Este estudo avaliou o efeito de soluções higienizadoras de próteses totais quanto ao controle do biofilme (análise clínica) e à alteração de propriedades da resina acrílica (análise laboratorial). A análise clínica foi realizada em 32 desdentados totais que foram orientados a escovar suas próteses (escova Denture e sabonete líquido) três vezes ao dia e imergí-las (″overnight″) nas soluções: 1) Controle: Água Natural; 2) Pastilha Corega Tabs; 3) Hipoclorito de Sódio 0,5%. Cada solução foi utilizada por 21 dias (03 ciclos de 07 dias). Ao final de cada ciclo, a superfície interna da prótese superior foi evidenciada (vermelho neutro 1%) e fotografada (HX1- Sony). As áreas (total e corada com biofilme) foram medidas (Image Tool 3.00), sendo a porcentagem de biofilme calculada como a relação entre a área do biofilme multiplicado por 100 e área da superfície total da base interna da prótese. Para a análise laboratorial, foram confeccionados 140 corpos de prova de resina acrílica termopolimerizável (Lucitone 550) que foram imersos por 08 horas nas soluções: 1) Controle 1 (sem imersão); 2) Controle 2 (água destilada); 2) Pastilha Corega Tabs; 3) Hipoclorito de sódio 0,5%, simulando uma higienização diária de 03 anos (1095 dias). Antes e após as imersões, os corpos de prova foram avaliados quanto à alteração de cor (Espectrocolorímetro Color Guide 45/0), rugosidade superficial (rugosímetro Surftest SJ-201P) e resistência à flexão (Máquina Universal de Ensaios DL 2000). Os dados de cor foram também calculados de acordo com a National Bureau of Standards (NBS). As análises estatísticas compreenderam o método de equações de estimação generalizadas (GEE) e comparações múltiplas (Teste de Bonferroni - α = 1,67%) para análise clínica; e Análise de Variância (ANOVA) e teste HSD de Tukey (α=0,05) para análise laboratorial. Os resultados clínicos mostraram que a imersão em hipoclorito de sódio 0,5% diminuiu a área coberta por biofilme (8,29 ± 13,26 - B), quando comparado ao controle (18,24 ± 14,91 - A) e à pastilha (18,18 ± 16,62 - A). O hipoclorito (2,75 ± 0,49 - B) e a pastilha (3,01 ± 0,35 - B) provocaram alteração de cor significativamente maior que o controle (0,66 ± 0,29 A), sendo classificadas como perceptível, segundo a NBS. As soluções não alteraram a rugosidade da resina. Houve uma diminuição na resistência à flexão dos grupos pastilha (85,61 ± 10,46 - C) e hipoclorito (82,17 ± 8,47 - C) quando comparados com o controle (sem imersão) (105,4 ± 14,93 - A). O controle (água destilada) apresentou uma redução na resistência à flexão (67,06 ± 11,89 - B). Os achados deste estudo revelaram que a solução de hipoclorito de sódio 0,5% foi a mais efetiva na remoção do biofilme das próteses totais e que ambas as soluções (hipoclorito de sódio 0,5% e peróxido alcalino) não alteraram a rugosidade superficial, porém provocaram alterações de cor classificadas como perceptíveis segundo a NBS, bem como acarretaram uma diminuição da resistência à flexão da resina acrílica termicamente ativada. / This study evaluated the effect of denture cleansers on denture biofilm removal (clinical trial) and changes the properties of acrylic resin (laboratory analysis). A randomized clinical trial was performed in 32 edentulous patients who were instructed to brush their dentures (denture-specific brush and liquid soap) three times a day and to soak them overnight in the solutions: 1) Control: Water; 2) Efervescent Tablet (Corega Tabs); 3) 0.5% Sodium Hypochlorite. Each solution was used for 21 days (03 alternate cycles of 07 days). At the end of each cycle, the inner surfaces of maxillary dentures were disclosed (1% neutral red) and photographed (HX1 Sony). Total and stained biofilm areas were measured (Image Tool 3.00), and the percentage of biofilm calculated as the ratio between the area of the biofilm multiplied by 100 and total surface area of the internal base of the denture. For laboratory analysis, 140 specimens were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and immersed for 08 hours in the solutions: 1) Control 1 (without immersion); 2) Control 2 (distilled water); 3) Efervescent Tablet Corega Tabs; 4) 0.5% Sodium Hypochlorite, simulating a daily hygiene of 03 years (1095 days). Before and after immersion, specimens were evaluated for color change (portable colorimeter Color Guide 450), surface roughness (Surface Roughness Tester SJ-201P) and flexural strength (universal testing machine DL 2000). Color data were also calculated according the National Bureau of Standards (NBS). Statistical analysis comprised the method of generalized estimating equations (GEE) and multiple comparisons (Bonferroni - α = 1.67%) for clinical analysis, and analysis of variance (ANOVA) and Tukey′s HSD test (α=0.05) for laboratory analysis. Clinical results showed that the immersion in sodium hypochlorite 0.5% reduced the area covered by biofilm (8.3 ± 13.3 - B) compared to the control (18.2 ± 14.9 - A) and tablet (18.2 ± 16.6 - A). Hypochlorite (2.8 ± 0.5 - B) and tablet (3.0 ± 0.4 - B) caused significantly higher color change than the control (0.7 ± 0.3 A); such changes were classified as noticeable, according to NBS. The solutions did not alter the roughness of the resin. There was a decrease in the flexural strength of the groups tablet (85.6 ± 10.5 - C) and hypochlorite (82.2 ± 8.5 - C) compared to control (without immersion) (105.4 ± 14.9 - A). The control (distilled water) showed a reduction in flexural strength (67.1 ± 11.9 - B). The findings revealed that the 0.5% sodium hypochlorite solution was the most effective for biofilm removal from complete dentures and that both solutions (0.5% sodium hypochlorite and alkaline peroxide) did not alter surface roughness, but caused color changes classified as noticeable according to the NBS, and resulted in a decrease of flexural strength of heat-polymerized acrylic resin.

Soluções auxiliares para higienização de próteses têm sido indicadas como método efetivo no controle de biofilme. Desta forma, este estudo teve por objetivo avaliar se as soluções (Cepacol/C, Cepacol Flúor/CF, Listerine/L, hipoclorito de sódio 0,05%/HS e água deionizada/AD, como controle) potencializam a perda de retenção do o\'ring (Conexão Sistemas de Prótese Ltda). Foi obtida uma base de teflon com dois análogos e pilares o\'ring e contra-bases, compostas pelas cápsulas metálicas e anéis, foram confeccionadas e divididas em grupos (n=6). Foram simulados 90 dias de imersão overnight, sendo obtido o valor da resistência à tração a cada 30 dias, utilizando a máquina de ensaios mecânicos (Material Testing System MTS 810), totalizando 4 leituras (T0, T1, T2 e T3). Foi realizada análise qualitativa por meio de microscopia eletrônica de varredura em um espécime de cada grupo. Os dados da força de retenção (N) foram analisados estatisticamente pelos testes ANOVA e Bonferroni (α=0,05). Os resultados demonstraram que a retenção diminuiu significativamente com o tempo (P=0,0001) e com o uso das soluções (P=0,0000) e houve interação entre os fatores de variação (P=0,0245). A retenção no T0 (11,25) foi maior que no T1 (9,63), T2 (8,76) e T3 (8,40). No T1 foi maior que nos demais tempos e entre T2 e T3 não houve diferença significante. Entre as soluções avaliadas, o HS causou a maior redução da força de retenção (7,00). Os enxaguatórios C e L propiciaram médias similares (10,41 e 10,09, respectivamente) à AD (10,91). O CF propiciou resistência similar (9,14) aos enxaguatórios C e L. No C e no HS a retenção diminuiu significativamente a partir de 30 dias. No L e no CF, a diminuição da retenção ocorreu após 60 dias. Na AD, a retenção se manteve pelo período de 90 dias. Após 90 dias, o C propiciou retenção similar à água deionizada. As eletromicrografias apontaram alteração dos anéis: no do grupo do HS, houve presença de solução de continuidade do material e no do CF, formação de uma película com precipitados cristalinos. Conclui-se que após 3 meses de imersão, os valores obtidos em todas as soluções se apresentaram acima do mínimo indicado para a retenção (5 N), entretanto as soluções de hipoclorito de sódio 0,05% e Cepacol Flúor devem ser evitadas devido aos efeitos deletérios causados no material. / Denture cleansers have been widely indicated as an effective auxiliary method to biofilm control. The aim of this study was to evaluate the effect of these solutions Cepacol/C, Cepacol Fluor/CF, Listerine/L, 0,05% sodium hypochlorite/SH and deionized water /DA - control) on the retention loss of overdentures nytril o\'rings (Conexão Sistemas de Prótese Ltda). Teflon dies containing 2 implants and abutments and acrylic specimens with the metal caps were obtained and divided into the groups (n = 6). Ninety overnight soaks were performed simulating 3 months of care. At each 30 immersions, the peak load of tensile strength was registered (Material Testing System MTS 810), and 4 tests wereperformed (T0, T1, T2 e T3). Qualitative method by scanning electronic microscopy (SEM) was used for complementary analyzes. The data were statistically analyzed by the ANOVA and Bonferroni tests (α=0.05). The results showed that the retention decreased with time (P = 0.0001) and with the use of solutions (P = 0.0000) and there was interaction between variation factors (P = 0.0245). Retention in T0 (11.25) was higher than in T1 (9.63), T2 (8.76) and T3 (8.40). In T1, the retention was higher than in other times and between T2 and T3 no significant difference. Among the solutions evaluated, the HS caused the greatest reduction in retention force (7.00). The C and L rinses propitiated similar averages (10.41 and 10.09, respectively) to AD (10.91). The CF provided similar resistance (9.14) to C and L rinses In C and HS, the retention decreased significantly from 30 days. In CF and L, the retention decrease occurred after 60 days. In AD, the retention was maintained for 90 days. After 90 days, C promoted retention similar to deionized water. The electron micrographs showed alteration of the rings: in HS group, there was presence of a discontinuity of the material and in CF, there was a film forming with crystalline precipitates. It can be concluded that after 3 months of immersion, the values of all the solutions were above the minimum suitable for retaining (5 N), however, solutions of sodium hypochlorite 0.05% and Cepacol Fluor should be avoided due to deleterious effects on the material.

Este estudo clínico-laboratorial avaliou uma solução à base de Ricinus communis para higiene de próteses totais, comparando-a ao hipoclorito de sódio, quanto à efetividade na remoção do biofilme, remissão de Candidíase Atrófica Crônica, grau de satisfação dos pacientes e rugosidade superficial da resina acrílica termopolimerizada. Sessenta e quatro usuários de próteses totais com ausência (n=40) ou presença de Candidíase (n=24) foram selecionados e orientados a escovar as próteses com escova específica e sabão neutro por 3 minutos, 3 vezes ao dia e imergi-las nas soluções de higiene (Hipoclorito de sódio 0,25% - S1; e 0,5% - S2; R. communisa 10% - S3; Salina - S4: controle) por 20 minutos. As soluções foram utilizadas de forma cruzada e randomizada com períodos de \"wash out\". Para quantificação do biofilme (ImageTool 3.0), a superfície interna foi evidenciada (vermelho neutro 1%) e fotografada ao final de cada período. A remissão da Candidíase foi avaliada por atribuição de escores antes e após o uso das soluções. A satisfação dos pacientes foi analisada por questionário. A rugosidade da superfície polida e não polida de 40 espécimes (90x30x4mm) de resina foi avaliada antes e após a exposição dos mesmos ao protocolo clínico de higiene por meio de rugosímetro e Microscopia Eletrônica de Varredura. A remoção do biofilme foi analisada como um \"split-plot\" com dois fatores de variação: presença de inflamação e soluções. A remissão da Candidíase foi analisada após ajuste dos dados por regressão logística multinomial. Para análise da satisfação dos pacientes os dados foram ajustados por regressões logísticas e foi adotada análise de simetria composta. Para avaliação da rugosidade das superfícies polida e não polida foi empregada análise de variância com dois fatores (período e solução). Todas as análises foram realizadas com nível de significância de 5%. Não houve diferença na porcentagem de biofilme entre pacientes com e sem inflamação, bem como na interação entre os fatores. Houve diferença entre soluções, sendo que o Hipoclorito de sódio a 0,25 e 0,5% promoveu as menores médias de biofilme (4,41±7,98 e 2,93±5,23), seguido do R. communis(6,95±10,93) e Salina (11,07±11,99). Para remissão da Candidíase, as soluções mais eficientes foram R. communis(50%) e Hipoclorito de sódio 0,25% (46%). O questionário de satisfação não indicou diferença entre as soluções. A rugosidade da superfície polida não foi alterada pelo período (p=0,062). Houve alteração em função das soluções (p=0,00) e da interação entre os fatores (p=0,005). Para S1 e S4, o período não influenciou na rugosidade. Para S2, houve alteração a partir de 07 dias, permanecendo estável após 14 dias. Para S3, houve alteração e estabilização a partir de 14 dias. Após 07 e 14 dias, S2 e S3 promoveram as maiores alterações, porém após 21 dias, não houve diferença entre as soluções, exceto a salina. A superfície não polida não foi influenciada pelos fatores período (p=0,358), solução (p=0,120) e interação (p=0,204). Concluiu-se que há viabilidade do uso do hipoclorito de sódio em menores concentrações e do Ricinus communis para remoção do biofilme, remissão da Candidíase e controle da rugosidade superficial. / This clinical-laboratory study evaluated a solution based on Ricinus communis for denture cleansing, comparing it to sodium hypochlorite, regarding biofilm removal capacity, remission of atrophic chronic candidiasis, degree of patient satisfaction and surface roughness of heat-polymerized acrylic resin. Sixty-four denture wearers with absence (n = 40) or presence of Candidiasis (n = 24) were selected and oriented on how to brush their dentures with a specific brush and mild soap for 3 minutes, 3 times a day and immerse them in hygiene solutions (0.25% sodium Hypochlorite - S1 and 0.5% - S2, R. communis 10% - S3; Saline - S4: control) for 20 minutes. The solutions were used in a randomized and cross form with \"washout\" periods. To quantify biofilm (ImageTool 3.0), the inner surface was disclosed (1% neutral red) and photographed at the end of each period. The remission of Candidiasis was assessed by assigning scores before and after using solutions. Patient satisfaction was assessed by questionnaire. The surface roughness of 40 polished and unpolished resin specimens (90x30x4mm) was evaluated before and after their exposure to clinical protocol hygiene by surface roughness and scanning electron microscopy. The biofilm removal was analyzed as a \"split-plot\" with two variation factors: inflammation and solutions. The candidiasis remission was analyzed after adjustment using multinomial logistic regression. For patient satisfaction logistic regression analysis was adopted and compound symmetry. For evaluation of surface roughness polished and unpolished was employed analysis of variance with two factors (time and solution). All the analysis were performed with a significance level of 5 %. There was no difference in the percentage of biofilm between patients with and without inflammation, as well as the interaction between the factors. There were differences among the solutions, having the Sodium Hypochlorite 0.25 % and 0.5% promoted the lowest average biofilm (4.41±7.98 and 2.93±5.23), followed by R. communis (6.95±10.93) and Saline (11.07±11.99) . For the remission of candidiasis, the most efficient solutions were R. communis (50%) and 0.25% sodium hypochlorite (46%). The satisfaction questionnaire indicated no difference among the solutions. The roughness of the polished surface was not affected by time (p = 0.062). There was a change in function of the solutions (p = 0.00) and the interaction between factors (p = 0.005). For S1 and S4, the period did not influence the roughness. For S2, there was a change from 07 days, remaining stable after 14 days. For S3, there were changes and stabilization from 14 days. After 7 and 14 days, S2 and S3 promoted major changes, but after 21 days, there were no difference among the solutions except the saline. The unpolished surface is not influenced by factors: period (p = 0.358), solution (p = 0.120) and interaction (p = 0.204). It was concluded that there is feasibility for using sodium hypochlorite at lower concentrations and Ricinus communis for the removal of biofilm, remission of candidiasis and control of surface roughness.

A higienização das próteses removíveis é fundamental para a longevidade do tratamento e prevenção de patologias orais. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de higienizadores de imersão nas superfícies da liga metálica e resina acrílica termopolimerizável de Prótese Parcial Removível (PPR), simulando 180 dias. Discos (12 mm x 3 mm) foram confeccionados com ligas metálicas de cobalto-cromo para PPR: Vera PDI® (VP) e DeguDent® (DD). Cada disco metálico foi incluído em mufla previamente preparada por matrizes de teflon (38 mm x 18 mm x 4 mm), incorporando-se o disco metálico à resina acrílica termopolimerizável. Os espécimes (n= 5) foram imersos nas seguintes soluções: água destilada (grupo controle - AD), hipoclorito de sódio 0,05% (HS), Cepacol® (cloreto de cetilpiridínio 0,005% - CE), Periogard® (digluconato de clorexidina 0,12% - PE), Corega Tabs® (peróxido alcalino e enzima - CT), Polident® (peróxido alcalino e enzima - PO) e Medical Interporous Dentures® (ácido cítrico - MI). Foram realizadas análise da estabilidade de cor por meio de espectrocolorímetro, análise visual da presença de manchas no metal, análise da perda de massa em balança de alta precisão e análise da rugosidade por meio de rugosímetro. Como estudo complementar, foram realizadas análises quantitativas da liberação de íons (cobalto e cromo) em cada solução com espectrômetro de massas e análises ópticas e qualitativas com microscópio eletrônico de varredura (MEV) e espectrometria de energia dispersiva de Raios-X (EDS). Os resultados de rugosidade, alteração de cor e massa apresentaram distribuição normal e homogênea, tendo sido submetidos à ANOVA e teste de Tukey (p< 0,05). Quanto à rugosidade (Ra&micro;m), não houve diferença estatisticamente significante entre as soluções e ligas tanto para o metal quanto para a resina. Com relação à alteração de cor da resina acrílica termopolimerizável (&Delta;E), houve diferença estatisticamente significante entre as ligas, soluções e na interação liga x solução. As soluções AD, CE e PE propiciaram menores valores que as demais. A resina associada à DD apresentou maior alteração de cor do que quando associada à VP (1,06 ± 0,51 e 0,51 ± 0,28, respectivamente). Com relação à presença de manchas no metal, o HS propiciou manchamento em 100% dos espécimes. O grupo MI/DD propiciou em 60% e o MI/VP em 40% dos espécimes. Quando avaliada a alteração de massa (g), as soluções CT e MI propiciaram maiores valores. Entre as ligas, a VP apresentou maior perda de massa. Com relação à liberação de íons cobalto e cromo, a solução de HS e a MI propiciaram maior liberação e quando comparadas as ligas, VP apresentou maior liberação de íons. Com o MEV pôde-se verificar que houve corrosão generalizada com o HS e por pites com a MI. Concluiu-se que as soluções CE, PE e PO não apresentaram efeitos deletérios podendo ser auxiliares à escovação para higienização de PPR. / The hygiene care of the removable dentures is required for the longevity of the treatment and prevention of oral diseases. The aim of this study was to evaluate the effect of denture cleansers on the surfaces of the alloys and heat-polymerized acrylic resin for removable partial denture (RPD), simulating a period of 180 days. Circular specimens (12 mm x 3 mm) had been fabricated with cobalt-chromium alloys: Vera PDI&trade; (VP) and DeguDent&trade; (DD). The cast specimens were centered in the moulds previously prepared by matrices of teflon (38 mm x 18 mm x 4 mm) and the acrylic resin was inserted. The specimens (n= 5) had been immersed in the following solutions: distilled water (control - DW), sodium hypochlorite 0.05% (SH), Cepacol&trade; (cetilpiridinium chloride 0.005% - CE), Periogard&trade; (chlorexidine gluconate 0.12% - PE), Corega Tabs&trade; (alkaline peroxide and enzyme - CT), Polident&trade; (alkaline peroxide and enzyme - PO) and Medical Interporous Dentures&trade; (citric acid - MI). The color stability was analyzed using a colorimeter, and the presence of tarnishes on the metal was performed by a visual analysis. The weight loss was measured with a precision balance and the surface roughness was analyzed with a surf-test analyzer. As complementary analyzes a quantitative study of ions release (cobalt and chromium) using inductively mass spectrometry and optical and qualitative analyses with scanning electron microscopy (SEM) associated to dispersive energy spectrometry were performed. The results of roughness, color stability and weight loss presented normal and homogeneous distribution and were submitted to ANOVA (p &le; 0.05) and Tukey test. There was no significant difference among the solutions and between the alloys for both metal and resin roughness (Ra &micro;m). The acrylic resin color stability (&Delta;E) was analyzed and showed significant difference among the solutions, alloys and interaction. AD, CE and PE solutions presented the lowest values of color changes. The resin associated to DD presented higher color change than when associated with the VP (1.06 ± 0.51 and 0.51 ± 0.28, respectively). The HS caused tarnishes on 100% of specimens. The MI/DD group provided 60% and the MI/VP in 40% of specimens. When was analyzed the mass loss (g), the solutions CT and MI had the higher values. Between the alloys VP presented higher weight loss. HS and MI presented greater ionic release and between the alloys, VP presented greater release. With the SEM it was possible observe the presence of widespread corrosion in the HS group and pites corrosion in the MI group. It was concluded that CE, PE, CT and PO solutions had no deleterious effects on the compounds of RPD and may be indicate as auxiliaries to brushing in the RPD hygiene care.

Orientador: Altair Antoninha Del Bel Cury / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-21T19:13:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lucena_SilviaCarneirode_D.pdf: 2411404 bytes, checksum: 60623a707d801134f36a5179acd0d512 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A adequada higienização das próteses dentais removíveis é fundamental para prevenir o acúmulo de biofilme, que funciona como reservatório de microorganismos que podem levar a infecções locais e sistêmicas. Apesar de a escovação constituir um método bem estabelecido para tal fim, limitações visual e motora de alguns pacientes reduzem sua eficácia. Assim, o uso de limpadores químicos (LQ) tem sido indicado como método complementar para remoção do biofilme. Frente ao exposto, os objetivos deste trabalho foram (i) avaliar in vitro o efeito da imersão diária em LQ sobre biofilmes multiespécies desenvolvidos em resina para base de próteses removíveis e (ii) avaliar in vivo o efeito do LQ no controle do biofilme de próteses parciais removíveis (PPR). Para o estudo in vitro, foram confeccionados discos de resina acrílica sobre os quais foram desenvolvidos biofilmes multiespécies (Candida albicans, Veillonella dispar, Streptococcus mutans, Streptococcus oralis, Fusubacterium nucleatum e Actinomyces naeslundii). Após 64,5 horas de desenvolvimento do biofilme, os espécimes foram aleatoriamente distribuídos em grupos controle e experimental. Os espécimes do grupo experimental foram submetidos a imersões diárias de 3 minutos na solução de LQ (Polident® 3 minute) por sete dias consecutivos; o biofilme do grupo controle foi desenvolvido durante o mesmo período sem tratamento. O biofilme de ambos os grupos foi coletado após 1, 4 e 7 dias experimentais (n=16) e analisados quanto ao número de células viáveis e concentração de polissacarídeos. Adicionalmente, a topografia superficial do biofilme e a morfologia celular foram analisadas através de microscopia eletrônica de varredura e confocal a laser. Para a avaliação in vivo, foram selecionados 25 voluntários usuários de PPR. Estes foram instruídos a complementar a higienização das próteses imergindo-as na solução do LQ (Polident® 3 minute) diariamente, por 3 minutos, durante 15 dias. O biofilme presente nas próteses foi coletado imediatamente antes e após o período experimental e o número de micro-organismos totais, estreptococos totais e Candida spp. foi quantificado. No estudo in vitro, foi observado que a imersão diária no LQ reduziu significativamente o número de micro-organismos totais quando comparado ao grupo controle nos três períodos avaliados (Análise de variância a dois fatores, p<0,05). Esta redução também foi observada para as bactérias individualmente e F. nucleatum e V. dispar não foram detectadas nos biofilmes expostos ao LQ. Observou-se um aumento gradativo na contagem de células de C. albicans no grupo experimental, comportamento inverso ao grupo controle no qual houve redução do número de células fúngicas viáveis. A concentração de polissacarídeos extracelulares no biofilme foi maior no grupo experimental após sete dias de limpeza quando comparado ao controle (Análise de variância a dois fatores, p<0,05). As imagens de microscopia revelaram elevada quantidade de hifas de C. albicans no grupo experimental. No estudo in vivo, observou-se uma redução significativa do número de micro-organismos totais e estreptococos totais após o período experimental (Teste-t pareado, p<0,05). Entretanto, não houve diferença para as contagens de Candida spp.. Conclui-se que a exposição diária ao limpador químico reduziu significativamente os micro-organismos totais viáveis em biofilmes multiespécies mas não apresentou eficácia sobre Candida / Abstract: The maintenance of adequate denture hygiene is of paramount importance to prevent biofilm accumulation which acts as a reservoir of microorganisms that can cause local and systemic infections. Although brushing is a well established method for denture cleaning, visual and manual limitations of some patients can reduce its efficacy. Therefore, the use of denture cleansers (DC) has been indicated as a complementary method for denture hygiene. Considering this, the aims of this study were to (i) evaluate, in an in vitro model, the effect of daily immersion in DC on a multispecies biofilm develop on denture-base acrylic resin and (ii) assess the effect of DC on controlling biofilm from removable partial dentures (RPD) surfaces. For the in vitro study, specimens were fabricated using acrylic resin on which it was develop a multispecies biofilm (Candida albicans, Veillonella dispar, Streptococcus mutans, Streptococcus oralis, Fusubacterium nucleatum e Actinomyces naeslundii). After 64.5 hours of biofilm growth, the specimens were randomized into control and experimental groups. The specimens of experimental group were submitted to 3-minutes immersions on DC solution daily for seven consecutive days; the biofilms of control group were developed for the same period without any treatment. The biofilms from both groups were collected after 1, 4 and 7 experimental days (n=16) and analyzed for viable cells and polysaccharides concentration. Additionally, the biofilms topography and cellular morphology were analysed by scanning electron microscopy ) and confocal microscopy. For in vivo evaluation of DC, 25 volunteers that used RPD were selected. They were instructed to complement their dentures hygiene by immersing them on DC solution, for 3 minutes, during 15 days. The biofilm present on RPD was collected immediately before and after the experimental period and the number of total microorganisms, total streptococci and Candida spp. were quantified. In the in vitro study, it was observed that daily immersion on DC significantly reduced the total microorganisms in comparison to control group, in all periods evaluated. (Two-way Anova, p<0.05). This reduction was also observed for individual bacteria and F. nucleatum and V. dispar were not detected on biofilms exposed to DC. It was observed a gradual increase of C. albicans count in biofilms of experimental group while, in control group, Candida counts decreased and it was not observed viable cells after seven experimental days. Additionally, extracellular polysaccharides concentration was significantly higher in experimental group after 7 days of treatment (Two way Anova, p<0.05). The microscopy images revealed a remarkable presence of hyphae in experimental group. In clinical study, it was observed a reduction on total microorganisms and total streptococci. However, no difference was observed in Candida spp. counts (paired t-test, p<0.05). It can be concluded that daily exposure to DC reduced total microorganisms on multispecies biofilms but did no demonstrated efficacy on Candida / Doutorado / Protese Dental / Doutora em Clínica Odontológica

Este estudo clínico randomizado avaliou o efeito de soluções químicas, quanto à remoção de biofilme e ação antimicrobiana, na higienização das próteses totais superiores e escovas específicas. Quarenta e cinco participantes foram orientados a escovar suas próteses (escova específica para prótese e sabonete neutro) três vezes ao dia e imergí-las, uma vez ao dia, nas soluções: Grupo I- Solução salina (controle negativo); Grupo II- Hipoclorito de sódio 0,2% (controle positivo); Grupo III- Peróxido Alcalino (Efferdent® Power Clean Crystals); Grupo IV- Ricinus communis a 6,25%. Além disso, os participantes também foram randomizados para a imersão (n=23) ou não imersão (n=22) das escovas específicas nas soluções, juntamente às próteses, para avaliação das escovas quanto à ação antimicrobiana e degradação das cerdas. As avaliações foram realizadas antes (Baseline) e após os 7 dias de uso de cada solução. Para a remoção de biofilme, as próteses foram evidenciadas (vermelho neutro 1%), fotografadas e a área de biofilme foi mensurada (Image Tool 3.00). A ação antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de Candida spp. e Streptococcus mutans. Para coleta do biofilme das próteses, as mesmas foram escovadas (escova Tek e solução salina) por 2 minutos, sendo a suspensão transferida para tubos de ensaio. As escovas foram preparadas, colocadas em meio de cultura Letheen Broth (20 mL) e levadas para cuba ultrassônica, seguido de agitação mecânica e centrifugação (6000 rpm, por 7 minutos). Diluições decimais (100 até 10-3) com alíquotas (50 L) de cada diluição foram cultivadas em placas de Petri contendo meio de cultura adequado, para posterior incubação (aerobiose) por 48hs e contagem do número de colônias. As diferenças entre imersão ou não imersão da escova foram avaliadas pelo teste de Mann-Whitney (&alpha;=0,05). As propriedades de remoção de biofilme e ação antimicrobiana foram avaliadas pelo teste de Friedman, seguido pelo teste de Wilcoxon (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram que, para a propriedade de remoção de biofilme, em ambos os grupos (com e sem imersão da escova), as soluções de hipoclorito de sódio a 0,2% [com imersão: posto-médio (PM)=1,41; sem imersão: PM=1,48], Efferdent® (com imersão: PM =2,41; sem imersão: PM =2,25) e Ricinus communis a 6,25% (com imersão: PM=2,48; sem imersão: PM=2,77) foram eficazes e semelhantes (p<0,001). Para as próteses, foi verificada ação antimicrobiana frente a Candida spp. para todas as soluções (hipoclorito de sódio a 0,2%: com imersão PM=2,22, sem imersão PM=2,09; Efferdent®: com imersão PM=2,24, sem imersão PM=2,57; Introdução | 22 Ricinus communis a 6,25%: com imersão PM=2,20, sem imersão PM=2,75). Frente a S. mutans, as soluções de hipoclorito de sódio a 0,2% (com imersão: PM=2,13, sem imersão: PM=1,96) e Efferdent® (com imersão: PM=2,26, sem imersão: PM=2,18) foram as mais eficazes e a solução de Ricinus communis a 6,25% (com imersão: PM=2,39, sem imersão: PM=2,75) apresentou valores intermediários (p<0,001). Não houve diferença significante na contagem UFC/mL de Candida spp. para as escovas, tanto para o grupo que não realizou a imersão das escovas (p=0,108), como para os que realizaram o procedimento (p=0,467). Para S. mutans, não houve diferença significante entre as soluções (p<0,001) para o grupo que não realizou a imersão das escovas, enquanto que para o grupo com imersão da escova o Efferdent e hipoclorito de sódio a 0,2% mostraram redução na contagem UFC/mL de S. mutans quando comparado ao grupo Controle (p=0,001). A solução de Ricinus communis a 6,25% apresentou valores intermediários. As imagens em microscopia eletrônica mostraram grande deterioração das cerdas após 7 dias de uso, e a solução de hipoclorito de sódio promoveu um maior número de ranhuras nas cerdas quando imersas. Concluiu-se que todas as soluções foram efetivas na remoção do biofilme e frente a Candida spp., no entanto, frente a S. mutans, as soluções de hipoclorito de sódio a 0,2% e Efferdent® foram efetivas, enquanto a solução de Ricinus communis a 6,25% promoveu ação intermediária. Em relação as escovas, não houve diferença entre os grupos em relação ao protocolo de imersão e na redução de UFC/mL de Candida spp. e S. mutans / This randomized clinical study evaluated the effect of chemical hygiene solutions on biofilm removal and antimicrobial action of denture and specific brushes. Forty-five participants were instructed to brush their dentures (specific brush and liquid soap) three times a day and to soak them, once a day, in the solutions: Group I- Saline solution (negative control); Group II - Sodium hypochlorite 0.2% (positive control); Group III - Alkaline Peroxide (Efferdent® Power Clean Crystals); Group IV Ricinus communis 6.25%. In addition, the participants were also randomized to immersion (n=23) or non-immersion (n=22) of the specific brushes in the solutions, with the dentures, to evaluate the brushes for antimicrobial action and bristle degradation. Evaluations were performed before (Baseline) and after 7 days of use of each solution. For the biofilm removal, the dentures were disclosed (1% neutral red), photographed and the biofilm area was measured (Image Tool 3.00). The antimicrobial action was evaluated by counting Candida spp. and Streptococcus mutans. To collect denture biofilm, dentures were brushed (Tek brush and saline solution) for 2 minutes, and the suspension transferred to test tubes. The brushes were prepared and placed at Letheen Broth (20 mL) and taken to ultrasonic vessel, followed by mechanical shaking and centrifugation (6000 rpm for 7 minutes). Decimal dilutions (100 to 10-3) with aliquots (50 L) of each dilution were grown in Petri dishes containing suitable culture medium, for further incubation (aerobiose) for 48 h and counting the number of colonies. The differences between brushes immersion or non-immersion by the Mann-Whitney test (&alpha;=0.05). The properties of biofilm removal and antimicrobial action were evaluated by Friedman test, followed by the Wilcoxon test ( &alpha;= 0.05). The results showed that, for the biofilm removal property, in both groups (brush immersion or non-immersion), 0.2% sodium hypochlorite [immersion: Mean-Rank (MR)=1.41; non-immersion: MR=1.48], Efferdent® (immersion: MR=2.41, non-immersion: MR=2.25) and 6.25% Ricinus communis (immersion: MR=2.48; non-immersion: MR=2.77) were effective and similar (p <0.001). For dentures, was founded antimicrobial action against Candida spp. for all solutions (0.2% sodium hypochlorite: immersion: MR=2.22, non-immersion: MR=2.09; Efferdent ®: immersion: MR=2.24, non-immersion: MR=2.57; 6.25% Ricinus communis: immersion: MR=2.20, non-immersion: MR=2.75). Against S. mutans, 0.2% sodium hypochlorite (immersion: MR=2.13, Introdução | 26 non-immersion MR=1.96) and Efferdent® (immersion: MR=2.26, non-immersion: MR=2.18) were the most effective and 6.25% Ricinus communis (immersion: MR=2.39, non-immersion: MR=2.75) showed intermediate values. There was no significant difference in the brushes CFU/mL of Candida spp. for group that did not perform brush immersion (p=0.108), as well as for those who performed the procedure (p=0.467). For S. mutans, there was no significant difference between the solutions (p <0.001) for the group that did not immerse the brushes, whereas for the brush-immersion group, Efferdent and 0.2% sodium hypochlorite showed a reduction in the UFC / mL count of S. mutans when compared to the Control group (p=0.001). 6.25% Ricinus communis presented intermediate values. The electron microscopy images showed a great deterioration of the bristles after 7 days of use, and the sodium hypochlorite solution promoted a greater number of grooves in the bristles. It was concluded that all solutions were effective for biofilm removal and Candida spp.. However, for S. mutans 0.2% sodium hypochlorite and Efferdent® were effective, whereas 6.25% Ricinus communis showed intermediate action. Regarding the brushes, there was no difference between the groups in relation to the immersion protocol and in the reduction of CFU/mL of Candida spp. and S. mutans

O objetivo desse estudo in vitro foi avaliar a efetividade antimicrobiana de higienizadores à base de peróxidos frente a biofilme multiespécies e o impacto dessas soluções na redução da carga microbiana, atividade metabólica e do biofilme agregado. A partir de matrizes circulares metálicas (15 x 3 mm), foram confeccionados corpos de prova de resina acrílica termopolimerizável os quais foram esterilizados em micro-ondas (650W, por 6 minutos) e inoculados com suspensão de 105 UFC/mL de Candida albicans (Ca) e 106 UFC/mL de Staphylococcus aureus (Sa) e de Pseudomonas aeruginosa (Pa). Após contaminação, os corpos de prova foram incubados a 37 ºC por 20 h e, em seguida, por meio de uma cesta de aço inoxidável, foram imersos em Béquer com as seguintes soluções, de acordo com as instruções do fabricante (n=9): Grupo CP (Controle positivo) - imersão em PBS (Phosphate-Buffered Saline); Grupo MI NitrAdine e Grupo FX Fixodent. Em seguida, foram lavados (PBS) e imersos em meio de cultura Letheen, para a avaliação da esterilidade e obtenção de diluições seriadas (100 a 10-3), as quais foram semeadas em meios de cultura específicos: CHROMagar Candida para C. albicans, Manitol Salt Agar para S. aureus e Agar Cetrimide para P. aeruginosa. Após incubação, de acordo com morfologia típica, o número de colônias características foi mensurado e o número de UFC/mL calculado. A avaliação da atividade metabólica foi realizada pelo método de redução do XTT e a viabilidade celular foi avaliada por microscopia de epifluorescência (n=2). Os dados obtidos para as variáveis de UFC/mL (Sa e Pa), Unidades de Absorbância e Percentual de Área, foram avaliados pelo teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo teste de Dunn (=0,05). Para comparação entre os dados vinculados (Percentual de área de células vivas e totais) empregou-se também o teste de Wilcoxon. Os dados da variável de UFC/mL para C. albicans foram avaliados pelo teste de ANOVA e pós-teste de Tukey, uma vez que apresentaram distribuição normal. Os resultados de UFC/mL mostraram diferença significativa entre os grupos (Ca p=0,002, Pa p<0,001e Sa p<0,001) havendo redução significante do número de UFC/mL de C. albicans [MI: 2,13 (1,17)], de P. aeruginosa [FX: 2,96 (1,76 4,17) e MI: 0,00 (-0,43 2,06)] e S. aureus [FX: 3,59 (2,97 4,31) e MI: 1,90 (0,40 3,01)], quando comparado aos grupos controles [CP:Ca: 4,02 (0,85), CP:Pa: 6,43 (6,02 6,61) e CP:Sa: 5,67 (5,41 6,31)]. Houve redução da atividade metabólica do biofilme multiespécies (p<0,001), em ambas as soluções higienizadoras [FX: 0,001 (-0,006 0,058) e MI: 0,000 (- 0,002 0,066)] quando comparadas ao Grupo Controle [CP: 0,068 (0,046 0,190)]. As imagens da microscopia de epifluorescência revelaram redução significativa da área de biofilme agregado sobre os corpos de prova após a imersão nos higienizadores [FX: 85,19 (77,23 86,42) e MI: 78,42 (70,91 81,65)] quando comparados ao grupo controle (p<0,001). Na comparação entre as áreas de biofilme vivo e total pode-se observar diferenças entre as áreas do biofilme multiespécies (p<0,001), após a imersão nos higienizadores avaliados. Conclui-se que os higienizadores de prótese conseguiram reduzir a atividade metabólica bem como o biofilme agregado, embora nenhum higienizador tenha conseguido remover completamente o biofilme multiespécies. O higienizador NitrAdine foi o mais efetivo na redução da carga microbiana do biofilme multiespécies. A P. aeruginosa foi mais suscetível a ação dos higienizadores do que o S. aurueus e C. albicans, quando associada em biofilme multiespécies / The objective of this in vitro study was to evaluate the peroxides soluions antimicrobial effectiveness of against the viability of multispecies biofilm and the impact of these solutions on the reduction of microbial load, metabolic activity and biofilm aggregate. Acrylic resin specimens were obtained by a circular metal matrix (15 × 3 mm), sterilized with microwave irradiation (650 W, 6 min) and contaminated with contaminated with 105 CFU/mL suspension of Candida albicans (Ca) and 106 CFU/mL suspensions of Staphylococcus aureus (Sa) and Pseudomonas aeruginosa (Pa). After contamination, the specimens were incubated at 37 ° C for 20 hours and then immersed in Becker through a stainless-steel basket, on the following solutions according to the manufacturer\'s instructions (n=9): Group CP (positive control) immersion in PBS (Phosphate-Buffered Saline); Group MI NitrAdine and Group FX - Fixodent. The specimens were washed (PBS) and immersed in Letheen culture medium, to evaluate sterility and obtain serial dilutions (100 to 10-3), that were seed into specific medium: CHROMagar Candida for C. albicans, Manitol Salt Agar for S. aureus and Agar Cetrimide for P. aeruginosa. After incubation, in accordance with characteristic morphology, the number of characteristic colonies was counted and the number of CFU/mL calculated. The evaluation of metabolic activity was performed by the XTT reduction assay and cell viability was evaluated by epifluorescence microscopy. The data obtained for the variables of CFU (Sa and Pa), Absorption Units and Area Percentage were evaluated by the Kruskal-Wallis test, followed by the Dunn test (=0.05). The Wilcoxon test was used to compare the paired data (percentage of live and total cell area). Data from the variable of UFC/mL for C. albicans were evaluated by the Anova test and Tukey\'s post-test, since they presented a normal distribution. The results of UFC/mL showed significant differences between groups (Ca p=0.002, Pa p<0.001e Sa p<0.001) with significant reduction in the number of CFU/mL of C. albicans [MI: 2.13 (1.17)], P. aeruginosa [FX: 2.96 (1.76 4.17); MI: 0.00 (-0.43 2.06)] and S. aureus [FX: 3.59 (2.97 4.31); MI: 1.90 (0.40 3.01)], when compared with control group [CP:Ca: 4.02 (0.85), CP:Pa: 6.43 (6.02 6.61) e CP:Sa: 5.67 (5.41 6.31)]. There was reduction in the metabolic activity of the multispecies biofilm in both denture cleanser [FX: 0.001 (-0.006 0.058) e MI: 0.000 (- 0.002 0.066)] when compared with control group [CP: 0.068 (0.046 0.190)]. The epifluorescence microscopy images revealed a significant reduction of the biofilm area on the specimens after immersion in the denture cleansers [FX: 85.19 (77.23 86.42) e MI: 78.42 (70.91 81.65)] when compared with control group (p<0.001). In live and total biofilm areas comparison it was possible to observe differences between the areas of the multispecies biofilm (p<0,001), after immersion in the denture cleansers evaluated. It was concluded that the denture cleansers were able to reduce metabolic activity as well as the aggregate biofilm, although none of the cleansers was able to completely remove the multispecies biofilm. NitrAdine was the most effective in reducing the microbial load of multispecies biofilm. P. aeruginosa was more susceptible to the action of denture clenasers than S. aureus and C. albicans, when associated with multispecies biofilms

O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de estudo laboratorial e clínico, a eficácia de soluções de hipoclorito alcalino (0,25% e 0,5%) e à base de mamona (Ricinus communis) a 10% quanto à ação antimicrobiana frente a micro-organismos específicos, por meio da contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC). No estudo laboratorial, a partir de matrizes metálicas quadrangulares (10 x 2 mm), foram confeccionados 360 corpos de prova de resina acrílica termopolimerizável (Lucitone 550), os quais foram esterilizados em micro-ondas (650W, por 6 minutos), contaminados com cepas de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis e Candida glabrata e imersos (20 minutos) em soluções higienizadoras (n=10): Grupo A - Hipoclorito de sódio 0,25%; Grupo B - Hipoclorito de sódio 0,5%; Grupo C - Solução de mamona a 10%; Grupo D (Controle positivo) - solução salina e Grupo E (Controle negativo) - sem contaminação e imerso em solução salina (n=5). Em seguida, foram lavados em solução salina e imersos em meio de cultura líquido (Letheen), a partir do qual foram obtidas diluições seriadas (100 e 10-3), as quais foram semeadas em meios de cultura seletivos. Após incubação a 37ºC por 24 horas, as colônias foram contadas e os valores de UFC/mL calculados. No estudo clínico, 64 pacientes, usuários de próteses totais, foram orientados a escovar suas próteses (escova Bitufo® e sabonete líquido neutro) três vezes ao dia e imergí-las (20 minutos), uma vez ao dia, em soluções: Solução 1 - Hipoclorito de sódio 0,25%; Solução 2 - Hipoclorito de sódio 0,5%; Solução 3 - Solução de mamona a 10% e Solução 4 - solução salina (controle). De acordo com uma sequência aleatorizada, cada solução foi utilizada por 7 dias, com um período de wash out entre elas. A avaliação da ação antimicrobiana foi realizada antes dos uso dos produtos (Baseline) e após os 7 dias de uso de cada uma das soluções, por meio da contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) de Streptococcus mutans, Candida spp. e gram negativos. Para coleta do biofilme, cada prótese total superior foi colocada em placa de Petri e a superfície interna escovada (escova Tek e solução salina) por 2 minutos, sendo a suspensão transferida para tubo de ensaio. Após diluições decimais (100 até 10-3), alíquotas de 50 &mu;L foram semeadas em placas de Petri contendo Mitis Salivarius Agar Base, Chromagar® Candida e Mac Conkey Agar para a detecção de Streptococcus mutans, Candida spp. ou gram negativo, respectivamente. Após incubação a 37ºC (em microaerofilia durante 48-72 horas para grupo mutans e aerobiose durante 48 horas para Candida spp. e gram negativo), de acordo com morfologia típica, o número de colônias características foi mensurado e o número de UFC/mL calculado. Os dados obtidos foram transformados de acordo com a fórmula log10 (UFC+1) e analisados estatisticamente por meio do teste t de Student (&alpha;=0,05), para a análise laboratorial, e teste de Friedman (&alpha;=0,05), para a análise clínica. Os resultados mostraram que, no estudo laboratorial, as soluções de hipoclorito de sódio (0,25% e 0,5%) eliminaram completamente todos os micro-organismos. A solução de mamona eliminou completamente B. subtilis, não apresentou efeito sobre E. faecalis e apresentou ação antimicrobiana moderada frente às demais cepas, havendo redução significante (p < 0,05) do número de UFC quando comparado com o grupo D (controle positivo). No estudo clínico, houve diferença significante entre as soluções (P < 0,001), sendo que o hipoclorito de sódio a 0,5% apresentou ação efetiva sobre todos os micro-organismos avaliados (Candida spp., S. mutans e gram negativos); o hipoclorito de sódio 0,25%, ação efetiva sobre S. mutans e moderada sobre Candida spp. e gram negativos, e a solução de mamona, ação efetiva sobre S. mutans e moderada contra Candida spp. A espécie de Candida mais frequentemente isolada foi C. albicans, seguida pelas espécies C. tropicalis e C. glabrata. Concluiu-se que a solução de hipoclorito de sódio 0,5% foi a mais efetiva, apresentando ação antimicrobiana sobre ambos os biofilmes (in vitro e in vivo), seguida pela solução de hipoclorito de sódio 0,25% que apresentou ação antimicrobiana sobre o biofilme in vitro e sobre S. mutans (biofilme in vivo). A solução de mamona (10%) foi a menos efetiva, apresentando ação antimicrobiana sobre B. subtilis (biofilme in vitro) e S. mutans (biofilme in vivo). / The objective of this study was to evaluate, through laboratory and clinical study, the efficacy of alkaline hypochlorite solutions (0.25% and 0.5%) and 10% castor oil solution (Ricinus communis) about the antimicrobial action against specific microorganisms, by counting the number of Colony Forming Units (CFU). In the laboratory study, 360 denture base acrylic resin specimens (Lucitone 550) were obtained from square metal matrix (10 mm x 2 mm), which were sterilized with microwave (650W, for 6 minutes), contaminated with Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis and Candida glabrata and immersed (20 minutes) in the hygiene solutions (n = 10): Group A - 0.25% Sodium Hypochlorite; Group - B - 0.5% Sodium hypochlorite; Group C - 10% Castor oil solution; Group D (Positive Control) - saline and Group E (Negative Control) - no contamination and immersed in saline (n = 5). The specimens were washed in saline solution and immersed in liquid culture medium (Letheen), from which were obtained serial dilutions (100 to 10-3) and seeded into selective solid media. After incubation at 37º C for 24 hours, the colonies were counted and the values of CFU/mL calculated. In the clinical study, 64 complete denture wearers were instructed to brush their dentures (Bitufo ® brush and liquid neutral soap) three times a day and to soak them (20 minutes), once a day, in the solutions: Solution 1 - 0.25% Sodium Hypochlorite; Solution 2 - 0.5% Sodium hypochlorite; Solution 3 - 10% Castor oil and Solution 4 - saline (control). According to a randomized sequence, each solution was used for 7 days, with a period of wash out between them. The evaluation of the antimicrobial action was performed before the use of the products (Baseline) and after 7 days after using each solution, by counting the Colony Forming Units (CFU) of Streptococcus mutans, Candida spp. and gram negative. For collection of the biofilm, each upper complete denture was placed in a Petri dish, the internal surface was brushed with saline solution for 2 minutes and the suspension was transferred to a test tube. After decimal dilutions (100 to 10-3), aliquots of 50 uL were seeded inside Petri dishes containing Mitis Salivarius Agar Base, Candida Chromagar ® and Mac Conkey Agar for the detection of Streptococcus mutans, Candida spp. or gram negative, respectively. After incubation at 37° C (in microaerophilic conditions for 48-72 hours for mutans and aerobiosis for 48 hours for Candida spp. and gram negative), in accordance with characteristic morphology, the number of characteristic colonies was countedand the number of CFU/ml calculated. Data were processed following transformation into the formula log10 (CFU +1) and statistically analyzed using the Student t test (&alpha; = 0.05) for laboratory analysis, and Friedman test (&alpha; = 0.05), for clinical analysis. The results showed that, in the laboratory study, sodium hypochlorite (0.25% and 0.5%) eliminated completely all microorganisms. The Castor oil solution eliminated B. subtilis, had no effect on E. faecalis and showed moderate antimicrobial activity against other strains, with a significant reduction (p <0.05) in the number of CFU compared with group D (positive control). In the clinical study, there was significant difference between the solutions (P <0.001), and 0.5% sodium hypochlorite had effective action on all evaluated microorganisms (Candida spp., S. mutans and gram negative); 0.25% sodium hypochlorite had effective action on S. mutans and moderate on Candida spp. and gram negative, and the castor oil solution had effective action on S. mutans and moderate against Candida spp. . The Candida species most often isolated was C. albicans, followed by the species C. tropicalis and C. glabrata. It was concluded that the solution of 0.5% sodium hypochlorite was the most effective presenting antimicrobial action on both biofilms (in vitro and in vivo), followed by 0.25% sodium hypochlorite solution that showed antimicrobial activity on biofilms in vitro and on S. mutans (biofilm in vivo). The 10% castor oil was less effective, with antimicrobial action on Bacillus subtilis (biofilm in vitro) and S. mutans (biofilm in vivo).

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Objectives: To evaluate the antifungal activity, mechanism of action, cytotoxicity and antibiofilm action of chloramine T (CAT) on Candida spp. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the substance on Candida albicans, Candida tropicalis, Candida krusei and Candida glabrata was determined by the microdilution technique and the minimum fungicidal concentration (CFM) was calculated through the subculture in Sabouraud Dextrose Agar (ASD) . The growth inhibition kinetics of C. albicans were evaluated by the method of counting colony forming units (CFU) at different times and concentrations. A microculture of C. albicans was performed on fowl agar plus tween 80 to evaluate the possible alteration of micromorphology against different concentrations of the substance. The possible mechanism of action on wall and fungal cell membrane was verified by the determination of MIC in the presence of sorbitol and ergosterol respectively. The inhibition of the initial adherence of fungal cells, formation and reduction of C. albicans biofilm were evaluated after short (1 min) and prolonged (8 h) contact with the substance and formation of the biofilm was measured by absorbance at 600 nm, Transformed into scores referring to the percentage of inhibition obtained based on the values ​​of the control group. The cytotoxicity of the substance was evaluated by the hemolysis method. Nystatin and sodium hypochlorite were used as positive controls. A descriptive and inferential analysis was performed considering α = 5%. Results: The CIM75% found for CAT was 781.3 μg / mL and the CFM / MIC ratio suggests a fungicidal activity against most of the strains tested, with probable action on cell wall and membrane. The substance showed immediate and prolonged action on the kinetic test and caused reduction of the filamentous form and inhibition of chlamydoconidia. In the biofilm assay, it presented similar results to sodium hypochlorite for inhibition of initial adherence and formation of mature biofilm (p> 0.05) and was more effective in reducing mature biofilm in the short contact groups at MIC concentration x2 (24 H) and CIM x 4 (48 h) (p <0.05). Conclusion: CAT shows antifungal activity on Candida spp. And shows fungicidal action on most of the strains tested. Its action is immediate and prolonged in the inhibition of C. albicans growth and probably occurs both in the wall and in the cell membrane. CAT causes alterations in the micromorphology of C. albicans and has antibiofilm activity, being effective in inhibiting the initial adherence of fungal cells, as well as in the formation and reduction of biofilm. / Introducao: Diante das limitacoes para o uso do hipoclorito de sodio na desinfeccao de proteses dentarias e da necessidade do controle da proliferacao fungica nestes sitios, faz-se necessario o estudo de novas substancias para este fim. Objetivos: Avaliar a atividade antifungica, mecanismo de acao, citotoxicidade e acao antibiofilme da cloramina T (CAT) sobre Candida spp. Materiais e Metodos: Foi determinada a concentracao inibitoria minima (CIM) da substancia sobre Candida albicans, Candida tropicalis, Candida krusei e Candida glabrata pela tecnica da microdiluicao e calculada a concentracao fungicida minima (CFM) atraves do subcultivo em Agar Sabouraud Dextrose (ASD). Foi avaliada a cinetica de inibicao do crescimento de C. albicans pelo metodo de contagem de unidades formadoras de colonias (UFC) em diferentes tempos e concentracoes. Foi realizado microcultivo de C. albicans em agar fuba acrescido de tween 80 para avaliacao da possivel alteracao da micromorfologia frente a diferentes concentracoes da substancia. O possivel mecanismo de acao sobre parede e membrana celular fungica foi verificado atraves da determinacao da CIM na presenca, respectivamente, de sorbitol e ergosterol. A inibicao da aderencia inicial de celulas fungicas, formacao e reducao do biofilme de C. albicans foram avaliados apos contato curto (1 min) e prolongado (8 h) com a substancia e a formacao do biofilme foi mensurada atraves de absorbancia a 600 nm, transformada em escores referentes a porcentagem de inibicao obtida com base nos valores do grupo controle. A citotoxicidade da substancia foi avaliada pelo metodo da hemolise. Nistatina e hipoclorito de sodio foram utilizados como controles positivos. Foi realizada analise estatistica descritiva e inferencial, considerando α=5%. Resultados: A CIM75% encontrada para a CAT foi de 781,3 µg/mL e a relacao CFM/CIM sugere uma atividade fungicida frente a maioria das cepas testadas, com provavel acao em parede e membrana celulares. A substancia mostrou acao imediata e prolongada no teste de cinetica e provocou reducao da forma filamentosa e inibicao de clamidoconidios. No ensaio do biofilme, apresentou resultados semelhantes ao hipoclorito de sodio para inibicao da aderencia inicial e formacao do biofilme maduro (p>0,05) e foi mais efetiva na reducao do biofilme maduro nos grupos de contato curto na concentracao CIM x 2 (24 h) e CIM x 4 (48 h) (p < 0,05). Conclusao: A CAT apresenta atividade antifungica sobre Candida spp. e apresenta acao fungicida sobre a maioria das cepas testadas. Sua acao e imediata e prolongada na inibicao do crescimento de C. albicans e provavelmente ocorre tanto em parede quanto em membrana celular. A CAT causa alteracoes na micromorfologia de C. albicans e possui atividade antibiofilme, sendo efetiva na inibicao da aderencia inicial das celulas fungicas, bem como na formacao e reducao do biofilme.

O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de estudo laboratorial e clínico, a eficácia de soluções de hipoclorito alcalino (0,25% e 0,5%) e à base de mamona (Ricinus communis) a 10% quanto à ação antimicrobiana frente a micro-organismos específicos, por meio da contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC). No estudo laboratorial, a partir de matrizes metálicas quadrangulares (10 x 2 mm), foram confeccionados 360 corpos de prova de resina acrílica termopolimerizável (Lucitone 550), os quais foram esterilizados em micro-ondas (650W, por 6 minutos), contaminados com cepas de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis e Candida glabrata e imersos (20 minutos) em soluções higienizadoras (n=10): Grupo A - Hipoclorito de sódio 0,25%; Grupo B - Hipoclorito de sódio 0,5%; Grupo C - Solução de mamona a 10%; Grupo D (Controle positivo) - solução salina e Grupo E (Controle negativo) - sem contaminação e imerso em solução salina (n=5). Em seguida, foram lavados em solução salina e imersos em meio de cultura líquido (Letheen), a partir do qual foram obtidas diluições seriadas (100 e 10-3), as quais foram semeadas em meios de cultura seletivos. Após incubação a 37ºC por 24 horas, as colônias foram contadas e os valores de UFC/mL calculados. No estudo clínico, 64 pacientes, usuários de próteses totais, foram orientados a escovar suas próteses (escova Bitufo® e sabonete líquido neutro) três vezes ao dia e imergí-las (20 minutos), uma vez ao dia, em soluções: Solução 1 - Hipoclorito de sódio 0,25%; Solução 2 - Hipoclorito de sódio 0,5%; Solução 3 - Solução de mamona a 10% e Solução 4 - solução salina (controle). De acordo com uma sequência aleatorizada, cada solução foi utilizada por 7 dias, com um período de wash out entre elas. A avaliação da ação antimicrobiana foi realizada antes dos uso dos produtos (Baseline) e após os 7 dias de uso de cada uma das soluções, por meio da contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) de Streptococcus mutans, Candida spp. e gram negativos. Para coleta do biofilme, cada prótese total superior foi colocada em placa de Petri e a superfície interna escovada (escova Tek e solução salina) por 2 minutos, sendo a suspensão transferida para tubo de ensaio. Após diluições decimais (100 até 10-3), alíquotas de 50 &mu;L foram semeadas em placas de Petri contendo Mitis Salivarius Agar Base, Chromagar® Candida e Mac Conkey Agar para a detecção de Streptococcus mutans, Candida spp. ou gram negativo, respectivamente. Após incubação a 37ºC (em microaerofilia durante 48-72 horas para grupo mutans e aerobiose durante 48 horas para Candida spp. e gram negativo), de acordo com morfologia típica, o número de colônias características foi mensurado e o número de UFC/mL calculado. Os dados obtidos foram transformados de acordo com a fórmula log10 (UFC+1) e analisados estatisticamente por meio do teste t de Student (&alpha;=0,05), para a análise laboratorial, e teste de Friedman (&alpha;=0,05), para a análise clínica. Os resultados mostraram que, no estudo laboratorial, as soluções de hipoclorito de sódio (0,25% e 0,5%) eliminaram completamente todos os micro-organismos. A solução de mamona eliminou completamente B. subtilis, não apresentou efeito sobre E. faecalis e apresentou ação antimicrobiana moderada frente às demais cepas, havendo redução significante (p < 0,05) do número de UFC quando comparado com o grupo D (controle positivo). No estudo clínico, houve diferença significante entre as soluções (P < 0,001), sendo que o hipoclorito de sódio a 0,5% apresentou ação efetiva sobre todos os micro-organismos avaliados (Candida spp., S. mutans e gram negativos); o hipoclorito de sódio 0,25%, ação efetiva sobre S. mutans e moderada sobre Candida spp. e gram negativos, e a solução de mamona, ação efetiva sobre S. mutans e moderada contra Candida spp. A espécie de Candida mais frequentemente isolada foi C. albicans, seguida pelas espécies C. tropicalis e C. glabrata. Concluiu-se que a solução de hipoclorito de sódio 0,5% foi a mais efetiva, apresentando ação antimicrobiana sobre ambos os biofilmes (in vitro e in vivo), seguida pela solução de hipoclorito de sódio 0,25% que apresentou ação antimicrobiana sobre o biofilme in vitro e sobre S. mutans (biofilme in vivo). A solução de mamona (10%) foi a menos efetiva, apresentando ação antimicrobiana sobre B. subtilis (biofilme in vitro) e S. mutans (biofilme in vivo). / The objective of this study was to evaluate, through laboratory and clinical study, the efficacy of alkaline hypochlorite solutions (0.25% and 0.5%) and 10% castor oil solution (Ricinus communis) about the antimicrobial action against specific microorganisms, by counting the number of Colony Forming Units (CFU). In the laboratory study, 360 denture base acrylic resin specimens (Lucitone 550) were obtained from square metal matrix (10 mm x 2 mm), which were sterilized with microwave (650W, for 6 minutes), contaminated with Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis and Candida glabrata and immersed (20 minutes) in the hygiene solutions (n = 10): Group A - 0.25% Sodium Hypochlorite; Group - B - 0.5% Sodium hypochlorite; Group C - 10% Castor oil solution; Group D (Positive Control) - saline and Group E (Negative Control) - no contamination and immersed in saline (n = 5). The specimens were washed in saline solution and immersed in liquid culture medium (Letheen), from which were obtained serial dilutions (100 to 10-3) and seeded into selective solid media. After incubation at 37º C for 24 hours, the colonies were counted and the values of CFU/mL calculated. In the clinical study, 64 complete denture wearers were instructed to brush their dentures (Bitufo ® brush and liquid neutral soap) three times a day and to soak them (20 minutes), once a day, in the solutions: Solution 1 - 0.25% Sodium Hypochlorite; Solution 2 - 0.5% Sodium hypochlorite; Solution 3 - 10% Castor oil and Solution 4 - saline (control). According to a randomized sequence, each solution was used for 7 days, with a period of wash out between them. The evaluation of the antimicrobial action was performed before the use of the products (Baseline) and after 7 days after using each solution, by counting the Colony Forming Units (CFU) of Streptococcus mutans, Candida spp. and gram negative. For collection of the biofilm, each upper complete denture was placed in a Petri dish, the internal surface was brushed with saline solution for 2 minutes and the suspension was transferred to a test tube. After decimal dilutions (100 to 10-3), aliquots of 50 uL were seeded inside Petri dishes containing Mitis Salivarius Agar Base, Candida Chromagar ® and Mac Conkey Agar for the detection of Streptococcus mutans, Candida spp. or gram negative, respectively. After incubation at 37° C (in microaerophilic conditions for 48-72 hours for mutans and aerobiosis for 48 hours for Candida spp. and gram negative), in accordance with characteristic morphology, the number of characteristic colonies was countedand the number of CFU/ml calculated. Data were processed following transformation into the formula log10 (CFU +1) and statistically analyzed using the Student t test (&alpha; = 0.05) for laboratory analysis, and Friedman test (&alpha; = 0.05), for clinical analysis. The results showed that, in the laboratory study, sodium hypochlorite (0.25% and 0.5%) eliminated completely all microorganisms. The Castor oil solution eliminated B. subtilis, had no effect on E. faecalis and showed moderate antimicrobial activity against other strains, with a significant reduction (p <0.05) in the number of CFU compared with group D (positive control). In the clinical study, there was significant difference between the solutions (P <0.001), and 0.5% sodium hypochlorite had effective action on all evaluated microorganisms (Candida spp., S. mutans and gram negative); 0.25% sodium hypochlorite had effective action on S. mutans and moderate on Candida spp. and gram negative, and the castor oil solution had effective action on S. mutans and moderate against Candida spp. . The Candida species most often isolated was C. albicans, followed by the species C. tropicalis and C. glabrata. It was concluded that the solution of 0.5% sodium hypochlorite was the most effective presenting antimicrobial action on both biofilms (in vitro and in vivo), followed by 0.25% sodium hypochlorite solution that showed antimicrobial activity on biofilms in vitro and on S. mutans (biofilm in vivo). The 10% castor oil was less effective, with antimicrobial action on Bacillus subtilis (biofilm in vitro) and S. mutans (biofilm in vivo).