Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-05-10T11:57:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 953824 bytes, checksum: 33083238f7a3fe7fee3d7c79c6ae674d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T11:57:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 953824 bytes, checksum: 33083238f7a3fe7fee3d7c79c6ae674d (MD5) Previous issue date: 2002-03-04 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A espécie de abelha sem ferrão Melipona quadrifasciata Lep. é um importante agente polinizador, assim como um ótimo material para estudos biológicos. Nessa espécie, assim como na maioria dos Hymenoptera, os machos se desenvolvem a partir de óvulos não fecundados e são haplóides, enquanto as fêmeas se originam de óvulos fertilizados e são diplóides. Melipona quadrifasciata possui um sistema de determinação do sexo de um único loco e múltiplos alelos e, sob endogamia, há produção de machos diplóides. Estes machos diplóides são, geralmente, inviáveis ou estéreis, e impõem um custo significativo no sucesso reprodutivo de seus progenitores. Nesta espécie, os machos diplóides emergem como adultos, possuindo, no entanto, uma menor longevidade que os machos haplóides. Em Melipona quadrifasciata, estes machos se assemelham visualmente aos haplóides. Neste trabalho, buscou-se características que distinguissem machos diplóides de haplóides de Melipona quadrifasciata. A característica analisada foi o tamanho dos testículos, que em outras espécies apresentou uma considerável variação entre machos diplóides e haplóides. Para realizar esta comparação, utilizou-se duas colônias fornecedoras de machos diplóides e duas fornecedoras de machos haplóides. Dez pupas de cada população foram analisadas, com medição do tamanho dos testículos e largura do tórax. Foi observado que machos haplóides possuem testículos significativamente maiores que machos diplóides, tornando esta característica útil para a diferenciação destes machos. Houve uma correlação positiva entre o tamanho dos testículos e a largura do tórax em machos diplóides. A produção de machos diplóides em Melipona quadrifasciata foi acompanhada em três colônias submetidas à cruzamentos endogâmicos. Uma destas colônias foi obtida pelo cruzamento de uma rainha com um de seus filhos, resultantes de um prévio cruzamento desta rainha com um macho estéril. As outras duas foram obtidas pelo cruzamento de uma rainha com um irmão. Todas as colônias produziram machos diplóides. Na colônia resultante do cruzamento mãe x filho houve uma produção considerável de machos haplóides, aparentemente devido ao primeiro cruzamento com um macho esterilizado. Nesta colônia a proporção entre machos diplóides e fêmeas não foi estatisticamente diferente de 1:1, como esperado pelo sistema de determinação de sexo desta espécie. Em ambas as colônias de cruzamento irmã x irmão, os machos foram todos diplóides. Em uma destas colônias a proporção de machos e fêmeas foi aproximadamente 1:1. No entanto, na outra colônia houve um número significativamente maior de fêmeas. Demonstrou-se, por meio de marcadores RAPD, que parte das operárias produzida nesta colônia era resultado de um segundo acasalamento da rainha. Foi feita uma análise para identificação do loco sexual. Um total de 376 marcadores polimórficos foram obtidos pela amplificação do DNA de cinco machos haplóides com 343 primers, obtendo-se um polimorfismo médio de 1,1 bandas polimórficas por primer. Para a análise de ligação ao sexo, amplificou-se o DNA de três machos diplóides e três operárias (da mesma colônia) com 119 primers polimórficos, não se obtendo evidências de ligação de nenhum destes marcadores ao loco sexual. / The species of stingless bee Melipona quadrifasciata Lep is very important in pollination, as well as a great model for biological studies. In this species, as in the majority of Hymenoptera, males develop from non-fertilized eggs, and are haploids, while females originate from fertilized eggs, and are diploids. Melipona quadrifasciata has a sex determination system of one locus and multiple alleles, and under inbreeding, diploid males are produced. These diploid males usually are unviable or sterile, and decrease the reproductive success of their progenitors. In this species, diploid males emerge as adults, and have less longevity than haploid males. In Melipona quadrifasciata, these males visually resemble the haploids. In this study, traits that distinguish haploid from diploid drones in this species were sought. The trait analyzed was the testis length, which presented a considerable variation between diploid and haploid drones in others species. In order to do this comparison in Melipona quadrifasciata, two colonies that provided diploid males, and two that provided haploid males were used. Ten pupae of each colony were analyzed, by measurements of testes length and thorax width. It was observed that haploid drones had smaller testes than diploid drones, what make this trait useful to distinguish these drones. A positive correlation was observed between the length of testes and width of thorax in diploid drones. The production of diploid drones in Melipona quadrifasciata was analyzed in three colonies submitted to inbreeding crossings. One of these colonies was obtained by crossing a queen with one of her sons, resulted from an earlier crossing of this queen with a sterililized drone. The other two were obtained by the crossing of a queen with her brother. All colonies produced diploid drones. In the colony resulted from mother x son crossing occurred a considerable production of haploid drones, apparently due to the first crossing with a sterilized drone. In this colony, the proportion of diploid drones and females was not statistically different from 1:1, as expected by the sex determination system of this species. In both colonies of sister x brother crossings, the drones were all diploids. In one of these colonies the proportion of males and females was 1:1. However, in the other colony the number of females was significantly greater than the number of males. It was demonstrated that part of the workers produced in this colony was resulted from a second crossing of the queen. An analysis to identify the sexual locus of the species Melipona quadrifasciata was done. A total of 376 RAPD markers was obtained by the DNA amplification of five haploid drones, with 343 primers, obtaining a mean polymorphism of 1,1 polymorphic bands per primer. To analyze sex linkage, DNA of three diploid males and three workers (from the same colony) was amplified with 119 polymorphic primers. However, it was not observed evidences of linkage of any markers to the sexual locus. / Dissertação importada do Alexandria

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:25:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Tatiane_Medeiros_Souza.pdf: 940252 bytes, checksum: 01f4b10ebe6ad084dbd24af81cf960ee (MD5) Previous issue date: 2011-02-18 / The anther culture of rice is a technique used to obtain haploid plants. This technique is useful in plant breeding because it enables breeders to obtain fully homozygous plants in one generation. Thus, important and recessive features are expressed without the need to conduct a population through several generations of selfing. Rice, cereal of great economic and social importance, when under flooding conditions may face iron toxicity. That can cause high losses in the rice crop productivity. Through crosses between genotypes with contrasting tolerance to iron and to obtain a double haploid population, it is possible to study the mechanisms involved in the toxicity of iron to rice plants. The objective of this work was to develop a double-haploid population of rice from the F1 and F2 generations from the cross between genotypes Nipponbare x BRS Atalanta and BRS Firmeza x Epagri 107. Three different culture media: N6 (2.4 D, Kinetin and Picloran), NL (2.4 D, Picloran and Kinetin) and NL (NAA and Kinetin) were tested. Three experiments were conducted. The first testing the three culture media in Nipponbare x BRS Atalanta and BRS Firmeza x EPAGRI 107. In the second, the response to anther culture with genotypes Nipponbare and BRS Atalanta on regeneration medium NL (NAA and Kinetin). The third experiment consisted of F1 of the cross Nipponbare x BRS Atalanta with the culture medium NL (NAA and Kinetin). The study focused on the influence of different sources and concentrations of iron in culture medium for in vitro cultivation of rice. The sources used were ferric EDTA and ferric sulphate in concentrations of 0.9 mM, 4.5 mM and 9.0 mM. The results obtained in double-haploid plants were more expressive in the first experiment with the 1 culture medium, where the regeneration of green plants had an efficiency rate of 0,11%. The callus induction and regeneration of green plants and albino was greater in the cross Nipponbare x BRS Atalanta. The sources and concentrations of iron tested cultivars Nipponbare and BRS Atalanta genotype showed significant differences in all variables, being the variable shoot length the one presenting the most significant differences. / A cultura de anteras de arroz é uma técnica utilizada para a obtenção de plantas haplóides. Esta técnica tem grande utilidade no melhoramento de plantas, pois possibilita a obtenção de plantas totalmente homozigotas em apenas uma geração. Desta forma, características importantes e de caráter recessivo são manifestadas sem a necessidade de conduzir uma população a várias gerações de autofecundação. O arroz, cereal de grande importância econômica e social, apresenta em condições de alagamento, toxidez ao ferro. Este estresse pode ocasionar elevadas perdas na produtividade de uma lavoura de arroz. Através de cruzamentos entre genótipos contrastantes a tolerância ao ferro e com a obtenção de uma população duplo-haplóide será possível estudar os mecanismos que envolvem a toxidez do ferro em plantas de arroz. O objetivo deste trabalho consistiu no desenvolvimento de uma população duplo-haplóides de arroz a partir da geração F1 e F2, obtida do cruzamento entre os genótipos Nipponbare x BRS Atalanta e BRS Firmeza x Epagri 107. Foram testados três meios de cultura: N6 (2,4 D, Picloran e Cinetina) NL (2,4 D, Picloran e Cinetina) e NL (ANA e Cinetina). Foram realizados três experimentos. O primeiro testando os três meios de cultura em Nipponbare x BRS Atalanta e BRS Firmeza x EPAGRI 107. No segundo, a resposta a cultura de anteras com os genótipos Nipponbare e BRS Atalanta no meio de regeneração NL (ANA e Cinetina). O terceiro experimento utilizou somente o cruzamento Nipponbare x BRS Atalanta com o meio de cultura NL (ANA e Cinetina). Foi realizado também o estudo sobre a influência de diferentes fontes e concentrações de ferro em meio de cultura in vitro para o cultivo do arroz. As fontes utilizadas foram EDTA férrico e sulfato férrico nas concentrações de 0,9 mM, 4,5 mM e 9,0 mM. Os resultados obtidos na obtenção de plantas duplo-haplóides foram mais expressivos no primeiro experimento com o meio de cultura 1, onde a regeneração de plantas verdes teve uma taxa de eficiência de 0,11%. A indução de calos e regeneração de plantas verdes e albinas foi maior entre o cruzamento Nipponbare x BRS Atalanta. As fontes e concentrações de ferro testadas nas cultivares Nipponbare e BRS Atalanta apresentaram diferenças significativas para genótipo em todas as variáveis analisadas, sendo a variável comprimento de parte aérea a que mais obteve diferenças significativas.