O nebivolol, um fármaco com quatro centros quirais, está disponível na clínica como mistura racêmica dos isômeros d-nebivolol (SRRR) e l-nebivolol (RSSS). A atividade -adrenérgica do nebivolol reside no isômero d-nebivolol, enquanto o l-nebivolol promove a liberação de óxido nítrico das células endoteliais. O nebivolol é eliminado por metabolismo dependente do CYP2D6. O estudo avalia a farmacocinética e a relação farmacocinética-farmacodinâmica (PK-PD) dos isômeros do nebivolol em voluntários sadios. Foram investigados 15 voluntários sadios (10 homens e 5 mulheres) fenotipados com metoprolol como metabolizadores extensivos (EM, n=13) ou metabolizadores lentos para o CYP2D6 (PM, n=2). Os voluntários sadios foram tratados com dose única oral de 10 mg de nebivolol racêmico. As amostras seriadas de sangue foram coletadas até 48 h após a administração do fármaco. Os isômeros do nebivolol foram resolvidos na coluna Chirobiotic® V e analisados nas amostras de plasma empregando LC-MS/MS. Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados por modelo bicompartimental com lag time, empregando o programa WinNonLin. A farmacodinâmica do nebivolol foi avaliada empregando como parâmetro a variação da frequência cardíaca entre os períodos final e anterior ao teste de esforço isométrico durante 2 min utilizando o handgrip a 30% da contratilidade voluntária máxima. A análise PK-PD relacionando o efeito na variação da frequência cardíaca induzida pelo exercício isométrico com as concentrações plasmáticas do isômero d-nebivolol foi avaliada empregando o modelo Emax sigmóide inibitório. A disposição cinética do nebivolol é enantiosseletiva nos voluntários sadios EM, com razões isoméricas de AUCl/ AUCd de 1,41. Os valores de concentração plasmática máxima (1,46 vs 0,79 ng/mL), área sob a curva concentração plasmática versus tempo (6,45 vs 3,99 ng.h/mL), clearance aparente (774,51 vs 1252,70 L/h) e volume de distribuição aparente (10936 vs 19082 L) mostram diferenças com significância estatística (Teste de Wilcoxon, p<0,05) entre os isômeros l-nebivolol e d-nebivolol para os voluntários sadios EM. A disposição cinética do nebivolol não é enantiosseletiva nos voluntários sadios PM investigados, com razões isoméricas de AUCl/AUCd de 0,93 e 0,98. Os valores de clearance aparente obtidos para os voluntários PM (87-350 vs 81-344 L/h, respectivamente para o l-nebivolol e d-nebivolol) são menores do que para os EM (775 vs 1253 L/h). O modelo Emax sigmóide inibitório descreveu a análise PK-PD relacionando o efeito na variação da frequência cardíaca induzida pelo exercício isométrico com as concentrações plasmáticas do isômero d-nebivolol em voluntários sadios EM com valores de Emax de 4,47 bpm (IC 95% 1,37-7,57) e de EC50 de 222,16 pg/mL (IC 95% 96,29-540,60 pg/mL). / Nebivolol is a drug with four chiral centers. It is administered in clinical practice as a racemic mixture of the isomers d-nebivolol (SRRR) and l-nebivolol (RSSS). The - blocking activity of nebivolol is attributed to d-nebivolol, whereas l-nebivolol promotes the release of nitric oxide from endothelial cells. Nebivolol is eliminated by metabolism dependent on CYP2D6. The present study evaluates the pharmacokinetic and pharmacokinetic-pharmacodynamic (PK-PD) of nebivolol isomers in healthy volunteers (10 men and 5 women) phenotyped with metoprolol as extensive metabolisers (EM, n=13) or poor metabolisers for CYP2D6. The healthy volunteers receveid a single oral dose of 10mg of racemic nebivolol. Serial blood samples were collected from 0 to 48 h after the administration of nebivolol. The isomers of nebivolol were analyzed by LC-MS-MS on a Chirobiotic® V column and the pharmacokinetic parameters (bicompartment model, micro, lag time, first order) were calculated by the software Winnonlin. The pharmacodynamic of nebivolol was evaluated using the variation of heart rate as parameter between the end and one minute before the handgrip exercise. Thus, the patients were oriented to conduct the isometric exercise with handgrip for 2 min at 30% of their maximum voluntary contractility. The PK-PD analysis relating the effect on the variation of heart rate induced by the isometric exercise and the plasma concentrations of the isomer d-nebivolol were evaluated using the Inhibitory effect sigmoid Emax model. The kinetic disposition of nebivolol is enantioselective on healthy volunteers EM, with isomeric ratios of AUCl/ AUCd of 0,93 e 0,98. The values of maximum plasma concentration (1,46 vs 0,79 ng/mL), area under the concentration time curve (6,45 vs 3,99 ng.h/mL), apparent clearance(774,51 vs 1252,70 L/h) and volume of distribution (10936 vs 19082 L) show statistically significant differences (p<0.05, Wilcoxon test) between the isomers l-nebivolol and d-nebivolol for the healthy volunteers EM. The kinetic disposition of nebivolol is not enantioselective on the healthy volunteers PM investigated, with isomeric ratios of AUCl/ AUCd of 1,07. The values of apparent clearance obtained for the volunteers pm (87-350 vs 81-344 L/h, respectively to l-nebivolol and d-nebivolol) are smaller than that for EM (775 vs 1253 L/h). The Inhibitory effect sigmoid Emax model described the PK-PD analysis described the effect on the variation of heart rate induced by handgrip isometric exercise with the plasma concentrations of the isomer d-nebivolol in healthy volunteers EM with Emax values of 4,47 bpm (IC 95% 1,37-7,57) and EC50 of 222,16 pg/mL (IC 95% 96,29-540,60 pg/mL).

A qualitative research study was conducted with people who had participated as healthy subjects in phase I drug trials at commercial research facilities, in order to develop a better understanding of their perspective regarding research participation. The participants were recruited using online advertisements posted on the University of Toronto student website (www.my.utoronto.ca) and NOW Magazine online. Thirty-one subjects were interviewed. The audiotaped interviews were transcribed and analyzed using grounded theory methods. A grounded theory was developed that describes the process of participation and the main factors affecting the experience of participation, from the perspective of healthy subjects. The theory, called Making Participation Work, explains how healthy subjects frame participation as an income earning opportunity, and how this framing shapes their behaviour with regard to participation. Participants expressed a range of attitudes about the experience of participation, from very positive to very negative. The main factor affecting the experience is the perceived net burden, which is in turn affected by the degree to which subjects find personal control over their participation. Net burden and finding personal control were both affected by the degree to which subjects felt valued by research staff, and by whether subjects had trust in the research enterprise. Although subjects framed participation as work, the relationship with the study doctors and nurses was viewed as clinical. Most subjects are generally trusting that participation in phase I drug trials is safe. These findings suggest that models of research participation assuming participation motivated by altruism or potential therapeutic benefit cannot accommodate the attitudes and behaviours of healthy subjects in phase I drug trials. New models must be developed which account for the framing of participation as work, while being sensitive to the trust that healthy subjects place in the research enterprise.

A qualitative research study was conducted with people who had participated as healthy subjects in phase I drug trials at commercial research facilities, in order to develop a better understanding of their perspective regarding research participation. The participants were recruited using online advertisements posted on the University of Toronto student website (www.my.utoronto.ca) and NOW Magazine online. Thirty-one subjects were interviewed. The audiotaped interviews were transcribed and analyzed using grounded theory methods. A grounded theory was developed that describes the process of participation and the main factors affecting the experience of participation, from the perspective of healthy subjects. The theory, called Making Participation Work, explains how healthy subjects frame participation as an income earning opportunity, and how this framing shapes their behaviour with regard to participation. Participants expressed a range of attitudes about the experience of participation, from very positive to very negative. The main factor affecting the experience is the perceived net burden, which is in turn affected by the degree to which subjects find personal control over their participation. Net burden and finding personal control were both affected by the degree to which subjects felt valued by research staff, and by whether subjects had trust in the research enterprise. Although subjects framed participation as work, the relationship with the study doctors and nurses was viewed as clinical. Most subjects are generally trusting that participation in phase I drug trials is safe. These findings suggest that models of research participation assuming participation motivated by altruism or potential therapeutic benefit cannot accommodate the attitudes and behaviours of healthy subjects in phase I drug trials. New models must be developed which account for the framing of participation as work, while being sensitive to the trust that healthy subjects place in the research enterprise.

O nebivolol, um fármaco com quatro centros quirais, está disponível na clínica como mistura racêmica dos isômeros d-nebivolol (SRRR) e l-nebivolol (RSSS). A atividade -adrenérgica do nebivolol reside no isômero d-nebivolol, enquanto o l-nebivolol promove a liberação de óxido nítrico das células endoteliais. O nebivolol é eliminado por metabolismo dependente do CYP2D6. O estudo avalia a farmacocinética e a relação farmacocinética-farmacodinâmica (PK-PD) dos isômeros do nebivolol em voluntários sadios. Foram investigados 15 voluntários sadios (10 homens e 5 mulheres) fenotipados com metoprolol como metabolizadores extensivos (EM, n=13) ou metabolizadores lentos para o CYP2D6 (PM, n=2). Os voluntários sadios foram tratados com dose única oral de 10 mg de nebivolol racêmico. As amostras seriadas de sangue foram coletadas até 48 h após a administração do fármaco. Os isômeros do nebivolol foram resolvidos na coluna Chirobiotic® V e analisados nas amostras de plasma empregando LC-MS/MS. Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados por modelo bicompartimental com lag time, empregando o programa WinNonLin. A farmacodinâmica do nebivolol foi avaliada empregando como parâmetro a variação da frequência cardíaca entre os períodos final e anterior ao teste de esforço isométrico durante 2 min utilizando o handgrip a 30% da contratilidade voluntária máxima. A análise PK-PD relacionando o efeito na variação da frequência cardíaca induzida pelo exercício isométrico com as concentrações plasmáticas do isômero d-nebivolol foi avaliada empregando o modelo Emax sigmóide inibitório. A disposição cinética do nebivolol é enantiosseletiva nos voluntários sadios EM, com razões isoméricas de AUCl/ AUCd de 1,41. Os valores de concentração plasmática máxima (1,46 vs 0,79 ng/mL), área sob a curva concentração plasmática versus tempo (6,45 vs 3,99 ng.h/mL), clearance aparente (774,51 vs 1252,70 L/h) e volume de distribuição aparente (10936 vs 19082 L) mostram diferenças com significância estatística (Teste de Wilcoxon, p<0,05) entre os isômeros l-nebivolol e d-nebivolol para os voluntários sadios EM. A disposição cinética do nebivolol não é enantiosseletiva nos voluntários sadios PM investigados, com razões isoméricas de AUCl/AUCd de 0,93 e 0,98. Os valores de clearance aparente obtidos para os voluntários PM (87-350 vs 81-344 L/h, respectivamente para o l-nebivolol e d-nebivolol) são menores do que para os EM (775 vs 1253 L/h). O modelo Emax sigmóide inibitório descreveu a análise PK-PD relacionando o efeito na variação da frequência cardíaca induzida pelo exercício isométrico com as concentrações plasmáticas do isômero d-nebivolol em voluntários sadios EM com valores de Emax de 4,47 bpm (IC 95% 1,37-7,57) e de EC50 de 222,16 pg/mL (IC 95% 96,29-540,60 pg/mL). / Nebivolol is a drug with four chiral centers. It is administered in clinical practice as a racemic mixture of the isomers d-nebivolol (SRRR) and l-nebivolol (RSSS). The - blocking activity of nebivolol is attributed to d-nebivolol, whereas l-nebivolol promotes the release of nitric oxide from endothelial cells. Nebivolol is eliminated by metabolism dependent on CYP2D6. The present study evaluates the pharmacokinetic and pharmacokinetic-pharmacodynamic (PK-PD) of nebivolol isomers in healthy volunteers (10 men and 5 women) phenotyped with metoprolol as extensive metabolisers (EM, n=13) or poor metabolisers for CYP2D6. The healthy volunteers receveid a single oral dose of 10mg of racemic nebivolol. Serial blood samples were collected from 0 to 48 h after the administration of nebivolol. The isomers of nebivolol were analyzed by LC-MS-MS on a Chirobiotic® V column and the pharmacokinetic parameters (bicompartment model, micro, lag time, first order) were calculated by the software Winnonlin. The pharmacodynamic of nebivolol was evaluated using the variation of heart rate as parameter between the end and one minute before the handgrip exercise. Thus, the patients were oriented to conduct the isometric exercise with handgrip for 2 min at 30% of their maximum voluntary contractility. The PK-PD analysis relating the effect on the variation of heart rate induced by the isometric exercise and the plasma concentrations of the isomer d-nebivolol were evaluated using the Inhibitory effect sigmoid Emax model. The kinetic disposition of nebivolol is enantioselective on healthy volunteers EM, with isomeric ratios of AUCl/ AUCd of 0,93 e 0,98. The values of maximum plasma concentration (1,46 vs 0,79 ng/mL), area under the concentration time curve (6,45 vs 3,99 ng.h/mL), apparent clearance(774,51 vs 1252,70 L/h) and volume of distribution (10936 vs 19082 L) show statistically significant differences (p<0.05, Wilcoxon test) between the isomers l-nebivolol and d-nebivolol for the healthy volunteers EM. The kinetic disposition of nebivolol is not enantioselective on the healthy volunteers PM investigated, with isomeric ratios of AUCl/ AUCd of 1,07. The values of apparent clearance obtained for the volunteers pm (87-350 vs 81-344 L/h, respectively to l-nebivolol and d-nebivolol) are smaller than that for EM (775 vs 1253 L/h). The Inhibitory effect sigmoid Emax model described the PK-PD analysis described the effect on the variation of heart rate induced by handgrip isometric exercise with the plasma concentrations of the isomer d-nebivolol in healthy volunteers EM with Emax values of 4,47 bpm (IC 95% 1,37-7,57) and EC50 of 222,16 pg/mL (IC 95% 96,29-540,60 pg/mL).

Introdução: Há muito as influências recíprocas entre o sistema estomatognático e a postural corporal são investigadas. Além da controvérsia nos achados, não foi encontrado qualquer estudo que tivesse investigado o efeito imediato de uma discrepância entre as pernas provocada por interferência podal nas funções orofaciais. Objetivos: Investigar se interferências na cavidade oral resultam em mudanças imediatas nos músculos mastigatórios e, se interferências podais provocam efeitos imediatos na oclusão, na mastigação e deglutição, bem como na própria postura corporal. Em caso positivo, analisar se as funções orofaciais apresentam efeitos compensatórios distintos. Metodologia: Participaram 21 voluntários saudáveis (13 do sexo feminino; 8 do sexo masculino), com média de idade de 24 ± 4 anos. Na seleção todos passaram por exame clínico da oclusão e investigação das condições miofuncionais orofaciais, por meio de protocolos previamente validados (ProDTMmulti e AMIOFE). Foram realizadas análise eletromiográfica (EMG) dos músculos mastigatórios na máxima contração voluntária (MCV), mastigação e deglutição; análise oclusal computadorizada e análise cinemática tridimensional. Os registros foram efetuados com interferências na cavidade oral ou podal, além da condição natural sem qualquer interferência. O teste não-paramétrico de Friedman foi empregado para comparar variáveis com distribuição não-normal e o teste de Wilcoxon com correção de Bonferroni foi aplicado como pós-teste para diferenças significantes. As variáveis com distribuição normal foram analisadas por estatística paramétrica, por meio do teste ANOVA, seguido do pós-teste de Tukey. O nível de significância foi estabelecido em 5% (p < 0,05) para todas as análises. Resultados: A atividade e coordenação dos músculos elevadores da mandíbula em MVC foram significantemente alteradas apenas por interferências na cavidade oral. A interferência podal (direita - ID ou esquerda - IE) não modificou a dinâmica oclusal, a amplitude EMG e coordenação muscular namastigação e deglutição. Apenas quando do lado esquerdo, gerou mudanças significantes em aspectos temporais da EMG, como aumento da frequência na mastigação unilateral esquerda, aumento da duração e redução do tempo para atingir metade do valor da integral durante a deglutição espontânea, bem como a cabeça foi inclinada para frente. Houve deslocamento lateral do braço esquerdo durante a deglutição espontânea com a interferência à direita. Tomando como referência condição sem interferência, ambas as condições com interferência (ID e IE) envolveram ajustes posturais agudos, ou seja, o corpo se deslocou levemente para trás e para o lado esquerdo, sem diferença significante entre elas. Também, houve deslocamento ao nível do quadril, para cima do lado ipsilateral à interferência e para baixo do lado contralateral. Conclusão: Os músculos temporal e masseter mostraram mudanças imediatas na distribuição da atividade e coordenação, que variaram de acordo com a localização da interferência oral. Imediatamente após a interferência podal não ocorreu efeito na dinâmica oclusal, na fisiologia dos músculos mastigatórios, tampouco no desempenho das funções de mastigação e de deglutição, exceto pela leve mudança em parâmetros temporais. Entretanto, aconteceram mudanças posturais compensatórias. / Introduction: The reciprocal influences between the stomatognathic system and the body postural have long been investigated. In addition to the controversy in the findings, any study was found that examined the immediate effect of a discrepancy between the legs caused by foot interference in the orofacial functions. Objectives: To investigate if interferences in the oral cavity result in immediate changes in the masticatory muscles and if foot interferences cause immediate effects on occlusion, chewing, swallowing and on body posture. If so, to analyze if the orofacial functions have different compensatory effects. Methods: Twenty-one healthy volunteers (13 females, 8 males) with a mean age of 24 ± 4 years were included. In the selection, all of them underwent a clinical examination of occlusion and investigation of myofunctional orofacial conditions, through previously validated protocols (ProDTMmulti and AMIOFE). Data were obtained by Electromyographic (EMG) analysis, computerized occlusal analysis, and three-dimensional kinematic analysis. The orofacial function analyzed were clenching at maximum voluntary contraction (MVC), chewing and swallowing. The records were made with interferences in the oral cavity or under the feet, besides the natural condition without any interference. The Friedman nonparametric test was used to compare variables with non-normal distribution and the Wilcoxon test with Bonferroni correction was applied as a post-test for significant differences. The variables with normal distribution were analyzed by parametric statistics, using the ANOVA test, followed by the Tukey post-test. The level of significance was 5% (p <0.05) for all analyzes. Results: The activity and coordination of the jaw elevator muscles in MVC were significantly altered only by interferences in the oral cavity. Foot interference (right - ID or left - IE) did not modify occlusal dynamics, EMG amplitude and muscular coordination in chewing and swallowing. Only on the left side did significant changes in temporal aspects of EMG, such as increased frequency in left unilateral chewing, increasedduration and reduced time to reach half of the integral value during spontaneous swallowing and the head tilted forward. There was lateral displacement of the left arm during spontaneous deglutition with right interference. Taking the reference condition without interference, both interfering conditions (ID and IE) involved acute postural adjustments, that is, the body shifted slightly backward and to the left side, without significant difference between them. Also, there was displacement at the hip level, up from the ipsilateral side to the interference and down from the contralateral side. Conclusion: The temporal and masseter muscles showed immediate changes in the distribution of activity and coordination, which varied according to the location of the oral interference. Immediately after the foot interference, there was no effect on occlusal dynamics, masticatory muscle physiology, or chewing and swallowing functions except for the slight change in temporal parameters. However, compensatory postural changes occurred

Introdução: A ocitocina (OT) é um nonapeptídeo sintetizado nos núcleos paraventricular e supraóptico do hipotálamo. Quando liberada perifericamente pela neurohipófise, a OT atua como um hormônio e promove a liberação do leite durante a lactação e a contração uterina no parto. No entanto, quando liberada centralmente, a OT age como um neurotransmissor ou neuromodulador de diversos processos, tal como na modulação da ansiedade e na regulação das respostas neuroendócrina e cardiovascular. Sendo assim, o presente trabalho tem como objetivo avaliar os efeitos agudos da administração intranasal da OT na ansiedade em voluntários saudáveis submetidos ao Teste de Simulação de Falar em Público (TSFP), bem como seu papel na modulação das respostas neuroendócrina e hemodinâmica. Métodos: Ocitocina ou veículo foram administrados intranasalmente em voluntários saudáveis (n=14) 50 minutos antes do TSFP. Durante a sessão experimental foram realizadas as seguintes medidas: (1) basal (t = -30 min)), (2) pré-teste (t = -15 min), (3) preparação (t = +50 min), (4) desempenho (t = +1:03 h) , pós-teste 1 (t = 1:26 h) e pós-teste 2 (t = 1:46 h). Para a avaliação dos estados subjetivos de ansiedade foram utilizadas as seguintes escalas de auto-avaliação: 1.Escala Analógica de Humor; 2.Escala de Sintomas Corporais; 3. Versão de ?estado? da escala de auto-avaliação ao falar em público. Para a dosagem de cortisol sérico e ACTH plasmático foi utilizada a técnica de radioimunoensaio. Também foram realizadas as medidas de freqüência cardíaca, pressão arterial, condutância da pele e número de flutuações espontâneas da condutância da pele. Resultados: O grupo OT apresentou-se menos ansioso nas fases PT (p-valor = 0,03), com maior sedação nas fases PT (p-valor = 0,003), Pr (p-valor = 0,01) e S (p-valor = 0,02) e com nível de condutância da pele menor nas fases PT (p-valor = 0,02), Pr (p-valor = 0,02), S (p-valor = 0,03) e F2 (p-valor = 0,02). Nos outros parâmetros mensurados não foram encontradas diferenças intergrupos. Conclusão: O presente estudo sugere que a OT na dose de 24 UI possui ação na ansiedade antecipatória em voluntários saudáveis. Espera-se que este estudo contribua com o desenvolvimento de intervenções terapêuticas em transtornos de ansiedade e com o desenvolvimento de possíveis fármacos agonistas. / Introduction: Oxytocin is a nonapeptide that is synthesized in the hypothalamus paraventricular and supraoptic nuclei. When released peripherally by the neurohypophysis, it acts as a hormone that will promote milk ejection during lactation and uterine smooth muscle contraction during labor. However, when centrally released, OT acts as a neurotransmitter or neuromodulator of several processes, such as anxiety modulation and regulation of cardiovascular and neuroendocrine responses. The objective of this study was to assess the acute effect of OT, intranasally administered, on anxiety levels of healthy volunteers who submitted themselves to the Public Speaking Simulation Test as well as its role in the modulation of neuroendocrine and hemodynanic responses. Methods: Oxytocin, or vehicle, was intranasally administered to healthy volunteers (n= 14) fifty minutes before the Test. During the experimental session, the following assessments were performed: 1) Baseline (t = - 30 minutes); 2) Pre test (t = -15 minutes) ;3) Preparation ( t = + 50 minutes) ; 4) Performance ( t = + 1:03 hours) , and post test 1 ( t = 1:26 hours) and post test 2 ( t = 1:46 hours ). In order to evaluate anxiety subjective states, the following self-assessment scales were used: 1) Mood Analogical Scale, 2) Bodily Symptoms Scale, and 3) ?State? Self-Assessment Version of Public Speaking Scale. A radio immune assay was used for cortisol serum level and plasmatic ACTH measurements. Additionally, heart rate, blood pressure, skin conductance, and number of spontaneous fluctuations of skin conductance were checked. Results: The OT group was less anxious during the PT (p value =0, 03), with a higher sedation during the PT (p value = 0,003), Pr (p value = 0, 01), and S phases (p value = 0, 02) and a lower level of skin conductance during the PT (p value = 0,02), Pr ( p value = 0,02), S (p value = 0,03), and F2 phases ( p value = 0,02). As for the other parameters evaluated, no differences were found between the groups. Conclusions: The present study suggests that an OT dose of 24 UI acts on the anticipation anxiety of healthy volunteers. This study is expected to contribute to the development of therapeutical interventions in anxiety disorders as well as possible agonist drugs.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2017-02-02T17:18:33Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Mayara Campêlo_Dissertação de mestrado_pós banca_versão Mônica_04.09.16.pdf: 2549632 bytes, checksum: 64ce0b1fe03a64305e5570dde8abb4e0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-02T17:18:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Mayara Campêlo_Dissertação de mestrado_pós banca_versão Mônica_04.09.16.pdf: 2549632 bytes, checksum: 64ce0b1fe03a64305e5570dde8abb4e0 (MD5) Previous issue date: 2016-03-07 / CNPQ / O exercício físico e as estimulações não invasivas do sistema nervoso central (SNC) são capazes de promover neuroplasticidade do SNC. Dentre as estimulações não invasivas destaca-se a estimulação transcraniana magnética repetitiva (EMTr) e, mais recentemente, a estimulação transcutânea medular por corrente contínua (ETMCC). O uso associado do exercício físico com a EMT ou com a ETMCC parece modular reflexos medulares. Contudo, não há evidência sistemática quanto aos efeitos da ETMCC sobre a excitabilidade da medula espinal, nem evidência comparativa das associações da ETMCC e da EMTr com o exercício físico. Portanto, essa dissertação apresenta dois artigos originais. O primeiro estudo é uma revisão sistemática com meta-análise que teve por objetivo sumarizar e avaliar o nível de evidência da eficácia da ETMCC em modificar a atividade medular. Dos sete estudos da revisão sistemática, cinco foram incluídos na meta-análise do efeito da ETMCC anódica e quatro na meta-análise do efeito da ETMCC catódica. Não houve efeito significante da ETMCC anódica e catódica, quando comparadas à ETMCC sham. Com isso, o estudo 1 conclui que não há evidência da eficácia da ETMCC em modular a excitabilidade medular. O segundo estudo é um crossover, triplo-cego, sham controlado, randomizado e contrabalanceado realizado com adultos saudáveis. Seu objetivo foi investigar as repercussões, nas excitabilidades medular e cortical, da associação da EMTr e da ETMCC com o exercício físico. Doze voluntários (24,75±2,77) foram submetidos a seis sessões experimentais, intercaladas por um período de 5 a 7 dias. Em cada sessão, um tipo de estimulação não invasiva do SNC (ETMCC anódica, ETMCC catódica, ETMCC sham, EMTr 20 Hz, EMTr1 Hz e EMTr sham) foi isoladamente associado a 20 minutos de exercício físico na esteira (EFE), em intensidade moderada. As repercussões das associações foram investigadas por meio de dois desfechos, avaliados antes (baseline), imediatamente (T0), 30 (T1) e 60 minutos (T2) após as intervenções. A excitabilidade medular (desfecho primário) e a excitabilidade cortical (desfecho secundário) foram mensuradas, respectivamente, por meio do componente doloroso do reflexo de retirada da perna (RIII) e de potenciais evocados motores (PEM). O estudo dois revelou que as intervenções ETMCC catódica/EFE (baseline/T0) e ETMr 20Hz/EFE (baseline/T0) aumentaram a excitabilidade medular, enquanto a aplicação da ETMr 1Hz/EFE (baseline/T2) e da ETMr 20Hz/EFE (baseline/T0, baseline/T1, e baseline/T2 ) aumentaram os níveis de excitabilidade cortical. Com isso, o estudo crossover demonstra que as associações EMTr/EFE e ETMCC/EFE podem interferir na atividade do SNC, mas apenas a ETMr 20Hz/EFE foi capaz de, simultaneamente, modular as excitabilidades cortical e medular. Portanto, a associação de estimulações não invasivas/EFE é capaz de modular o SNC e os efeitos decorrentes parecem depender do tipo de estimulação não invasiva aplicada. / Physical exercise and central nervous system (CNS) non invasive stimulation techniques, including repetitive transcranial magnetic stimulation (rTMS) and transcutaneous spinal direct current stimulation (tsDCS), are able to promote CNS plasticity. Furthermore, the association between physical exercise and rTMS or tsDCS appears to promote spinal reflexes modulation. However, there are not systematic evidence about tsDCS effects on spinal reflexes. Similarly, there are no comparative study about an associative intervention of physical exercise and rTMS or tsDCS.Thus, this masters dissertation presents two originals articles. The first one is a systematic review with meta-analysis aimed to summarize and evaluate the level of evidence of tsDCS efficacy to modify spinal cord excitability. Seven studies were included on this systematic review. From these, five using anodal tsDCS and four using cathodal tsDCS were included on meta-analysis. The results indicated that there were not significant effects of anodal and cathodal tsDCS, when compared to sham tsDCS. Therefore, the first article concluded that there are not evidence of tsDCS efficacy to modulate spinal cord excitability. The second article is a crossover, triple-blind, sham controlled, randomized and counterbalanced study with healthy individuals. The aim of this study was to investigate the repercussions of the association between rTMS or tsDCS and physical exercise over CNS excitability. Twelve volunteers performed six experimental sessions. On each session, one type of CNS non invasive stimulation technique (anodal tsDCS, cathodal tsDCS, sham tsDCS, rTMS 20 Hz, rTMS 1 Hz or rTMS sham) was associated with 20 minutes of treadmill. An interval between five and seven days was assumed as washout period. The physical exercise (treadmill) was perfomed on moderate intensity and the CNS excitability was investigated by two outcomes measures, assessed at four different time points: before (baseline), immediately (T0), 30 (T1) and 60 (T2) minutes after the interventions. Spinal cord (primary outcome) and cortical (secondary outcome) excitabilities were assessed by the painful component of withdrawal reflex (RIII) and by motor evoked potentials (MEP), respectively. The result reveled that cathodal tsDCS/treadmill (baseline/T0) and rTMS 20HZ/treadmill (baseline/T0) increased spinal cord excitability. Additionally, rTMS1 Hz/treadmill (baseline/T2) and rTMS 20Hz/treadmill (baseline/T0, baseline/T1 and baseline/T2) increased cortical excitability. Thereby, the crossover study demonstrated that rTMS/treadmill and TsDCS/treadmill associative intervention are able to interfere on CNS excitability. However, only rTMS 20Hz/treadmill was able to modulate cortical and spinal cord activity. Therefore, CNS non invasive technique and physical exercise associative intervention can modify CNS excitability and the after effects seems to be dependent on the type of stimulation.

Introdução: A ocitocina (OT) é um nonapeptídeo sintetizado nos núcleos paraventricular e supraóptico do hipotálamo. Quando liberada perifericamente pela neurohipófise, a OT atua como um hormônio e promove a liberação do leite durante a lactação e a contração uterina no parto. No entanto, quando liberada centralmente, a OT age como um neurotransmissor ou neuromodulador de diversos processos, tal como na modulação da ansiedade e na regulação das respostas neuroendócrina e cardiovascular. Sendo assim, o presente trabalho tem como objetivo avaliar os efeitos agudos da administração intranasal da OT na ansiedade em voluntários saudáveis submetidos ao Teste de Simulação de Falar em Público (TSFP), bem como seu papel na modulação das respostas neuroendócrina e hemodinâmica. Métodos: Ocitocina ou veículo foram administrados intranasalmente em voluntários saudáveis (n=14) 50 minutos antes do TSFP. Durante a sessão experimental foram realizadas as seguintes medidas: (1) basal (t = -30 min)), (2) pré-teste (t = -15 min), (3) preparação (t = +50 min), (4) desempenho (t = +1:03 h) , pós-teste 1 (t = 1:26 h) e pós-teste 2 (t = 1:46 h). Para a avaliação dos estados subjetivos de ansiedade foram utilizadas as seguintes escalas de auto-avaliação: 1.Escala Analógica de Humor; 2.Escala de Sintomas Corporais; 3. Versão de ?estado? da escala de auto-avaliação ao falar em público. Para a dosagem de cortisol sérico e ACTH plasmático foi utilizada a técnica de radioimunoensaio. Também foram realizadas as medidas de freqüência cardíaca, pressão arterial, condutância da pele e número de flutuações espontâneas da condutância da pele. Resultados: O grupo OT apresentou-se menos ansioso nas fases PT (p-valor = 0,03), com maior sedação nas fases PT (p-valor = 0,003), Pr (p-valor = 0,01) e S (p-valor = 0,02) e com nível de condutância da pele menor nas fases PT (p-valor = 0,02), Pr (p-valor = 0,02), S (p-valor = 0,03) e F2 (p-valor = 0,02). Nos outros parâmetros mensurados não foram encontradas diferenças intergrupos. Conclusão: O presente estudo sugere que a OT na dose de 24 UI possui ação na ansiedade antecipatória em voluntários saudáveis. Espera-se que este estudo contribua com o desenvolvimento de intervenções terapêuticas em transtornos de ansiedade e com o desenvolvimento de possíveis fármacos agonistas. / Introduction: Oxytocin is a nonapeptide that is synthesized in the hypothalamus paraventricular and supraoptic nuclei. When released peripherally by the neurohypophysis, it acts as a hormone that will promote milk ejection during lactation and uterine smooth muscle contraction during labor. However, when centrally released, OT acts as a neurotransmitter or neuromodulator of several processes, such as anxiety modulation and regulation of cardiovascular and neuroendocrine responses. The objective of this study was to assess the acute effect of OT, intranasally administered, on anxiety levels of healthy volunteers who submitted themselves to the Public Speaking Simulation Test as well as its role in the modulation of neuroendocrine and hemodynanic responses. Methods: Oxytocin, or vehicle, was intranasally administered to healthy volunteers (n= 14) fifty minutes before the Test. During the experimental session, the following assessments were performed: 1) Baseline (t = - 30 minutes); 2) Pre test (t = -15 minutes) ;3) Preparation ( t = + 50 minutes) ; 4) Performance ( t = + 1:03 hours) , and post test 1 ( t = 1:26 hours) and post test 2 ( t = 1:46 hours ). In order to evaluate anxiety subjective states, the following self-assessment scales were used: 1) Mood Analogical Scale, 2) Bodily Symptoms Scale, and 3) ?State? Self-Assessment Version of Public Speaking Scale. A radio immune assay was used for cortisol serum level and plasmatic ACTH measurements. Additionally, heart rate, blood pressure, skin conductance, and number of spontaneous fluctuations of skin conductance were checked. Results: The OT group was less anxious during the PT (p value =0, 03), with a higher sedation during the PT (p value = 0,003), Pr (p value = 0, 01), and S phases (p value = 0, 02) and a lower level of skin conductance during the PT (p value = 0,02), Pr ( p value = 0,02), S (p value = 0,03), and F2 phases ( p value = 0,02). As for the other parameters evaluated, no differences were found between the groups. Conclusions: The present study suggests that an OT dose of 24 UI acts on the anticipation anxiety of healthy volunteers. This study is expected to contribute to the development of therapeutical interventions in anxiety disorders as well as possible agonist drugs.

Orientador: Gilberto De Nucci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T05:49:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_FernandaCustodio_M.pdf: 2535372 bytes, checksum: 8c0543a6d03f7d2069375240a51187f3 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Um método simples, seletivo e sensível de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa em tandem (CLAE-EM/EM) foi desenvolvido para a determinação de dapaconazol (BL-125) em plasma humano usando tioconazol como padrão interno. As drogas foram extraídas a partir do plasma por uma extração líquido-líquido com éter/hexano (80/20, v/v). A cromatografia foi realizada em uma coluna analítica Genesis C18 partícula 4 ?m (100x2.1mm i.d) com uma fase móvel de metanol/acetonitrila/água (80/10/10,v/v/v) e acetato de amônia (0.5 mM). O dapaconazol foi quantificado usando um espectrômetro de massa com uma fonte de electrospray no modo positivo (ES+) configurado para o modo de monitoramento de múltiplas reações (MRM) para monitorar as transições 415.1 > 159.2 e 387.0 > 131.0 para o dapaconazol e tioconazol, respectivamente. O método teve tempo total de corrida de 3.8 min e uma curva de calibração linear no intervalo de 0.2-100 ng/mL (r = 0.9998). O limite inferior de quantificação (LIQ) foi de 0.2 ng/mL. Os valores de precisão e exatidão do ensaio estavam dentro de ± 10%. Os testes de estabilidade não indicaram nenhuma degradação significativa em condições do experimento. Este método foi usado posteriormente para um estudo de fase I de administração tópica de tosilato de dapaconazol em voluntários humanos saudáveis do sexo masculino / Abstract: A simple, selective and sensitive method based on high-performance liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) has been developed for the determination of dapaconazole (BL-125) in human plasma using tioconazole as internal standard. The drugs were extracted from plasma by liquid-liquid extraction with ether/hexane (80/20, v/v). The chromatography separation was performed on a Genesis C18 analytical column 4 ?m (100 x 2.1 mm i.d.) with a mobile phase of methanol/acetonitrile/water (80/10/10, v/v/v) and ammonium acetate (0.5 mM). Dapaconazole was quantified using a mass spectrometer with an electrospray source in the ESI positive mode (ES+) configured for multiple reaction monitoring (MRM) to monitor the transitions 415.1 > 159.2 and 387.0 > 131.0 for dapaconazole and tioconazole, respectively. The method had a chromatography run time of 3.8 min and a linear calibration curve over the range 0.2 ¿ 100 ng/mL (r = 0.9998). The lower limit of quantification (LLOQ) was 0.2 ng/mL. The precision and accuracy values of the assay were within ±10%. The stability tests indicate no significant degradation under conditions of experiment. This method was used for a phase I study of topical administration of dapaconazole tosylate in healthy human male volunteers / Mestrado / Farmacologia / Mestra em Farmacologia

Introdução: O café é uma das bebidas mais apreciadas e consumidas no mundo, por suas características organolépticas e efeito estimulante. Pelos potenciais efeitos na saúde causados por esta bebida surgiu, desde cedo, o interesse da comunidade científica. Como ainda ha controvérsias a respeito do café quanto aos seus reais efeitos, justifica-se este estudo em voluntários saudáveis e consumidores habituais de café. Objetivo: Comparar o consumo de dois diferentes graus de torras de café (torra média e escura) em 3 tipos de café: 100% arábica, blend e blend descafeinado e seus efeitos sobre o perfil metabólico em indivíduos saudáveis. Métodos: Em estudo prospectivo, foram avaliados 70 indivíduos sem qualquer doença associada, sendo 50 mulheres, com idade média de 47 ± 12 anos. Durante o período de seguimento no estudo, os voluntários que preencheram os critérios de inclusão, assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido e iniciaram no estudo, que teve um total de 77 dias. Cada voluntário realizou quatro visitas (T0, T1, T2 e T3). Primeiramente, os participantes foram randomizados para cada tipo de café: 100% arábica, blend ou blend descafeinado. Depois uma nova randomização foi feita para estabelecer a ordem de consumo dos dois graus de torra (média e escura), num estudo do tipo crossover. Na visita T0, o participante foi orientado a parar a ingestão do café ou qualquer alimento fonte de cafeína por 21 dias. Na visita T1 foram randomizados para iniciar o consumo de café filtrado primeiro com um tipo de torra (torra média ou torra escura) por 4 semanas e então com \"crossover\" para o outro tipo (visita T2), com um período total de 8 semanas de consumo de café. O café foi fornecido aos pacientes, sendo do mesmo tipo, do mesmo produtor e com a forma de preparo padronizada e consumo diário de café de 450-600 ml/dia. Após período de \"washout\" (basal) e após cada período de tomada de café por tipo de torra, os pacientes foram submetidos aos exames laboratoriais (Colesterol total e frações, triglicérides, glicemia de jejum, PCR, Lp(a), homocisteína e acido fólico) e avaliação antropométrica (peso e IMC). Resultados: Foi observado aumento do colesterol total, do LDL e do HDL no grupo que consumiu café do tipo Blend, para os dois tipos de torra quando comparados ao basal. Houve aumento significativo da homocisteína no grupo que consumiu café 100% arábica e Blend. No grupo que consumiu café 100% arábica houve aumento significativo da homocisteína somente na torra média quando comparado ao basal. Já no grupo que consumiu o café tipo blend a diferença significativa foi apenas entre as duas torras escura e média, na qual a escura apresentou valor menor que a torra média. Conclusão: Café promove aumento discreto nas dosagens de homocisteína quando consumido o café blend e 100% arábica. Aumentou também o colesterol total, LDL, e ao mesmo tempo o HDL, quando consumido café tipo Blend. Apesar de significativas, as alterações no perfil metabólico foram muito discretas. Seria muito difícil determinar a influência que o café tem no metabolismo lipídico dos indivíduos, mas talvez esse discreto aumento juntamente com algum efeito antioxidante pode contribuir para a redução de morte por doenças cardiovasculares como já foi observado em estudos epidemiológicos / Introduction: Coffee is one of the most popular beverages in the world. Given its high consumption, potential health effects caused by this beverage brought the interest of the scientific community. Considering the current knowledge and controversies about drinking coffee daily, justifies this study in healthy volunteers and habitual coffee drinkers. Objectives: To compare the consumption of two different coffee roasts degrees (medium and dark roast) on 3 types of coffee: 100% arabic, blend and decaffeinated blend coffee and its effects on metabolic profile in healthy subjects. Results: 70 healthy subjects, age 47 ± 12 years old participated in the trial. Most subjects were female (71,4%). This randomized crossover clinical trial lasted 77 days. All the volunteers performed four visits (T0 - T1 - T2 -T3). In the visits, the participants had blood samples taken, held clinical examinations and nutritional evaluation, aside from receiving orientation. Randomly, participants should drink 100% Arabic, blend coffee or decaffeinated coffee. Then, in a second stage, again randomly, volunteers were draw to see which roast they would start drinking. In T0, subjects were oriented to stop consuming all the foods and beverages, which contained coffee or caffeine for 21 days. In T1 subjects start consuming medium or dark roast paper-filtered coffee for 4 weeks. In T2 they start the other roast for another additional 4 weeks. In T3, subjects stopped the coffee consumption, thus the study was completed. Participants received the coffee powder according to randomization criteria previously described. It is the same kind of coffee from the same producer and way to prepare. The coffee daily consumption were between 450 -600 ml. After \"washout\" period and after each period drinking coffee, all the subjects had sample bloods taken, to assess total cholesterol and fractions, triglycerides, glycaemia, homocisteine, acid folic and anthropometric (weight and BMI - body mass index). After analyzing the results, we observed an increase in total cholesterol, LDL and HDL levels after blend coffee intake. A significative increase in homocisteine levels after 100% Arabic and blend coffee intake. The significant difference in the group that consumed 100% arabic coffee were in between basal and medium roast. But in in group that consumed blend coffee this significant difference in homocisteine were in between the two roasts, higher during medium roast. Conclusions: Those results demonstrate a slight increase in homocisteine, when consumed blend coffee and 100% Arabic coffee. Also increased total cholesterol and LDL but at the same time increased the HDL, when they drank blend coffee. Despite significant, those metabolic alterations were discrete. It is difficult to determine the coffee influence on lipid metabolism, but maybe this slight increase tin HDL together with some antioxidant effect can contribute to the reduction of death from cardiovascular disease as already noted in epidemiologic studies