Orientador: Edilson Ervolino / Coorientadora: Roberta Okamoto / Banca: Leonardo Perez Faverani / Banca: Rogerio Leone Buchaim / Resumo: OBJETIVOS: Os objetivos do presente estudo foram avaliar o efeito da terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) e da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) no processo de reparo alveolar de ratas com os principais fatores de risco para a osteonecrose dos maxilares associada à terapia medicamentosa (ONM-M). MATERIAIS E MÉTODOS: Ratas senis (n=29) foram distribuídas nos grupos: SAL, ZOL, ZOL/LLLT e ZOL/aPDT. Durante sete semanas, a cada dois dias, administrou-se pela via intraperitoneal 0,45ml de NaCl 0,9% (SAL) ou 0,45ml desta mesma solução acrescida de 100μg/Kg de zoledronato (ZOL, ZOL/LLLT e ZOL/aPDT). Decorridas três semanas, realizou-se a exodontia do primeiro molar inferior esquerdo. Nos grupos ZOL/LLLT e ZOL/aPDT as ratas foram submetidas respectivamente a LLLT ou aPDT aos 0, 2 e 4 dias pós exodontia. A eutanásia foi realizada 28 dias após a exodontia. No sítio de extração dental foram realizadas análises: histopatológica do processo de reparação tecidual, histométrica da área de tecido ósseo neoformado (ATO) e imunoistoquímica direcionada para os seguintes biomarcadores: PCNA, BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4, RUNX-2, OCN, OPG, RANKL e TRAP. RESULTADOS: Os grupos tratados com zoledronato apresentaram maior imunomarcação para OPG e menor imunomarcação para RANKL e TRAP. Em ZOL observou-se áreas de osteonecrose, comprometimento da reparação tecidual, menor ATO, menor imunomarcação para PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4 e OCN, e maior ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: OBJECTIVES: The aim of this study was to evaluate the effects of Low Level Laser Therapy (LLLT) and antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) in the a lveolar bone repair in rats with the high risk factors for Medication - Related Osteonecrosis of the Jaw (MRONJ). MATERIALS AND METHODS: Senile rats (n = 29 ) were distributed into four grou ps: SAL, ZOL, ZOL/LLLT and ZOL/aPDT. For seven weeks, every two days, 0,45ml 0.9% NaCl (SAL) or 0,45ml of this same solution plus 100μg/kg zoledronate (ZOL, ZOL/LLLT and ZOL/aPDT) were administered intraperitoneally. After three weeks, the first lower left molar was extracted. In ZOL/LLLT and ZOL/aPDT groups, the rats were submitted to LLLT or aPDT therapy at 0, 2 and 4 days after tooth extraction. Euthanasia was performed 28 days after tooth extraction. In dental extraction site was performed the histopath ology analysis of the tissue repair, histometric analysis of newly formed bone area (NFB) and immunohistochemistry related to the following biomarkers: PCNA, BAX, C3C, TNFα, IL - 1β, IL - 6, HIF - 1α, VEGF, CD31, BMP2/4, RUNX - 2, OCN, OPG, RANKL and TRAP. RESULT S: The groups treated with zoledronate showed higher immunolabeling for OPG and lower immunolabeling for RANKL and TRAP. In ZOL group was observed areas of osteonecrosis, impairment of wound healing, lower ATO, lower immunolabeling for PCNA, HIF - 1α, VEGF, CD31, BMP2/4 and OCN, and higher immunolabeling for BAX, C3C, TNFα, IL - 1β, IL - 6 and RUNX - 2 when compared to the SAL group. ZOL/LLLT showed improvement in some parameters regarding to ZOL (ATO, PCNA, TNFα, HIF - 1α, VEGF, CD31 and RUNX - 2), however, few parame ters were similar to the SAL (PCNA, HIF - 1α, VEGF, CD31 and RUNX - 2). ZOL/aPDT did not present areas of osteonecrosis and the tissue repair did not differ significantly from the SAL groups, as well as the following ...(Complete abstract electronic access below) / Mestre

Orientador: Carla Raquel Fontana / Coorientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Alexandra Ivo de Medeiros / Banca: Kleber Thiago de Oliveira / Resumo: O câncer de colo uterino (ou câncer cervical) é uma neoplasia maligna que tem a infecção pelo HPV como o principal fator de risco para o seu surgimento. As terapias atuais para o tratamento do câncer cervical têm como maior desvantagem a excisão substancial do estroma cervical e muitos efeitos adversos associados aos quimioterápicos, principalmente a cisplatina. Nesse cenário, a terapia fotodinâmica (TFD) vem se mostrando uma alternativa promissora, especialmente se combinada a tratamentos convencionais. A técnica é baseada na administração de um agente fotossensibilizador não tóxico ao paciente com posterior exposição a uma fonte de luz de comprimento de onda específico, resultando em resposta citotóxica via dano oxidativo. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar, in vitro, a citotoxicidade, o tipo de morte induzido e os efeitos genotóxicos e mutagênicos da TFD em monoterapia e associada à cisplatina sobre as linhagens SiHa, C-33 A e HaCaT, utilizando os fotossensibilizadores Photogem e azul de metileno. Observou-se que tanto a terapia fotodinâmica mediada por azul de metileno (AMTFD) quanto a terapia mediada pelo Photogem (PGTFD) foram eficazes em reduzir o número de células viáveis, com a citotoxicidade sendo dependente da dose de luz. A cisplatina teve menor eficácia sobre as três linhagens quando comparada à TFD. Porém, a combinação cisplatina + TFD apresentou efeito sinérgico intenso e provocou maior morte celular em todas as condições testadas. A sequência de aplicação dos tratamentos (cisplatina + TFD ou TFD + cisplatina) demonstrou-se importante e dependente do fotossensibilizador. Com relação ao tipo de morte celular provocado, tanto a AMTFD quanto a PGTFD induziram morte independente de caspases, mas a AMTFD induziu morfologia típica de necrose, enquanto a PGTFD induziu morfologia mais similar à apoptose. A cisplatina induziu predominantemente apoptose e as terapias... / Abstract: Cervical cancer is a malignant tumor that has HPV infection as the main risk factor for its emergence. Current therapies for the treatment of cervical cancer have as major disadvantage substantial excision of cervical stroma and many adverse effects associated with chemotherapy, especially cisplatin. In this scenario, photodynamic therapy (PDT) has proven to be a promising alternative, specially if combined with conventional treatments. The technique is based on the administration of a non-toxic photosensitizing agent to the patient with subsequent exposure to a light source of a specific wavelength, resulting in cytotoxic response by oxidative damage. Thus, the present study intended to evaluate in vitro cytotoxicity, the type of induced death and the genotoxic and mutagenic effects of PDT alone and associated with cisplatin on the cell lines SiHa, C-33 A and HaCaT, using the photosensitizers Photogem and methylene blue. It was observed that both the photodynamic therapy mediated by methylene blue (MBPDT) and Photogem mediated therapy (PGPDT) were effective in reducing cell viability with cytotoxicity being dependent on the light dose. Cisplatin was less effective over the three lines compared to PDT. However, the combination cisplatin + PDT had a greater synergistic effect and caused greater cell death in all conditions tested. The sequence of treatment application (PDT + cisplatin or cisplatin + PDT) was important and depended on the photosensitizer. Regarding the type of induced cell death, both AMPDT and PGPDT induced caspase-independent death, but AMPDT induced the typical morphology of necrosis, while PGPDT induced morphology was most similar to apoptosis. Cisplatin predominantly induced apoptosis; and combination therapy induced greater apoptosis- or necrosis-like rate according to the cell line, but always with a higher percentage of dead cells than monotherapies. MBPDT, either as monotherapy or in combination with cisplatin was ... / Mestre

Orientador: Valdir Gouveia Garcia / Resumo: O presente estudo teve por objetivo avaliar histologicamente o efeito da terapia fotodinâmica (PDT) na progressão da doença periodontal induzida em ratos. Realizou-se a adaptação de uma ligadura de algodão na margem gengival do primeiro molar inferior esquerdo de cento e vinte ratos. Os animais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos experimentais(n=30): Grupo I: nenhum tipo de tratamento realizado, somente a presença da ligadura; Grupo II (MB): tratamento com aplicação tópica de azul de metileno (100 æg/mL) dois dias após adaptação da ligadura; Grupo III (LLT): tratamento com Laser em baixa intensidade dois dias após adaptação da ligadura; e Grupo IV (PDT): tratamento com aplicação tópica de azul de metileno (100 æg/mL) seguido da aplicação do Laser em baixa intensidade dois dias após adaptação da ligadura. A superfície mesial dos dentes no Grupo III e IV foram irradiados com o Laser de diodo de GaAlAs, com 685 nm (50 mW, 120 s, 4.5 J/cm2). Todos os grupos foram subdivididos em subgrupos (n=10) e sacrificados nos períodos de 5, 15 e 30 dias pós-operatório. As peças foram processadas para análise histológica e coradas pela técnica de H&E. Através de um sistema de escores, vários parâmetros foram utilizados para avaliar o tecido conjuntivo, ligamento periodontal, superfície radicular e tecido ósseo. A análise estatística foi realizada pelo teste de Kruskal-Wallis, (p<0.05). Os resultados indicaram diferença no nível da inserção do ligamento periodontal entre o Grupo I (C) e Grupo III (LLT) (p=0,0327), Grupo II (MB) e Grupo III (LLT) (p=0,0118) e entre o Grupo III (LLT) e Grupo IV (PDT) (p=0,0076) no período de 15 dias de pó-operatório. Não ocorreu diferença estatisticamente significante ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of this study was to histologically evaluate the effect of photodynamic therapy (PDT) on the progression of experimentally induced periodontal disease in rats. Cotton ligatures were placed at the gingival margin level of the lower left first molar in one hundred and twenty rats. The animals were then randomly divided evenly into 4 groups (n=30): Group I (C): no treatment; Group II (MB): treated with topical application of methylene blue (100æg/ml) 2 days after ligature placement; Group III (LLT): treated by low level laser therapy 2 days after ligature placement; and Group IV (PDT): treated with topical application of methylene blue (100æg/ml) followed by low level laser therapy 2 days after ligature placement. The mesial aspect of the teeth in Groups III and IV were irradiated using a 685nm GaAlAs laser (50mW, 120s, 4.5J/cm2). All groups were subdivided into subgroups (n=10) and euthanized at either 5, 15 or 30 days post-operative. Block sections were routinely processed for histological analysis using H&E stain. Using a scoring system, several biological parameters were used to evaluate the connective tissue, periodontal ligament, root surface and bone. The data were statistically analyzed (Kruskal-Wallis, p<0.05). The results showed significant differences in the periodontal attachment level between Group I (C) and Group III (LLT) (p=0,0327), Group II (MB) and Group III (LLT) (p=0,0118) and between Group III (LLT) and IV (PDT) (p=0.0076) at 15 days postoperative.There were no significant differences in any of the evaluated parameters...(Complete abstract click eletronic address below) / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências Médicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2014. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2015-02-03T12:19:16Z No. of bitstreams: 1 2014_JeffersonBrunoPereiraRibeiro.pdf: 1823020 bytes, checksum: 49ac554d7e44d30b39885986770a3523 (MD5) / Approved for entry into archive by Ruthléa Nascimento(ruthleanascimento@bce.unb.br) on 2015-02-10T16:21:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_JeffersonBrunoPereiraRibeiro.pdf: 1823020 bytes, checksum: 49ac554d7e44d30b39885986770a3523 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-10T16:21:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_JeffersonBrunoPereiraRibeiro.pdf: 1823020 bytes, checksum: 49ac554d7e44d30b39885986770a3523 (MD5) / A escassez de fármacos é uma preocupação e objeto de estudo para a descoberta de alternativas eficazes para o tratamento da leishmaniose tegumentar (LT). A formulação tópica tem sido almejada devido sua baixa toxicidade. O desenvolvimento de terapias alternativas, como a multimodal, é importante no enfrentamento da resistência às drogas. O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia in vivo da terapia fotodinâmica (TFD) tópica com ftalocianina cloro-alumínio lipossomal para o tratamento da LT, isoladamente e em associação com a terapia sistêmica com miltefosina. Foram formados 5 grupos, cada um com 6 camundongos isogênicos, adultos, fêmeas, da espécie Mus musculus, cepa C57BL/6: (1) Controle negativo, sem infecção e sem tratamento; (2) Controle positivo, infectado e não tratado; (3) Miltefosina 200 mg, diariamente, e TFD com ftalocianina cloro-alumínio lipossomal (FCL), em dias alternados; (4) Apenas Miltefosina; e (5) Apenas TFD com FCL. Os esquemas terapêuticos duraram 20 dias. Confirmou-se a infecção dos animais, realizando cultura em meio NNN da linfa colhida da pata dos animais. Vias de administração adotadas foram miltefosina oral e FCL tópica. Para a aplicação da TFD, os animais foram anestesiados com a associação de xilazina e quetamina. Os animais foram avaliados por: (i) medição das patas e (ii) critérios parasitológicos. As análises estatísticas foram realizadas com software SPSS®. O número de parasitas viáveis por pata foi determinado pelo programa Elida®. Observou-se maior eficácia para o grupo que utilizou a associação de TFD com FCL e miltefosina (p<0,05), no qual houve uma redução maior de parasitas quando comparada aos outros dois grupos, cujos resultados do tratamento foram semelhantes ao grupo controle negativo (p<0,05). A TFD com FCL, quando usada isolada, demonstrou baixa eficácia quando comparada ao grupo controle negativo e grupo padrão ouro (miltefosina) (p<0,05). ________________________________________________________________________ ABSTRACT / Shortage of drugs is a concern and object of studies for the discovery of effective alternative for Cutaneous Leishmaniasis (CL) treatment. Topic formulation has been aimed due its low toxicity. Development of alternative therapies, as multimodal, is important to confront the drug resistance. This study aims to compare the in vivo effectiveness of topic photodynamic therapy (PDT) with liposomal chloro-aluminuim phthalocyanine (LCP) in treatment of CL, isolated and associated with systemic therapy with miltefosine. 5 groups were adopted each one with 6 isogenic adult female mice, Mus musculus species, C57BL/6: (i) Negative Control, without infection and without treatment; (ii) Positive Control, infected but not treated; (iii) Miltefosine 200mg, daily, and PDT with LCP on alternating days; (iv) only Miltefosine; and (v) only PDT with LCP. Therapeutic schemes lasted 20 days. Animal infection has been confirmed, performing culture in NNN of the collected lymph paw of animals. The adopted routes of administration were oral miltefosine and topic LCP. For PDT implementation, animals were anaesthetized with the association of xylazine and ketamine. Animals were evaluated by: (i) paw measuring; and (ii) parasitological criteria. Statistics analysis were performed by specific statistics software [SPSS™]. The number of feasible parasites by paw was determined by a software for parasite data counting [Elida™]. It was observed greater effectiveness for the group that used the association of PDT with LCP and miltefosine (p<0.05), which had a greater reduction in parasites when compared to the other two groups, wherein the result of treatment was similar to the Negative Control group (p<0.05). PDT with LCP, when isolated, demonstrated low effectiveness when compared to the Negative Control and gold standard group (miltefosine) (p<0.05). Association of miltefosine and PDT with LCP represents hopes for CL, an increasing dermatological disease among several countries.

Nesta Tese foram estudadas as propriedades do composto nitroheterocíclico Quinifuril na sua ação com a luz. O composto possui absorção na região espectral 350-450 nm ( 1 1 396 ? = 24700 M- cm- ) e, sendo irradiado nesta região, sofre fotodecomposição. Foi observada a formação do seu estado tripleto (?max = 550 nm), de energia ET=18200 cm-1. O tripleto sofre supressão na interação com seu estado fundamental (2,6×108 M-1 s-1) e pelo oxigênio molecular (2×109 M-1 s-1). É apresentado um modelo para a fotodecomposição do Quinifuril em solução aquosa que supõe dois caminhos para sua fotólise: diretamente a partir do seu estado singleto e a partir da reação entre as moléculas nos estados fundamental e tripleto. São apresentados os efeitos de detergentes de diferentes cargas elétricas sobre suas propriedades, onde se observou o Quinifuril interage fracamente com o CTAB (catiônico); moderadamente como o DPS (zwitteriônico); e fortemente com o aniônico SDS, que afeta sua velocidade de fotodecomposição e seu estado tripleto. São apresentados dados da cinética de formação de agregação SDS-Quinifuril e o efeito destes agregados sobre suas características de fotodecomposição. Estudou-se a fotocitotoxicidade do Quinifuril contra células em cultura, P388 (leucemia de camundongos), K562 (leucemia humana) e NIH3T3 (fibroblasto imortalizado de camundongos), onde se determinou um significativo aumento na sua citotoxicidade ao ser irradiado. O composto apresentou fotocitotoxicidade contra células K562 e NIT3H3 em doses tão baixas quanto 0,2 ?g/mL; sua dose letal (LC50) contra células P388 foi estimada em 0,45 ?g/mL. O composto apresentou capacidade de inibir a proliferação destas linhagens em ~100 %. Mostrou-se que os produtos finais de sua fotodecomposição não são os responsáveis pela sua fotocitotoxicidade. Foi mostrado que, sob ação da luz, o Quinifuril produz as espécies reativas oxigênio singlete g 1? , ânion superóxido ( o- 2 O ) e óxido nítrico NO? e sua fotocitotoxicidade pode ser explicada pela produção destas espécies intermediárias. / In this work there were studied the properties of a nitroheterocyclic compound Quinifuryl in its interaction with light. The compound presents absorption in the 350-450 nm spectral region ( 1 1 396 ? = 24700 M- cm- ), and suffers photolysis under irradiation. The triplet state is formed (?max = 550 nm), characterized by the energy ET= 18200 cm-1. The triplet state can be self-quenched (2,6×108 M-1 s-1), and quenched by oxygen (2×109 M-1 s-1). A model of the Quinifuryl water solution photolysis proposes two possible ways for the process: a direct photolysis through singlet state, and the other one due to its triplet/ground states reaction. We present the effects of different charged detergents upon Quinifuryl properties. It was observed that Quinifuryl interacts weakly with cationic CTAB, moderately with zwitterionic DPS, and strongly with anionic SDS. The latter affects the rate of its photolysis and the triplet state properties. The SDS-Quinifuryl aggregation and its effects over the Quinifuryl photolysis behavior are discussed. Phototoxic effects of Quinifuryl against the P388 (mouse leukaemia), the K562 (human erythroleukaemia), and the NIH3T3 (immortalized mouse fibroblast) cell lines were studied. The compound demonstrated an elevated cytotoxicity under irradiation. The phototoxic dosage was 0.2 ?g/mL to both K562 and NIT3H3 cell lines, and 0.45 ?g/mL to the P388 ones. Under irradiation the compound showed ~100 % proliferation arrest against the P388 cell line. These results show that the final products of Quinifuryl photolysis are not responsible for its cytotoxicity. Under irradiation, Quinifuryl produces reactive species, such as singlet oxygen g 1? , superoxide anion ( o- 2 O ), and nitric oxide NO?, which can explain its high photocytotoxicity.

Orientador: Carla Raquel Fontana / Resumo: A doença periodontal é um processo patológico infecto-inflamatório, que pode causar eventual perda do elemento dental. O principal tratamento realizado é a raspagem e alisamento radicular (RAR), que embora seja efetiva, tem como fator limitante a dificuldade técnica de intervir em biofilmes de áreas de difícil acesso. As associações com antibióticos podem ocasionar efeitos colaterais e em bactérias resistentes podem ser ineficazes. Desta forma, a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) surge como uma opção adjuvante, para o tratamento das doenças periodontais. Este trabalho investigou, in vitro, o potencial de redução e desenvolvimento de resistência bacteriana, em um pool clínico resistente ao metronidazol, frente a múltiplos ciclos de TFDa, em fase planctônica e biofilme, utilizando azul de metileno, clorina-e6 e curcumina, como fotossensibilizadores (FS). Para realização dos ciclos de indução de resistência, foi necessário encontrar as condições sub ótimas da TFDa, através da quantificação das colônias formadas por mililitro de amostra (UFC/mL). Os seguintes parâmetros foram encontrados em fase planctônica: 50 µg/mL de azul de metileno e dose de luz de 120 J/cm2 com redução de 1,67 log10, clorina-e6 e curcumina obtiveram reduções de 1,91 log10 e 1,76 log10, respectivamente, com dose de luz de 25 J/cm2 e 100 µg/mL de FS. Posteriormente o pool de bactérias foi sujeito a múltiplas exposições de TFDa, seguido de um período de recuperação, em que células bacterianas sobreviv... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Periodontal disease is an infectious-inflammatory pathological process, which can cause eventual loss of the dental element. The main treatment is scaling and root planing (RAR), which, although effective, has as a limiting factor the technical difficulty of intervening in biofilms of difficult access areas. Associations with antibiotics can cause side effects and in resistant bacteria they may be ineffective. In this way, antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) appears as an adjuvant option for the treatment of periodontal diseases. This study investigated, in vitro, the potential for reduction and development of bacterial resistance in a clinical pool, resistant to metronidazole, against multiple cycles of aPDT in planktonic phase and biofilm using methylene blue, chlorine-e6 and curcumin as photosensitizers (PS). For resistance induction cycles, it was necessary to find the sub optimal conditions of the aPDT, by quantifying the colonies formed per milliliter of sample (CFU/mL). The following parameters were found in the planktonic phase: 50 μg/mL methylene blue and light dose of 120 J/cm2 with a reduction of 1.67 log10, chlorine-e6 and curcumina obtained reductions of 1.91 log10 and 1.76 log10, respectively, with light dose of 25 J/cm2 and 100 μg/mL PS. Subsequently, the pool of bacteria was subjected to multiple exposures of aPDT, followed by a recovery period, in which surviving bacterial cells were resuspended in the same treatment, and so on until resistance developm... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Marilia de Freitas Calmon / Resumo: O câncer cervical é um problema de saúde pública mundial, especialmente devido à sua relação com a infecção prévia pelo papilomavírus humano (HPV). Os HPV são uma família de vírus de DNA com mais de 200 tipos e podem ser classificados em HPVs de baixo e alto risco. Os HPVs de alto risco mais relevantes são os HPV-16 e -18, que juntos são responsáveis por mais de 70% dos casos de carcinoma cervical. As modalidades atuais de tratamento para o câncer cervical são cirurgia, e a combinação de quimioterapia à base de cisplatina com radiação, porém apresentam efeitos adversos graves. Portanto, esforços contínuos são necessários para desenvolver novas drogas e estratégias terapêuticas eficazes para aumentar a eficácia da quimioterapia e diminuir esses efeitos colaterais. A emodina tem atraído grande atenção devido a seu efeito anti-inflamatório, antineoplásico e proapoptótico nos últimos anos. Além disso, a emodina pode ser utilizada como agente fotossensibilizador na terapia fotodinâmica. O interesse na terapia fotodinâmica no tratamento do câncer tem crescido exponencialmente, uma vez que é um tratamento minimamente invasivo, onde se erradica as células alvo, evitando-se a toxicidade sistêmica e os efeitos colaterais nos tecidos saudáveis. Assim, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da emodina associada à terapia fotodinâmica em linhagens de carcinoma cervical infectadas por HPV de alto risco (SiHa e CaSki) e queratinócitos humanos imortalizados (HaCaT). Inicialmente, as i... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cervical cancer is a worldwide public health problem, especially due to its relation to the previous infection by human papillomavirus (HPV). The HPV is a family of DNA viruses with more than 200 types, and can be classified in low and high risk HPVs. The most important high risk HPVs are the HPV-16 and -18, which together are responsible for more than 70% cervical carcinoma cases. Current treatment modalities for cervical cancer are surgery, and the combination of cisplatin based chemotherapy with radiation, however they present severe adverse effects. Therefore, ongoing efforts are necessary to developed new drugs and effective therapeutic strategies to enhance chemotherapeutic efficacy and decrease these side effects. Emodin has attracted extensive attention due to its anti-inflammatory, antineoplastic, and proapoptotic effects in recent years. Furthermore, emodin may be used as a photosensitizing agent in photodynamic therapy. The interest in photodynamic therapy in the treatment of cancer has grown exponentially, since it is a minimally invasive treatment where eradicate target cells while avoiding systemic toxicity and side effects on healthy tissues. So, the aim of this study was to analyze the effect of emodin associated with photodynamic therapy in cervical carcinoma cell lines infected with high-risk HPV (SiHa and CaSki) and immortalized human keratinocytes (HaCaT). Initially, the investigations demonstrated that emodin presented cytotoxicity in concentration and ti... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Fernando Lucas Primo / Resumo: Neste trabalho de mestrado profissional foi possível obter um sistema nanoestruturado polimérico contendo Quinizarina (QZ), um corante fotossensibilizador que emerge como nova alternativa para tratamento antitumoral, utilizando a terapia fotodinâmica (TFD). As nanopartículas foram produzidas em escala, utilizando um método inovador de Nano Spray Dryer as quais foram caracterizadas por diferentes métodos, tais como: Espectroscopia por Absorção e Emissao de Fluorescência na região do Ultra-Violeta Visível (UV-Vis), Espalhamento de Luz dinâmica (DLS) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Através das caracterizações observou-se nanopartículas monodispersas com diâmetro hidrodinâmico reduzido, verificou-se também que as nanopartículas foram preparadas de forma eficiente, o qual obteve-se a encapsulação das partículas QZ camada por camada (layer by layer). As nanopartículas foram preparadas utilizando uma rota de baixo custo e com altissimo rendimento (>70%). Após a completa caracterização do sistema, as nanopartículas foram aplicadas em testes biológicos in vitro utilizando dois tipos de linhagens celulares: a fibroblastóide (NIH-3T3) e cancerígena de origem melanocítica (B16-F10). Realizou-se estudos de biocompatibilidade, internalização utilizando QZ livre e encapsulada (uptake) e microscopia confocal em ambas as linhagens utilizadas e testes de fototoxicidade na linhagem melanocítica. Observou-se através dos estudos de uptake que houve uma maior internalização da quiniza... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In this professional master's work it was possible to obtain a polymeric nanostructured system containing Quinizarin (QZ), a photosensitizing dye that appears as a new alternative for antitumor treatment, using a photodynamic therapy (PDT). The nanoparticles were produced in scale using an innovative Nano Spray Dryer method, and characterized by different methods such as: Absorption Spectroscopy and Fluorescence Emission in the Ultra-Violet and Visible Region (UV-Vis), Dynamic Light Scattering (DLS) and Scanning Electron Microscopy (SEM). Through caracterizations, was observed that the nanoparticles produced where monodispered and small hydrodynamic diameter, the particles where prepared in a efficient way, which encapsulated the QZ particles layer by layer. The nanoparticles were prepared using a low cost, high yield (> 70%) route. After a complete characterization of the system, nanoparticles were applied in in vitro biological tests using two types of cell line: a fibroblast (NIH-3T3) and a melanocytic cancer (B16-F10). Biocompatibility, uptake, using free and encapsulated QZ and confocal microscopy studies were performed in both cell lines, and phototoxicity tests were performed in melanocytic cell line. It was observed through uptake studies that there was a greater internalization of nanostructured quinizarin, due to its high biocompatibility, compared to free quinizarin. The internalization study by confocal microscopy demonstrates that the QZ nanostructured system fun... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Juliana Campos Junqueira / Resumo: A terapia fotodinâmica (TFD) é uma técnica que combina um fotossensibilizador (FS) com luz visível e oxigênio molecular, podendo ser utilizada como agente antimicrobiano no controle de diversas doenças infecciosas, como a cárie dentária. A quitosana vem demonstrando atividade promissora quando associada à alguns fotossensibilizadores. Portanto, o objetivo desse trabalho foi investigar a associação da quitosana com o fotossensibilizador Photodithazine® (PDZ) na TFD sobre culturas planctônicas e biofilmes de S. mutans, bem como avaliar sua eficácia sobre biofilmes microcosmos orais. Inicialmente, foi preparada uma suspensão de S. mutans UA 159 padronizada em 106 células/mL. Para o estudo em culturas planctônicas, foi adicionada a suspensão de S. mutans em placas de 96 poços. Para o estudo em biofilmes, foram confeccionadas amostras de esmalte de dentes bovinos como substrato para a formação do biofilme em placas de 24 poços. As culturas planctônicas e os biofilmes foram tratados de acordo com os grupos experimentais, recebendo adição de PDZ, quitosana ou PBS, seguido pela irradiação ou pela manutenção em ambiente escuro (controle). Os efeitos dos tratamentos foram analisados por meio da contagem de UFC/mL de S. mutans em ágar Infusão Cérebro Coração (BHI) incubadas por 48h a 37°C (5% de CO2) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Além disso, para confirmar a penetração do FS e da quitosana nas células de S. mutans foi realizado teste de absorbância. A seguir, foram estuda... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Hélio Amante Miot / Resumo: Fundamentos: Campo de cancerização cutâneo representa uma área com alterações genômicas induzidas pela radiação ultravioleta, cujo sinal de atividade são as queratoses actínicas (QA). Tratamentos que visem sua estabilização podem reduzir a incidência de QA e de tumores cutâneos não melanoma. Estudos em terapia fotodinâmica com metil aminolevulinato (TFD-MAL) no tratamento do campo de cancerização cutâneo mostram redução de até 89% na contagem de QA, já com colchicina tópica, há redução de até 78%. Até o momento, não há estudos comparando colchicina com TFD-MAL. Esse trabalho objetiva avaliar eficácia e segurança de colchicina 0,5% creme versus TFD-MAL no tratamento do campo de cancerização dos antebraços.Casuística e métodos: Ensaio clínico aberto, controlado, randomizado, envolvendo 36 pacientes do ambulatório de Dermatologia da UNESP-Botucatu, com 3-10 QAs em cada antebraço, tratados (cada antebraço) com creme de colchicina 0,5% (2x/dia por 10 dias) ou uma sessão de TFD-MAL; reavaliados após 60 dias. A avaliação clínica foi realizada pela contagem de QAs, seus subtipos clínicos, sua escala de gravidade e escala de fotoenvelhecimento dos antebraços. Avaliação histopatológica foi realizada pelo escore KIN (Keratinocyte Intraepithelial Neoplasia), atrofia epitelial e imunohistoquímica de p53 e Ki67. Todos os pacientes incluídos no estudo e randomizados fizeram parte da população ITT (intention to treat). Os dados do único dropout foram imputados como LOCF (last observed car... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre