Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2017-04-11T20:00:33Z No. of bitstreams: 2 Tese_Grazy_GCBEV_2016.pdf: 4348642 bytes, checksum: bfcda1c216855cf7089f37381109893d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-11T20:00:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese_Grazy_GCBEV_2016.pdf: 4348642 bytes, checksum: bfcda1c216855cf7089f37381109893d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-11-23 / This study aimed to understand the effects (genetic, histological and physiological) of different environmental stressors such as temperature, CO2 levels and O2, as well as the action of benzo[a]pyrene (BaP) and Roundup® (RD) in Colossoma macropomum. In the first chapter we evaluated the acute effect (96 h) of BaP (4, 8, 16, 32 mol/kg) in tambaqui fish. Changes were observed in the expression of the ras oncogene and hypoxia-inducible factor-1 (hif-1). Tissue damage in the liver increased in fish exposed to BaP (8, 16, 32 mol / kg) compared with the control, being classified as irreparable damage. There has also been an increase in genotoxic damage index in blood cells by the comet assay. The second chapter describes the effects of BaP (8 and 16 mol/kg) in tambaquis exposed to climate scenario A2 (extreme scenario) which provides an average increase of 4.5 °C in air temperature and CO2 levels (850 ppm), as forecasted by IPCC (2007). The increased temperature and CO2 levels in the extreme scenario induced changes in expression of the ras oncogene and hif-1 gene. Both ras oncogene and hif-1 showed an increase in gene expression in fish injected with both concentrations of BaP and exposed to the extreme scenario compared to the same treatments in the current scenario. Moreover, the responses of detoxifying enzyme and antioxidant defense, glutathione-S-transferase (GST), catalase (CAT) and levels of lipid peroxidation LPO were greater in the control setting. The activity of GST and CAT decreased in fish exposed to BaP in the extreme scenario compared to the control scenario. Extreme scenario with high temperatures and CO₂ levels weaken the body's antioxidant response. Likewise, the LPO levels decreased. In consequence of the failure in the antioxidant system, the extreme scenario had a greater influence on genetic variables increasing the expression of ras oncogene and hif-1, also DNA strand breaks in blood cells and histological damage, causing irreversible injuries to the liver cells and tissue necrosis. In the third chapter were evaluated toxicological responses of C. macropomum exposed simultaneously to RD and hypoxia. Surprisingly, animals exposed to hypoxia and hypoxia more RD had their levels of expression of hif1 smaller than those subjected to normoxic and normoxic more RD, suggesting greater cell damage in these groups. The ras oncogene showed higher relative expression in animals contaminated with RD in normoxic, reducing their relative expression in animals exposed to hypoxia and RD, which could also be explained by cellular injury (see below). The enzymes of oxidative stress GST and CAT showed greater activity in both treatments under hypoxia, being able to minimize the damage of oxidative stress in the membranes, which was evidenced by the low lipid peroxidation rate (LPO). Histological changes C. macropomum liver exposed to normoxia plus RD, hypoxia and hypoxia plus RD were similar, and the occurrence of fish had massive necrosis. Tambaqui proved to be an excellent model for studies of genes related to cancer, complemented by molecular markers such as ras oncogene and the hif-1 gene. / Esse estudo objetivou compreender os efeitos (genéticos, histológicos e fisiológicos) de diferentes estressores ambientais como: temperatura, níveis de CO2 e O2, bem como a ação dos contaminantes benzo[a]pireno (BaP) e Roundup® (RD) em Colossoma macropomum. No primeiro capítulo foi avaliado o efeito agudo (96 h) do BaP (4, 8, 16, 32 mol/kg) em tambaquis. Foram observadas alterações no nível de expressão do oncogene ras e do fator de indução à hipóxia-1 (hif-1). Os danos teciduais no fígado aumentaram nos peixes expostos ao BaP (8, 16, 32 mol/kg) quando comparados com o controle, sendo classificados como danos irreparáveis. Verificou-se também o aumento no índice de danos genéticos das células sanguíneas por meio do ensaio cometa. O segundo capítulo descreve os efeitos do BaP (8 e 16mol/kg) em tambaquis expostos ao cenário climático A2 (cenário extremo) que prevê um aumento médio de 4.5 °C na temperatura do ar e 850 ppm de CO2, como proposto pelo IPCC (2007). O aumento da temperatura e dos níveis de CO2 no cenário extremo induziu modificações nos níveis de expressão do oncogene ras e do gene hif-1. Tanto o oncogene ras como hif-1. apresentaram aumento nos níveis de expressão nos peixes injetados com ambas as concentrações de BaP e expostos ao cenário extremo, quando comparados aos mesmos tratamentos no cenário atual. Por outro lado, as respostas das enzimas glutationa-S-transferase (GST) e catalase (CAT) e nível de lipoperoxidação (LPO) foram maiores no cenário controle. A atividade da GST e CAT diminuiu nos peixes expostos ao BaP no cenário extremo, em relação ao cenário controle, mostrando que um possível cenário com altas temperaturas e níveis de CO2 enfraqueceriam as respostas antioxidantes do organismo. Da mesma maneira, os níveis de LPO diminuíram. Em consequência da falha no sistema antioxidante, o cenário extremo teve maior influência sobre as variáveis genéticas aumentando a expressão do oncogene ras e hif-1, bem como os danos no DNA a alterações histológicas, causando danos irreversíveis nas células hepáticas e necrose do tecido. No terceiro capítulo foram avaliadas as repostas toxicológicas de C. macropomum expostos simultaneamente ao RD e hipóxia. Surpreendentemente, os animais expostos à hipóxia e à hipóxia mais RD tiveram seus níveis de expressão de hif-1 menores doque aqueles submetidos à normóxia e normóxia mais RD, sugerindo uma lesão celular maior nesses grupos. O oncogene ras apresentou expressão relativa maior nos animais contaminados com RD em normóxia, diminuindo sua expressão relativa nos animais expostos à hipóxia e RD, o que também pôde ser explicado pelas lesões celulares (vide abaixo). As enzimas de estresse oxidativo GST e CAT apresentaram maior atividade em ambos os tratamentos sob hipóxia, sendo capazes de minimizar os danos de estresse oxidativo nas membranas, o que foi evidenciado pela baixa taxa de lipoperoxidação (LPO). As alterações histológicas do fígado de C. macropomum expostos à normóxia mais RD, hipóxia e hipóxia mais RD foram similares, sendo que os peixes tiveram massiva ocorrência de necrose. O tambaqui se mostrou um excelente modelo para os estudos de genes relacionados ao câncer, complementado pelos marcadores moleculares como o oncogene ras e o gene hif-1

Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2017-11-03T15:26:26Z No. of bitstreams: 2 Vinícius Faria de Oliveira_Dissertaçao (Versão Final).pdf: 1315708 bytes, checksum: 88b3eabf4c4bb0d057f2684af85f0bc7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-03T15:26:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Vinícius Faria de Oliveira_Dissertaçao (Versão Final).pdf: 1315708 bytes, checksum: 88b3eabf4c4bb0d057f2684af85f0bc7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-08-21 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / Hypoxia events are common in the aquatic ecosystems of the Amazon. As a result, numerous adaptive adjustments to optimize oxygen uptake are known in the fish of this region, including, but not limited to, increased opercular beats, the release of circulating blood cells, metabolic suppression, and reduction of organic phosphate concentration in erythrocytes. This study aimed to find out how the regulation of the concentration of guanosine triphosphate ([GTP]) occurs in the red cells of tambaqui exposed to hypoxia. GTP by acting as a negative modulator of the affinity of hemoglobin with O 2 decreases oxygen uptake; thus, a reduction of [GTP] in hypoxia represents a strategy to improve the transfer of oxygen to tissues. An important cellular process that may be involved in the reduction of GTP levels in erythrocytes is the synthesis of proteins, specifically the translation stage. At this point there is an element designate eIF2α, which requires GTP to be able to recruit the RNAt Met i and continue the formation of the translation machinery. Thus, we investigated the relative expression of two eIFs (eIF2α and eIF3A) by real-time PCR and quantified the GTP in erythrocytes of tambaqui juveniles exposed to normoxia, four exposures to hypoxia (<1 mgO 2 /L) (30, 140, 200 e 260 min) and recovery from hypoxia (240 e 480 min) in >6.0 mgO 2 /L. Our results showed an increase in the relative expression of the two genes analyzed at practically all times of exposure to hypoxia. eIF2α gene was not elevated relatively to the control group at 30 min only. The concentrations of GTP were sharply reduced until the group exposed to 140 min of hypoxia, remaining practically stable until 480 min of recovery. In this way, we noticed that the decrease in the [GTP] occurred between the 30 and 140 min of hypoxia. We confirmed that Colossoma macropomum specimens were hypoxic by high plasma levels of glucose and lactate of animals subjected to low oxygen availability in water. The increase in the relative expression of the eIFs at the same time as a sharp reduction in the GTP concentration in the tambaqui erythrocytes a relationship between the intensity of the protein synthesis and the consumption of GTP molecules. However, during hypoxia, a severe metabolic suppression occurs to establish a balance between production and consumption of ATP, since the primary source of this compound is compromised. As a consequence an overall decrease in protein synthesis is observed. On the other hand, many genes linked to the mechanisms of hypoxia response are regulated positively, increasing their transcripts in the cell, which, to become functional products, depend on an elevation of the translation rate, even if only transient. This phenomenon contributes to the metabolic reorganization, essential for greater resistance of organisms to hypoxia. / Eventos de hipóxia são comuns nos ecossistemas aquáticos da Amazônia. Como resultado, inúmeros ajustes adaptativos voltados a otimizar a captação de oxigênio são conhecidos nos peixes dessa região, que incluem, entre outros, aumento dos batimentos operculares, liberação de células sanguíneas na circulação, supressão metabólica e redução da concentração dos fosfatos orgânicos nos eritrócitos. O principal objetivo deste estudo foi desvendar como ocorre a regulação da concentração do trifosfato de guanosina ([GTP]) nas células vermelhas do tambaqui em hipóxia. O GTP diminui a eficiência no transporte de oxigênio porque atua como modulador negativo da afinidade da hemoglobina com O 2 . Dessa forma, a diminuição da [GTP] em hipóxia representa uma estratégia para melhorar a transferência de oxigênio para os tecidos. Um importante processo celular que pode estar envolvido com a queda na concentração de GTP nos eritrócitos é a síntese de proteínas, especificamente a etapa de tradução. Nesse ponto atua um elemento denominado eIF2α, o qual necessita de GTP para poder recrutar o RNAt Met i e dar continuidade à formação da maquinaria de tradução. Sendo assim, investigamos a expressão relativa de dois eIFs (eIF2α e eIF3A) por meio de PCR em tempo real e quantificamos o GTP nos eritrócitos de juvenis de tambaqui expostos à normóxia, quatro exposições à hipóxia (<1 mgO 2 /L) (30, 140, 200 e 260 min) e recuperação da hipóxia (240 e 480 min) em >6.0 mgO 2 /L. Nossos resultados mostraram claro aumento da expressão relativa dos dois genes analisados em praticamente todos os tempos de exposição àhipóxia; já que apenas no tempo 30 min o gene eIF2α não apresentou-se elevado em relação ao grupo controle. As concentrações de GTP sofreram forte redução até o grupo exposto a 140 min de hipóxia, mantendo-se praticamente estável até 480 min de recuperação. Sendo assim, notamos que a queda na [GTP] ocorreu entre os tempos 30 min e 140 min de hipóxia. Confirmamos que os exemplares de Colossoma macropomum estavam em hipóxia por meio dos altos níveis de glicose e lactato plasmáticos quantificados nos animais submetidos a baixa disponibilidade de oxigênio na água. O incremento na expressão relativa dos eIFs ao mesmo tempo em que houve a brusca redução na concentração de GTP nos eritrócitos do tambaqui constitui evidência a favor da relação entre intensidade da síntese de proteínas e consumo de moléculas de GTP. No entanto, durante a hipóxia, ocorre uma séria supressão metabólica para estabelecer um equilíbrio entre a produção e o consumo de ATP, uma vez que a principal fonte geradora desse composto encontra-se comprometida. Isso resulta em uma diminuição global na síntese de proteínas. Por outro lado, inúmeros genes ligados aos mecanismos de resposta à hipóxia são regulados positivamente, aumentando seus transcritos na célula, os quais, para se tornarem produtos funcionais dependem de uma elevação da taxa de tradução, mesmo que apenas transitória. Esse fenômeno contribui para a reorganização metabólica, essencial para maior resistência dos organismos à hipóxia.

A levedura Cryptococcus gattii é um dos agentes etiológicos da criptococose, doença que pode levar à infecção fatal no sistema nervoso central em humanos e outros mamíferos. A forma de infecção ocorre através da inalação de esporos fúngicos pelas vias aéreas superiores e atinge os pulmões dando início à formação de sítios de deposição fúngica (criptococoma). Os níveis de oxigênio nos criptococomas são reduzidos devido à diminuição da perfusão sanguínea no local, ocasionando hipóxia (0,5-5% oxigênio) ou anóxia (0% oxigênio). Nesses sítios, o fungo não só modula seu metabolismo energético de acordo com a disponibilidade de oxigênio como também de nutrientes que o tecido dispõe. O oxigênio molecular (O2) é essencial para a produção de trifosfato de adenosina (ATP) na respiração celular e nas vias bioquímicas relacionadas à biossíntese de ácidos graxos insaturados, tirosina, esteróis e ácido nicotínico para a fosforilação oxidativa e processos biossintéticos. Desse modo, o oxigênio é um elemento essencial para a manutenção do patógeno aeróbico no hospedeiro. Sendo assim, o objetivo desse estudo foi analisar o efeito da hipóxia sobre a expressão global das proteínas de C. gattii. Para isso, a levedura foi cultivada em YNB líquido a 37ºC em concentração de O2 ajustada para 1% (V/V). As células foram coletadas em três tempos diferentes de hipóxia (0h-T0, 24h-T24 e 48h-T48) e as proteínas extraídas foram separadas por SDS-PAGE. Cada canaleta do gel foi dividida em 9 frações, as quais foram submetidas à tripsinização. Os peptídeos eluídos foram separados por cromatografia líquida e analisados por espectrometria de massas. Foram consideradas identificações válidas as proteínas que apresentassem pelo menos 2 peptídeos únicos, nas quais aparecessem em no mínimo 2 replicatas biológicas. Nas condições analisadas, foi possível identificar 130 proteínas, tendo sido identificadas proteínas expressas somente em uma determinada condição (43 proteínas em T0, 14 em T24 e 13 em T48). Com os resultados proteômicos analisados, pôde-se observar que houve a regulação positiva ou negativa da expressão protéica de C. gattii na situação de hipóxia. Devido ao fato da hipóxia ocorrer comumente no ambiente da infecção fúngica, o remodelamento metabólico ao qual o fungo se submete é crucial para a sua proteção e manutenção in vitro ou no hospedeiro. Em análises fenotípicas realizadas neste trabalho, verificou-se que a hipóxia pode exercer influência no crescimento fúngico e na sua melanização, porém não foi possível verificar aumento na espessura da cápsula. Adicionalmente, observou-se modificações na regulação da expressão protéica nas vias metabólicas glicolítica, pentose-fosfato, glioxalato, ácido tricarboxílico, fosforilação oxidativa entre outras. Essa alteração entre as via metabólicas pode ser o resultado de uma compensação pela redução do aporte de oxigênio para dentro da célula fúngica. / The yeast Cryptococcus gattii is the etiologic agent of cryptococcosis, a disease that can led to fatal infection of the central nervous system in humans and other mammals. The form of infection occurs through inhalation of fungal spores through the upper airways and reaches the lungs initiating the formation sites of fungal deposition (crytococcoma). Cryptococcomas experience low oxygen levels in the lungs causing hypoxia (0.5-5 % oxygen) or anoxia (0 % oxygen). At these sites, the fungal cells not only modulates its energy metabolism according to the availability of oxygen but also to the nutrients that the tissue has. The molecular oxygen is essential for the production of adenosine triphosphate (ATP) in cell respiration and the biochemical pathways related to the biosynthesis of unsaturated fatty acids, tyrosine, sterols and nicotinic acid for oxidative phosphorylation and biosynthetic processes.Thus, oxygen is essential for the maintenance of aerobic pathogen in host environment. So, the aim of this study is to analyze the effect of hypoxia on the global expression of proteins of C. gattii. For that reason, yeast was grown in liquid YNB 37ºC with reduced O2 levels (1% - V/V). Cells were collected at three different periods of hypoxia (0h-T0, 24h-T24, 48h-T48) and the extracted proteins were separated by SDS-PAGE. Each gel lane was divided into 10 slices and digested with trypsin. The eluted peptides were separated by HPLC and analyzed by mass spectrometry. Only proteins identifications with at least 2 unique peptides and present in at least two biological replicates were considered true identifications. In the conditions analyzed, a total of 130 proteins could be identified, with several presenting the expression in specific conditions (fourty-three proteins in T0, fourteen in T24 and thirteen in T48). With the proteomic results analyzed, it was observed that there was a positive or negative regulation of protein expression of C. gattii in the situation of hypoxia. Because of hypoxia occur commonly in the environment fungal infection, metabolic remodeling to which the fungus undergoes is crucial for their protection and maintenance in vitro or in the host. The phenotypic analyzes showed that hypoxia can exert influence on fungal growth and their melanization, but this work did not observed increase in the thickness of the capsule. In addition, we observed changes in the regulation of protein expression, pentose-phosphate, glyoxylate, tricarboxylic acid, oxidative phosphorylation and other glycolytic pathways. This change between the metabolic pathway may be the result of a compensation for reduced oxygen supply into the fungal cell.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-03-23T17:00:08Z No. of bitstreams: 1 2017_MaraClaudiaRibeiro.pdf: 21050587 bytes, checksum: c5725d841025af7acdc2c6114aedaa62 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-03-28T21:13:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_MaraClaudiaRibeiro.pdf: 21050587 bytes, checksum: c5725d841025af7acdc2c6114aedaa62 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-28T21:13:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_MaraClaudiaRibeiro.pdf: 21050587 bytes, checksum: c5725d841025af7acdc2c6114aedaa62 (MD5) Previous issue date: 2018-03-28 / Introdução: Anualmente, milhares de pessoas sofrem hipóxia cerebral, apresentando o dobro de chance de desenvolver alterações cognitivocomportamentais relacionadas à ansiedade e à depressão. Como forma de tratamento não farmacológico para tais condições pode-se utilizar a musicoterapia. Objetivo: Analisar as alterações histológicas hipocampais e cerebelares e possíveis repercussões comportamentais e bioquímicas provocadas pela Sonata de Mozart em animais sem e com hipóxia isquêmica encefálica induzida experimentalmente por Nitrito de Sódio. Metodologia: Foi realizado um estudo experimental com 36 ratas Wistar distribuídas em grupos que sofreram hipóxia e que ouviram música em protocolos de aplicações agudas e crônicas. A hipóxia foi induzida experimentalmente por Nitrito de Sódio na dosagem de 60mg/kg durante 15 dias. Foram analisadas variáveis comportamentais no Campo aberto, Labirinto em Cruz Elevado (comportamento sugestivo de ansiedade) e o Nado Forçado (comportamento sugestivo de depressão). Análises bioquímicas verificaram o estresse agudo e crônico por meio dos níveis de cortisol, glicose, colesterol e lactato. Foram coletadas e analisadas amostras histológicas do hipocampo, regiões CA1, CA2, CA3, CA4 e Giro Denteado e do córtex cerebelar. Resultados: Os animais que sofreram a lesão encefálica e não receberam o protocolo de música apresentaram o pior desempenho nos testes de ansiedade e de depressão, demonstrando claramente o efeito ansiogênico da lesão encefálica. O efeito ansiogênico também foi verificado no grupo que sofreu hipóxia e recebeu música crônica. Já os grupos que receberam música aguda e crônica (sem lesão) e o grupo que recebeu música aguda após lesão apresentaram características de efeito ansiolítico. Destacou-se também efeito antidepressivo da música aguda e crônica em todos os grupos. Em relação as análises bioquímicas, o cortisol foi a variável que apresentou destaque, com níveis elevados no grupo que sofreu hipóxia e também no grupo que recebeu o protocolo de música crônica. Em relação aos aspectos histológicos, a região CA1 foi a área menos atingida pela hipóxia. Os animais que apenas receberam música, seja no protocolo agudo ou crônico, não apresentaram diferença significante (p≤ 0,05) na contagem de neurônios sadios em relação ao grupo controle. Já os animais que receberam o protocolo de música aguda após a lesão encefálica apresentaram melhores contagens de neurônios sadios nas áreas CA1, CA3, CA4 e Giro Denteado que os demais grupos com hipóxia. O cerebelo não apresentou alterações significativas nos animais que receberam música, apenas nos que sofreram hipóxia foi possível observar a lesão. Conclusões: A hipóxia isquêmica encefálica pode provocar danos estruturais e comportamentais, sendo que os animais que apenas sofreram hipóxia apresentaram menor peso encefálico, comportamento similar a depressão e a ansiedade, maior nível de cortisol e menor contagem de neurônios sadios em todas as áreas, exceto CA1. A música aguda e crônica em animais saudáveis, demonstraram efeitos antidepressivos e ansiolíticos, porém, o estresse acompanhou o grupo que ouviu música crônica. Embora estes grupos tenham apresentado maior número de neurônios sadios que lesionados em todas as áreas, não houve melhor contagem que no grupo controle. O destaque da atual pesquisa e deu no grupo de animais que sofreu lesão e recebeu o protocolo de música aguda devido ao elevado peso do encéfalo, assim como o efeito ansiolítico e efeitos antidepressivos, e mais os valores de cortisol que também foram menores que no grupo hipóxia. Este grupo apresentou o maior número de neurônios sadios em quase todas as áreas do hipocampo, exceto a área CA2. Já os animais que sofreram lesão e receberam o protocolo de música crônica apresentaram respostas ansiogênicas e sinais de estresses, possivelmente relacionados com os efeitos da lesão somado ao da música crônica. Destaca-se negativamente o fato de que estes animais apresentaram desempenho semelhante ao grupo que apenas sofreu hipóxia, no que tange a contagem de neurônios, de forma que, para a região hipocampal, a música aguda após a lesão por hipóxia, foi aquela que promoveu os melhores estímulos. Ao se projetar estes achados em humanos, é provável que possa haver repercussões positivas sobre aspectos comportamentais e histológicos e, consequentemente, na qualidade de vida de pessoas com lesões encefálicas decorrentes de hipóxia. / Introduction: Every year thousands of people suffer from cerebral hypoxia, which has a double chance of developing cognitive-behavioral changes related to anxiety and depression. As a form of non-pharmacological treatment for such conditions music therapy may be used. Objective: To analyze hippocampal and cerebellar histological changes and possible behavioral and biochemical repercussions caused by Mozart's Sonata in animals without and with ischemic hypoxia experimentally induced by Sodium Nitrite. Methods: An experimental study was performed with 36 Wistar rats distributed in groups that had hypoxia and who had heard music in protocols for acute and chronic applications. Hypoxia was experimentally induced by Sodium Nitrite at a dose of 60 mg/kg for 15 days. Behavioral variables were analyzed in Open Field, Elevated Plus Maze (anxiety like-behavior) and Forced Swimming (depression like- behavior). Biochemical analyzes verified acute and chronic stress through the levels of cortisol, glucose, cholesterol and lactate. Histological samples from the hippocampus, CA1, CA2, CA3, CA4, and Dentade Gyrus and cerebellar cortex regions were collected and analyzed. Results: Animals that suffered brain damage and did not receive the music protocol presented the worst performance in the tests of anxiety and depression, clearly demonstrating the anxiogenic effect of the brain injury. The anxiogenic effect was also verified in the group that suffered hypoxia and received chronic music. The groups that received acute and chronic music (without injury) and the group that received acute music after injury showed characteristics of anxiolytic effect. The anti-depressive effect of acute and chronic music was also highlighted in all groups. Regarding the biochemical analyzes, cortisol was the variable that presented prominence, with high levels in the group that suffered hypoxia and also in the group that received the chronic music protocol. Regarding the histological aspects, the CA1 region was the area less affected by hypoxia. Animals that only received music, whether in the acute or chronic protocol, did not present significant difference (p≤0.05) in the healthy neuron count in relation to the control group. The animals that received the acute music protocol after the brain injury presented better scores of healthy neurons in the CA1, CA3, CA4 and Dentade Gyrus areas than the other groups with hypoxia. The cerebellum did not show significant changes in the animals that received music, only in those who suffered hypoxia was it possible to observe the lesion. Conclusions: Brain ischemic hypoxia can promote structural and behavioral damage, animals that only suffered hypoxia presented lower brain weight, depression and anxiety like- behavior, higher level of cortisol and lower number of healthy neurons in all areas except CA1. Acute and chronic music in healthy animals created anti-depressant and anxiolytic effects. However, stress accompanied the group who heard chronic music. And although these groups had more healthy neurons than lesions in all areas, there was no better counting than in the control group. In the present research the group of animals that suffered injury and received the protocol of acute music due to the high weight of the encephalon, as well as the anxiolytic effect and anti-depressive effects, and, cortisol values were also lower than in the hypoxia group. As well as, this group had the highest number of healthy neurons in almost all areas of the hippocampus, except the CA2 area. The animals that suffered injury and received the chronic music protocol presented anxiogenic effects and signs of stress, possibly related to the effects of the injury added to that of chronic music. Thus, for the hippocampal region, he acute music, after the hypoxia lesion, was the one that promoted the best stimulus. When projecting these findings in humans, it is probable that there may be positive repercussions, on behavioral and histological aspects, and consequently on he quality of life of people with encephalic lesions due to hypoxia.

A levedura Cryptococcus gattii é um dos agentes etiológicos da criptococose, doença que pode levar à infecção fatal no sistema nervoso central em humanos e outros mamíferos. A forma de infecção ocorre através da inalação de esporos fúngicos pelas vias aéreas superiores e atinge os pulmões dando início à formação de sítios de deposição fúngica (criptococoma). Os níveis de oxigênio nos criptococomas são reduzidos devido à diminuição da perfusão sanguínea no local, ocasionando hipóxia (0,5-5% oxigênio) ou anóxia (0% oxigênio). Nesses sítios, o fungo não só modula seu metabolismo energético de acordo com a disponibilidade de oxigênio como também de nutrientes que o tecido dispõe. O oxigênio molecular (O2) é essencial para a produção de trifosfato de adenosina (ATP) na respiração celular e nas vias bioquímicas relacionadas à biossíntese de ácidos graxos insaturados, tirosina, esteróis e ácido nicotínico para a fosforilação oxidativa e processos biossintéticos. Desse modo, o oxigênio é um elemento essencial para a manutenção do patógeno aeróbico no hospedeiro. Sendo assim, o objetivo desse estudo foi analisar o efeito da hipóxia sobre a expressão global das proteínas de C. gattii. Para isso, a levedura foi cultivada em YNB líquido a 37ºC em concentração de O2 ajustada para 1% (V/V). As células foram coletadas em três tempos diferentes de hipóxia (0h-T0, 24h-T24 e 48h-T48) e as proteínas extraídas foram separadas por SDS-PAGE. Cada canaleta do gel foi dividida em 9 frações, as quais foram submetidas à tripsinização. Os peptídeos eluídos foram separados por cromatografia líquida e analisados por espectrometria de massas. Foram consideradas identificações válidas as proteínas que apresentassem pelo menos 2 peptídeos únicos, nas quais aparecessem em no mínimo 2 replicatas biológicas. Nas condições analisadas, foi possível identificar 130 proteínas, tendo sido identificadas proteínas expressas somente em uma determinada condição (43 proteínas em T0, 14 em T24 e 13 em T48). Com os resultados proteômicos analisados, pôde-se observar que houve a regulação positiva ou negativa da expressão protéica de C. gattii na situação de hipóxia. Devido ao fato da hipóxia ocorrer comumente no ambiente da infecção fúngica, o remodelamento metabólico ao qual o fungo se submete é crucial para a sua proteção e manutenção in vitro ou no hospedeiro. Em análises fenotípicas realizadas neste trabalho, verificou-se que a hipóxia pode exercer influência no crescimento fúngico e na sua melanização, porém não foi possível verificar aumento na espessura da cápsula. Adicionalmente, observou-se modificações na regulação da expressão protéica nas vias metabólicas glicolítica, pentose-fosfato, glioxalato, ácido tricarboxílico, fosforilação oxidativa entre outras. Essa alteração entre as via metabólicas pode ser o resultado de uma compensação pela redução do aporte de oxigênio para dentro da célula fúngica. / The yeast Cryptococcus gattii is the etiologic agent of cryptococcosis, a disease that can led to fatal infection of the central nervous system in humans and other mammals. The form of infection occurs through inhalation of fungal spores through the upper airways and reaches the lungs initiating the formation sites of fungal deposition (crytococcoma). Cryptococcomas experience low oxygen levels in the lungs causing hypoxia (0.5-5 % oxygen) or anoxia (0 % oxygen). At these sites, the fungal cells not only modulates its energy metabolism according to the availability of oxygen but also to the nutrients that the tissue has. The molecular oxygen is essential for the production of adenosine triphosphate (ATP) in cell respiration and the biochemical pathways related to the biosynthesis of unsaturated fatty acids, tyrosine, sterols and nicotinic acid for oxidative phosphorylation and biosynthetic processes.Thus, oxygen is essential for the maintenance of aerobic pathogen in host environment. So, the aim of this study is to analyze the effect of hypoxia on the global expression of proteins of C. gattii. For that reason, yeast was grown in liquid YNB 37ºC with reduced O2 levels (1% - V/V). Cells were collected at three different periods of hypoxia (0h-T0, 24h-T24, 48h-T48) and the extracted proteins were separated by SDS-PAGE. Each gel lane was divided into 10 slices and digested with trypsin. The eluted peptides were separated by HPLC and analyzed by mass spectrometry. Only proteins identifications with at least 2 unique peptides and present in at least two biological replicates were considered true identifications. In the conditions analyzed, a total of 130 proteins could be identified, with several presenting the expression in specific conditions (fourty-three proteins in T0, fourteen in T24 and thirteen in T48). With the proteomic results analyzed, it was observed that there was a positive or negative regulation of protein expression of C. gattii in the situation of hypoxia. Because of hypoxia occur commonly in the environment fungal infection, metabolic remodeling to which the fungus undergoes is crucial for their protection and maintenance in vitro or in the host. The phenotypic analyzes showed that hypoxia can exert influence on fungal growth and their melanization, but this work did not observed increase in the thickness of the capsule. In addition, we observed changes in the regulation of protein expression, pentose-phosphate, glyoxylate, tricarboxylic acid, oxidative phosphorylation and other glycolytic pathways. This change between the metabolic pathway may be the result of a compensation for reduced oxygen supply into the fungal cell.

A levedura Cryptococcus gattii é um dos agentes etiológicos da criptococose, doença que pode levar à infecção fatal no sistema nervoso central em humanos e outros mamíferos. A forma de infecção ocorre através da inalação de esporos fúngicos pelas vias aéreas superiores e atinge os pulmões dando início à formação de sítios de deposição fúngica (criptococoma). Os níveis de oxigênio nos criptococomas são reduzidos devido à diminuição da perfusão sanguínea no local, ocasionando hipóxia (0,5-5% oxigênio) ou anóxia (0% oxigênio). Nesses sítios, o fungo não só modula seu metabolismo energético de acordo com a disponibilidade de oxigênio como também de nutrientes que o tecido dispõe. O oxigênio molecular (O2) é essencial para a produção de trifosfato de adenosina (ATP) na respiração celular e nas vias bioquímicas relacionadas à biossíntese de ácidos graxos insaturados, tirosina, esteróis e ácido nicotínico para a fosforilação oxidativa e processos biossintéticos. Desse modo, o oxigênio é um elemento essencial para a manutenção do patógeno aeróbico no hospedeiro. Sendo assim, o objetivo desse estudo foi analisar o efeito da hipóxia sobre a expressão global das proteínas de C. gattii. Para isso, a levedura foi cultivada em YNB líquido a 37ºC em concentração de O2 ajustada para 1% (V/V). As células foram coletadas em três tempos diferentes de hipóxia (0h-T0, 24h-T24 e 48h-T48) e as proteínas extraídas foram separadas por SDS-PAGE. Cada canaleta do gel foi dividida em 9 frações, as quais foram submetidas à tripsinização. Os peptídeos eluídos foram separados por cromatografia líquida e analisados por espectrometria de massas. Foram consideradas identificações válidas as proteínas que apresentassem pelo menos 2 peptídeos únicos, nas quais aparecessem em no mínimo 2 replicatas biológicas. Nas condições analisadas, foi possível identificar 130 proteínas, tendo sido identificadas proteínas expressas somente em uma determinada condição (43 proteínas em T0, 14 em T24 e 13 em T48). Com os resultados proteômicos analisados, pôde-se observar que houve a regulação positiva ou negativa da expressão protéica de C. gattii na situação de hipóxia. Devido ao fato da hipóxia ocorrer comumente no ambiente da infecção fúngica, o remodelamento metabólico ao qual o fungo se submete é crucial para a sua proteção e manutenção in vitro ou no hospedeiro. Em análises fenotípicas realizadas neste trabalho, verificou-se que a hipóxia pode exercer influência no crescimento fúngico e na sua melanização, porém não foi possível verificar aumento na espessura da cápsula. Adicionalmente, observou-se modificações na regulação da expressão protéica nas vias metabólicas glicolítica, pentose-fosfato, glioxalato, ácido tricarboxílico, fosforilação oxidativa entre outras. Essa alteração entre as via metabólicas pode ser o resultado de uma compensação pela redução do aporte de oxigênio para dentro da célula fúngica. / The yeast Cryptococcus gattii is the etiologic agent of cryptococcosis, a disease that can led to fatal infection of the central nervous system in humans and other mammals. The form of infection occurs through inhalation of fungal spores through the upper airways and reaches the lungs initiating the formation sites of fungal deposition (crytococcoma). Cryptococcomas experience low oxygen levels in the lungs causing hypoxia (0.5-5 % oxygen) or anoxia (0 % oxygen). At these sites, the fungal cells not only modulates its energy metabolism according to the availability of oxygen but also to the nutrients that the tissue has. The molecular oxygen is essential for the production of adenosine triphosphate (ATP) in cell respiration and the biochemical pathways related to the biosynthesis of unsaturated fatty acids, tyrosine, sterols and nicotinic acid for oxidative phosphorylation and biosynthetic processes.Thus, oxygen is essential for the maintenance of aerobic pathogen in host environment. So, the aim of this study is to analyze the effect of hypoxia on the global expression of proteins of C. gattii. For that reason, yeast was grown in liquid YNB 37ºC with reduced O2 levels (1% - V/V). Cells were collected at three different periods of hypoxia (0h-T0, 24h-T24, 48h-T48) and the extracted proteins were separated by SDS-PAGE. Each gel lane was divided into 10 slices and digested with trypsin. The eluted peptides were separated by HPLC and analyzed by mass spectrometry. Only proteins identifications with at least 2 unique peptides and present in at least two biological replicates were considered true identifications. In the conditions analyzed, a total of 130 proteins could be identified, with several presenting the expression in specific conditions (fourty-three proteins in T0, fourteen in T24 and thirteen in T48). With the proteomic results analyzed, it was observed that there was a positive or negative regulation of protein expression of C. gattii in the situation of hypoxia. Because of hypoxia occur commonly in the environment fungal infection, metabolic remodeling to which the fungus undergoes is crucial for their protection and maintenance in vitro or in the host. The phenotypic analyzes showed that hypoxia can exert influence on fungal growth and their melanization, but this work did not observed increase in the thickness of the capsule. In addition, we observed changes in the regulation of protein expression, pentose-phosphate, glyoxylate, tricarboxylic acid, oxidative phosphorylation and other glycolytic pathways. This change between the metabolic pathway may be the result of a compensation for reduced oxygen supply into the fungal cell.

SENA, C.M. Imunoexpressão do fator induzido por hipóxia (hif-1) em carcinoma basocelular. 2016. 50 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2016 / Submitted by Mestrado Ciências da Saúde (ppgcsufcsobral@gmail.com) on 2017-02-01T18:53:24Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_cmsena.pdf: 10501307 bytes, checksum: 0f78ffaad25bbfc3a02edff35006d19c (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Márcia Sousa (marciasousa@ufc.br) on 2017-02-02T11:45:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_cmsena.pdf: 10501307 bytes, checksum: 0f78ffaad25bbfc3a02edff35006d19c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-02T11:45:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_cmsena.pdf: 10501307 bytes, checksum: 0f78ffaad25bbfc3a02edff35006d19c (MD5) Previous issue date: 2016-03-28 / BACKGROUND: Skin cancer (non-melanoma) is a lesion with high prevalence, with the Basal Cell Carcinoma (BCC) is the most common type of this malignancy. Recent research has sought molecular biomarkers for cancer, with a focus on energy metabolism of cells, highlighting the factor induced by hypoxia, HIF-1. To evaluate the immunohistochemical expression of HIF-1α in CBC; correlate the immunoreactivity of HIF-1α with normal tissue, histologic subtypes and clinical parameters of CBC. METHODS: The sample consisted of 27 cases of BCC in the head and neck region, classified as histologic subtype. Was performed immunohistochemical assessment by the technique of streptoavidin-Biotin with HIF-1α antibody (clone EP1215Y, ABCAM®, 1: 100 dilution, antigen retrieval with citrate pH6, Pascal Pan, System Envision Flex, overnight incubation). five fields each case in 400x magnification were assessed, using the Image J program Statistical tests were performed based on significance level of 5% using the Mann-Whitney test / Kruskal-Wallis test. RESULTS: Obtained immunoreactivity of HIF-1α in all cases of BCC, 100% (n = 27), whichever is the nodular subtype in males and elderly face. Observed was weak cytoplasmic immunostaining in cells of higher side lesions (51.3 ± 20.3) (p = 0.018) and no cytoplasmic immunostaining of cells in lesions in non-face (68.7 ± 22.6) (p = 0.015). Strong immunostaining was higher in nuclear BCC cells compared to that observed in normal skin cells (6.9 ± 7.4) (p = 0.036); greater immunoreactivity weak cytoplasmic HIF-1α in the lesions of the cells with positive margins (61.1 ± 10.4) (p = 0.004); higher percentage of cells with no cytoplasmic immunostaining in lesions with clear margins (56.0 ± 23.2) (p = 0.004); and greater weak cytoplasmic immunostaining in AML cells with positive margins compared to the normal skin cells and free margins (61.1 ± 10.4) (p = 0.042). There was no statistical difference between the immunostaining of HIF-1α between cells of different subtypes and between cells ulcerated and non-ulcerated. CONCLUSION: There was immunoreactivity of HIF-1α in all cases of CBC sample analyzed, with no statistical difference in the histological subtype, less immunostaining in normal epithelial tissue cells. The immunoreactivity of HIF-1α, both as nuclear cytoplasmic may be indicative of the involvement of this protein in these tumors, suggesting a role of HIF-1α in the CBC carcinogenesis. / INTRODUÇÃO: O Câncer de pele (não melanoma) é uma lesão com elevada prevalência, sendo o Carcinoma Basocelular (CBC) o tipo mais frequente dessa neoplasia maligna. Pesquisas recentes têm buscado biomarcadores moleculares para câncer, com enfoque no metabolismo energético das células, destacando-se o Fator Induzido por Hipóxia, HIF-1. OBJETIVOS: Avaliar a expressão imuno-histoquímica do HIF-1αem CBC; correlacionar a imunoexpressão do HIF-1αcom tecido normal, subtipos histológicos e parâmetros clínicos de CBC. METODOLOGIA: A amostra foi constituída por 27 casos de CBC na região de cabeça e pescoço, classificados conforme subtipo histológico. Realizou-se a avaliação imunohistoquímica pela técnica da Estreptoavidina-Biotina, com anticorpo HIF-1α(clone EP1215Y, ABCAM ® , diluição 1:100, recuperação antigênica com citrato pH6, Panela Pascal, Sistema Envision Flex, incubação overnight). Foram analisados cinco campos de cada caso no aumento de 400x, utilizando o programa Image J. Os testes estatísticos foram realizados com base nos níveis de significância de 5%, utilizando-se os testes de Mann-Whitney/Kruskall-Wallis. RESULTADOS: Obteve-se imunoexpressão do HIF-1α em todos os casos de CBC, 100% (n=27), prevalecendo o subtipo nodular em idosos do sexo masculino e em face. Observaramse imunomarcação citoplasmática fraca maior nas células das lesões em face (51,3±20,3) (p=0,018) e ausência de imunomarcação citoplasmática nas células das lesões em não face (68,7±22,6) (p=0,015). Houve maior imunomarcação nuclear forte em células de CBC comparativamente ao que foi observado nas células de pele normal (6,9±7,4) (p=0,036); maior imunoexpressão citoplasmática fraca do HIF-1α nas células das lesões com margens comprometidas (61,1±10,4) (p=0,004); maior percentual de células sem imunomarcação citoplasmática em lesões com margens livres (56,0±23,2) (p=0,004); além de maior imunoexpressão citoplasmática fraca em células de CBC com margens comprometidas, comparando-se às células de pele normal e margens livres (61,1±10,4) (p=0,042). Não houve diferença estatística entre a imunomarcação do HIF-1αentre as células dos diversos subtipos, bem como entre células de lesões ulceradas e não ulceradas. CONCLUSÃO: Houve imunoexpressão do HIF-1α em todos os casos de CBC da amostra analisada, sem diferença estatística quanto ao subtipo histológico, com menor imunomarcação em células de tecido epitelial normal. A imunoexpressão do HIF-1α, tanto nuclear quanto citoplasmática pode ser indicativo da participação dessa proteína nessas neoplasias, sugerindo possível papel do HIF-1αnas carcinogênese do CBC.

Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2017-02-14T20:08:50Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Waldir Heinrichs-S.pdf: 1084755 bytes, checksum: 55f50ad95fa242c660bfa0be468881c1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-14T20:08:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Waldir Heinrichs-S.pdf: 1084755 bytes, checksum: 55f50ad95fa242c660bfa0be468881c1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-07-08 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / The aquatic habitats of the Amazon basin present deep oxygen level variation, and many aquatic animals developed biochemical and physiological adaptations to survive such changes. The advanced teleost Astronotus crassipinnis is tolerant to hypoxia and has the ability to depress its metabolic rate (oxygen consumption) and to increase its anaerobic activity when exposed to hypoxia episodes. Hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) is the first gene related to hypoxia-tolerance, being regulated under these circumstances to maintain regular cellular function and control anaerobic metabolism. In the present work we studied HIF-1α expression and correlated the gene expression with changes in the metabolism of Astronotus crassipinnis exposed to 1, 3, and 5 hours of hypoxia, followed by 3 hours of recovery. The results show that A. crassipinnis presents metabolic depression under hypoxia and increases its anaerobic metabolism, and differentially regulates this gene in each of the studied tissues, with positive relationship with its metabolic profile, suggesting that HIF-1α might be the main factor to regulate responses to hypoxia tolerance. / Os ambientes aquáticos da Amazônia apresentam variações profundas, diárias e sazonais, nos níveis de oxigênio. Com isso, vários animais aquáticos desenvolveram adaptações bioquímicas e fisiológicas para sobreviver em tais condições. Astronotus crassipinnis é um teleósteo tolerante à hipóxia e possui a habilidade de diminuir o consumo de oxigênio e aumentar o seu metabolismo anaeróbico. Hypoxia-Inducible factor (HIF) é um gene altamente relacionado à sobrevivência à hipóxia, sendo regulado nessas circunstâncias com o objetivo de manter o funcionamento celular normal e controlar o metabolismo anaeróbico. No presente estudo, foram relacionados os efeitos da expressão do gene HIF-1α com mudanças no perfil metabólico de Astronotus crassipinnis expostos a 1, 3 e 5 horas de hipóxia, seguindo um período de 3 horas de recuperação. Os resultados mostraram que esse animal deprime o seu metabolismo aeróbico e ativa o anaeróbico, aumentando a atividade da enzima LDH, regulando diferencialmente o gene HIF-1α em cada tecido estudado, com relações com seu perfil metabólico, sugerindo que esse gene pode ser um dos principais fatores na regulação de respostas à tolerância à hipóxia.

Orientador: Kênia Cardoso Bícego / Banca: Wilfried Klein / Banca: Glauber dos Santos Ferreira da Silva / Resumo: O oxigênio é essencial para o desenvolvimento e a funcionalidade celular nos organismos aeróbicos. A exposição de embriões à hipóxia pode alterar a trajetória de desenvolvimento geneticamente estabelecida e gerar alterações morfofisiológicas em diversos órgãos e sistemas. Em aves precoces, a hipóxia durante a incubação é conhecida por alterar tamanho dos órgãos, taxa metabólica e ventilação em pintinhos recém-eclodidos. Nestes animais o desenvolvimento das estruturas parabrônquiais envolvidas em trocas gasosas e condução de ar, ocorre principalmente durante a segunda metade da incubação. Baseados nos fatos expostos, nós hipotetizamos que a hipóxia durante esta fase de desenvolvimento pode induzir um remodelamento nestas estruturas, favorecendo as trocas gasosas na vida pós-natal. Para testar esta hipótese, os embriões foram expostos à normóxia durante toda a incubação, ou à 15% O2 (dia 12 ao 18 de incubação) e as estruturas parabrônquiais, incluindo capilares aéreos, capilares sanguíneos, infundíbulo, átrio, lúmen parabronquial, vasos sanguíneos maiores que capilares, e tecido interparabronquial, foram analisados através de método estereológico em pintinhos com 1 e 10 dias de idade. A hipóxia aumentou os volumes relativos das estruturas diretamente relacionadas com trocas gasosas, como capilares aéreos e sanguíneos, enquanto não afetou o volume dos pulmões, e o volume relativo de infundíbulo, vasos sanguíneos maiores que capilares e tecido interparabronquial em pintinhos de 1 e 10 dias. A menor concentração de oxigênio, diminuiu o volume relativo dos átrios em ambas idades e o lúmen parabronquial nos pintinhos mais velhos. Concluímos que a hipóxia durante a fase embrionária de desenvolvimento parabronquial pode trazer um remodelamento morfológico, caracterizado por aumento de estruturas responsáveis diretamente por trocas gasosas... / Abstract: Oxygen is essential for cell development and function in aerobic organisms. Exposure of embryos to hypoxia can change the genetically estabilished developmental trajectory and generate morphological and physiological changes of several organs and systems. In precocious birds, hypoxia during incubation is known to change size of organs, metabolic rate and ventilation in hatchlings. In these animals, embryonic development of the parabronchial structures, involved in gas exchange and conduction, occurs mainly during the second half of incubation time. Based on the above facts, we can hypothesize that hypoxia during this phase of development can induce a remodeling of such structures, favoring gas exchange, later in post-hatch life. To test this hypothesis, embryos were exposed to normoxia for the entire incubation or to 15% O2 (from day 12 to 18 of incubation) and their parabronchial structures, including air capillaries, blood capillaries, infundibula, atria, parabronchial lumen, blood vessels larger than capillaries and interparabronchial tissue, were analyzed by stereological method in 1 and 10-day old chicks. Hypoxia increased the relative volume of structures directly involved in gas exchange such as air and blood capillaries, while did not change total lung volume and relative volumes of infundibula, blood vessels larger than capillaries and interparabronchial tissue of 1 and 10 days-old chicks. The lower concentration of oxygen decreased the relative volume of atria in both groups of chicks, and parabronchial lumen in the older ones. It can be concluded that hypoxia during the embryonic phase of parabronchial development can lead to a morphological remodeling characterized by increase of structures responsible directly for gas exchange at the expense of regions that participate in the conduction of air in chicks up to 10 days after hatch / Mestre

Made available in DSpace on 2018-08-01T23:26:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_7930_45 - Dissertacao - Helder Ivo Pandolfi20150903-152939.pdf: 1914550 bytes, checksum: a2ef395c6f20f25fec76f8ea26d0e783 (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / O cacaueiro é cultivado em toda região tropical do mundo e sua amêndoa é o principal ingrediente do chocolate. Alguns locais de cultivo tendem a sofrer com alagamento em determinada época do ano. A baixa disponibilidade de oxigênio, provocada pelo alagamento, induz alterações nos processos fisiológicos e morfológicos modificando o desenvolvimento e crescimento das plantas. A aeração da solução nutritiva é necessária para disponibilizar oxigênio para as raízes em plantas cultivadas em sistema hidropônico. O silício é benéfico para várias culturas, principalmente quando submetidas a algum tipo de estresse, o que pode ajudar a aliviar os danos provocados pelo alagamento. Na literatura não há relato do cultivo de cacau com omissão enível de silício, principalmente pela presença do elemento em todos os tipos de solo. Com base nessa prerrogativa, foi realizado um experimento com mudas de cacaueiro, cv. Catongo. O experimento foi realizado na casa de vegetação do CEUNES, localizada no município de São MateusES. O experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado com quatro repetições sendo uma planta por repetição na primeira e segunda época de avaliação e na terceira foram utilizadas duas plantas por repetição. Os tratamentos foram distribuídos num arranjo fatorial 2x3x5, sendo com e sem aeração da solução nutritiva, três épocas de avaliação (1, 10 e 30 dias) e 5 níveis de silício (0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mmol L-1). As avaliações realizadas foram divididas em dois capítulos, o primeiro avaliou as variáveis de crescimento, teor foliar de silício e teores de pigmentos fotossintéticos. O segundo capítulo, reuniu os caracteres de fluorescência da clorofila a e trocas gasosas. Com base nos resultados, foram observadosa influência da falta de aeraçãono teor foliar de silício, degradaçãode pigmentos fotossintéticos, fluorescência da clorofila a e trocas gasosas. Pode ser observadoo efeito isolado do silíciosobre algumas variáveis fisiológicas de plantas não submetidas ao estresse, bem como em plantas submetidas, nesse caso aliviando o estresse provocado pela falta de aeração.