de prótese dentária. Os laboratórios, cadastrados no Conselho Regional de Odontologia do Ceará, foram selecionados por sorteio e não foram identificados ao operador dos experimentos. A terapia teve como fotossensibilizador a eritrosina 22 µM (P), associada à irradiação com LED de 520 nm, a 38 J/cm2 (L). Cinquenta espécimes de cada laboratório foram distribuídos em 5 grupos (n:10): controle positivo (padrão ouro), estéril em óxido de etileno (EO); controle negativo (P-L-), sem tratamento; controle (P+L-) apenas corado com eritrosina; controle (P-L+) apenas irradiado com LED 520 nm; experimental (P+L+). Os espécimes foram colocados em tubos individuais contendo solução salina e agitados para desprendimento microbiano. A suspensão obtida foi diluída e plaqueada em Ágar Sangue, Sabouraud Dextrose e CHROMagar Orientation®, para incubação em 48 horas a 37°C. O número de unidades formadoras de colônias (UFC) bacterianas e fúngicas viáveis foi obtido, para comparações entre os grupos. Foram realizados os testes estatísticos de Kruskal-Wallis e Dunn, que determinaram diferença significante entre os grupos (P-L-) e (P+L+) (p<0,0001). Foi identificada contaminação inicial com diversos micro-organismos nos seis laboratórios, como Enterococcus spp., Pseudomonas spp., Staphylococcus aureus, Klebsiella, Escherichia coli e Staphylococcus saprophyticus. As leveduras viáveis foram eliminadas totalmente após a TFD para os laboratórios L1, L2, L4 e L5. No laboratório L3, a contagem de leveduras viáveis foi reduzida, em 97% após a TFD, enquanto que no L6, a redução foi de 94%. As bactérias viáveis foram eliminadas em 100% nos laboratórios L1, L2, L4 e L5. Nos laboratórios L3 e L6, a eliminação das bactérias viáveis foi de 99%. A TFD foi bastante eficaz na eliminação microbiana das superfícies dos espécimes de resina acrílica.

TEIXEIRA, Alrieta Henrique. Ação da terapia fotodinâmica antimicrobiana sobre biofilmes orais crescidos in vitro e in situ. 2010. 53 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-11-11T12:56:25Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_ahteixeira.pdf: 1743363 bytes, checksum: 8653c7d718f31ddead02fe4bdd38dc56 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-12-05T13:08:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_ahteixeira.pdf: 1743363 bytes, checksum: 8653c7d718f31ddead02fe4bdd38dc56 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-12-05T13:08:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_ahteixeira.pdf: 1743363 bytes, checksum: 8653c7d718f31ddead02fe4bdd38dc56 (MD5) Previous issue date: 2010 / The treatment of diseases caused by oral biofilms involves mechanical removal and use of antibiotics and antiseptics which can lead to problems of bacterial resistance. Photodynamic antimicrobial chemotherapy (PACT) represents an alternative option to conventional treatment, promoting bacterial killing by photo-sensitization of microbial components. This study assessed the antimicrobial action of photodynamic therapy on oral biofilms produced in vitro and in situ using a light emitting diode (LED) associated with the photosensitizer toluidine blue O (TBO). Biofilms of Streptococcus mutans UA159 were grown on hydroxyapatite discs immersed in bathing culture and submitted to PACT after 5 days. For the in situ study, twenty-one volunteers were previously selected to use intra-oral palatal appliances containing eight blocks of human dentin during 7 days. Sucrose solution (10%) was dripped onto the dental blocks 8 times a day. The biofilm formed on one side of the device received treatment (PACT), and the opposite side acted as control. The collected material has gone through a process of disruption to the dispersion of cells and diluted in decimal series (10-1 to 10-4). In both experiments, specific culture media for the growth of total streptococci and mutans streptococci were inoculated and incubated under optimal conditions for growth of these microorganisms. Significant reductions in excess of 99.99% (p<0.05) were observed in the viability of colonies of S. mutans UA159 when exposed to TBO and LED on in vitro study. However, the biofilms formed in situ and subjected to the same experimental conditions showed no statistically significant differences (p≥0.05) in the microbiological counting when compared with control group. Therefore, we conclude that PACT was effective in microbiological reduction of S. mutans UA159 grown in an in vitro biofilm model, but very little effective on oral streptococci biofilms produced in situ. / O tratamento das doenças ocasionadas por biofilmes orais envolve basicamente a remoção mecânica e o uso de antibióticos e agentes anti-sépticos os quais podem originar cepas resistentes aos antimicrobianos tradicionais. A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFDA) apresenta-se como uma opção alternativa ao tratamento clássico, promovendo a morte bacteriana por meio da fotossensibilização dos componentes microbianos. Este estudo verificou a ação antimicrobiana da terapia fotodinâmica sobre biofilmes orais produzidos in vitro e in situ utilizando um diodo emissor de luz (LED) associado ao fotossensibilizador azul de orto-toluidina (TBO). No estudo in vitro, biofilmes de Streptococcus mutans UA159, foram formados sobre discos de hidroxiapatita utilizando um modelo de banhos de cultura e submetidos à TFDA após 5 dias. Para o estudo in situ, vinte e um voluntários foram previamente selecionados para utilizar dispositivos intra-orais palatinos contendo 8 blocos de dentina humana durante 7 dias. Solução de sacarose 10% foi gotejada sobre os blocos dentais 8 vezes ao dia. O biofilme formado em um dos lados do dispositivo recebeu tratamento da TFDA, e o lado oposto serviu como grupo controle. O material coletado passou por um processo de disrupção para a dispersão das células e diluição em série decimal de 10-1 a 10-4. Em ambos os experimentos, meios de cultura específicos para o crescimento de estreptococos totais e estreptococos do grupo mutans foram inoculados e incubados em condições ideais para o crescimento desses microrganismos. Reduções significativas acima de 99,99% (p<0.05) foram observadas na viabilidade das colônias de S. mutans UA159 quando expostos ao TBO e LED no estudo in vitro. Entretanto, nos biofilmes formados in situ e submetidos às mesmas condições experimentais, não foram verificadas diferenças estatisticamente significantes (p≥0.05) da contagem microbiana quando comparadas ao grupo controle. Portanto, podemos concluir que a TFDA foi efetiva na redução microbiológica de S. mutans UA159 crescidos em modelo de formação de biofilme in vitro, mas, pouco efetiva sobre biofilmes de estreptococos orais formados in situ.

PEREIRA, E. S. Expressão gênica de Streptococcus mutans em biofilmes produzidos in vitro submetidos à terapia fotodinâmica antimicrobiana. 2011. 70f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2011. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-27T14:40:07Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_espereira.pdf: 3666457 bytes, checksum: 90af4a5db3bdeb676bb82c201847fe7f (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-27T14:40:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_espereira.pdf: 3666457 bytes, checksum: 90af4a5db3bdeb676bb82c201847fe7f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-27T14:40:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_espereira.pdf: 3666457 bytes, checksum: 90af4a5db3bdeb676bb82c201847fe7f (MD5) Previous issue date: 2011 / The early stages of the formation of caries lesions in humans are directly related to the presence of Streptococcus mutans in biofilm. The treatment of diseases caused by oral biofilms basically involves mechanical removal and use of antibiotics and antiseptic agents which may lead to strains resistant to traditional antimicrobials. Antimicrobial Photodynamic Therapy (PACT) presents itself as an alternative option to conventional treatment, promoting bacterial killing by photosensitizing of microbial components. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial potential of PACT and its ability to alter the pattern of gene expression of S. mutans in oral biofilms produced in vitro using both a LED light (LED) associated with the photosensitizer ortho-toluidine blue ( TBO). To this end, S. mutans UA159 biofilms were formed on hydroxyapatite discs using a model of bathing culture and were subjected to PACT after 5 days. The collected material has gone through sonication for dispersion and dilution of cells in decimal series. After that, material was plated in rich medium and incubated under optimum growth conditions. Additionally, expression of virulence gtfB, and gtfC gbpB genes of S. mutans were evaluated after extraction of total RNA, cDNA synthesis and realization of the technique of polymerase chain reaction in real time using specific primers. The 16S ribosomal gene was used as the reference gene. Significant reductions (p <0.05) were observed in the viability of colonies of S. mutans when exposed to TBO and LED at the same time. Gene expression of gtfC in S. mutans biofilm was significantly reduced after the completion of antimicrobial photodynamic therapy, whereas expression of gtfB seems to have been less influenced by therapy. No change in the expression of gbpB a function of antimicrobial photodynamic therapy was observed. Therefore, further studies are needed to evaluate the action of antimicrobial photodynamic therapy in conditions more like those found in the clinical environment and to encourage understanding of their effects on the expression of important virulence of S. mutans genes. / Os estágios iniciais da formação das lesões de cárie em humanos estão relacionados diretamente com a presença de Streptococcus mutans no biofilme dental. O tratamento das doenças ocasionadas por biofilmes orais envolve basicamente a remoção mecânica e o uso de antibióticos e agentes anti-sépticos os quais podem originar cepas resistentes aos antimicrobianos tradicionais. A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFDA) apresenta-se como uma opção alternativa ao tratamento clássico, promovendo a morte bacteriana por meio da fotossenssibilização dos componentes microbianos. O objetivo dessa dissertação foi avaliar o potencial antimicrobiano da TFDA e sua capacidade de alterar o padrão de expressão gênica de Streptococcus mutans em biofilmes orais produzidos in vitro utilizando para tanto um diodo emissor de luz (LED) associado ao fotossenssibilizador azul de orto-toluidina (TBO). Para tanto biofilmes de .S. mutans UA159, foram formados sobre discos de hidroxiapatita utilizando um modelo de banhos de cultura e submetidos a TFDA após 5 dias. O material coletado passou por um processo de disrrupção para a dispersão das células e diluição em série decimal, após o que foi plaqueado em meio de cultura e incubado em condições ideais de crescimento. Adicionalmente, e expressão dos genes de virulência gtfB, gtfC e gbpB de S. mutans foram avaliados após a extração do RNA total, síntese de cDNA e realização da técnica da reação da polimerase em cadeia em tempo real utilizando primers específicos. O gene ribossomal 16S foi utilizado com gene de referência. Reduções significativas (p<0,05) foram observadas na viabilidade das colônias de S. mutans quanto exposto ao TBO e LED. A expressão gênica de gtfC em biofilme de S. mutans foi significantemente reduzida após a realização da terapia fotodinâmica antimicrobiana enquanto a expressão de gtfB parece ter sido menos influenciada pela terapia. Não houve alterações na expressão de gbpB em função da terapia fotodinâmica antimicrobiana. Assim, outros estudos são necessários para avaliar ação da terapia fotodinâmica antimicrobiana em condições mais semelhantes daquelas encontradas no ambiente clínico, bem como para favorecer o de seus efeitos na expressão de importantes genes de virulência de S. mutans

ALEXANDRINO, F. J. R. Terapia fotodinâmica com rosa bengala em nanoformulação com alfa-ciclodextrina contra suspensões de Streptococcus mutans. 2016. 32 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Carolinda Oliveira (ppgmm@ufc.br) on 2017-11-14T16:12:13Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_fjralexandrino.pdf: 2022784 bytes, checksum: 914011d7ad83cf7fd0cb679c4b1c5948 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-11-14T17:34:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_fjralexandrino.pdf: 2022784 bytes, checksum: 914011d7ad83cf7fd0cb679c4b1c5948 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-14T17:34:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_fjralexandrino.pdf: 2022784 bytes, checksum: 914011d7ad83cf7fd0cb679c4b1c5948 (MD5) Previous issue date: 2017-01-29 / Considering that dental caries is a biofilm-sugar-dependent disease and that S. mutans is considered the most cariogenic microorganism present in the oral biofilm, photodynamic therapy (PDT) has been proposed to supresscariogenic specie. The aim of this study was to assess the efficacy of PDT using blue light (BL) and the photosensitizer (PS) rose bengal (RB) or RB containing nanoparticulated-α-cyclodextrin (RBNP) against suspensions of S. mutans in two different planktonic suspension models. S. mutans suspensions were divided into groups, as follows: absenceof PS and BL, with BLand without PS, absence ofPS and presence of BL and presence of BL andPS. Four different concentrations of RB and RBNP (0.031, 0.062, 1 and 2 µM) and three energy densities of studied light source (3.35; 6.70 and 10.05 J.cm-2) were tested. Treatments were applied after bacteria being suspended in tryptone soy broth (TSB) or 0.89% NaCl (saline). Aliquots of each studied group was plated in BHI agar and submitted to colony forming units counting (CFU/mL) and the data transformed into logarithmical scale.BL did not cause cell death in the absence of RB or RBNP, regardless of planktonic suspension modeltested. For RB, dark cytotoxicity was not observed in TSB model, while in saline model, this cytotoxicity occurred at a 2μM concentration. For RBNP and TSB model, cell death occurred in the absence of light with2μM concentration, as well as it occurredfor 1 and 2 μM concentrations in saline model. In groups where PDT was applied,for bothRB and TSB models, microbial reduction was found from the concentration 1 µM and 3.35 J.cm-2. For higher both PS concentrations and energy densities,bacterial growth was not observed after treatments. For saline model, microbial reduction occurred from 0.031μM concentration and 10.05 J.cm-2. No bacterial growth was observed in energy densities and concentrations greater than 0.062 μMat 10.05 J.cm-2. In TSB model and RBNP, microbial reduction was detected forboth 0.031μM and 0.062μM concentrations in all tested energy densities.. For saline model, bacterial growth was not observed for all groups where PDT was performed. The model of planktonic cells with saline seems to present lower microbial counts compared to the TSB model. Photodynamic therapy performed with RB or RBNP was effective in reductingmicrobial load in S. mutanssuspensions. The addition of nanoparticles favored the RB antimicrobial effect, however, further studies are needed to investigate the effects of therapy in cariogenic biofilms formedin vitro and in situ. Keywords: Photochemotherapy, Dental Caries, Nanotechnology. / Considerando que a cárie dentária é uma doença biofilme-açúcar-dependente e queS. mutans é considerado o micro-organismo mais cariogênico presente no biofilme oral, a terapia fotodinâmica (TFD) tem sido proposta para suprimir talespécie cariogênica. O objetivo deste trabalho foi verificar a eficácia da TFD, utilizando luz azul (LA) e o fotossenssilizador (FS)rosa bengala (RB) ouRB nanoparticulado com -ciclodextrina (RBNP) contra suspensões de S. mutans,em dois diferentes modelos de suspensão planctônica.Suspensões de S. mutans foram divididas em grupos, como se segue:inexistência de FS e LA, com FSe sem LA, ausência de FS com LA e presença de FS e LA. Quatro concentrações diferentes de RB e RBNP(0,031; 0,062; 1e 2 µM) e três densidades de energia da fonte de luz estudada (3,35; 6,70 e 10,05 J.cm-2) foram testadas. Os tratamentos foram aplicados com as bactérias suspensas em caldo triptona de soja (TSB) ou NaCl a 0,89% (Salina). Alíquotas de cada grupo estudado foram plaqueadas em ágar BHI e submetidas a contagem de unidades formadoras de colônias (CFU/mL) e os dados transformados em escala logarítmica.A LA não causou morte celular na ausência do RB ou RBNP, independente do modelo de suspensão testado. Para o RB, citoxidade no escuro não foi observada no modelo com TSB, enquanto que no modelo com salina,esta ocorreu na concentração de 2 μM. Para o RBNP, houve morte celular na ausência da luz na concentração de 2 μM no modelo com TSB, bem como com 1 e 2 μM no modelo com salina. Nos grupos onde TFD foi utilizada, no modelo com RB e TSB, houve redução microbiana a partir da concentração 1 μM e 3,35 J.cm-2. Nas concentrações e densidades de energia superiores não foi observado crescimento bacteriano após os tratamentos. Para o modelo com salina, houve redução microbiana a partir da concentração 0,031 μM e 10,05 J.cm-2. Não foi observado crescimento bacteriano nas concentrações e densidades de energia superiores a 0,062 μM com 10,05 J.cm-2. No modelo com RBNP e TSB, houve redução microbiana nas concentrações 0,031 e 0,062 μM em todas as densidades de energia testadas. Para o modelo com salina, não foi observado crescimento bacteriano para todos os grupos onde a TFD foi realizada. O modelo de células planctônicas com salina parece apresentar menores contagens microbianas quando comparado ao modelo com TSB de modo geral. A terapia fotodinâmica realizada com RB ou RBNP foi efetiva da redução de carga microbiana em suspensões de S. mutans. A adição da nanopartícula favoreceu o efeito antimicrobiano do RB,contudo, mais estudos são necessários a fim de investigar os efeitos da terapia em biofilmes cariogênicos formados in vitro e in situ.