Made available in DSpace on 2014-06-12T15:54:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo7062_1.pdf: 919789 bytes, checksum: 6e872a18799628059bf1e98f37d1d47d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A expansão da floricultura brasileira tem levado à necessidade da produção de uma maior variedade de insumos. Dentre eles, a Heliconia bihai (L.) L. destaca-se por apresentar flores com beleza exótica, atraindo consumidores. Dentre as ferramentas usadas para o melhoramento, a indução de poliploidia in vitro tem sido desenvolvida visando à criação de novas variedades de plantas, produzindo materiais com alterações morfológicas e fisiológicas, de grande interesse para a agricultura. Este trabalho objetivou a produção de indivíduos poliploides in vitro de H. bihai. Para este fim, plântulas de H. bihai foram inoculadas in vitro e transferidas para o meio MS com metade das concentrações dos sais, adicionado de BAP 0,03 mg/L e colchicina em diferentes concentrações (0%; 0,05%; 0,1%; 0,2%), além do acréscimo de 0,75 mL de solução de colchicina na mesma concentração de cada tratamento, por 24 ou 48 h. Em seguida, os explantes foram transferidos para um novo meio de cultura de mesma composição, sem colchicina. Após 30 dias, observou-se que materiais submetidos à colchicina apresentaram desenvolvimento reduzido ou com alterações morfológicas, sendo mais acentuados de acordo com o aumento da concentração e do tempo de exposição ao agente antimitótico. A contagem cromossômica indicou a poliploidização de dois indivíduos (0,05% e 0,1%, ambos por 48 h) em nível tetraploide, sendo observadas também alterações no tamanho e número de estômatos. Os resultados indicam que a indução de poliploides é viável para H. bihai, sendo estabelecidas as concentrações ideais de colchicina de 0,05% e 0,1% por 48 h, de acordo com os resultados obtidos. Palavras-chave: Poliploidização, Colchicina, Heliconiaceae.

A poliploidia induzida é uma ferramenta valiosa para o melhoramento genético de plantas, resultando em genótipos com características superiores aos diploides correspondentes. Considerando a importância da cultura de eucalipto para o setor florestal e para a economia brasileira, o presente trabalho teve como objetivo estabelecer um protocolo de poliploidização in vitro para eucalipto, utilizando a espécie Eucalyptus urophylla ST Blake. Segmentos nodais contendo gemas laterais de plântulas desenvolvidas in vitro foram utilizados como explantes para os testes de indução. Os tratamentos avaliados consistiram na imersão e agitação dos explantes em soluções de colchicina nas concentrações: 0; 0,125% e 0,250% em tempos de exposição de 12 e 24 horas e posterior inoculação in vitro em meio de cultura para multiplicação. Após 60 dias, as brotações emitidas foram analisadas por citometria de fluxo e constatou-se indivíduos diploides, tetraploides e mixoploides. Estas foram micropropagadas para a obtenção de mudas clonais ao final do processo. As mudas obtidas foram avaliadas por meio de análises morfológicas organográficas e anatômicas para verificar possíveis alterações resultantes da poliploidização in vitro. Os tratamentos promoveram a indução de 16 poliploides, sendo 11 mixoploides, quatro tetraploides e um octaplóide. A eficência máxima de indução obtida foi de 28% de poliploides no tratamento com 0,125% de colchicina por 12 horas sob agitação, com a obtenção tanto de mixoploides como de tetraploides puros. O protocolo geral de micropropagação utilizado, apesar de algumas perdas durante as etapas, garantiu a obtenção de altos percentuais de mudas clonais inteiramente tetraploides, comprovando a eficiência da técnica no isolamento de setores poliploides. A análise morfo-anatômica das mudas mostrou diferenças significativas em relação às características estomáticas, apontando este tipo de análise como indicador de poliploidização na separação preliminar dos indivíduos. A estrutura anatômica das folhas, no entanto, não sofreu modificações significativas, com exceção da espessura e área foliar da epiderme adaxial. A análise de componentes principais realizada para algumas variáveis morfo-anatômicas demonstrou que, apesar da análise estatística não ter apontado diferenças significativas, existe uma tendência em agrupar os genótipos diploides e tetraploides, diferenciando-os principalmente em relação às características estomáticas, espessura foliar, área do mesofilo, parênquimas paliçádico e lacunoso e espaço intercelular. Os resultados obtidos neste trabalho instigam a continuidade do estudo em diversas possibilidades de abordagens, como o estudo do desenvolvimento das mudas em condições de campos, anatomia da madeira e avaliação do comportamento meiótico. / The induced polyploidy is a valuable tool for genetic improvement of plants, resulting in genotypes with superior characteristics to their corresponding diploid. Considering the Eucalyptus culture importance to the forest sector and Brazilian economy, the aim of this study was establish an in vitro polyploidy protocol for eucalyptus, using the species Eucalyptus urophylla ST Blake. Nodal segments containing lateral buds developed from in vitro seedlings were used as explants for induction tests. The treatments tested consisted of soak and shake the explants in colchicine solutions at the concentrations: 0; 0.125% and 0.250% in soaking by periods of 12 or 24 hours and subsequent in vitro inoculation in culture medium for multiplication. After 60 days, the emitted shoots were classified by flow cytometry in levels of ploidy (diploid, tetraploid and mixoploids) and were subsequently micropropagated to obtain clonal seedlings at the end of the process. The clonal seedlings were evaluated using morphological and anatomical analysis to check the possible changes resulting from the in vitro polyploidy. The treatments promoted the induction of sixteen polyploids, being eleven mixoploids, four tetraploid and one octaploid. The maximum induction efficiency was obtained in 28% of polyploidy in the treatment with 0.125% of colchicine by soaking period of 12 hours, having obtained both mixoploids and pure tetraploids. The general protocol of micropropagation used, although presenting some losses during the steps, guaranted the inducing of high percentages of enterelly tetraploid, proving the efficiency of micropropagation in the isolation of polyploid sectors. The morpho-anatomical analysis of the poliploidy seedlings showed significant differences in relation to stomatal characteristics, indicating this type of analysis as polyploidy indicator in the preliminary separation of individuals. The anatomical structure of the leaves, however, did not change significantly, except for the thickness and leaf area of the adaxial epidermis. The principal component analysis (PCA) performed for some morphological and anatomical variables demonstrated that despite the statistical analysis did not have pointed out significant differences, there is a tendency to group the diploid and tetraploid genotypes, differentiating them mainly in relation to stomatal characteristics, leaf thickness, mesophyll area, palisade and spongy parenchyma areas and intercellular space. The results of this work instigate to continue the study in several possibilities of approaches, such as the study of the development of seedlings in fields conditions, wood anatomy and study of meiotic behavior.

A poliploidia induzida é uma ferramenta valiosa para o melhoramento genético de plantas, resultando em genótipos com características superiores aos diploides correspondentes. Considerando a importância da cultura de eucalipto para o setor florestal e para a economia brasileira, o presente trabalho teve como objetivo estabelecer um protocolo de poliploidização in vitro para eucalipto, utilizando a espécie Eucalyptus urophylla ST Blake. Segmentos nodais contendo gemas laterais de plântulas desenvolvidas in vitro foram utilizados como explantes para os testes de indução. Os tratamentos avaliados consistiram na imersão e agitação dos explantes em soluções de colchicina nas concentrações: 0; 0,125% e 0,250% em tempos de exposição de 12 e 24 horas e posterior inoculação in vitro em meio de cultura para multiplicação. Após 60 dias, as brotações emitidas foram analisadas por citometria de fluxo e constatou-se indivíduos diploides, tetraploides e mixoploides. Estas foram micropropagadas para a obtenção de mudas clonais ao final do processo. As mudas obtidas foram avaliadas por meio de análises morfológicas organográficas e anatômicas para verificar possíveis alterações resultantes da poliploidização in vitro. Os tratamentos promoveram a indução de 16 poliploides, sendo 11 mixoploides, quatro tetraploides e um octaplóide. A eficência máxima de indução obtida foi de 28% de poliploides no tratamento com 0,125% de colchicina por 12 horas sob agitação, com a obtenção tanto de mixoploides como de tetraploides puros. O protocolo geral de micropropagação utilizado, apesar de algumas perdas durante as etapas, garantiu a obtenção de altos percentuais de mudas clonais inteiramente tetraploides, comprovando a eficiência da técnica no isolamento de setores poliploides. A análise morfo-anatômica das mudas mostrou diferenças significativas em relação às características estomáticas, apontando este tipo de análise como indicador de poliploidização na separação preliminar dos indivíduos. A estrutura anatômica das folhas, no entanto, não sofreu modificações significativas, com exceção da espessura e área foliar da epiderme adaxial. A análise de componentes principais realizada para algumas variáveis morfo-anatômicas demonstrou que, apesar da análise estatística não ter apontado diferenças significativas, existe uma tendência em agrupar os genótipos diploides e tetraploides, diferenciando-os principalmente em relação às características estomáticas, espessura foliar, área do mesofilo, parênquimas paliçádico e lacunoso e espaço intercelular. Os resultados obtidos neste trabalho instigam a continuidade do estudo em diversas possibilidades de abordagens, como o estudo do desenvolvimento das mudas em condições de campos, anatomia da madeira e avaliação do comportamento meiótico. / The induced polyploidy is a valuable tool for genetic improvement of plants, resulting in genotypes with superior characteristics to their corresponding diploid. Considering the Eucalyptus culture importance to the forest sector and Brazilian economy, the aim of this study was establish an in vitro polyploidy protocol for eucalyptus, using the species Eucalyptus urophylla ST Blake. Nodal segments containing lateral buds developed from in vitro seedlings were used as explants for induction tests. The treatments tested consisted of soak and shake the explants in colchicine solutions at the concentrations: 0; 0.125% and 0.250% in soaking by periods of 12 or 24 hours and subsequent in vitro inoculation in culture medium for multiplication. After 60 days, the emitted shoots were classified by flow cytometry in levels of ploidy (diploid, tetraploid and mixoploids) and were subsequently micropropagated to obtain clonal seedlings at the end of the process. The clonal seedlings were evaluated using morphological and anatomical analysis to check the possible changes resulting from the in vitro polyploidy. The treatments promoted the induction of sixteen polyploids, being eleven mixoploids, four tetraploid and one octaploid. The maximum induction efficiency was obtained in 28% of polyploidy in the treatment with 0.125% of colchicine by soaking period of 12 hours, having obtained both mixoploids and pure tetraploids. The general protocol of micropropagation used, although presenting some losses during the steps, guaranted the inducing of high percentages of enterelly tetraploid, proving the efficiency of micropropagation in the isolation of polyploid sectors. The morpho-anatomical analysis of the poliploidy seedlings showed significant differences in relation to stomatal characteristics, indicating this type of analysis as polyploidy indicator in the preliminary separation of individuals. The anatomical structure of the leaves, however, did not change significantly, except for the thickness and leaf area of the adaxial epidermis. The principal component analysis (PCA) performed for some morphological and anatomical variables demonstrated that despite the statistical analysis did not have pointed out significant differences, there is a tendency to group the diploid and tetraploid genotypes, differentiating them mainly in relation to stomatal characteristics, leaf thickness, mesophyll area, palisade and spongy parenchyma areas and intercellular space. The results of this work instigate to continue the study in several possibilities of approaches, such as the study of the development of seedlings in fields conditions, wood anatomy and study of meiotic behavior.

Los bencimidazoles se usan como antihelmínticos, antinématodos y antiprotozoos. La colchicina es un alcaloíde tricíclico de orígen natural. Se ha usado en el tratamiento de gota, reumatismo y fiebre mediterránea. Recientemente, su actividad antitumoral ha generado expectativas en la investigación del cáncer. La actividad antitumoral de ambos tipos de compuestos se atribuye a su capacidad de influír en la polimerización de la tubulina y como consecuencia en el proceso de mitosis. El mecanismo preciso de acción no es conocido. Por esta razón proponemos utilizar la fotólisis de destello láser (FDL) para estudiar las interacciones entre los agentes antimitóticos en estado excitado con las proteínas y las ciclodextrinas. La FDL es una técnica relativamente novedosa y con muchas ventajas. En general, se conoce poco sobre los estados excitados singlete, mientras que los estados excitados triplete no han sido descritos. La fase preliminar ha consistido en la caracterización fotofísica y fotoquímicas de los compuestos cuyas propiedades no han sido estudiadas con anterioridad. Así, se han caracterizado el estado excitado triplete del 2-aminobencimidazol, del tiabendazol y de las lumicolchicinas (por generación in situ a través de la isomerización de la colchicina). Además, para el 2-aminobencimidazol, se ha identificado el radical aminilo, cuya formación ha sido utilizada como sonda en estudios mecanísticos llevados a cabo sobre la reactividad entre el triplete de distintas cetonas aromáticas y el 2-aminobencimidazol. Se ha valorado el uso de las especies transitorias de estos fármacos como sondas en el estudio de interacción con biomoléculas y ciclodextrinas. Así, se han estudiado las interacciones del triplete del tiabendazol con ciclodextrinas de distinto tamaño. / Bartovsky ., P. (2011). Caracterización fotofísica de compuestos con actividad antitumoral [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/11798 / Palancia

A citricultura brasileira destaca-se como a de maior expressão em nível mundial, com cerca de 27,9% da produção mundial de laranjas e 59% da produção global de suco concentrado congelado de laranja. No entanto, apresenta uma vulnerabilidade que é o predomínio de uma única espécie de porta-enxerto, o limão \'Cravo\', com aproximadamente 85% das plantas cítricas plantadas sobre ele. Assim, uma maior diversificação dos porta-enxertos é necessária mas isto depende também da obtenção e da disponibilização de variedades superiores ao limão Cravo. O porta-enxerto é de fundamental importância na formação da muda cítrica, visto que ele interfere em vários aspectos da planta enxertada, dentre eles o vigor da copa e o tamanho das plantas. Atualmente, devido ao surgimento de novas doenças e a necessidade de maximização dos recursos alocados na propriedade citrícola, tem sido utilizado o plantio de pomares mais adensados, com consequentemente aumento no interesse da produção de plantas com menor porte. Uma das possibilidades de se obter plantas de porte baixo é por meio do uso de portaenxertos ananicantes ou semi-ananicantes, sendo que alguns autores já verificaram que plantas autotetraplóides, quando usadas como porta-enxertos, induzem à formação de plantas de porte baixo. O objetivo inicial deste trabalho foi obter e identificar plantas autopoliplóides de limão Cravo, tangerinas Cleópatra e Sunki, utilizando-se o método de cultivo in vitro de segmentos de epicótilo temporariamente em meio de cultura contendo colchicina, seguido de regeneração das brotações em meio sem o alcalóide. A colchicina causou toxidez aos explantes, nos diversos tempos de cultivo e concentrações testadas. Várias plantas foram obtidas e dentre estas, 27 foram selecionadas por possuir características morfológicas semelhantes à plantas poliplóides. A seguir, foram realizados experimentos com seis plantas selecionadas (duas de cada espécie) visando confirmar a ploidia e a origem nucelar, além de caracterizar a morfologia das folhas, a densidade estomática e alguns parâmetros fisiológicos. Dentre as seis plantas, apenas quatro foram confirmadas como sendo autotetraplóides pelo método de citometria de fluxo. Estas, geralmente apresentaram folhas com comprimento significativamente menor, maior espessura do limbo foliar e menor densidade estomática nas folhas. Todas as seis plantas apresentaram alguma modificação em parâmetros fisiológicos, mas ainda não se pode determinar se estas modificações poderão afetar as taxas de crescimento. / The Brazilian citriculture stands out as the greatest expression worldwide, with about 27.9% of world production of oranges and 59% of global production of frozen orange juice concentrate. However, it presents a vulnerability that is the predominance of a single species of rootstock, the \'Cravo\' lemon, with approximately 85% of citrus planted on it. Thus, greater diversification of rootstocks is necessary, which also depends on obtaining and provision of superior kind of lemon Cravo. The rootstock is of fundamental importance in shaping the citrus scion, since it interferes with various aspects of graft, such as the vigour of the graft and plant size. Currently, due the appearance of new diseases and the need to maximize resources allocated in the citrus farm, more dense citrus orchards have been used, increasing the interest in the production of smaller plants. One of the possibilities of obtaining plants of small size is through the use of dwarf or semi-dwarf rootstocks, and some authors have found that plants autotetraploids, when used as rootstock, induce the formation of small-sized plants. The initial objective of this study was to obtain and identify plants autopoliploids of \'Cravo\' lemon, \'Cleopatra\' and \'Sunki\' tangerines, using the method of in vitro culture of segments of epicotyl temporarily in the culture medium containing colchicine, followed by shoots regeneration in medium without the alkaloid. The colchicine caused toxicity in explants, at the different times of cultivation and concentrations tested. Several plants were obtained and among these, 27 were selected for morphological characteristics similar to polyploid plants. Afterwards, trials were conducted with six selected plants (two of each kind) to confirm the nucelar ploidy origin, and to characterize the morphology of the leaves, stomatal density and some physiological parameters. Among the six plants, only four were confirmed as autotetraploids by method of flow cytometry. These, generally presented leaves with small length, greater thickness of the leaf lamina and lower stomatal density in leaves. All six plants showed some change in physiological parameters, but data could not determine whether these changes could affect the plants growth rates

A poliploidia teve importante papel no melhoramento de muitas espécies de plantas, principalmente nos cereais, incluindo híbridos intergenéricos. O processo de poliploidização, geralmente, produz novos e desejáveis fenótipos ou fornece suporte para cruzamentos de plantas em programas de melhoramento. Esse trabalho apresenta o resultado da indução de poliploidia em duas cultivares de mandioca (\'Porquinho\' e \'Vassourinha\') que foram tratadas com diferentes concentrações de colchicina (0,05%, 0,10% e 0,15%), em meio de cultura, durante 48 e 96 horas. As plantas regeneradas foram analisadas citologicamente por citometria de fluxo e pela contagem do número de cromossomos. Adicionalmente, análises do tamanho e da frequência dos estômatos foram realizadas e o resultado comprovou que podem ser utilizadas como screening das plantas tratadas. O tratamento com 0,1% de colchicina, em meio de cultura, durante 96 horas apresentou maior número de plantas tetraplóides produzidas sobre o número de plantas regeneradas nas duas cultivares avaliadas. Não há diferenças entre as doses de colchicina e tempos de exposição a droga no número de tetraplóides encontrados em cada tratamento. Entretanto, foi possível verificar que existe diferença significativa na produção de tetraplóides entre as cultivares analisadas, indicando que pode haver uma resposta genética à indução da duplicação dos cromossomos com colchicina. / The polyploidy played an important role in the improvement of many species of plants, especially in cereals including intergeneric hybrids. The process of polyploidy usually produces new and desirable phenotypes or provides support for crosses of plants in breeding programs. This research work reports the result of polyploidy induction in two cassava cultivars (\'Porquinho\' and \'Vassourinha\') by different colchicine concentrations (0.05 %, 0.10 % and 0.15 %) in culture medium exposed for 48 or 96 hours. Regenerated plants were examined cytologically by flow cytometry and chromosome counting. Additionally, analysis of the size and frequency of stomata were performed and the results showed that can be used for screening of the treated plants. Treatment with 0.1% colchicine in the culture medium for 96 hours showed a higher number of tetraploid plants produced about the number of regenerated plants in both cultivars evaluated. No significant differences among colchicine doses and duration times treatment were found in the number of tetraploids found in each treatment. However, we observed a significant difference in tetraploid production between the cultivars analyzed, indicating that there may be a genetic response to induction of chromosome doubling with colchicine.

A poliploidia teve importante papel no melhoramento de muitas espécies de plantas, principalmente nos cereais, incluindo híbridos intergenéricos. O processo de poliploidização, geralmente, produz novos e desejáveis fenótipos ou fornece suporte para cruzamentos de plantas em programas de melhoramento. Esse trabalho apresenta o resultado da indução de poliploidia em duas cultivares de mandioca (\'Porquinho\' e \'Vassourinha\') que foram tratadas com diferentes concentrações de colchicina (0,05%, 0,10% e 0,15%), em meio de cultura, durante 48 e 96 horas. As plantas regeneradas foram analisadas citologicamente por citometria de fluxo e pela contagem do número de cromossomos. Adicionalmente, análises do tamanho e da frequência dos estômatos foram realizadas e o resultado comprovou que podem ser utilizadas como screening das plantas tratadas. O tratamento com 0,1% de colchicina, em meio de cultura, durante 96 horas apresentou maior número de plantas tetraplóides produzidas sobre o número de plantas regeneradas nas duas cultivares avaliadas. Não há diferenças entre as doses de colchicina e tempos de exposição a droga no número de tetraplóides encontrados em cada tratamento. Entretanto, foi possível verificar que existe diferença significativa na produção de tetraplóides entre as cultivares analisadas, indicando que pode haver uma resposta genética à indução da duplicação dos cromossomos com colchicina. / The polyploidy played an important role in the improvement of many species of plants, especially in cereals including intergeneric hybrids. The process of polyploidy usually produces new and desirable phenotypes or provides support for crosses of plants in breeding programs. This research work reports the result of polyploidy induction in two cassava cultivars (\'Porquinho\' and \'Vassourinha\') by different colchicine concentrations (0.05 %, 0.10 % and 0.15 %) in culture medium exposed for 48 or 96 hours. Regenerated plants were examined cytologically by flow cytometry and chromosome counting. Additionally, analysis of the size and frequency of stomata were performed and the results showed that can be used for screening of the treated plants. Treatment with 0.1% colchicine in the culture medium for 96 hours showed a higher number of tetraploid plants produced about the number of regenerated plants in both cultivars evaluated. No significant differences among colchicine doses and duration times treatment were found in the number of tetraploids found in each treatment. However, we observed a significant difference in tetraploid production between the cultivars analyzed, indicating that there may be a genetic response to induction of chromosome doubling with colchicine.

A citricultura brasileira destaca-se como a de maior expressão em nível mundial, com cerca de 27,9% da produção mundial de laranjas e 59% da produção global de suco concentrado congelado de laranja. No entanto, apresenta uma vulnerabilidade que é o predomínio de uma única espécie de porta-enxerto, o limão \'Cravo\', com aproximadamente 85% das plantas cítricas plantadas sobre ele. Assim, uma maior diversificação dos porta-enxertos é necessária mas isto depende também da obtenção e da disponibilização de variedades superiores ao limão Cravo. O porta-enxerto é de fundamental importância na formação da muda cítrica, visto que ele interfere em vários aspectos da planta enxertada, dentre eles o vigor da copa e o tamanho das plantas. Atualmente, devido ao surgimento de novas doenças e a necessidade de maximização dos recursos alocados na propriedade citrícola, tem sido utilizado o plantio de pomares mais adensados, com consequentemente aumento no interesse da produção de plantas com menor porte. Uma das possibilidades de se obter plantas de porte baixo é por meio do uso de portaenxertos ananicantes ou semi-ananicantes, sendo que alguns autores já verificaram que plantas autotetraplóides, quando usadas como porta-enxertos, induzem à formação de plantas de porte baixo. O objetivo inicial deste trabalho foi obter e identificar plantas autopoliplóides de limão Cravo, tangerinas Cleópatra e Sunki, utilizando-se o método de cultivo in vitro de segmentos de epicótilo temporariamente em meio de cultura contendo colchicina, seguido de regeneração das brotações em meio sem o alcalóide. A colchicina causou toxidez aos explantes, nos diversos tempos de cultivo e concentrações testadas. Várias plantas foram obtidas e dentre estas, 27 foram selecionadas por possuir características morfológicas semelhantes à plantas poliplóides. A seguir, foram realizados experimentos com seis plantas selecionadas (duas de cada espécie) visando confirmar a ploidia e a origem nucelar, além de caracterizar a morfologia das folhas, a densidade estomática e alguns parâmetros fisiológicos. Dentre as seis plantas, apenas quatro foram confirmadas como sendo autotetraplóides pelo método de citometria de fluxo. Estas, geralmente apresentaram folhas com comprimento significativamente menor, maior espessura do limbo foliar e menor densidade estomática nas folhas. Todas as seis plantas apresentaram alguma modificação em parâmetros fisiológicos, mas ainda não se pode determinar se estas modificações poderão afetar as taxas de crescimento. / The Brazilian citriculture stands out as the greatest expression worldwide, with about 27.9% of world production of oranges and 59% of global production of frozen orange juice concentrate. However, it presents a vulnerability that is the predominance of a single species of rootstock, the \'Cravo\' lemon, with approximately 85% of citrus planted on it. Thus, greater diversification of rootstocks is necessary, which also depends on obtaining and provision of superior kind of lemon Cravo. The rootstock is of fundamental importance in shaping the citrus scion, since it interferes with various aspects of graft, such as the vigour of the graft and plant size. Currently, due the appearance of new diseases and the need to maximize resources allocated in the citrus farm, more dense citrus orchards have been used, increasing the interest in the production of smaller plants. One of the possibilities of obtaining plants of small size is through the use of dwarf or semi-dwarf rootstocks, and some authors have found that plants autotetraploids, when used as rootstock, induce the formation of small-sized plants. The initial objective of this study was to obtain and identify plants autopoliploids of \'Cravo\' lemon, \'Cleopatra\' and \'Sunki\' tangerines, using the method of in vitro culture of segments of epicotyl temporarily in the culture medium containing colchicine, followed by shoots regeneration in medium without the alkaloid. The colchicine caused toxicity in explants, at the different times of cultivation and concentrations tested. Several plants were obtained and among these, 27 were selected for morphological characteristics similar to polyploid plants. Afterwards, trials were conducted with six selected plants (two of each kind) to confirm the nucelar ploidy origin, and to characterize the morphology of the leaves, stomatal density and some physiological parameters. Among the six plants, only four were confirmed as autotetraploids by method of flow cytometry. These, generally presented leaves with small length, greater thickness of the leaf lamina and lower stomatal density in leaves. All six plants showed some change in physiological parameters, but data could not determine whether these changes could affect the plants growth rates

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-04-18T11:03:26Z No. of bitstreams: 1 christianedovalleribeiro.pdf: 1049142 bytes, checksum: 98e994d5887430998d905b84484671d5 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-04-24T03:08:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 christianedovalleribeiro.pdf: 1049142 bytes, checksum: 98e994d5887430998d905b84484671d5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-24T03:08:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 christianedovalleribeiro.pdf: 1049142 bytes, checksum: 98e994d5887430998d905b84484671d5 (MD5) Previous issue date: 2015-07-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Lippia alba é uma planta medicinal que pertence à família Verbenaceae e é conhecida popularmente como erva cidreira. A espécie possui duas características que merecem destaque, é rica em óleos essenciais de interesse econômico e apresenta-se como um complexo poliploide, com números cromossômicos de 2n= 30, 38, 45, 60 e 90. Dessa maneira, L. alba é uma espécie interessante, tanto para a ciência aplicada, quanto para a ciência básica. Este trabalho teve como objetivo produzir plantas poliploides artificiais de L. alba para serem utilizadas em futuros estudos de melhoramento e evolução. Foi utilizado o acesso BGEN02 (2n=2x=30) para a produção de plantas autotetraploides (2n=4x=60). As plantas foram propagadas em meio de cultura MS livre de hormônios e a exposição à colchicina foi realizada misturando-a ao meio MS e inoculando os segmentos nodais. As plantas foram lavadas 3 vezes em água destilada e reinoculadas em meio MS livre de colchicina para posterior análise de nível de ploidia por citometria de fluxo. Foram realizados três experimentos de indução de poliploidia: experimento 1, experimento 2 e experimento 3. Nos dois primeiros, a análise de ploidia foi feita após a organogênese do explante (40 DAI) e no terceiro, a citometria de fluxo foi feita imediatamente após a exposição à colchicina, em curtos intervalos de tempo, para monitorar as alterações de ploidia nesse período. No experimento 1, foram utilizadas diversas concentrações de colchicina, para obter informações sobre as melhores concentrações para realizar os experimentos seguintes. A concentração de melhor resultado (0,2%) juntamente com uma concentração 10 vezes menor (0,02%) foram utilizadas no experimento 2 de indução de poliploidia, para comparar efeitos de baixa e alta concentração. Essas duas concentrações foram utilizadas também no experimento 3, no qual se utilizou dos percentuais de células em 4C e 8C para inferir a ploidia. Poliploides com aproximadamente 6 cm de comprimento foram aclimatizados utilizando substrato para plantio BioPlant ®. No experimento 1, as análises por citometria de fluxo revelaram poliploides nas concentrações de 0,2% e 0,5%, sendo que a primeira produziu maior número de plantas com ploidia alterada. Embora os tratamentos mais fortes tenham causado maior alteração de ploidia, os mesmos causaram maior mortalidade. Com os resultados do experimento 3, foi possível concluir que a concentração 0,2% aumentou os percentuais de células em 4C e 8C, ou seja, produziu células poliploides. Esse resultado corrobora os achados nos experimentos 1 e 2, em que o tratamento de 0,2% foi o que mais produziu plantas poliploides e mixoploides. Portanto, conclui-se que (1) o presente estudo obteve êxito em induzir autotetraploides artificiais de L. alba utilizando a colchicina e as técnicas de cultura de tecidos vegetais in vitro; (2) que as concentrações de 0,2% e 0,5% de colchicina foram capazes de produzir plantas autotetraploides nessa espécie e (3) que as concentrações altas apresentaram maior efeito de alteração de ploidia nos explantes de L. alba. / L. alba is an important medicinal plant that belongs to the family Verbenaceae and is popularly known as falsa melissa or erva cidreira. This species has two features that are very important, it is rich in essential oils of economic interest and is a polyploid complex, with chromosome numbers 2n= 30, 38, 45, 60 and 90. Thus, L. alba is an interesting species, for both the applied and basics research, for plant breeding (improving essential oils) and for evolutionary studies. The aim of this work was to induce artificial polyploid L. alba plants for improvement and evolutionary studies. Biological material was constituted by an accession of L. alba (BGEN02 2n=2x=30). This accession was employed to produce autotetraploid plants (2n=4x=60). Plants were propagated by in vitro tissue culture in MS hormone free culture medium. For the colchicine treatment, colchicine solution was mixed with MS medium and the nodal segments were inoculated. The explants were washed three times in distilled water and inoculated in MS medium colchicine free to after ploidy analysis by flow cytometry. Three polyploidy induction experiments were made: experiment 1, experiment 2 and experiment 3. In 1 and 2 experiments the ploidy analysis were made after explant organogenesis (40 DAI) and in experiment 3, flow cytometry was made immediately after colchicine exposure at short time intervals to monitoring the ploidy changes in this initial period. In experiment 1, several colchicine concentrations were used to obtaining information about the best concentrations to perform following experiments. The best result was obtained by 0,2%. This concentration and a ten times low concentration (0,02%) were used in experiment 2, to compare the effects of high and low concentrations. These two colchicne concentrations were used also in experiment 3 in which 4C and 8C percentiles were used to inferring the ploidy level. Polyploids with a length of approximately 6 cm were acclimatized in substrate for planting BioPlant®. In experiment 1, the ploidy analysis by flow cytometry of polyploidy induction experiments revealed polyploids in treatments with colchicine at concentrations of 0.2% and 0.5%, and the concentration that produced a greater number of plants with altered ploidy was 0.2%.Although the strongest treatments caused more ploidy changes, they caused higher mortality too. From the results of experiment 3, we concluded that 0.2% concentration caused increasing in the percentage of cells in 4C and 8C, which means polyploidy. This result corroborates the findings in experiment 1 and 2, in which the treatment of 0.2% produced more polyploids and mixoploids plants. Therefore, it is concluded that (1) this study was successful in inducing L. alba artificial autotetraploids using colchicine and the plant tissue culture techniques; (2) the concentrations of 0.2% and 0.5% colchicine were able to produce autotetraploids plants of this species, and (3) the high concentrations exhibited higher ploidy change effect on the explants L. alba than the low concentrations.

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-04-13T18:27:12Z No. of bitstreams: 1 ADRIANA DA COSTA BRAZ - DISSERTAÇÃO PPG-CEMat 2014..pdf: 2523605 bytes, checksum: 90e198ea98d95b535e91044abaf7e15f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-13T18:27:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ADRIANA DA COSTA BRAZ - DISSERTAÇÃO PPG-CEMat 2014..pdf: 2523605 bytes, checksum: 90e198ea98d95b535e91044abaf7e15f (MD5) Previous issue date: 2014-12-12 / O Carcinoma basocelular é o câncer mais comum do mundo, e apesar da sua evolução muitas vezes benigna, com altas taxas de cura, algumas vezes nos deparamos com casos mais agressivos, invasivos, destrutivos e de difícil controle. É sabido que já houve avanços terapêuticos para estes casos específicos, a exemplo do Vismodegib, entretanto o uso desta droga ainda é uma realidade distante para nossos pacientes brasileiros que se expõe a índices elevados de radiações solares, na maioria trabalhadores rurais de baixa renda e com grande dificuldade a acessibilidade ao sistema público de saúde. Por isso, o presente trabalho sugere uma alternativa para o controle das formas graves do carcinoma basocelular, através da produção de um filme de quitosana dopado de colchicina substância sabidamente antimitótica e com evidência clínica já citada na literatura no carcinoma basocelular, por via transdérmica por liberação controlada da droga que permita mantê-la em um nível sérico contínuo, suficiente para sua ação antimitótica, causando morte seletiva das células tumorais, diminuindo ou extirpando esses tumores, com custos mais acessíveis, pois é uma droga de baixo custo, melhorando consequentemente a morbidade da doença e a qualidade de vida destes pacientes. E os resultados obtidos através das caracterizações apresentaram membranas com variações de cristalinidade (por DRX) de acordo com o processo de reticulação. Por FTIR pode-se observar certa interação entre o fármaco e os grupos amina da quitosana. Pelas microscopias ótica e eletrônica, pode-se observar que o acréscimo de fármaco proporcionou alguma rugosidade a membrana. Também pelas microscopias verificou-se a reticulação não homogênea da superfície da membrana. Por EDS não se verificou nenhum elemento estranho a estrutura da quitosana e do fármaco. Por medida do ângulo de molhabilidade pode-se verificar aumento do perfil hidrofílico da membrana por adição do fármaco, perfil este que foi modificado pelo processo de reticulação. A partir do ensaio de citotoxicidade pode-se constatar que a membrana apresenta certa citotoxicidade. Este resultado demonstra também o potencial da membrana de quitosana em liberar o fármaco, considerando que a membrana apenas de quitosana não apresenta toxicidade em meio biológico, sendo a toxicidade observada no ensaio decorrente do fármaco liberado. / Basal cell carcinoma is the most common cancer in the world, and despite its evolution often benign, with high cure rates, sometimes we are faced with more aggressive, invasive cases, destructive and difficult to control. It is known that there have been advances in treatment for these specific cases, such as the Vismodegib, however this drug is still a distant reality for our Brazilian patients who are exposed to high levels of solar radiation in most rural workers from low-income, great difficulty accessibility to the public health system. Therefore, this study suggests an alternative for the control of severe forms of basal cell carcinoma, through the production of a chitosan film doped colchicine known antimitotic substance and with clinical evidence already mentioned in the literature in basal cell carcinoma, transdermally for release controlled drug that allows keep at a steady serum level, enough for their antimitotic, causing selective killing of tumor cells, reducing or extirpating these tumors, with more affordable because it is an inexpensive drug, consequently improving morbidity the disease and the quality of life of these patients. And the results obtained from the characterization showed membranes crystallinity variations (XRD) according to the crosslinking process. By FTIR one can observe some interaction between the drug and amino groups of chitosan. Through optical and electronic microscopy, it can be seen that addition of drug has provided some roughness to the membrane. Also by microscopy verified the inhomogeneous crosslinking of the membrane surface. EDS there was no foreign object the structure of chitosan and the drug. By measuring the wetting angle can be checked increase the hydrophilic profile of the drug by adding the membrane, this profile has been modified by the crosslinking process. From the cytotoxicity assay can be seen that the membrane has some cytotoxicity. This result also demonstrates the potential of chitosan membrane to release the drug, whereas only chitosan membrane shows no toxicity in biological medium, with the toxicity observed in this trial due to the released drug.