Thesis (M.S.)--University of Michigan, 1981.

Thesis (M.S.)--University of Michigan, 1981.

Thesis (Ph.D.)--University of Alabama at Birmingham, 2009. / Title from PDF title page (viewed on Sept. 9, 2009). Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of Chicago, Committee on Immunology. / Includes bibliographical references. Also available on the Internet.

Thesis (Ph. D.)--University of Oklahoma. / Bibliography: leaves 115-153.

Thesis (Ph.D.)--Uniformed Services University of the Health Sciences, 2006 / Typescript (photocopy)

Dysregulation of endothelial cell barrier function is associated with a wide variety of human diseases ranging from tumor metastasis to inflammation. The barrier function of endothelial cells is maintained by cell adhesion molecules (CAMs). Immunoglobulin containing and proline-rich receptor-1(IGPR-1) was recently identified as a novel CAM involved in angiogenesis. However, the molecular mechanism of IGPR-1 function in endothelial cells remains largely unknown. The overarching goals of this study were: (A) to determine molecular mechanism by which IGPR-1 stimulates biological responses in cells and (B) to investigate regulation of phosphorylation of IGPR-1 at serine 220 (Ser220), and its role in IGPR-1 function. Our data demonstrate that IGPR-1 undergoes cis-dimerization, which leads to homophilic trans-dimerization of IGPR-1, which is required for its adhesive function. Moreover, we demonstrate that phosphorylation of Ser220 is regulated by trans-dimerization of IGPR-1 and that Glycogen Synthase Kinase 3 (GSK-3) is responsible for its phosphorylation as over-expression of kinase active increased and kinase inactive inhibited phosphorylation of Ser220, respectively. Taken together, the results demonstrate that the coordinated dimerization of IGPR-1 and its homophilic interaction regulates its adhesive function and serine phosphorylation. The adhesive function of IGPR-1 contributes to the barrier function of endothelial cells.

Trypanosoma evansi is a protozoan flagellate that affect cattle, sheep, goats, donkeys, cats and pigs. The disease is particularly important in horses, known as "Mal das Cadeiras", due to deficits characteristic of locomotion in animals infected. The disease has a worldwide distribution, with several reports of natural infections in different regions in Brazil. Several pharmaceutical drugs have been recommended for the prophylaxis and control of the parasite, but over the years, these drugs have lost their effectiveness and protozoan looks developing resistance. The production and use of avian antibodies has aroused great interest in the scientific community because of the diversity of diagnostic and therapeutic applications. Due to the phylogenetic distance, immune diversification mechanisms and transferability of serum immunoglobulin to the egg yolk, currently recognizes a number of advantages to using avian antibodies rather than antibodies of mammals. This study produced a specific immunoglobulin against Trypanosoma evansi from immunization of chickens using an isolate of the parasite. After extraction and purification from egg yolk, cytotoxicity and genotoxicity of these antibodies in cultures of human leukocytes were evaluated. The therapeutic efficacy was tested in Rattus norvegicus. The trial also assessed the use of avian antibody associated with imidocarb dipropionate and diaceturate of diminazene. The toxicity tests showed that immunoglobulin does not produce gene and cell injury. In vivo tests showed increased in longevity and pre-patent period, mainly in rats treated with avian immunoglobulin associated with pharmacological treatment. The immunization and the extraction protocol used in this study allowed obtaining specific antibodies against protozoan and innocuous to the host. Moreover, when administered for therapeutic purposes, strengthens the immune system and prolongs the survival of infected patients. / Trypanosoma evansi é um protozoário flagelado que acomete bovinos, ovinos, caprinos, asininos, felinos e suínos. A enfermidade tem especial importância em equinos, sendo conhecida como mal das cadeiras , devido aos déficits de locomoção característicos em animais infectados. A doença tem distribuição mundial, com vários relatos de infecções naturais em diversas regiões no Brasil. Várias drogas terapêuticas têm sido recomendadas para a profilaxia e controle do protozoário, porém ao longo dos anos estes medicamentos tem perdido a eficácia e o protozoário parece desenvolver resistência. A produção e uso de anticorpos aviários tem despertado grande interesse na comunidade científica devido à diversidade de aplicações diagnósticas e terapêuticas. Devido à distância filogenética, mecanismos de diversificação imune e capacidade de transferência das imunoglobulinas séricas para a gema do ovo, atualmente reconhece-se uma série de vantagens ao utilizar anticorpos aviários ao invés de anticorpos de mamíferos. Neste estudo foi produzido uma imunoglobulina específica contra o T. evansi a partir de imunização de galinhas usando um isolado do protozoário. Após a extração e purificação a partir da gema do ovo, foram avaliadas a citotoxicidade e genotoxicidade destes anticorpos em cultura de leucócitos humanos. A eficácia terapêutica foi testada em Rattus norvegicus. O ensaio também avaliou o uso do anticorpo aviário associado ao dipropionato de imidocarb e diaceturato de diminazene. Os testes de toxicidade mostraram que a imunoglobulina não produz lesões celulares e genéticas. Testes in vivo mostraram aumento da longevidade e período pré-patente, principalmente em ratos tratados com a imunoglobulina aviária associada ao tratamento farmacológico. O protocolo de imunização e extração usados nesta pesquisa permitiu a obtenção de anticorpos específicos contra o protozoário e inócuo para o hospedeiro. Além disso, ao ser administrado com fins terapêuticos, reforça o sistema imunológico e prolonga a sobrevida de pacientes infectados.

Um dos motivos do baixo desempenho dos animais está em falhas durante o processo de colostragem, pois ele pode apresentar baixa qualidade nutricional e microbiológica. Após esta fase inicial de vida, o desempenho das bezerras sofre influência direta do manipulador. Na intenção de identificar pontos falhos no processo de criação de bezerras, objetivou-se caracterizar o manejo destes animais, através do levantamento das principais práticas zootécnicas adotadas, avaliar a composição nutricional e microbiológica do colostro fornecido aos recém nascidos e as características do tratador de bezerras. Para caracterizar os sistema de criação de bezerras realizou-se uma entrevista com 179 produtores e/ou técnicos, abordando questões relacionadas a criação de bezerras, desde o manejo da vaca seca até o desaleitamento. Para caracterizar o colostro, foram colhidas 66 amostras, diretamente da ordenha de vacas recém-paridas ou do banco de colostro, com as quais realizaram-se análises bromatológicas e microbiológicas. A avaliação da atitude dos tratadores de bezerras foi realizada através de uma entrevista com 100 tratadores, a qual permitiu colher dados de auto-relatos do responsável pela criação de bezerras. A entrevista foi conduzida com base em questionário semi-estruturado, aplicado por um único entrevistador e direcionado ao tratador de bezerras. Os itens de atitude foram medidos e classificados de acordo com a resposta do entrevistado em uma escala de cinco pontos (Escala de Likert). Através do levantamento foi possível identificar pontos de melhoria na criação de bezerras, principalmente com as vacas pré-parto e acompanhamento dos partos, além de um melhor cuidado com o processo de colostragem desde a identificação da qualidade do colostro até o momento correto de oferecer o alimento ao recém-nascido. Práticas de manejo direcionadas a obtenção de colostro de boa qualidade devem ser priorizadas, além de cuidados com a higienização da colheita e armazenamento do mesmo, pois apenas 22,6% das amostras de colostro atendem a recomendação de qualidade nutricional e microbiológica. Assim, grande parte dos bezerros nesta população estudada está propensa a apresentar falhas na transferência de imunidade passiva e exposta a patógenos quando alimentados com colostro materno. Para algumas variáveis o tratador tem uma atitude positiva, porém na prática o comportamento realizado nem sempre é o mesmo. É possível que os tratadores de bezerras tenham componentes afetivos e cognitivos positivos, ou seja, já tiveram experiência anterior de sucesso com as práticas ou ainda, conhecem a importância técnica das principais ações na criação. Porém, o componente comportamental sobressai sobre algumas ações, levando-os a uma divergência entre a atitude e o comportamento. Programas voltados para educação, treinamento e fortalecimento do comprometimento dos colaboradores é um caminho interessante na tentativa de reduzir as falhas na criação de bezerras. / One cause of the low dairy calves performance is related to failures during colostrum feeding process, because it may have low nutritional and microbiological quality. After this initial period of life, the dairy calves performance is under direct influence of the handler. In an attempt to identify weak points in the dairy calves raising systems the study aimed to characterize the dairy calves management, through a survey of the main husbandry adopted practices, assess the nutritional and microbiological composition of colostrum and the calves handler attitude. To characterize the dairy calves raising system an interview with 179 producers and / or field technicians, addressing issues related to creation of calves from the dry cow management until weaning, was held. To characterize colostrum quality, 66 samples were collected directly from recently calved cows or colostrum bank, for chemical and microbiological analyzes. The evaluation of the attitude of calves handlers was conducted by interviewing 100 handlers, which allowed the collection of self-reported data. The interview was conducted based on a semi-structured questionnaire applied by a single interviewer and directed to calves handler. The items of attitude were measured and ranked according to the handler\'s response on a five point scale (Likert scale). Through the survey it was possible to identify areas for improvement in the dairy calves system of production, especially with pre-partum cows and monitoring of deliveries, and better care with the colostrum feeding process as to identifying the quality of colostrum to the correct feeding time for the newborn. Management practices aimed to obtain good quality colostrum must be priorities besides, care with sanitation during the harvest and storage of the same, since only 22.6% of colostrum samples meet the recommendation of nutritional and microbiological quality. Thus, most of the calves in the studied population are likely to present failures in the transfer of passive immunity and exposed to pathogens when fed colostrum. For some variables the handler has a positive attitude, but in practice the behavior performed is not always the same. It is possible that the calves handlers have positive affective and cognitive components, in other words, have had previous experience of successful practices or even know the technical importance of the main practices in dairy calves raising. However, the behavioral component stands on some actions, leading them to a divergence between the attitude and behavior. Programs for education, training and commitment of employees are an interesting way to reduce the low performance of dairy calves.

Orientador: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Dagmar Ruth Stach Machado / Banca: Alexandrina Sartori / Resumo: As proteínas Yops. formam uma família de proteínas secretadas por Yersinia spp que incluem efetores intracelulares (seis efetores foram identificados: YopE, YopH, YopM, YpkA/YopO, YopJ/YopP e YopT) e vários componentes do aparato de secreção-translocação que são liberado pela bactéria sob quelação de Ca2+. As .Yops. efetoras têm sido relacionadas a uma série de propriedades de virulência, incluindo resistência à fagocitose, citotoxicidade e desfosforilação de proteínas do hospedeiro. Porém, a interação das .Yops. de Yersinia com a resposta imune específica do hospedeiro não está bem esclarecida. O objetivo deste estudo foi investigar o papel imunomodulador das "Yops" secretadas por amostras de Yersinia pseudotuberculosis sobre a produção de anticorpos e autoanticorpos por linfócitos B. Para tanto camundongos foram infectados com uma amostra selvagem de Y. pseudotuberculosis (YpIII) e com amostras mutantes, defectivas na secreção de determinadas .Yops. efetoras (YopH, YopE, YopM, YpkA e YopJ). Foram obtidas células esplênicas destes animais, e as células secretoras de imunoglobulinas inespecíficas e específicas (anti-Yersinia e anti-.Yops.) foram quantificadas através do teste ELISPOT. A presença de anticorpos específicos anti-Yersinia e anti-.Yops. no soro dos animais infectados foi analisada através do teste ELISA. A presença de auto-anticorpos séricos foi analisada através do teste DOT-BLOT. Não se observou nenhuma diferença entre o número de células secretoras de imunoglobulinas (Igs) inespecíficas dos animais inoculados com a amostra selvagem, YpIIIpIB102 (wt), em relação aos controles. Já a amostra YpIII pIB522, embora defectiva na secreção de YopE, provocou uma redução dos linfócitos B secretores de IgG2a, IgM e IgA. A única ativação observada ocorreu para o isotipo IgG2a (aumento de 1,7 vezes)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The "Yops" proteins form a protein family secreted by Yersinia spp that includes intracellular effectors (six effectors had been identified: YopE , YopH, YopM, YpkA/YopO, YopJ/YopP and YopT) and some components of the secretion-translocation apparatus that are released by the bacteria under Ca2+ quelation. The "Yops" effectors have been related to a series of virulence properties, including resistance to phagocytosis, citotoxicity and desfosforilation of host proteins. However, the interaction of the Yersinia "Yops" with the host specific immune response is not well defined. The objective of this study was to investigate the immunomodulatory role of the "Yops" secreted by strains of Yersinia pseudotuberculosis on the production of antibodies and autoantibodies by splenic B lymphocytes. To this end, mice were infected with wild-type Y. pseudotuberculosis (YpIII) or with mutant strains, unable to secrete specific "Yops" (YopH, YopE, YopM, YpkA and YopJ). Spleen cells were obtained, and the cells secreting nonspecific and specific immunoglobulins (anti-Yersinia and anti-"Yops") was quantified by the ELISPOT technique. The presence of anti-Yersinia and anti- .Yops. specific antibodies in infected mice serum was investigated by ELISA and the presence of autoantibodies by DOT-BLOT assay. It was not observed neither difference between the number of nonspecific Igs-secreting cells of the animals infected with YpIIIpIB102 (wt) in relation to the controls. The strain YpIII pIB522, although defective in YopE secretion, provoked a reduction in the B lymphocytes secreting IgG2a, IgM and IgA. The unique activation observed was that of IgG2a isotype (an increase of 1.7-fold) on the 7th day post infection. The YopH- strain, YpIII pIB29, provoked an increase in the number of IgG1-, IgG2a- and IgG3- secreting cells (between 1.4 to 2.4-fold), on the 7th and 14th days post infection... (Complete abstract, click electronic address below) / Mestre