Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-25Bitstream added on 2014-06-13T20:06:11Z : No. of bitstreams: 1 000740082.pdf: 4167341 bytes, checksum: 8fe87af8a33480548b14b44df006b99a (MD5) / A capacidade de aderência dos micro-organismos a diferentes superfícies, a resistência a medicamentos, bem como a interação entre as espécies visam garantir a sobrevivência e a proliferação dos mesmos, resultando em menor susceptibilidade dos patógenos aos tratamentos e aos procedimentos de desinfecção. Este estudo teve como objetivo avaliar in vitro a eficácia da Terapia Fotodinâmica (PDT) mediada pelos fotossensibilizadores (FSs) Photodithazine® (PDZ) e Curcumina (Cur) sobre biofilmes multi-espécies compostos por Streptococcus mutans, Candida albicans e Candida glabrata. Para isso, o estudo foi divido em três partes: 1- avaliação do efeito fotodinâmico das diferentes concentrações de PDZ (100, 150, 175, 200 e 250mg/L) associada à luz LED (660nm/ 37,5J/cm2) na inativação de biofilme multi-espécies formado em fundo de placa de 96 orifícios; 2- avaliação do efeito fotodinâmico quando realizadas uma e três aplicações sucessivas de PDT, mediada por PDZ (175 e 200mg/L) e luz LED (660nm/ 37,5J/cm2) na inativação de biofilmes multi-espécies, formado sobre corpos-de-prova de resina acrílica. 3- avaliação do efeito fotodinâmico de diferentes concentrações do FS Cur (80, 100 e 120μM) associada à luz LED (455nm/ 37,5J/cm2) sobre biofilmes multi-espécies cultivados por diferentes períodos (24 e 48h) sobre corpos-de-prova de resina acrílica. Adicionalmente para cada condição avaliada foi verificado o efeito da aplicação isolada de cada concentração dos FSs PDZ e Cur em contato com o biofilme na ausência de luz (P+L-) e o efeito isolado da luz (P-L+). Além disso, foi realizado o grupo controle positivo, no qual o biofilme não esteve em contato com o FS e não foram iluminados com luz LED (P-L-). Após a aplicação dos tratamentos propostos, a viabilidade dos micro-organismos foi avaliada por meio da contagem de colônias (UFC/mL), teste do XTT, determinação da... / The ability of adhesion of microrganisms to different surfaces, the drug resistance, as well as the interaction among the species help to ensure the survival and proliferation of these microrganisms and result in lower susceptibility of these pathogens to treatment and disinfection procedures. This study aimed to evaluate the in vitro efficacy of PDT mediated by photosensitizers (FSs) Photodithazine ® (PDZ) and Curcumin (Cur) against multispecies biofilms formed by Candida albicans, Candida glabrata and Streptococcus mutans. This study was divided into three parts: 1. evaluation of the effect of photodynamic therapy of different concentrations of PDZ (100, 150, 175, 200 and 250mg / L) associated with the LED light (660 nm / 37.5 J/cm2) in the inactivation of multspecies biofilms formed in 96-well microtiter plates; 2. evaluation of the photodynamic effect of one PDT applications only and three successive PDT applications mediated by PDZ (175 and 200 mg / L) and LED light (660 nm / 37.5 J/cm2) in the inactivation of multispecies biofilms, formed on acrylic resin samples; 3. evaluation of the photodynamic effect of different concentrations of Cur FS (80, 100, and 120μM) associated with LED light (455nm / 37.5 J/cm2) against multispecies biofilms grown during different periods (24 and 48h) on acrylic resin samples. Additional samples were treated either with FSs (PDZ or Cur) (P+L-) or LED light (P-L+) only. Positive control samples had neither light nor FSs (PDZ or Cur) (P-L-). After applying the proposed treatments, the viability of microrganisms was assessed by Colony Count (CFU / mL), the XTT assay, determination of the total biomass (CV) and confocal laser scanning microscopy (CLSM).The results were analyzed using ANOVA or Kruskal-Wallis test followed by Tukey or Dunn, respectively. For the biofilm formed in 96-well plate, the concentrations of 175 and 200mg/L showed greater reduction in cell...

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-23. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:46:59Z : No. of bitstreams: 1 000828941_20180223.pdf: 246237 bytes, checksum: 69f2b55221a27bc97a05e593fbc263c5 (MD5) Bitstreams deleted on 2018-02-23T13:06:33Z: 000828941_20180223.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-02-23T13:07:24Z : No. of bitstreams: 1 000828941.pdf: 5791672 bytes, checksum: c31d8c70f8aa0a0104870a71c7ba408a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivo: Este estudo avaliou a influência de múltiplas sessões da Terapia com Laser em Baixa Intensidade (LLLT) coadjuvante a raspagem e alisamento radicular (RAR), e da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) associada ou não ao tratamento mecânico de RAR, no tratamento da periodontite experimental (PE) em ratos submetidos à quimioterapia com 5-Fluorouracil. Materiais e Métodos: Duzentos e dezesseis ratos foram submetidos à indução da PE por meio de ligadura no primeiro molar inferior direito e esquerdo. Após 7 dias a ligadura foi removida e os animais separados aleatoriamente em 9 grupos: PE (n=24) - sem tratamento; 5FU-PE (n=24) - tratados sistemicamente com 5FU (60mg/kg e 40mg/kg); 5FU-PE-RAR (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU e com RAR; 5FU-PE-RAR-1LLLT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, com RAR seguida da LLLT (sessão única) (660 nm; 0,035 W; 4,2 J, 120 segundos; 1,23 W/cm2); 5FU-PE-RAR-4LLLT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, com RAR seguida da LLLT (0, 24, 48 e 72 horas); 5FU-PE-RAR-1aPDT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, com RAR e 1 episódio de aPDT (LLLT + azul de metileno); 5FU-PE-RAR-4aPDT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, com RAR e aPDT (0, 24, 48, 72 horas); 5FU-PE-1aPDT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU seguida da aPDT; 5FU-PE-4aPDT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, seguida da aPDT (0, 24, 48, 72 horas). Oito animais de cada grupo foram eutanasiados aos 7, 15 e 30 dias após tratamento local. A área de perda óssea (PO) na região de furca foi analisada histometricamente, histologicamente e análise dos padrões de imunomarcação para TRAP, PCNA RANKL, OPG e CASP-3-AT foram realizadas. A quantificação da citocina PGE2 foi avaliada pelo ELISA e TNF-α e IL-6 foram avaliadas pelos Kits de ensaio Multiplex. A prevalência... / Objective: This study evaluated the influence of multiple sessions of Low Level Laser Therapy (LLLT), adjuvant to the scaling and root planing (SRP), and antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), with or without the mechanical treatment of SRP, in the treatment of experimental periodontitis (EP) in rats treated with chemotherapy 5- fluorouracil (5-FU). Materials and methods: Two hundred and sixteen animals were subjected to induction of EP by ligature in mandibular first molar right and left. 7 days after the ligature was removed, the animals were randomly divided into 9 groups: EP (n=24) - no treatment; 5FU-EP (n=24) - systemically treated with 5-FU (60mg/kg and 40mg/kg); 5FU-EP-SRP (n=24) - systemically treated with 5-FU, with SRP; 5FU-EP-SRP-1LLLT (n= 24) - systemically treated with 5-FU, with SRP, followed by LLLT (single session) (660 nm, 0.035 W; 4.2 J, 120 seconds; 1.23 W/cm2); 5FU-EP-SRP-4LLLT (n= 24) - systemically treated with 5-FU, with SRP, followed by LLLT (0, 24, 48 and 72 hours); 5FU-EP-SRP-1aPDT (n=24) - systemically treated with 5-FU, with SRP, followed by one application of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) (LLLT + methylene blue); 5FU-EP-SRP-4aPDT (n=24) - systemically treated with 5-FU, with SRP followed by aPDT (0, 24, 48, 72 hours); 5FU-EP-1aPDT (n=24) - systemically treated with 5-FU followed by aPDT; 5FU-EP-4aPDT (n=24) - treated systemically with 5-FU, followed by treatment with aPDT (0, 24, 48, 72 hours). Eight animals in each group were euthanized at 7, 15 and 30 days after local treatment. The area of bone loss (BL) in the furcation region was analyzed histometrically, histologically and analysis of immunostaining patterns for RANKL, OPG, TRAP, PCNA and CASP-3-AT were performed. Quantity of cytokine was measured by ELISA for PGE2 and TNF-α and IL-6 were evaluated by kits multiplex assays. The prevalence... / FAPESP: 12/05864-0 / FAPESP: 12/08649-3

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-11. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:23Z : No. of bitstreams: 1 000843125.pdf: 3415915 bytes, checksum: 3c3dc53c547494a401c76c5c860f02ab (MD5) / Enterococcus faecium se tornou um dos mais temidos micro-organismos em infecções hospitalares, por apresentar maior facilidade em adquirir resistência aos antibióticos do que E. faecalis. Entretanto, faltam estudos voltados para o isolamento e identificação de E. faecium na cavidade bucal. Os objetivos deste trabalho foram isolar e identificar E. faecalis e E. faecium em canais radiculares com infecções endodônticas e comparar as cepas de E. faecalis e E. faecium em relação à sensibilidade aos antibióticos convencionais e à terapia fotodinâmica antimicrobiana (PDT). Além disso, essas espécies foram comparadas quanto à virulência in vivo, utilizando o modelo de infecção experimental de Galleria mellonella. As cepas de E. faecalis e E. faecium isoladas de canais radiculares foram identificadas pelo sistema Rapid ID 32 Strep e PCR multiplex. Todos os isolados identificados como E. faecalis e E. faecium, foram testadas quanto à sensibilidade aos antibióticos pelo método E-test para determinação da concentração inibitória mínima (MIC). A seguir, foram selecionadas algumas cepas de E. faecalis e E. faecium sensíveis e resistentes aos antibióticos de uso clínico na odontologia para testes de sensibilidade in vitro à terapia fotodinâmica antimicrobiana. A virulência das cepas de E. faecalis e E. faecium foram testadas in vivo no modelo de infecção experimental de G. mellonella por meio da análise da curva de sobrevivência das larvas e quantificação de UFC/mL de células bacterianas presentes na hemolinfa desses animais. Os dados de UFC/mL obtidos na terapia fotodinâmica e na infecção em G. mellonella foram submetidos à análise de variância e teste de Tukey. Os dados obtidos na curva de sobrevivência de G. mellonella foram analisados pelo método de Log-rank. Foram realizadas coletas de 38 canais radiculares de diferentes pacientes, sendo que 22 apresentaram culturas positivas para enterococcus spp.(58%).... / Enterococcus faecium has become one of the most dreaded micro-organisms in nosocomial infections, due to its greater ease in acquiring resistance to antibiotics than E. faecalis. However, lack of studies focused on the isolation and identification of E. faecium in the oral cavity. The objectives of this study was to isolate and identify E. faecalis and E. faecium in root canals with endodontic infections and to compare strains of E. faecalis and E. faecium in sensitivity to conventional antibiotics and antimicrobial photodynamic therapy (PDT). Furthermore, these species were compared for virulence in vivo, using the model of experimental infection of Galleria mellonella. The strains of E. faecalis and E. faecium isolated from root canals were identified by the Rapid ID 32 Strep system and multiplex PCR. All isolates identified as E. faecalis and E. faecium were tested for antibiotic susceptibility E-test method for determination of minimal inhibitory concentration (MIC). Next, we selected some strains of E. faecalis and E. faecium sensitive and antibiotic-resistant clinical use in dentistry for in vitro susceptibility testing to antimicrobial photodynamic therapy. The virulence of strains of E. faecalis and E. faecium were tested in in vivo experimental model of infection of G. mellonella by analysis of larval survival curve and quantitation of CFU/mL bacterial cells present in the hemolymph of these animals. Data from CFU/mL obtained in photodynamic therapy and infection in G. mellonella were subjected to analysis of variance and Tukey test. The data on the survival of G. mellonella curves were analyzed by log-rank method. Samples of 38 root canals from different patients were performed and 22 had cultures positive for Enterococcus spp. (58%). Of these patients, all showed E. faecalis and only 2 had mixed infections with E. faecalis and E. faecium 6 isolates (27%) E. faecalis resistant to ....

Made available in DSpace on 2014-08-27T14:36:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-20Bitstream added on 2014-08-27T15:57:12Z : No. of bitstreams: 1 000734833.pdf: 2189317 bytes, checksum: 8cc1e7c303126f49a3ecd91ad07bb881 (MD5) / O trabalho investigou o potencial antimicrobiano fotodinâmico (PACT) mediado por um fotossensibilizador (FS) natural, curcumina (C), exposto a uma fonte de luz LED azul (L) aplicado sobre biofilme maduro de Streptococcus mutans (SM) formado sobre discos de hidroxiapatita e comparou esse potencial com biofilmes submetidos a imersão única com solução de clorexidina a 0.12% (CHX). Adicionalmente, verificou-se a eficácia de uma fonte de luz de amplo espectro (luz branca) de alta intensidade de potência na presença de C e azul de toluidina (T) a baixas concentrações expostos a um tempo extra curto de iluminação. Material e Método: Biofilmes de SM foram submetidos a tratamento com soluções de C e iluminadas com um LED azul (L) a 48 J/cm2 e 72 J/cm2 e a imersão em CHX. Adicionalmente, uma fonte de luz branca (42 J/cm2; 3410 mW/cm2) foi utilizada na presença de baixas concentrações de C e T por um período extra curto de iluminação sobre suspensões de SM. A eficácia das tratamentos foi realizada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC/mg de biofilme seco e UFC/ml de suspensão) e análise morfológica dos biofilmes foram realizadas por meio de microscopia confocal a laser e microscopia eletrônica de varredura ambiental. Resultados: PACT (C a 2.5 mM e L a 48 J/cm2) apresentou a maior redução bacteriana substancial quando comparada a CHX. A luz branca apresentou fotossensibilização letal nos parâmetros utilizados. Conclusão: A utilização da curcumina, um corante natural e a luz branca, capaz de ativar FS em curtos períodos de tempo, são avanços nesse campo antimicrobiano alternativo. / This work investigated the antimicrobial photodynamic potential (PACT) mediated by a natural photosensitizer (PS), curcumin (C), exposure to an source of blue LED (L) applied over a Streptoccocus mutans (SM) mature biofilm formed on hidroxiapatite discs and compared this potential with biofilms submitted to single immersion of chlorhexidine at 0.12% (CHX). Additionally, it was verified the efficacy of a broad visible spectrum light source (white light) of high potency intensity in the presence of C and toluidine blue (T) at low concentrations and exposure to an extra short illumination time. Materials: SM biofilms were submitted to a treatment with C solutions and exposure to a 48 J/cm2 e 72 J/cm2 of L and immersion in CHX. Furthermore, a white light source (42 J/cm2; 3410 mW/cm2) was used in the presence of low concentrations of C and T for an extra short period over SM suspensions. The efficacy of the treatments were performed by colony forming units counting (CFU/mg of dry biofilm and CFU/ml of suspension) and the morphological analysis of biofilms were performed using confocal laser scanning microscopy images and environmental scanning electron microscopy. Results: PACT (C at 2.5 mM and L at 48 J/cm2) presented a bacterial substantial reduction when compared with CHX treatment. The white light showed lethal photossensibilization in the utilized parameters. Conclusion: The use of curcumin, a natural compound and the white light, able to activate FS at shorts periods, are advance on this antimicrobial alternative field.

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-24Bitstream added on 2015-03-03T12:06:26Z : No. of bitstreams: 1 000806647_20170324.pdf: 196182 bytes, checksum: 763008db7102b02d0429742db959bfb2 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-24T12:04:47Z: 000806647_20170324.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-24T12:05:39Z : No. of bitstreams: 1 000806647.pdf: 2195734 bytes, checksum: 6a77f9f36608edf41dbadc0645b019e9 (MD5) / A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (aTFD), é uma terapia que utiliza fonte de luz e fotossensibilizador (FTS) na fotoinativação de microrganismos. O objetivo deste trabalho foi avaliar, in vivo, respostas teciduais da aplicação da aTFD utilizando ftalocianina-glucamina, cujo pico de absorção coincide com o comprimento de onda da cor vermelha, no tratamento da doença periodontal (DP) induzida em ratos, pelas avaliações: microtomográfica, histométrica e histológica. Ligaduras foram inseridas nos sulcos dos segundos molares superiores para indução da DP. Os animais foram distribuídos em 4 grupos: GI: DP (Somente indução da doença, sem tratamento); GII: RAR (Indução e tratamento básico periodontal); GIII: TFD (Indução e aplicação da terapia fotodinâmica); GIV: RAR+TFD (Indução, aplicação da terapia fotodinâmica e tratamento básico periodontal). Após 15 dias, as ligaduras foram removidas e os animais eutanaziados após 7, 15 e 30 dias do tratamento. Como todos os dados apresentaram-se normais (Kolmogorov-Smirnov), aplicou-se o teste paramétrico ANOVA, seguida do pós-teste de Tukey. Na histometria, não encontraram diferenças estatistísticas; a análise microtomográfica mostrou diferenças significantes em todos períodos para o grupo TFD nas proximais e região de furca, assim como o grupo RAR+TFD. No período de 30 dias, entre os grupos DP e TFD na região de furca, como também em 7 dias, além dos grupos DP e RAR+TFD; na histologia, mostrou que não houve danos aos tecidos. Podese concluir que a aTFD com ftalocianina-glucamina foi efetiva tanto quanto a RAR no tratamento da DP induzida, porém mais estudos são necessários para elucidar os efeitos deste fotossensibilizador na aTFD. / Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) is a therapy which uses a light source and photosensitizer (PS) in the microorganisms photoinativation. The aim of this study was to evaluate, in vivo, tissue response application of aPDT using phthalocyanineglucamine, with its peak absorption spectrum of color in red wavelength, in the treatment of induced PD in rats, by the microtomographic, histometric and histological analyses. Ligatures were inserted into the grooves of the upper second molars to induce PD. The animals were divided into 4 groups: GI: PD (only induction of PD, no treatment); GII: SRP (Induction and periodontal basic treatment); GIII: PDT (Induction and application of photodynamic therapy); GIV: SRP+PDT (induction, application of photodynamic therapy and periodontal basic treatment). After 15 days, the ligatures were removed and the animals were euthanized after 7, 15 and 30 days of treatment. Since all data were normal (Kolmogorov-Smirnov test), we used the parametric test ANOVA followed by Tukey post-test. Histometric, no differences were found; microtomographic, showed significant differences in all periods for the PDT group in the proximal and furcation area, as well as the SRP+PDT group. In the period of 30 days between PD and PDT groups in the furcation region as well as in 7 days, in addition to the PD and SRP+PDT groups; histological , showed no tissue damage. It can be concluded that the aPDT with phthalocyanine-glucamine was effective as much as the SRP in treatment induced PD, but more studies are needed to elucidate the effects of this PS in aPDT.

Orientador: Lourdes Aparecida Martins dos Santos-Pinto / Banca: Alessandra Nara Souza Rastelli / Banca: Osmir Batista de Oliveira Junior / Banca: Maria Aparecida de Andrade Moreira Machado / Banca: Simone Duarte / Resumo: O trabalho investigou o potencial antimicrobiano fotodinâmico (PACT) mediado por um fotossensibilizador (FS) natural, curcumina (C), exposto a uma fonte de luz LED azul (L) aplicado sobre biofilme maduro de Streptococcus mutans (SM) formado sobre discos de hidroxiapatita e comparou esse potencial com biofilmes submetidos a imersão única com solução de clorexidina a 0.12% (CHX). Adicionalmente, verificou-se a eficácia de uma fonte de luz de amplo espectro (luz branca) de alta intensidade de potência na presença de C e azul de toluidina (T) a baixas concentrações expostos a um tempo extra curto de iluminação. Material e Método: Biofilmes de SM foram submetidos a tratamento com soluções de C e iluminadas com um LED azul (L) a 48 J/cm2 e 72 J/cm2 e a imersão em CHX. Adicionalmente, uma fonte de luz branca (42 J/cm2; 3410 mW/cm2) foi utilizada na presença de baixas concentrações de C e T por um período extra curto de iluminação sobre suspensões de SM. A eficácia das tratamentos foi realizada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC/mg de biofilme seco e UFC/ml de suspensão) e análise morfológica dos biofilmes foram realizadas por meio de microscopia confocal a laser e microscopia eletrônica de varredura ambiental. Resultados: PACT (C a 2.5 mM e L a 48 J/cm2) apresentou a maior redução bacteriana substancial quando comparada a CHX. A luz branca apresentou fotossensibilização letal nos parâmetros utilizados. Conclusão: A utilização da curcumina, um corante natural e a luz branca, capaz de ativar FS em curtos períodos de tempo, são avanços nesse campo antimicrobiano alternativo. / Abstract: This work investigated the antimicrobial photodynamic potential (PACT) mediated by a natural photosensitizer (PS), curcumin (C), exposure to an source of blue LED (L) applied over a Streptoccocus mutans (SM) mature biofilm formed on hidroxiapatite discs and compared this potential with biofilms submitted to single immersion of chlorhexidine at 0.12% (CHX). Additionally, it was verified the efficacy of a broad visible spectrum light source (white light) of high potency intensity in the presence of C and toluidine blue (T) at low concentrations and exposure to an extra short illumination time. Materials: SM biofilms were submitted to a treatment with C solutions and exposure to a 48 J/cm2 e 72 J/cm2 of L and immersion in CHX. Furthermore, a white light source (42 J/cm2; 3410 mW/cm2) was used in the presence of low concentrations of C and T for an extra short period over SM suspensions. The efficacy of the treatments were performed by colony forming units counting (CFU/mg of dry biofilm and CFU/ml of suspension) and the morphological analysis of biofilms were performed using confocal laser scanning microscopy images and environmental scanning electron microscopy. Results: PACT (C at 2.5 mM and L at 48 J/cm2) presented a bacterial substantial reduction when compared with CHX treatment. The white light showed lethal photossensibilization in the utilized parameters. Conclusion: The use of curcumin, a natural compound and the white light, able to activate FS at shorts periods, are advance on this antimicrobial alternative field. / Doutor

Orientador: Ana Claúdia Pavarina / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Claúdia Helena Lovato da Silva / Banca: Ewerton Garcia de Oliveira Mima / Banca: Eunice Teresinha Giampaolo / Resumo: A capacidade de aderência dos micro-organismos a diferentes superfícies, a resistência a medicamentos, bem como a interação entre as espécies visam garantir a sobrevivência e a proliferação dos mesmos, resultando em menor susceptibilidade dos patógenos aos tratamentos e aos procedimentos de desinfecção. Este estudo teve como objetivo avaliar in vitro a eficácia da Terapia Fotodinâmica (PDT) mediada pelos fotossensibilizadores (FSs) Photodithazine® (PDZ) e Curcumina (Cur) sobre biofilmes multi-espécies compostos por Streptococcus mutans, Candida albicans e Candida glabrata. Para isso, o estudo foi divido em três partes: 1- avaliação do efeito fotodinâmico das diferentes concentrações de PDZ (100, 150, 175, 200 e 250mg/L) associada à luz LED (660nm/ 37,5J/cm2) na inativação de biofilme multi-espécies formado em fundo de placa de 96 orifícios; 2- avaliação do efeito fotodinâmico quando realizadas uma e três aplicações sucessivas de PDT, mediada por PDZ (175 e 200mg/L) e luz LED (660nm/ 37,5J/cm2) na inativação de biofilmes multi-espécies, formado sobre corpos-de-prova de resina acrílica. 3- avaliação do efeito fotodinâmico de diferentes concentrações do FS Cur (80, 100 e 120μM) associada à luz LED (455nm/ 37,5J/cm2) sobre biofilmes multi-espécies cultivados por diferentes períodos (24 e 48h) sobre corpos-de-prova de resina acrílica. Adicionalmente para cada condição avaliada foi verificado o efeito da aplicação isolada de cada concentração dos FSs PDZ e Cur em contato com o biofilme na ausência de luz (P+L-) e o efeito isolado da luz (P-L+). Além disso, foi realizado o grupo controle positivo, no qual o biofilme não esteve em contato com o FS e não foram iluminados com luz LED (P-L-). Após a aplicação dos tratamentos propostos, a viabilidade dos micro-organismos foi avaliada por meio da contagem de colônias (UFC/mL), teste do XTT, determinação da... / Abstract: The ability of adhesion of microrganisms to different surfaces, the drug resistance, as well as the interaction among the species help to ensure the survival and proliferation of these microrganisms and result in lower susceptibility of these pathogens to treatment and disinfection procedures. This study aimed to evaluate the in vitro efficacy of PDT mediated by photosensitizers (FSs) Photodithazine ® (PDZ) and Curcumin (Cur) against multispecies biofilms formed by Candida albicans, Candida glabrata and Streptococcus mutans. This study was divided into three parts: 1. evaluation of the effect of photodynamic therapy of different concentrations of PDZ (100, 150, 175, 200 and 250mg / L) associated with the LED light (660 nm / 37.5 J/cm2) in the inactivation of multspecies biofilms formed in 96-well microtiter plates; 2. evaluation of the photodynamic effect of one PDT applications only and three successive PDT applications mediated by PDZ (175 and 200 mg / L) and LED light (660 nm / 37.5 J/cm2) in the inactivation of multispecies biofilms, formed on acrylic resin samples; 3. evaluation of the photodynamic effect of different concentrations of Cur FS (80, 100, and 120μM) associated with LED light (455nm / 37.5 J/cm2) against multispecies biofilms grown during different periods (24 and 48h) on acrylic resin samples. Additional samples were treated either with FSs (PDZ or Cur) (P+L-) or LED light (P-L+) only. Positive control samples had neither light nor FSs (PDZ or Cur) (P-L-). After applying the proposed treatments, the viability of microrganisms was assessed by Colony Count (CFU / mL), the XTT assay, determination of the total biomass (CV) and confocal laser scanning microscopy (CLSM).The results were analyzed using ANOVA or Kruskal-Wallis test followed by Tukey or Dunn, respectively. For the biofilm formed in 96-well plate, the concentrations of 175 and 200mg/L showed greater reduction in cell... / Doutor

Submitted by DANIELA PEREIRA DE SÁ (daniela.sa@hotmail.com) on 2018-04-25T20:08:16Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇAO MESTRADO DANIELA SÁ PDF....pdf: 2506715 bytes, checksum: bf68fa58e403e9ad16de3c31ff7d3b9d (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Rimoli de Oliveira null (anapaula@foa.unesp.br) on 2018-04-25T20:29:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sa_dp_me_araca_int.pdf: 2373246 bytes, checksum: 97cbbe6e1db525a114babf3166227ff5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-25T20:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sa_dp_me_araca_int.pdf: 2373246 bytes, checksum: 97cbbe6e1db525a114babf3166227ff5 (MD5) Previous issue date: 2018-04-16 / O objetivo do presente estudo foi avaliar a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), como monoterapia ou como coadjuvante à raspagem e alisamento radicular (RAR) no tratamento da periodontite experimental (PE) em ratos tratados com dose oncológica de zoledronato. Cento e vinte ratos foram aleatoriamente distribuídos em quatro grupos experimentais, cada um composto por 30 ratos. Durante 8 semanas, foi administrado 100 µg/Kg de zoledronato com intervalo de três dias entre as injeções. No 14º dia do início do protocolo medicamentoso, foi instalada uma ligadura nos primeiros molares inferiores para indução de PE. Após 14 dias a ligadura foi removida e foram realizados os seguintes tratamentos: exclusivamente uma sessão de RAR (grupo PE-RAR), exclusivamente três sessões de aPDT (grupo PE-aPDT) e uma sessão de RAR associada à três sessões de aPDT (grupo PE-RAR-aPDT). As sessões de aPDT foram realizadas aos 0, 2 e 4 dias pós tratamento local. No grupo PE-NTL não foi realizado nenhum tratamento local. Após 7, 14 e 28 dias pós tratamento periodontal local foram realizadas as eutanásias. Foi realizada análise microtomografica (micro-CT), análise histopatológica, histométrica da porcentagem tecido ósseo (PTO) e porcentagem de tecido ósseo não vital (PTONV) e imunoistoquímica para fator de crescimento transformador beta (TGFβ) nos tecidos periodontais. Os dados obtidos foram submetidos à análise quantitativa e estatística com nível de significancia de 5%. Não houve diferença estatisticamente significante nos seguintes parâmetros microtomográficos: perda óssea alveolar, volume ósseo na furca, número e espessura de trabéculas ósseas. O processo de reparação tecidual pós tratamento foi mais favorável em PE-aPDT e PE-RAR-aPDT. Não houve diferença estatisticamente significante na PTO, todavia, a PTONV foi menor tanto em PE-aPDT quanto em PE-RAR-aPDT. A imunomarcação para TGFβ foi maior em PE-RAR, PE-aPDT e PE-RAR-aPDT aos 7 dias pós tratamento. Conclui-se que o emprego da aPDT, quando empregada como monoterapia ou como terapia coadjuvante à RAR, se mostrou mais efetiva e segura para tratamento da PE em ratos. / The aim of the present study was to evaluate the antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) as a monotherapy or adjunct to scaling and root planning (SRP) for the treatment of experimental periodontitis (EP) in rats treated with oncological dosage of zoledr onate. A hundred and twenty rats were randomly divided in four experimental groups, each one of them composed by 30 rats. During a period of 8 weeks, 100 μg/Kg of zoledronate was administered every three days. After 14 days of the beginning of the drug pro tocol, a ligature was installed in the lower first molars for EP induction. After 14 days, ligature was removed and the following treatments were performed: a single session of SRP, exclusively (group EP - SRP), three sessions of aPDT, exclusively (group EP - aPDT), and one session of SRP associated to the three sessions of aPDT (group EP - SRP - aPDT). aPDT sessions were performed at days 0, 2, and 4 after the local treatment. In the fourth group, no local treatment was made (EP - NLT). After 7, 114, and 28 days aft er the local periodontal treatment, the animals were euthanized. Microcomputed tomography (micro - CT) analysis, histopathologic analysis, percentage of bone tissue (PBT), percentage of non - vital bone (PNVB), and immunohistochemistry for transforming growth factor beta ( TGFβ ) in the periodontal tissues were performed. Obtained data underwent quantitative analysis and statistics considering 5% level of significance. No statistical difference was detected in the following microtomographic parameters: alveolar b one loss, bone volume in the furcation, number and thickness of the trabecullaes. Tissue healing after the treatment was more favorable in EP - aPDT and EP - RAR - aPDT groups. No significant differences were detected in PTO; however, PNVB was lower both in EP - a PDT and EP - SRP. Immunolabeling for TGFβ was higher in EP - SRP, EP - aPDT and EP - SRP - aPDT at day 7 post - treatment. It is concluded that when aPDT is used as monotherapy or as adjunct therapy associated with SRP, it is more effective and safe for the treatment of EP in rats.

Orientador: Letícia Helena Theodoro / Coorientador: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Edilson Ervolino / Banca: Cristiane Duque / Banca: José Eduardo Cezar Sampaio / Banca: Renato Corrêa Viana Casarin / Resumo: Objetivo: Este estudo avaliou a influência de múltiplas sessões da Terapia com Laser em Baixa Intensidade (LLLT) coadjuvante a raspagem e alisamento radicular (RAR), e da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) associada ou não ao tratamento mecânico de RAR, no tratamento da periodontite experimental (PE) em ratos submetidos à quimioterapia com 5-Fluorouracil. Materiais e Métodos: Duzentos e dezesseis ratos foram submetidos à indução da PE por meio de ligadura no primeiro molar inferior direito e esquerdo. Após 7 dias a ligadura foi removida e os animais separados aleatoriamente em 9 grupos: PE (n=24) - sem tratamento; 5FU-PE (n=24) - tratados sistemicamente com 5FU (60mg/kg e 40mg/kg); 5FU-PE-RAR (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU e com RAR; 5FU-PE-RAR-1LLLT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, com RAR seguida da LLLT (sessão única) (660 nm; 0,035 W; 4,2 J, 120 segundos; 1,23 W/cm2); 5FU-PE-RAR-4LLLT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, com RAR seguida da LLLT (0, 24, 48 e 72 horas); 5FU-PE-RAR-1aPDT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, com RAR e 1 episódio de aPDT (LLLT + azul de metileno); 5FU-PE-RAR-4aPDT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, com RAR e aPDT (0, 24, 48, 72 horas); 5FU-PE-1aPDT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU seguida da aPDT; 5FU-PE-4aPDT (n=24) - tratados sistemicamente com 5-FU, seguida da aPDT (0, 24, 48, 72 horas). Oito animais de cada grupo foram eutanasiados aos 7, 15 e 30 dias após tratamento local. A área de perda óssea (PO) na região de furca foi analisada histometricamente, histologicamente e análise dos padrões de imunomarcação para TRAP, PCNA RANKL, OPG e CASP-3-AT foram realizadas. A quantificação da citocina PGE2 foi avaliada pelo ELISA e TNF-α e IL-6 foram avaliadas pelos Kits de ensaio Multiplex. A prevalência... / Abstract: Objective: This study evaluated the influence of multiple sessions of Low Level Laser Therapy (LLLT), adjuvant to the scaling and root planing (SRP), and antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), with or without the mechanical treatment of SRP, in the treatment of experimental periodontitis (EP) in rats treated with chemotherapy 5- fluorouracil (5-FU). Materials and methods: Two hundred and sixteen animals were subjected to induction of EP by ligature in mandibular first molar right and left. 7 days after the ligature was removed, the animals were randomly divided into 9 groups: EP (n=24) - no treatment; 5FU-EP (n=24) - systemically treated with 5-FU (60mg/kg and 40mg/kg); 5FU-EP-SRP (n=24) - systemically treated with 5-FU, with SRP; 5FU-EP-SRP-1LLLT (n= 24) - systemically treated with 5-FU, with SRP, followed by LLLT (single session) (660 nm, 0.035 W; 4.2 J, 120 seconds; 1.23 W/cm2); 5FU-EP-SRP-4LLLT (n= 24) - systemically treated with 5-FU, with SRP, followed by LLLT (0, 24, 48 and 72 hours); 5FU-EP-SRP-1aPDT (n=24) - systemically treated with 5-FU, with SRP, followed by one application of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) (LLLT + methylene blue); 5FU-EP-SRP-4aPDT (n=24) - systemically treated with 5-FU, with SRP followed by aPDT (0, 24, 48, 72 hours); 5FU-EP-1aPDT (n=24) - systemically treated with 5-FU followed by aPDT; 5FU-EP-4aPDT (n=24) - treated systemically with 5-FU, followed by treatment with aPDT (0, 24, 48, 72 hours). Eight animals in each group were euthanized at 7, 15 and 30 days after local treatment. The area of bone loss (BL) in the furcation region was analyzed histometrically, histologically and analysis of immunostaining patterns for RANKL, OPG, TRAP, PCNA and CASP-3-AT were performed. Quantity of cytokine was measured by ELISA for PGE2 and TNF-α and IL-6 were evaluated by kits multiplex assays. The prevalence... / Doutor

Orientador: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Banca: Marcio Zaffalon Casati / Banca: Leticia Helena Theodoro / Resumo: A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (aTFD), é uma terapia que utiliza fonte de luz e fotossensibilizador (FTS) na fotoinativação de microrganismos. O objetivo deste trabalho foi avaliar, in vivo, respostas teciduais da aplicação da aTFD utilizando ftalocianina-glucamina, cujo pico de absorção coincide com o comprimento de onda da cor vermelha, no tratamento da doença periodontal (DP) induzida em ratos, pelas avaliações: microtomográfica, histométrica e histológica. Ligaduras foram inseridas nos sulcos dos segundos molares superiores para indução da DP. Os animais foram distribuídos em 4 grupos: GI: DP (Somente indução da doença, sem tratamento); GII: RAR (Indução e tratamento básico periodontal); GIII: TFD (Indução e aplicação da terapia fotodinâmica); GIV: RAR+TFD (Indução, aplicação da terapia fotodinâmica e tratamento básico periodontal). Após 15 dias, as ligaduras foram removidas e os animais eutanaziados após 7, 15 e 30 dias do tratamento. Como todos os dados apresentaram-se normais (Kolmogorov-Smirnov), aplicou-se o teste paramétrico ANOVA, seguida do pós-teste de Tukey. Na histometria, não encontraram diferenças estatistísticas; a análise microtomográfica mostrou diferenças significantes em todos períodos para o grupo TFD nas proximais e região de furca, assim como o grupo RAR+TFD. No período de 30 dias, entre os grupos DP e TFD na região de furca, como também em 7 dias, além dos grupos DP e RAR+TFD; na histologia, mostrou que não houve danos aos tecidos. Podese concluir que a aTFD com ftalocianina-glucamina foi efetiva tanto quanto a RAR no tratamento da DP induzida, porém mais estudos são necessários para elucidar os efeitos deste fotossensibilizador na aTFD. / Abstract: Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) is a therapy which uses a light source and photosensitizer (PS) in the microorganisms photoinativation. The aim of this study was to evaluate, in vivo, tissue response application of aPDT using phthalocyanineglucamine, with its peak absorption spectrum of color in red wavelength, in the treatment of induced PD in rats, by the microtomographic, histometric and histological analyses. Ligatures were inserted into the grooves of the upper second molars to induce PD. The animals were divided into 4 groups: GI: PD (only induction of PD, no treatment); GII: SRP (Induction and periodontal basic treatment); GIII: PDT (Induction and application of photodynamic therapy); GIV: SRP+PDT (induction, application of photodynamic therapy and periodontal basic treatment). After 15 days, the ligatures were removed and the animals were euthanized after 7, 15 and 30 days of treatment. Since all data were normal (Kolmogorov-Smirnov test), we used the parametric test ANOVA followed by Tukey post-test. Histometric, no differences were found; microtomographic, showed significant differences in all periods for the PDT group in the proximal and furcation area, as well as the SRP+PDT group. In the period of 30 days between PD and PDT groups in the furcation region as well as in 7 days, in addition to the PD and SRP+PDT groups; histological , showed no tissue damage. It can be concluded that the aPDT with phthalocyanine-glucamine was effective as much as the SRP in treatment induced PD, but more studies are needed to elucidate the effects of this PS in aPDT. / Mestre