Orientador: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Banca: Juliano Milanezi de Almeida / Banca: Marinella Holzhausen Caldeira / Resumo:A Terapia Fotodinâmica (TFD) tem mostrado resultados satisfatórios quando associada ao tratamento mecânico de doenças periodontais. O objetivo deste trabalho foi avaliar se a TFD com o fotossensibilizador hipericina-glucamina, ativado por LED âmbar (34,10 J/cm2) e associada à raspagem e alisamento radicular (RAR), promove melhor reparo da doença periodontal induzida experimentalmente em ratos. Para indução da DP foram instaladas ligaduras no sulco de um dos segundos molares superiores, escolhido randomicamente. Após 15 dias as ligaduras foram removidas e os animais aleatoriamente distribuídos entre 4 grupos experimentais (n =5): Grupo IDP (Indução da Doença Periodontal); Grupo RAR; Grupo TFD; Grupo RAR+TFD. Após 7, 15 e 30 dias da aplicação do tratamento os animais foram eutanasiados. As hemimaxilas foram submetidas a Microtomografia digital e avaliações histométricas. Os dados foram avaliados pelo teste de normalidade de Shapiro-Wilk. Os grupos foram avaliados entre si e os dados paramétricos foram avaliados pelo teste ANOVA. Todos os testes foram aplicados com p<0,05. Não foram encontradas diferenças estatísticas entre os grupos avaliados. Concluímos que a TFD como adjunta à RAR ou isolada obteve resultados semelhantes à raspagem e alisamento radicular. / Abstract:The Photodynamic Therapy (TFD) has shown satisfactory results when coupled with mechanical treatment of periodontal diseases. The aim of this work was to evaluate whether PDT with the photosensitizer hypericin-glucamine, enabled by amber LED (34.10 J/cm2) and combined with scaling and root planning (RAR), promotes better repair of the periodontal disease induced experimentally in rats. The periodontal diseases was installed by randomly inserting ligatures in the grooves of the superior second molars. The bandages were removed after 15 days and the animals were randomized into 4 experimental groups (n = 5): IPD group (Induced Periodontal Disease); RAR group; TFD group; and RAR+TDF group. The animals were sacrificed after 7, 15 and 30 days of the performed treatment. Digital microtomography and histometric analyses were carried out on their hemimaxillas. Shapiro-Wilk normality test was applied to data. The groups were assessed among each other and parametric data were evaluated using ANOVA test. All tests were conducted with p<0.05. Statistical differences were not observed among the groups. Therefore, we concluded that TFD combined with RAR or isolated obtained similar results to scaling and root planning. / Mestre

Orientador: Ana Claúdia Pavarina / Banca: Gilberto Ubida Leite Braga / Banca: Ewerton Garcia de Oliveira Mima / Resumo: Este estudo avaliou os efeitos da Terapia Fotodinâmica (PDT), mediada pelo Photodithazine® (PDZ) e luz LED, sobre Candida albicans resistente a fluconazol em um modelo de candidose oral induzida. Para isso, camundongos fêmeas de 6 semanas foram imunussuprimidos e inoculados com C. albicans (107 células/mL). Em seguida, aplicou-se 100 mg/L de PDZ (diluído em salina ou hidrogel) na cavidade bucal por 20 min e o dorso lingual foi iluminado (37,5 J/cm² dose de luz). Animais adicionais foram tratados somente com LED ou PDZ. O grupo controle positivo não recebeu nenhum tratamento e, adicionalmente, animais saudáveis receberam tratamento com PDT (n=5). Em seguida, foi feita a recuperação do micro-organismo da língua dos animais. O número de colônias viáveis foi quantificado e os valores de UFC/mL foram determinados. Os animais foram sacrificados e as línguas foram removidas cirurgicamente para análise histológica. Duas colônias de cada animal foram isoladas da placa de cultura para avaliação dos fatores de virulência: adesão e formação de biofilme em superfície abiótica, formas filamentares de crescimento e produção de exoenzimas. Os dados foram analizados por ANOVA (P < 0,05). Os resultados demonstraram que a PDT resultou em redução significativa de C. albicans resistente a fluconazol (1,91 e 1,96 log10) em relação ao grupo controle positivo. Somente a aplicação da luz ou PDZ não reduziu a viabilidade celular. A PDT não ocasionou efeitos adversos no tecido lingual dos animais e reduziu apenas a produção de fosfolipase. A PDT foi efetiva na inativação da C. albicans resistente a fluconazol, sem causar efeitos adversos no tecido lingual. / Abstract: This study evaluated the effects of Photodynamic Therapy (PDT), mediated by Photodithazine® (PDZ) and LED light, on fluconazole-resistant Candida albicans in a murine model of oral candidosis. For this, six-week-old female mice were immunosuppressed and inoculated with C. albicans (107 células/mL). Then, 100 mg/L of PDZ (diluted in saline or hydrogel) was applied on the oral cavity for 20 min and the dorsum of the tongue was illuminated (37.5 J/cm2 of fluence). The use of PDZ or light only was also investigated. Additionally, healthy animals received treatment with PDT. Positive control animals did not receive any treatment and negative control animals were not inoculated (n=5). After treatment the dorsum of the tongue was swabbed to recover C. albicans. The yeast colony counts were quantified and the number of CFU/mL was determined. The animals were killed and the tongues were surgically removed for histological analysis. Two yeast colony of each group were isolated from the culture plate for the evaluation of virulence factors: adhesion and biofilm formation in abiotic surface, filamentous forms of growth and production of exoenzymes. Data were analyzed by ANOVA (P < 0.05). PDT resulted in a significant reduction of fluconazole-resistant C. albicans (1.91 e 1.96 log10). The application of PDZ or LED only did not reduce the cell viability. PDT did not cause adverse effects in the local mucosa and it was able to reduce only phospholipase production. PDT was effective in the inactivation of fluconazole-resistant C. albicans without harming the tongue tissue. / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Nanociências e Nanobiotecnologia, 2014. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2014-10-15T15:34:23Z No. of bitstreams: 1 2014_MosarCorreaRodrigues.pdf: 5058878 bytes, checksum: ac09311e30d09952917525297a0f169f (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2014-10-17T12:35:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_MosarCorreaRodrigues.pdf: 5058878 bytes, checksum: ac09311e30d09952917525297a0f169f (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-17T12:35:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_MosarCorreaRodrigues.pdf: 5058878 bytes, checksum: ac09311e30d09952917525297a0f169f (MD5) / O câncer de mama é o segundo tipo de câncer mais incidente no mundo, acometendo uma a cada oito mulheres. Os tratamentos utilizados atualmente para o câncer de mama não apresentam o índice terapêutico desejado e, diante disso, a emergente terapia fotodinâmica (TFD) vem despertando bastante atenção no tratamento de neoplasias. Fundamentada em três componentes básicos, luz no comprimento de onda específico, fotossensibilizante (FS) e oxigênio, a TFD é considerada bastante segura e eficaz. Uma das limitações da TFD está relacionada à natureza hidrofóbica apresentada pela maioria dos FS. Nesse sentido, o presente estudo teve como objetivo analisar a utilização de dois agentes fotossensibilizantes: extrato de crajiru (ECr) e o cloreto de alumínio-ftalocianina (AlFtCl), associados em duas nanoemulsões independentes, como mediadores da TFD aplicados em ensaios celulares de tumor de mama 2D e 3D. As nanoformulações obtidas (NE-ECr/NE-AlFtCl) apresentaram diâmetro hidrodinâmico de cerca de 30 nm, foram monodispersas e com carga de superfície levemente negativa. As NE-ECr apresentou pico de absorção de λ=668 nm e emissão de fluorescência (excitação em 350 nm) de λ=676. A NE-AlFtCl apresentou pico de absorção de λ=676 nm e emissão de fluorescência (excitação em 350 nm) de λ=680. Ademais, as duas nanoformulações apresentaram excelente capacidade de produzir espécies reativas de oxigênio (ERO). Foi conferida também uma excelente estabilidade nas condições a 4 °C e a ~25°C, sendo possível preservar as propriedades fotofísicas e fisicoquímicas das nanofomulações pelo máximo tempo testado, i.e., 365 dias. Tanto a NE-ECr (0,125 mg/mL) quanto a NE-AlFtCl (0,125 μM) expostas por 15 minutos às células tumorais MCF-7, separadamente, apresentaram-se interiorizadas no citoplasma dessas células. Os efeitos citotóxicos ocasionados nas células foram exclusivamente pela ação das duas nanoformulações quando irradiadas. As células MCF-7 submetidas à TFD mediada pelas diferentes concentrações de NE-ECr apresentaram CC50 de 0,0013 mg/mL e CC100 de 0,007 mg/mL. Nas mesmas condições, foram observadas para células MCF-10A CC50 e CC100 de 0,0048 mg/mL e de 0,020 mg/mL das NE-ECr, respectivamente. Também foi observada uma recuperação mais lenta das células tumorais quando comparadas às não tumorais. As NE-ECr mediadoras da TFD também se apresentaram bastantes citotóxicas contra os esferoides das células MCF-7. Nos experimentos realizados com as NE-AlFtCl, as células MCF-7 foram submetidas à TFD mediada pelas diferentes concentrações, agora das NE-AlFtCl, apresentando CC50 de 0,0028 μM e CC100 de 0,093 μM. Nas mesmas condições, foram observadas para células MCF-10A CC50 e CC100 de 0,0058 μM e de 0,625 μM das NE-AlFtCl, respectivamente. MCF-7 apresentaram-se mais lentas quanto à recuperação por diferentes tempos após a TFD. Quando os esferoides foram expostos a diferentes concentrações das NE-AlFtCl-TFD por 60 minutos, houve uma maior citotoxicidade em relação ao tempo de 30 minutos. Conclui-se que as NE-ECr e as NE-AlFtCl são estáveis a diferentes condições por longos períodos de tempo, e que as duas nanoemulsões, quando utilizadas como mediadoras da TFD, independentemente, foram citotóxicas contra células tumorais com maior intensidade do que a exercida sobre células não tumorais. A TFD mediada pelas NE-ECr ou NE-AlFtCl também apresentou efeito citotóxico contra esferoides de células MCF-7. _________________________________________________________________________ ABSTRACT / Breast cancer is the second most frequent type of cancer in the world, affecting one in eight women. Current treatments for breast cancer do not present the desired therapeutic index binging attention, therefore, to the emerging photodynamic therapy (PDT), which has been attracting much attention for the treatment of neoplasies. Based on three basic components, light in specific wavelength, photosensitizer (PS) and oxygen, PDT is considered very safe and effective. One of the limitations of PDT is related to the hydrophobic nature presented by the majority of the PS. In this sense, the present study aimed at analyzing the use of two photosensitizing agents: crajiru extract (ECr) and aluminum phthalocyanine chloride (AlFtCl), associated in two independent nanoemulsions, as PDT mediators applied in cellular assays of 2D and 3D breast tumors. The nanoformulations obtained (NE-ECr/NE-AlFtCl) had a hydrodynamic diameter of about 30 nm, were monodisperse and had a slightly negative surface charge. The NE-ECr showed absorption peak of λ = 668 nm and fluorescence emission (excitation at 350 nm) of λ = 676. The NE- AlFtCl showed absorption peak of λ = 676 nm and fluorescence emission (excitation at 350 nm) of λ = 680. Moreover, both nanoformulations showed excellent capacity to produce reactive oxygen species (ROS). We also observed excellent stability conditions at 4 °C and ~ 25 °C, which showed that it is possible to preserve the physicochemical and photophysical properties of the nanoformulations during the maximum tested period, i.e. 365 days. Both NE-ECr (0.125 mg/mL) and NE-AlFtCl (0.125 μM) separately exposed for 15 minutes to the MCF-7 tumor cells presented themselves internalized into the cytoplasm of these tumor cells. The cytotoxic effects on cells were caused solely by the action of both nanoformulations when irradiated. MCF-7 cells undergoing PDT mediated by different concentrations of NE-ECr showed CC50 of 0,0013 mg/mL and CC100 of 0,007 mg/mL. Under the same conditions, we observed for MCF-10A CC50 and CC100 of 0,0048 mg/mL e of 0,020 mg/mL of NE-ECr, respectively. Slower recovery of tumor cells was also observed when compared to that of non-tumor cells. NE-ECr as PDT mediators also presented significant cytotoxicicity against spheroids of MCF-7 cells. In the experiments with NE-AlFtCl, MCF-7 cells were subjected to PDT mediated by different concentrations mediated of NE-AlFtCl, this time presenting CC50 of 0,0028 μM and CC100 of 0,093 μM. Under the same conditions, we observed for MCF-10A CC50 and CC100 of 0,0058 μM and of 0,625 μM of NE-AlFtCl, respectively. Recovery of MCF-7 was slower for different periods after PDT. When spheroids were exposed to different concentrations of NE-AlFtCl-PDT for 60 minutes, there was higher cytotoxicity when compared to those exposed for 30 minutes. We conclude that the NE-ECr and the NE-AlFtCl are stable under different conditions for long periods of time, and that both nanoemulsions, when used as mediators of PDT, independently, presented cytotoxicicity to tumor cells in a stronger intensity than that exerted on non-tumor cells . PDT mediated by NE-ECr or NE-AlFtCl also showed cytotoxic effect against spheroids of MCF-7 cells.

Orientador: Reginaldo Bruno Gonçalves / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T10:35:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zanin_IrianaCarlaJunqueira_M.pdf: 2673624 bytes, checksum: dcab04f03ff93cdda7417ac1c667b9fb (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A redução de microrganismos patogênicos da superfície dental é um dos fatores principais envolvidos na prevenção e controle da doença cárie. Neste estudo avaliou-se o efeito antimicrobiano da terapia fotodinâmica sobre microrganismos bucais in vitro e in situ utilizando um laser diodo de 660 nm (meio ativo de arseneto-gálio-alumínio da DMC Equipamentos Ltda, emissão contínua, potência de entrada na sonda de 21 mW, sonda de 0,8 cm de diâmetro com perda de 24%, potência de saída na sonda de 16 mW e densidade de energia de 28,8 J/cm2) associado ao corante azul de toluidina O na concentração de 100 'mu'/mL (Sigma CI 52040). Suspensões bacterianas foram submetidas aos tratamentos com corante, com laser e com corante e laser ao mesmo tempo. A total inibição de crescimento foi encontrada in vitro para Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Streptococcus. cricetus, Laclobacillus acidophilus e Lactobacillus casei. Reduções estatisticamente significativas foram encontradas para Streptococcus sanguinis e a ausência de efeito antimicrobiano foi observado para Cândida albicans. A aplicação da terapia fotodinâmica sobre pool de saliva humana in vitro demonstrou inibição total de crescimento para estreptococos grupo mutans e inibição parcial de crescimento para estreptococos totais. Os resultados da sensibilização dos microrganismos crescidos em biofilme dental in situ demonstraram total inibição de crescimento para estreptococos grupo mutans, estreptococos totais e lactobacilos com reduções nas contagens respectivamente de 2,4 x 10 'POT. 5¿, 4,8 X 10 'POT. 6¿ ,e 9,7 x 10 'POT. 5¿ nos grupos não tratados para zero nos grupos submetidos à terapia fotodinâmica. A candida apresentou inibição parcial de crescimento estatisticamente significativa in situ. Assim, a terapia fotodinâmica é efetiva para a redução de bactérias cariogênicas in vitro e in situ nos parâmetros testados / Abstract: Elimination of pathogenic microorganisms from dental surface has been one of the most important factors related to dental caries control and prevention. In order to test the antimicrobial effect of photodynamic therapy on the susceptibility of oral microorganisms, the diode laser at 660 nm (a gallium-aluminium-arsenide laser from DMC Equipments Ltda, continuous mode, power input of 21 mW, sound diameter of 0,8 cm with loss of 24%, power output of 16 mW and energy density of 28,8 J/cm2) in association with toluidine blue O at a concentration of 100 'mu¿g/mL (Sigma CI 52040) was evaluated in vitro and in situ. Suspensions of microorganisms were exposed to treatment with the dye, the laser and to dye and the laser together. Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Streptococcus cricetus, Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus casei showed total growth inhibition in vitro. A statistically significant reduction in microorganism was observed for Streptococcus sanguis, and no effect on the viability of Candida albicans was found after therapy. Total growth inhibition to mutans streptococci and partial growth inhibition to total streptococci were found when human saliva was exposed to the photodynamic therapy. Following, an in situ experiment was conducted in order to verify the effect of this therapy on dental biofilms. Microorganisms grown in biofilm presented total growth inhibition of mutans streptococci, total streptococci, and lactobacilli with the viable count, being respectively reduced from 2,4 x 10 'POT. 5¿, 4,8 X 10 'POT. 6¿, e 9,7 x 10 'POT. 5¿ (control groups) to zero (groups exposed to both laser and dye). A partial growth inhibition statistically significant in microorganism was observed for candida in situ. In conclusion, it was observed that the photodynamic therapy can eftectively reduce in vitro and in situ cariogenic bacteria on tested parameters / Mestrado / Cariologia / Mestre em Odontologia

Orientador: Renato Atilio Jorge / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T11:51:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_AndreRomeroda_M.pdf: 556885 bytes, checksum: 549097f9d234f8f633fb4f991e899fad (MD5) Previous issue date: 2003 / Mestrado

Orietador: Renato Atilio Jorge / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:35:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mussi_Lilian_M.pdf: 588670 bytes, checksum: fb8f1144fc35c6cb0fdc259127d033d8 (MD5) Previous issue date: 2003 / Mestrado

Orientador: Livia Nordi Dovigo / Resumo: Na saliva humana é possível identificar a presença de diversas espécies constituintes do microbioma oral. De forma geral, as bactérias presentes na saliva em estado planctônico podem ou não ser agentes causais diretos das doenças, sendo o desequilíbrio microbiano apontado como principal fator a permitir que bactérias mais virulentas se tornem dominantes e desencadeiem patologias. Com o intuito preventivo ou de tratamento diversas formas de tentar conter ou eliminar os microrganismos têm surgido. Uma nova técnica que vem sendo investigada é a Inativação Fotodinâmica (do inglês Photodynamic Inactivation, PDI), cujo mecanismo de ação envolve a utilização de um fotossensibilizador (FS), sua iluminação com uma fonte de luz de comprimento de onda compatível com o espectro de absorção do FS e a presença de oxigênio. A Curcumina (CUR) vem sendo apontada como potencial FS e diversos estudos vêm propondo alternativas farmacológicas para sua veiculação. O objetivo geral desse estudo foi investigar o efeito antimicrobiano da PDI utilizando a CUR em um sistema precursor de cristal líquido (CL) sobre amostras de saliva humana. Tratou-se de estudo experimental laboratorial no qual diferentes indivíduos forneceram amostras de saliva não estimulada, sendo então as amostras de saliva distribuídas aleatoriamente em diferentes grupos. Como variáveis de desfecho tem-se o número de unidades formadoras de colônia por mililitro (UFC/mL), avaliadas em quatro diferentes meios de cultura para identific... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: It is possible to identify the presence of several constituent species of the oral microbiome in human saliva. Generally, bacteria present in saliva in planktonic state could be responsible agents of the diseases, and the microbial imbalance is indicated as the main factor to allow more virulent bacteria to become dominant and to trigger pathologies. In order to prevent or treat, many ways of trying to contain or eliminate microorganisms have arisen. A new technique that has been investigated is the Photodynamic Inactivation (PDI), whose mechanism of action involves the use of a photosensitizer (FS), its illumination with a light source of wavelength compatible with the spectrum of absorption of FS and the presence of oxygen. Curcumin (CUR) has been identified as a potential FS and several studies have proposed pharmacological alternatives for its use. The general objective of this study was to investigate the antimicrobial effect of PDI using CUR in a liquid crystal precursor (CL) system on samples of human saliva. This was an experimental laboratory study in which different individuals provided samples of nonstimulated saliva, and the saliva samples were randomly distributed in different groups. As outcome variables, the number of colony forming units per milliliter (CFU/mL) evaluated in four different culture media for presumptive identification of selected species was used. As independent variables are the treatment (i PDI: Photodynamic Inactivation; ii CUR: curcumin only; iii Control: only the vehicle of the formulations) and formulation (i.CL: liquid crystal precursor system; ii DMSO: 10% DMSO). The crossing of these variables gave rise to six experimental groups. After the treatments, quantification of viable cells in each sample by sowing in four culture media: Mitis Salivarius for presumptive identification of mutans...(Complete abstract electronic access below) / Mestre

Orientador: Daniela Leal Zandim-Barcelos / Resumo: A resistência bacteriana é uma ameaça real alertada pela OMS. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) pode ser uma das soluções para superar este desafio, uma vez que já demonstra ação antimicrobiana frente a inúmeros patógenos. A clorina-e6 (Ce6) provou ser um fotossensibilizador (FS) com potente efeito quando irradiada pela luz vermelha, contra diferentes biofilmes. No entanto, o principal pico de absorção deste FS está no espectro visível de luz azul, ainda insuficientemente investigado. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da TFDA com utilização da Ce6 irradiada a 450 e 660 nm contra biofilmes relacionados à doença periodontal. Biofilmes monoespécie de Streptococcus oralis, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis e Aggregatibacter actinomycetemcomitans foram desenvolvidos em condições adequadas por cinco dias. A TFDA foi realizada em diferentes concentrações de fotossensibilizador (100 e 200 µM) e comprimentos de onda de luz (450 e 660 nm), e comparada ao controle negativo (DMSO a 1%) e positivo (clorexidina a 0,2%) por análise de unidades formadoras de colônias (UFC) e microscopia confocal. O uso de luz e FS também foram testados individualmente. A maior redução bacteriana foi observada no grupo em que a TFDA foi realizada com utilização da Ce6 a 200 µM e aplicação de luz azul para todas as cepas (redução de 4,01 log10 para A. actinomycetemcomitans e redução total para P. gingivalis e S. oralis), exceto para F. nucleatum, onde o melhor resultado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Juliana Campos Junqueira / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: José Chibebe Junior / Resumo: Enterococcus faecium se tornou um dos mais temidos micro-organismos em infecções hospitalares, por apresentar maior facilidade em adquirir resistência aos antibióticos do que E. faecalis. Entretanto, faltam estudos voltados para o isolamento e identificação de E. faecium na cavidade bucal. Os objetivos deste trabalho foram isolar e identificar E. faecalis e E. faecium em canais radiculares com infecções endodônticas e comparar as cepas de E. faecalis e E. faecium em relação à sensibilidade aos antibióticos convencionais e à terapia fotodinâmica antimicrobiana (PDT). Além disso, essas espécies foram comparadas quanto à virulência in vivo, utilizando o modelo de infecção experimental de Galleria mellonella. As cepas de E. faecalis e E. faecium isoladas de canais radiculares foram identificadas pelo sistema Rapid ID 32 Strep e PCR multiplex. Todos os isolados identificados como E. faecalis e E. faecium, foram testadas quanto à sensibilidade aos antibióticos pelo método E-test para determinação da concentração inibitória mínima (MIC). A seguir, foram selecionadas algumas cepas de E. faecalis e E. faecium sensíveis e resistentes aos antibióticos de uso clínico na odontologia para testes de sensibilidade in vitro à terapia fotodinâmica antimicrobiana. A virulência das cepas de E. faecalis e E. faecium foram testadas in vivo no modelo de infecção experimental de G. mellonella por meio da análise da curva de sobrevivência das larvas e quantificação de UFC/mL de células bacterianas presentes na hemolinfa desses animais. Os dados de UFC/mL obtidos na terapia fotodinâmica e na infecção em G. mellonella foram submetidos à análise de variância e teste de Tukey. Os dados obtidos na curva de sobrevivência de G. mellonella foram analisados pelo método de Log-rank. Foram realizadas coletas de 38 canais radiculares de diferentes pacientes, sendo que 22 apresentaram culturas positivas para enterococcus spp.(58%).... / Abstract: Enterococcus faecium has become one of the most dreaded micro-organisms in nosocomial infections, due to its greater ease in acquiring resistance to antibiotics than E. faecalis. However, lack of studies focused on the isolation and identification of E. faecium in the oral cavity. The objectives of this study was to isolate and identify E. faecalis and E. faecium in root canals with endodontic infections and to compare strains of E. faecalis and E. faecium in sensitivity to conventional antibiotics and antimicrobial photodynamic therapy (PDT). Furthermore, these species were compared for virulence in vivo, using the model of experimental infection of Galleria mellonella. The strains of E. faecalis and E. faecium isolated from root canals were identified by the Rapid ID 32 Strep system and multiplex PCR. All isolates identified as E. faecalis and E. faecium were tested for antibiotic susceptibility E-test method for determination of minimal inhibitory concentration (MIC). Next, we selected some strains of E. faecalis and E. faecium sensitive and antibiotic-resistant clinical use in dentistry for in vitro susceptibility testing to antimicrobial photodynamic therapy. The virulence of strains of E. faecalis and E. faecium were tested in in vivo experimental model of infection of G. mellonella by analysis of larval survival curve and quantitation of CFU/mL bacterial cells present in the hemolymph of these animals. Data from CFU/mL obtained in photodynamic therapy and infection in G. mellonella were subjected to analysis of variance and Tukey test. The data on the survival of G. mellonella curves were analyzed by log-rank method. Samples of 38 root canals from different patients were performed and 22 had cultures positive for Enterococcus spp. (58%). Of these patients, all showed E. faecalis and only 2 had mixed infections with E. faecalis and E. faecium 6 isolates (27%) E. faecalis resistant to .... / Mestre

Orientador: Juliana Campos Junqueira / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Fernanda Malagutti Tomé / Banca: Renato Araújo Prates / Banca: Raduan Hage / Resumo: Devido ao rápido aumento dos micro-organismos resistentes aos antibióticos e ao desenvolvimento limitado de novos agentes antimicrobianos, as infecções por bactérias Gram-negativas estão se tornando um desafio para os profissionais da saúde e uma ameaça para a saúde pública internacional. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito sinérgico dos antibióticos convencionais associados a terapia fotodinâmica antimicrobiana (PDT) no controle de Acinetobacter baumannii. Para realização desse trabalho, foram obtidos isolados clínicos de A. baumannii do Laboratório de Análises Clínicas Valeclin da cidade de São José dos Campos/SP, identificados pelo método de bioquimismo e submetidos ao teste de difusão em disco para verificar a sensibilidade antimicrobiana. Os isolados selecionados foram transferidos para o ICT/UNESP, onde foi realizado testes para determinação da Concentração Inibitória Mínima aos antibióticos Imipenem e Meropenem seguindo as normas da CLSI. Cepas sensíveis e resistentes aos antibióticos foram avaliadas quanto a sensibilidade in vitro à terapia fotodinâmica antimicrobiana. Além disso, foram testados os efeitos dos antibióticos convencionais, da PDT e da terapia combinada de antibióticos e PDT nas infecções experimentais induzidas em G. mellonella por isolados clínicos de A. baumannii resistentes aos antibióticos. Os resultados das terapias na infecção experimental foram avaliados por meio da curva de sobrevivência das lagartas de G. mellonella. Os dados dos testes in vitro foram submetidos à Análise de Variância e teste de Tukey. Os dados obtidos na curva de sobrevivência de G. mellonella foram analisados pelo método de Log-rank. Em todos os testes, foi considerado nível de significância de 5%. Nos resultados desse estudo, observou-se que o Laboratório Valeclin identificou 1,54% de amostras positivas para A. baumannii entre as 13.715 amostras clínicas analisadas em um período de... / Abstract: Due to the rapid growth of microorganisms resistant to antibiotics and the limited development of new antimicrobial agents, infections by Gramnegative bacteria are becoming a challenge for health professionals and a threat to international public health. The aim of this study was to evaluate the synergistic effect of conventional antibiotics associated with antimicrobial photodynamic therapy (PDT) in control of Acinetobacter baumannii. In order to conduct this project were obtained clinical isolates of A. baumannii at the Clinical Laboratory Valeclin situated in the city of São José dos Campos / SP, identified by bioquimismo method and submitted to disk diffusion test to verify the antimicrobial sensitivity. The selected isolates were transferred to the ICT / UNESP, which were conducted tests to determine the Minimum Inhibitory Concentration to Imipenem and Meropenem antibiotics following the rules of the CLSI. Sensitive and resistant strains to antibiotics were evaluated in vitro sensitivity to antimicrobial photodynamic therapy. Besides, the effects of conventional antibiotics, and combined PDT, and PDT of antibiotics in experimental infections induced in G. mellonella by clinical isolates of A. baumannii resistant to antibiotic therapy were tested. The results of therapies in experimental infection were evaluated by survival curve of worms G. mellonella. Data from in vitro tests were submitted to ANOVA and Tukey test. The data obtained in G. mellonella survival curve were analyzed by log-rank method. In all tests it was considered 5% significance level. The results of this study, it was observed that the Valeclin Laboratory identified 1.54% of positive samples for A. baumannii between the 13,715 clinical specimens analyzed in a period of 8 months. Among the isolates of A. baumannii, 58% were resistant to antibiotic imipenem and meropenem by disk diffusion test. Next, 3 isolates clinical sensitive and 18 isolates resistant to those ... / Doutor