Orientador: Rodrigo Fernando Costa Marques / Banca: Maria Aparecida Zaghethe Bertochi / Banca: Juliana Marchi / Resumo: As terapias fotodinâmica e fototérmica vêm sendo desenvolvidas de forma a oferecer melhores e mais baratas alternativas no tratamento de câncer. Os principais desafios na utilização destas técnicas estão na obtenção de novos materiais fototérmicos e fotosensibilizadores que absorvam no mesmo comprimento de onda. Neste contexto, este trabalho desenvolveu um material com este potencial. Para isso foi escolhido como base o óxido de grafeno devido suas propriedades hidrofílica e atóxica, boa estabilidade térmica, capacidade de absorção de luz e possibilidade de funcionalização. Nanopartículas de óxido de ferro magnéticas, floresceína o-metacrilato e o Verteporfin foram ligados em sua superfície trazendo novas características como a possibilidade do uso como agente de contraste no diagnóstico por ressonância magnética nuclear e terapia fotodinâmica. Para isso, estratégia de síntese foi feita em quatro etapas: síntese do óxido de grafeno, óxido de grafeno magnético, óxido de grafeno magnético fluorescente e óxido de grafeno magnético fluorescente com fotossenssibilizador. Na primeira etapa empregou-se o método de Hummers modificado para obtenção do óxido de grafeno pela oxidação e esfoliação do grafite. Em seguida, nanopartículas de óxido de ferro magnético foram imobilizadas em sua superfície pelo método de coprecipitação simples. A propriedade de fluorescência foi então inserida pela ancoragem da fluoresceína o-metacrilato juntamente com o ácido acrílico (AA), persulfato de amôni... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Photodynamic and photothermal therapies have been developed in order to offer better and cheaper alternatives in cancer treatment . The main challenges in the use of these techniques are in obtaining new photothermal and photosensitizers materials that absorb at the same wavelength. In this context, this work has developed a material with this potential. For this, graphene oxide was chosen as the base due to its hydrophilic and nontoxic properties, good thermal stability, light absorbing capacity and possibility of functionalization. Magnetic iron oxide nanoparticles, fluorescein o - methacrylate and Verteporfin were linked on their surface bringing new features such as the possibility of use as a contrast agent in the diagnosis by nuclear magnetic resonance and photodynamic. For this, the synthesis strategy was done in four steps: synthesis of gra phene oxide, magnetic graphene oxide, fluorescent magnetic graphene oxide and fluorescent magnetic graphene oxide with photosensitizer. In the first step, the modified Hummers method was used to obtain graphene oxide by t he oxidation and exfoliation of gra phite. Next, nanoparticles of magnetic iron oxide were immobilized on their surface by the simple co - precipitation method. The fluorescence property was then inserted by fluorescein o - methacrylate anchoring along with acrylic acid (AA), ammonium persulfate and sodium bisulfite. Finally, the graphene oxide was functionalized with the Verteporfin photosensitizer by a transesterification reaction. In order to verify the physical - chemical and structural character of the intermediates and final products of each step, characterization techniques were used, such as high - resolution scanning electron microscopy ( SEM ), X - ray diffractometry (XRD), RAMAN spectroscopy, Ultraviolet/ visible spectroscopy (UV - Vis), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), fluorescence spectroscopy, zeta potential and dynamic light scattering (DLS). From the... / Mestre

O tratamento convencional para lesões de cáries dentinárias tem sido baseado na remoção mecânica da dentina desmineralizada, utilizando instrumentos cortantes manuais ou rotatórios. Como uma alternativa à remoção dos microrganismos responsáveis pela lesão com o desgaste da estrutura dental, a proposta deste estudo é eliminá-los por meio da fotossensibilização promovida pela irradiação da lesão com um laser de baixa potência, associado a um corante específico. Se as bactérias presentes na lesão cariosa puderem ser eliminadas, o tecido desmineralizado poderia ser preservado, evitando-se a ocorrência de exposição pulpar, principalmente no caso de lesões profundas. A terapia envolve a utilização de um agente fotossensibilizante que, ao ser ativado por uma fonte de luz visível comprimento de onda compatível com o corante, induz a formação de espécies reativas de oxigênio, como o oxigênio singleto e radicais livres, responsáveis pela morte celular. Com o objetivo de avaliar a efetividade da terapia fotodinâmica in vivo, lesões de cárie profundas em molares permanentes (n=26) foram tratadas com corante azul de metileno 0,01% e irradiadas com laser diodo em baixa intensidade (= 660 nm) por 90 segundos. Amostras de dentina cariada da parede pulpar das lesões foram coletadas com micropunch e mantidas no meio de transporte VMGA III para a análise microbiológica. Após o processamento, as amostras foram semeadas nos meios, Ágar Mitis Salivarius Bacitracina, Ágar Rogosa e Ágar sangue, para as contagens de estreptocoos do grupo mutans, Lactobacillus spp. e total de bactérias viáveis, respectivamente. Passado o período de incubação, foi realizada a contagem de unidades formadoras de colônias das amostras coleadas para cada grupo, antes e após a terapia, e a porcentagem de redução microbiana em cada grupo de bactérias estudadas foi calculada. O testes de Wilcoxon demonstrou haver redução estatisticamente significante (p<0,0001) tanto para estreptococos do grupo mutans (78.07%), como para Lactobacillus spp. (78.0%) e para o total de bactérias viáveis (76.03%). De acordo com o teste de Mann-Whitney, não houve diferença estatisticamente significante para as porcentagens de redução entre os três grupos (p>0,05). A terapia fotodinâmica pode ser considerada uma técnica efetiva para a eliminação das bactérias presentes na dentina de lesões de cárie profundas, assegurando a preservação de estrutura dental durante o tratamento. / The traditional treatment of dentinal caries lesions has been based on the mechanical removal of all demineralized dentine, using hand or rotatory instruments. As an alternative to removal of the cariogenic organisms by drilling, the purpose of this study was to eliminate them through photosensitization promoted by irradiation with a low power laser associated with a specific dye. If bacteria in carious lesion could be eliminated, demineralized tissue could be retained and pulpal exposure could be avoided, particularly in case of deep carious lesions. Photodynamic therapy involves the use of photoactive dye that is activated by irradiation with light of an adequate wavelength causing the generation of cytotoxic species, such as singlet oxygen and free radicals. In order to evaluate in vivo the effectiveness of the therapy, remaining carious dentine of deep cavitated lesions on permanent molars (n=26) were treated with 0.01% methylene blue dye and irradiated with a low power diode laser (= 660 nm) for 90 seconds. Samples of dentine from pulpal wall were collected with a micropunch immediately before and after the therapy and kept in VGMA III transport medium for microbiological analysis. Samples were then cultured in Brucella blood agar, Mitis Salivarius Bacitracin agar and Rogosa agar plates to determine the total viable, S. mutans and Lactobacillus spp. counts, respectively. After incubation, the number of colony-forming units was counted and the percentage of microbial reduction was calculated for each group of bacteria studied. Wilcoxon and Mann-Whitney tests showed that there was a statistically significant reduction (p<0,0001) of the dentin microflora after photodynamic therapy for the total of viable bacteria (76.03%), S. mutans (78.07%) and Lactobacillus spp. (78.0%) and that there was no statistic differences for its efficiency between groups (p>0,05). Photodynamic antimicrobial therapy can be considered an effective technique to kill bacteria present in dentine from deep carious lesions.

O tratamento da doença periodontal consiste na remoção mecânica do biofilme, sendo que terapias complementares como a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) podem melhorar os resultados obtidos. Este trabalho avaliou in vitro o efeito dos corantes azul de toluidina e azul de metileno com distintos parâmetros de laser (70; 100mW) e LED em Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a) em suspensão. O primeiro experimento avaliou efeito bactericida de diferentes concentrações dos dois corantes sozinhos (0,05; 0,1; 0,5, 1,0; 2,0; 5,0; 10 mg/ml). O segundo foi dividido nos seguintes grupos: controles positivo e negativo (gentamicina), grupos somente com luz aplicada, grupos com três concentrações (0,05; 0,1; 10 mg/ml) de corante sozinhos ou associados ao laser de baixa intensidade (660 nm; 2,91 e 4,16 W/cm2; 70 e 100mW; 45 J/cm2; 0,024 cm2; 12 e 18s) e LED (627 ± 10 nm; 150mW/cm2; 10,5 mW; 20 J/cm2; 0,07cm2; 123s). Os dados foram analisados pelo teste ANOVA complementado por Tukey (p<0,05). Os resultados demonstraram que ambos os corantes na concentração de 10 mg/ml sozinhos ou associados com laser (ambas as potências) ou LED causaram 100 % de morte bacteriana semelhante ao controle negativo (p>0,05). Com isso, pode-se concluir que aPDT pode eliminar o A.a. de forma dependente da concentração do corante. / The main treatment of periodontal disease is the mechanical removal of biofilm. Adjuvant therapies as antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) may offer better results. The aim of this in vitro study was to evaluate the effect of toluidine and methylene blue dyes, associated to red laser (70; 100mW) and LED on elimination of a suspension of Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a). A first test evaluated the bactericidal effect of various concentrations of both dyes (0.05; 0.1; 0.5, 1.0; 2.0; 5.0, 10 mg/ml) in absence of light. In the second test, the experimental groups consisted of positive and negative (gentamicin) controls, groups with three concentrations (0.05; 0.1,10 mg/ml) of dyes alone of associated to low level laser (660 nm; 2.91 and 4.16 W/cm2; 70 and 100mW; 45 J/cm2; 0.024 cm2; 12 and 18s) and LED (627 ± 10 nm; 150mW/cm2; 10.5 mW; 20 J/cm2; 0.07cm2; 123s). Data were analyzed by ANOVA complemented by Tukeys test (p<0.05). The results showed that both dyes, with 10 mg/ml, alone or associated to laser and LED caused 100% of death as the negative control (p>0.05). It can be concluded that aPDT is capable of eliminate A.a depending of the dye concentration.

Orientador: Carla Raquel Fontana Mendonça / Resumo: O presente estudo tem como objetivo avaliar a fototoxicidade do azul de metileno (AM), clorina-e6 (Ce-6) e curcumina (CUR) associados a irradiações com diferentes intensidades de luz para a terapia fotodinâmica (TFD) contra cepas de Enterococcus faecalis e Cutibacterium acnes, em suspensão e em biofilme. As fontes de luz utilizadas na TFD foram LEDs no comprimento de onda azul (450 nm) e vermelho (660 nm) de acordo com cada fotossensibilizador testado. Como resultado observamos que, em E. faecalis a TFDa mediada por AM e Ce6 foi mais eficiente quando exposta a intensidade de luz de 153 mW/cm², porém com a CUR os melhores resultados foram obtidos com a intensidade de luz de 103 mW/cm². Para C. acnes em suspensão, a Ce6 e a CUR submetidas às diferentes intensidades de luz, causaram reduções bacterianas similares. Em biofilme, a Ce6 associada a intensidade de 122 mW/cm² de luz foi mais eficiente, no entanto, a CUR não proporcionou morte de biofilmes de C. acnes independente das intensidades testadas. O AM, independente da fase, apresentou os melhores resultados com a intensidade de luz de 153 mW/cm². Considerando a quantificação de espécies reativas de oxigênio, a concentração de AM foi determinante na produção de EROs. Na concentração de 100 μg/mL de AM na dose de 120 J/cm2 radicais hidroxila foram mais evidentes em relação a quantidade de oxigênio singleto formado. Na concentração de 50 μg/mL, a intensidade de 61 mW/cm² gerou similarmente as espécies testadas, quanto que a int... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: Carla Raquel Fontana Mendonça / Coorientador: Ana Marisa Fusco Almeida / Banca: Madalena Palomari Spolidorio / Banca: Juliana Cabrini Carmello / Banca: Eliane Trovatti / Banca: Cristiane Costa Quishida / Resumo: A necessidade de superar a resistência dos micro-organismos frente aos fármacos disponíveis, a fim de se chegar ao sucesso terapêutico leva a uma constante exploração de novas abordagens para este fim. Os sistemas de efluxo multidrogas tem sido um profundo obstáculo para uma terapêutica bem-sucedida utilizando-se antimicrobianos existentes hoje no mercado. A descoberta de bloqueadores desses sistemas complementa estudos envolvendo terapias nãoconvencionais, como a Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (Antimicrobial Photodynamic Therapy - aPDT). Este estudo teve como objetivo avaliar a aPDT mediada pelo azul de metileno (AM) associada com inibidores de bomba de efluxo em diferentes espécies microbianas. Para isso, foram utilizados como inibidor o verapamil, em biofilmes de Escherichia coli e Staphylococcus aureus, e verapamil e farnesol para Candida albicans. A determinação da combinação ideal de Inibidor/AM foi feita através do cruzamento de diferentes concentrações dos compostos, de tal forma que todas as combinações possíveis fossem avaliadas, nas concentrações previamente determinadas através da concentração inibitória mínima. O metabolismo celular para todas as condições experimentais foi avaliado por meio do ensaio de redução do XTT. As combinações onde foram verificadas a redução de 80% no metabolismo foram plaqueadas e a contagem de células (UFC/ml) determinada. Os resultados obtidos permitiram observar que para E. coli, foram necessárias uma dose maior de luz (44 J/cm2... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Conventional antimicrobials are mostly ineffective due to emerging antimicrobial resistance acquired by pathogenic micro-organisms. The need to overcome this resistance to reach therapeutic success has led to exploration of new approaches. Multidrug efflux systems have been a profound obstacle to achieve success in some specific cases with the available antibiotics today. The discovery of efflux pump inhibitors systems can act as an adjuvant to alternative therapies such as Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT). This study aimed to evaluate the association of aPDT mediated by methylene blue (MB), with efflux pump inhibitors in different microbial species. Verapamil was used as an inhibitor in biofilm of Escherichia coli and Staphylococcus aureus, and verapamil and farnesol were expected to block the pumps for Candida albicans. The determination of the optimal combination of Inhibitor/MB was carried out by crossing different concentrations of the compounds. Cell metabolism for all experimental conditions was assessed by XTT reduction assay. The combinations where 80% of metabolism reduction was observed, cells were plated and colony count units (cfu/ml) determined. The E. coliresults showed requirement of higher light dose (44 J/cm2 ) and a lower concentration of verapamil (215 μg/mL) to achieve reduction of 3.4 log10 (CFU/mL). Compared to S. aureus, a lower dose of light (22 J/cm2 ) was needed, and a higher concentration of verapamil (312 μg/mL), was necessary to obtain reduction of 3.65 log10 (CFU/ml). For C. albicans, verapamil presented lower reduction of biofilm viable cells compared to farnesol. Setting the same light dose (44 J/cm2 ), the combination verapamil/MB: 215/400 showed reduction of 2,82 log10 (CFU/mL) and farnesol/MB: 22/200 determined reduction of 3.82 log10 (CFU/mL). Briefly, aPDT mediated MB, associated with an efflux pump... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Patricia Vieira Silva (patricia.silva@unigranrio.com.br) on 2016-05-30T19:02:38Z No. of bitstreams: 1 Bianca Calil Feldman.pdf: 2284805 bytes, checksum: 69c0180a07320832baec4a29c6abe5b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-30T19:02:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bianca Calil Feldman.pdf: 2284805 bytes, checksum: 69c0180a07320832baec4a29c6abe5b6 (MD5) Previous issue date: 2009-11-10 / Photodynamic therapy (PDT) basically involves a triad of light, a photosensitizer and oxygen. When combined they can produce cytotoxic agents that can cause cell death, which may represent a promising alternative for the reduction of certain periodontal pathogens, and therefore the treatment of periodontitis. The aim of this study was to evaluate the clinical effect of adjunctive PDT in the nonsurgical treatment of chronic periodontitis. A randomized-controlled trial, 15 patients with chronic periodontitis were included, and exhibited at least five periodontal pockets and clinical attachment level ≥ 5 mm. All patients received non-surgical periodontal treatment. Using a split-mouth design, test side were additionally treated with a PDT (methylene blue 0,01% + Diode Laser 660 nm). Probing pockets depth (PB), Clinical attachment levels (CAL) and Blending on probing (BOP) were assessed at baseline, 30, 60 and 90 days after therapy. The statistical results showed that all clinical parameters were significantly reduced in test and control sides after therapy. However, the intergroup difference was not significant for PBS and CAL. BOP was statistical difference intergroups in the 60 days later (p =0,048). The additional application of a PDT to nonsurgical periodontal treatment was not effective. There were no extra reductions in PBS, CAL and BOP. / A terapia fotodinâmica (PDT) envolve a tríade luz, agente fotossensibilizador e oxigênio. Quando combinados, produzem agentes citotóxicos que podem ocasionar a morte celular, o que pode representar uma alternativa promissora na redução de certos periodontopatógenos, e conseqüentemente, no tratamento da periodontite. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos clínicos da PDT adjunta ao tratamento não-cirúrgico da periodontite crônica. Em um estudo randomizado controlado, foram incluídos 15 pacientes com periodontite crônica, com no mínimo cinco sítios com profundidade de bolsa sondagem e nível de inserção clínica ≥ 5 mm. Todos os pacientes receberam terapia periodontal não-cirúrgica. Utilizando um modelo de boca dividida, o Lado teste recebeu tratamento adicional com PDT (azul de metileno 0,01% + Laser de diodo 660 nm). Foram avaliados os parâmetros clínicos de profundidade de bolsa a sondagem (PBS), Nível de inserção clínica (NI) e Sangramento a sondagem (SS), no início e 30, 60 e 90 dias após a terapia. Os resultados obtidos através do estudo clínico demonstraram que houve melhoria estatisticamente significativa nos parâmetros clínicos investigados, nos Lados Teste e Controle, quando comparado as medidas iniciais com os três períodos avaliados. No entanto, na comparação intergrupos, não houve diferenças estatísticas para PBS e NI. No parâmetro SS, houve diferença estatística entre os grupos para o período de 60 dias (p = 0,048). A aplicação adjunta da PDT ao tratamento periodontal não-cirúrgico não mostrou efeito adicional na melhoria dos níveis clínicos avaliados.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-22Bitstream added on 2014-06-13T19:27:33Z : No. of bitstreams: 1 coletti_tmsfa_me_arafcf.pdf: 679985 bytes, checksum: 44586dabcae6690099fbdb0e6005a933 (MD5) / Nos últimos anos o aumento na incidência da candidose superficial ou invasiva causada por espécies emergentes e resistentes aos medicamentos tem sido atribuído a disseminação do uso de antibióticos e/ou agentes imunossupressores. A candidose é considerada uma doença oportunista de alta incidência em pacientes que utilizam medicamentos imunossupressores após transplante de órgãos, antibióticos de amplo espectro, terapias antineoplásicas e nos que possuem imunossupressão relacionada à síndrome da imunodeficiência adquirida. A Terapia Fotodinâmica (Photodynamic Therapy ou PDT) utiliza a combinação de luz (visível) e um composto fotossensível. A maior aplicação da PDT ocorre no tratamento de câncer, entretanto, a técnica está difundindo-se para o tratamento de outras doenças como infecções microbianas. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da PDT mediada pela Curcumina, na ausência e na presença do surfactante brometo de cetiltrimetilamônio (CTAB), com uma fonte de luz do tipo LED, sobre suspensões planctônicas de isolados clínicos das espécies C. albicans e C. glabrata fluconazol-resistentes, bem como de cepas ATCC. Após a PDT, foram obtidas diluições seriadas de cada amostra e alíquotas foram plaqueadas para a contagem das células viáveis (ufc/mL). O metabolismo celular para todas as condições experimentais também foi avaliado por meio do ensaio de redução do 2,3-bis[2-methoxy-4-nitro-5-sulphophenyl]2H-tetrazolium-carboxanilida (XTT). Também foi avaliada a capacidade de adesão/formação de biofilme dessas cepas após a PDT. Para isso, amostras obtidas da fase de adesão e da fase madura dos biofilmes foram monitoradas pela contagem de células viáveis (ufc/mL). Os resultados permitem observar que a utilização da PDT com curcumina em micelas de CTAB em suspensões planctônicas... / In recent years the increase in the incidence of superficial or invasive candidiasis caused by species emerging drug-resistant and has been attributed to widespread use of antibiotics and/or immunosuppressive agents. Candidiasis is considered an opportunistic disease of high incidence in patients taking immunosuppressive drugs after organ transplantation, broad-spectrum antibiotics, anticancer therapies and who has immunosuppression related to acquired immunedeficiency syndrome. Photodynamic Therapy (PDT) uses a combination of (visible) light and a photosensitive compound. The largest application of PDT occurs in the treatment of cancer, however, the technique is diffusing in the treatment of other diseases such microbial infections. The aim of this study was to evaluate the effect of PDT mediated by Curcumin, in the absence and presence of surfactant cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) with a light source type LED on planktonic suspensions of clinical isolates of the species C. albicans and C. glabrata Fluconazole-resistant strains as well as strains ATCC. After PDT, serial dilutions were collected and aliquots of each sample were plated for viable cell count (cfu/ml). Cellular metabolism for all experimental conditions was also assessed by reduction assay of 2,3-bis [2-methoxy-4-nitro-5-sulphophenyl]-2H-tetrazolium carboxanilide (XTT). It was also evaluated the ability of adhesion/biofilm formation of these strains after PDT. For this, samples of the accession and the mature phase biofilms were monitored by viable cell count (cfu/mL). The results allow to observe that the use of PDT with curcumin in CTAB micelles in planktonic suspensions was able to decrease metabolism (XTT) strains of C. albicans and C. glabrata susceptible and resistant to fluconazole, however, the reduction in viable cell count... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Márcio Ropke (ropke13marcio@gmail.com) on 2017-07-06T14:27:47Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação do alendronato sódico, da terapia fotodinâmica.pdf: 1219109 bytes, checksum: bc5d1362a16fa1f1a79dc31cad3765ad (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-06T14:27:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação do alendronato sódico, da terapia fotodinâmica.pdf: 1219109 bytes, checksum: bc5d1362a16fa1f1a79dc31cad3765ad (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O propósito deste estudo foi avaliar radiograficamente a influência do alendronato sódico (ALN), da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), ou da sua associação adjuntos à raspagem e alisamento radicular (RAR) no tratamento da periodontite experimental (PE) induzida em ratos. A PE foi induzida em 64 ratos, por meio da inserção subgengival de uma ligadura de fio de algodão no 1º molar inferior esquerdo. Após 7 dias de indução, a ligadura foi removida e os animais foram tratados de acordo com os seguintes grupos experimentais (n=8): RAR: RAR e irrigação com soro fisiológico; ALN: RAR e irrigação com ALN; aPDT: RAR, irrigação com azul de metileno e aplicação do laser em baixa intensidade (LBI); ALN/aPDT: RAR, irrigação com ALN associado ao azul de metileno e aplicação do LBI. Os animais foram eutanasiados aos 7 ou 30 dias após os tratamentos. Radiografias digitais periapicais padronizadas foram realizadas nas hemimandíbulas esquerdas para avaliar a perda óssea alveolar (PO). A PO foi mensurada por meio de medidas lineares traçadas na região distal do 1º molar inferior esquerdo, entre a junção amelocementária e a crista óssea alveolar. As médias dos valores obtidos foram calculadas e os dados submetidos à análise estatística (p<0,05). A PO foi significativamente menor no grupo ALN/aPDT quando comparado aos grupos RAR e ALN nos dois períodos experimentais. Os animais do grupo aPDT apresentaram PO significativamente menor do que os do grupo RAR aos 7 e aos 30 dias pós-operatórios. O grupo ALN apresentou a maior média de PO aos 7 e 30 dias. Dentro dos limites desse estudo, pode-se concluir que o uso do ALN não demonstrou melhora dos parâmetros radiográficos de PO. A associação ALN/aPDT adjunto a RAR promoveu melhores condições radiográficas periodontais no tratamento da PE induzida em ratos. / The purpose of this study was to radiographically evaluate the influence of sodium alendronate (SA), photodynamic therapy (aPDT), or their combination as adjuvant to scaling and root planing (SRP) in the treatment of experimental periodontitis (EP) induced in rats. EP was induced in 64 rats with a ligature around the mandibular left first molar. After 7 days of induction, the ligature was removed and the animals were treated according to the following experimental groups (n = 8): SRP: SRP plus saline solution; SA: SRP plus SA; aPDT: SRP plus methylene blue irrigation followed by low-level laser therapy (LLLT); SA/aPDT: SRP plus SA and methylene blue irrigation followed by LLLT. The animals were euthanized at 7 or 30 days after the treatments. Standardized periapical digital radiographs were performed on the left hemi-jaws to assess alveolar bone loss (ABL). The ABL was measured through linear measurements in the distal region of the mandibular left first molar, between the cementoenamel junction and the alveolar bone crest. The medians of the values were calculated and the data submitted to the statistical analysis. The ABL was significantly lower in the SA/aPDT group when compared to SRP and SA groups, in the two postoperative periods. Animals from the aPDT group showed significantly lower ABL than those from SRP group, at 7 and 30 postoperative days. The SA group presented the highest ABL at 7 and 30 days. Within the limits of this study, it can be concluded that the use of ALN did not demonstrate radiographic parameters improvement in ABL. The ALN/aPDT combined with SRP promoted radiographically better periodontal conditions in the treatment of EP induced in rats.

Orientador: Carla Raquel Fontana / Banca: Clóvis Wesley Oliveira de Souza / Banca: Ana Marisa Fusco Almeida / Resumo: A ocorrência de uma variedade de agentes patogênicos resistentes aos antibióticos atuais continua a ser um problema, especialmente quando as infecções bacterianas estão crescendo em biofilme. Neste estudo, propomos o uso da terapia fotodinâmica (TFD) como monoterapia e também associada à antibioticoterapia como um tratamento alternativo. O objetivo deste estudo foi analisar os efeitos da TFD mediada pelo azul de metileno (AM) em Staphylococcus aureus (ATCC 25923) e Escherichia coli (ATCC 25922), como biofilme e em fase planctônica. Diferentes concentrações de fotossensibilizador (400; 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,25 μg/mL) e fluência (2,8; 5,6; 11.2 22,4J/cm²) foram testadas. Também realizamos experimentos que avaliaram o efeito sinérgico da terapia fotodinâmica e o antibiótico ciprofloxacina. Os efeitos bactericidas da TFD como monoterapia não foram estatisticamente aumentados com a concentração de fotossensibilizador, e bactérias em biofilmes foram menos afetadas que as da fase planctônicas. Entretanto, o efeito sinérgico da terapia fotodinâmica seguida de ciprofloxacina no biofilme aumentou a redução bacteriana. Em biofilme para S. aureus, utilizando 50 ug/mL de AM, irradiação 22,4 J/cm² e a concentração de 15.625 ug/mL de antibiótico, tivemos uma redução de 61,80%. Para E. coli, houve uma erradicação bacteriana em todas as concentrações testadas na TFD combinada com antibiótico, tanto a irradiação de 11,2 J/cm², como a irradiação 22,4 J/cm². O crescimento bacteriano foi observado apenas na concentração mais baixa do antibiótico testada, de 0,125 ug/mL, em concentrações de 50 e 25 ug/mL de AM. / Abstract: The occurrence of a variety of pathogens resistant to current antibiotics remains the major problem especially when bacterial infections are growing in biofilm. In this study, we propose the use of photodynamic therapy (PDT) as monotherapy and also associated with antibiotic therapy as an alternative treatment. The aim of this study was to analyze the effects of PDT mediated by methylene blue (MB) on Staphylococcus aureus (ATCC 25923) and Escherichia coli (ATCC 25922) as biofilm and planktonic phase. Different concentrations of photosensitizer (400; 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,25g/mL), and fluency of 2.8; 5.6; 11.2 22,4J/cm2 were tested. We also carried out experiments that evaluated the synergistic effect of photodynamic therapy and antibiotic ciprofloxacin. The bactericidal effects with PDT as monotherapy were not statistically increased with the concentration of photosensitizer and bacteria in biofilms were less than affect in the planktonic phase. Although, the synergistic effect of photodynamic therapy on biofilms followed by ciprofloxacin amplified the bacterial reduction. In biofilm for S. aureus, using 50 μg/ml MB, irradiation 22,4 J/cm² and the concentration of 15,625 μg/mL of antibiotic, got a reduction of 61,80%. For E. coli, there was a bacterial eradication at all concentrations tested in PDT combined with antibiotic, both the irradiation 11,2 J/cm² as the irradiation 22,4 J/cm². Bacterial growth was observed only in the lowest tested concentration of the antibiotic, 0,125 μg/mL, at concentrations of 50 and 25 μg/mL MB. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-28Bitstream added on 2014-06-13T20:58:44Z : No. of bitstreams: 1 carmello_jc_me_arafo.pdf: 701741 bytes, checksum: 55eb9d8f5746ef34ede24573f0c2455a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve por objetivo avaliar a efetividade da terapia fotodinâmica (PDT) mediada pelo fotossensibilizador (FS) Photodithazine® (PDZ), associado à luz do tipo LED (660nm). Para tanto, foram utilizados 55 camundongos com aproximadamente 6 semanas de vida, os quais foram submetidos a indução de candidose no dorso da língua. Inicialmente os animais foram imunossuprimidos e no dia seguinte se realizou a inoculação de C. albicans na língua dos mesmos por meio de swabs embebidos na suspensão (107 Ufc/mL). Para a realização da terapia fotodinâmica o FS foi avaliado nas concentrações de 75, 100, 125 e 150mg/L. Tais grupos experimentais foram denominados de (P+L+ 75mg/L, P+L+ 100mg/L, P+L+ 125mg/L, P+L+ 150mg/L) associados a uma dose de luz de 37,5 J/cm2. Para a verificação apenas do efeito da PDZ, a mesma foi aplicada na língua dos animais, sem iluminação (grupos denominados de P+L- 75mg/L, P+L- 100mg/L, P+L- 125mg/L, P+L- 150mg/L). O efeito da luz foi avaliado por meio da iluminação das línguas com dose de luz de 37,5J/cm2, (grupo denominado de P-L+ 37,5J/cm2). Um grupo recebeu apenas inoculação por Candida (grupo P-L-, controle positivo), outro grupo não recebeu nenhum tratamento e nem inoculação fúngica (grupo CN – controle negativo). Após os experimentos realizou-se a recuperação de C. albicans das línguas dos animais por meio de swabs que foram esfregados sobre as mesmas durante 1 minuto. Esses swabs foram embebidos em tubos de ensaio com 1mL de solução salina, e diluições seriadas foram realizadas e colocadas em placas de petri com SDA. Após 48 horas de incubação a 37º C as células fúngicas foram quantificadas e o número de Ufc/mL foi determinado e analisado pelo teste ANOVA (P<.05). Os camundongos foram sacrificados e tiveram as línguas removidas cirurgicamente para realização da análise histológica. Os resultados demonstraram... / The aim of this investigation was to evaluate the effectiveness of photodynamic therapy (PDT) mediated by photossensitizer Photodithazine® (PDZ) associated with LED light (660nm) for the photoinactivation of C. albicans in a murine model of oral candidosis. Fifty-five 6-week-old female Swiss mice were immunossuppressed and in the next day small cotton pads were soaked in a C. albicans cell suspension (107CFU/mL) and swabbed in the oral cavity of mice. PDT was performed and the PS was applicated topically on the dorsum of the tongue of mice at concentrations 75, 100, 125 and 150mg/L (P+L+75, P+L+100, P+L+125 and P+L+150mg/L) associated with LED at a fluence of 37,5J/cm2. The effect of PS only was tested by application of PDZ for the same period of pre-irradiation time and irradiation at the same concentration as that for the P+L+ group, without the LED illumination (P+L-75, P+L-100, P+L-125 and P+L-150mg/L). To verify the effect of the light only, the group was exposed to the same LED dose mentioned previously (P-L+ 37,5J/cm2), 1 group). The positive control did not receive any PS or light (P-L-). The negative control group (CN) of animals was evaluated and mice did not receive any treatment. After treatment the dorsum of the tongue was swabbed for 1 minute with a cotton pad to recover C. albicans cells and the microbiological evaluation was performed. The yeast colony counts were quantified and the number of CFU/mL was determined and analyzed by ANOVA test (P<.05). Animals were killed 24 hours after treatment and the tongue of all mice were surgically removed for histological analysis. The results of this investigation demonstrated that PDT was effective in reducing C. albicans recovered from the tongue of mice at concentrations 100, 125 and 150mg/L of PS when compared with the animals from the positive control group (P-L-) (P<0.05). There was no difference between these concentrations... (Complete abstract click electronic access below)