Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O óleo de peixe é rico em ácidos graxos poli-insaturados (AGPI) n-3 e vem sendo apontado como anti-inflamatório associado à melhora de diversas doenças de natureza inflamatória. No presente estudo, objetivou-se avaliar a influência do óleo de peixe sobre a inflamação pulmonar e hiper-reatividade em camundongos ativamente sensibilizados desafiados com ovoalbumina (OVA). Camundongos A/J machos foram alimentados com dieta standard-chow (SC) ou dieta rica em óleo de peixe (Px) durante 8 semanas. Após 4 semanas do início da dieta, cada grupo foi subdividido aleatoriamente para ser desafiado com salina (SC-SAL e PX-SAL) ou ovoalbumina (SC-OVA e PX-OVA). A função pulmonar (resistência e elastância) foi avaliada através de pletismografia invasiva, na condição de aerolização ou não com metacolina 24 horas após o último desafio antigênico. Foi realizado lavado broncoalveolar (LBA) para contagem de leucócitos e quantificação de eotaxina-2. A deposição de muco e de matriz peribronquiolar e o infiltrado de eosinófilos foram quantificados no tecido pulmonar. Foram avaliados interleucina (IL)-13 através de imunohistoquímica e NFκB, GATA-3 e PPARγ, por western-blotting. O desafio com OVA resultou em aumento da infiltração de eosinófilos, elevada produção de citocinas inflamatórias, remodelamento pulmonar, produção de muco e hiper-reatividade das vias aéreas. Detectou-se aumento na expressão dos fatores de transcrição NFκB e GATA-3 nos camundongos do grupo sensibilizado e desafiado com OVA em comparação aos controles. Todas essas alterações foram atenuadas nos camundongos que receberam dieta com óleo de peixe. Expressão elevada de PPARγ foi detectada nos pulmões dos camundongos dos grupos alimentados com óleo de peixe. Em conclusão, nossos resultados mostram que a ingestão de óleo de peixe atenuou as características clássicas do quadro asmático através da modulação da síntese de mediadores inflamatórios, via regulação negativa de NFκB e GATA-3 e regulação positiva de PPARγ. O óleo de peixe parece ser uma terapia alternativa para o controle e tratamento da asma. / Fish oil (FO) is rich in n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFA), which have been suggested to be anti-inflammatory and are associated with improvement of several inflammatory diseases. In this study, we investigated the influence of FO on allergen-induced lung inflammation and airway hyperreactivity in mice. Male A/J mice were fed either a standard-chow (SC) or a FO diet (FO) for 8 weeks. After 4 weeks, each group was further randomized for ovalbumin (SC-OVA and FO-OVA) or saline (SC-SAL and FO-SAL) challenge. Resistance and elastance were measured at baseline and after aerosolized methacholine, 24h after the last challenge. Bronchoalveolar lavage (BAL) was performed for leukocyte counts and eotaxin-2 quantification. Lung tissue mucus deposition, peribronchiolar matrix deposition and eosinophil infiltration were quantified. Interleukin-13 expression was evaluated by immunohistochemistry and nuclear factor kappa B (NFκB), GATA-3 and peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) expression was measured by Western blot. OVA challenge resulted in increased eosinophil infiltration, increased inflammatory cytokine production, peribronchiolar matrix and mucus deposition and airway hyperreactivity to aerosolized methacholine. Elevated lung NFκB and GATA-3 expression was noted in OVA-challenged mice, which was attenuated in FO diet-fed mice. Higher PPARγ expression was also detected in the lungs from the FO-fed groups. In conclusion, FO intake attenuated classical asthma features by reducing inflammatory mediator production via GATA-3 and NFκB down-regulation and PPARγ up-regulation. Thus, FO might be an alternative therapy for asthma prevention and control.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O óleo de peixe é rico em ácidos graxos poli-insaturados (AGPI) n-3 e vem sendo apontado como anti-inflamatório associado à melhora de diversas doenças de natureza inflamatória. No presente estudo, objetivou-se avaliar a influência do óleo de peixe sobre a inflamação pulmonar e hiper-reatividade em camundongos ativamente sensibilizados desafiados com ovoalbumina (OVA). Camundongos A/J machos foram alimentados com dieta standard-chow (SC) ou dieta rica em óleo de peixe (Px) durante 8 semanas. Após 4 semanas do início da dieta, cada grupo foi subdividido aleatoriamente para ser desafiado com salina (SC-SAL e PX-SAL) ou ovoalbumina (SC-OVA e PX-OVA). A função pulmonar (resistência e elastância) foi avaliada através de pletismografia invasiva, na condição de aerolização ou não com metacolina 24 horas após o último desafio antigênico. Foi realizado lavado broncoalveolar (LBA) para contagem de leucócitos e quantificação de eotaxina-2. A deposição de muco e de matriz peribronquiolar e o infiltrado de eosinófilos foram quantificados no tecido pulmonar. Foram avaliados interleucina (IL)-13 através de imunohistoquímica e NFκB, GATA-3 e PPARγ, por western-blotting. O desafio com OVA resultou em aumento da infiltração de eosinófilos, elevada produção de citocinas inflamatórias, remodelamento pulmonar, produção de muco e hiper-reatividade das vias aéreas. Detectou-se aumento na expressão dos fatores de transcrição NFκB e GATA-3 nos camundongos do grupo sensibilizado e desafiado com OVA em comparação aos controles. Todas essas alterações foram atenuadas nos camundongos que receberam dieta com óleo de peixe. Expressão elevada de PPARγ foi detectada nos pulmões dos camundongos dos grupos alimentados com óleo de peixe. Em conclusão, nossos resultados mostram que a ingestão de óleo de peixe atenuou as características clássicas do quadro asmático através da modulação da síntese de mediadores inflamatórios, via regulação negativa de NFκB e GATA-3 e regulação positiva de PPARγ. O óleo de peixe parece ser uma terapia alternativa para o controle e tratamento da asma. / Fish oil (FO) is rich in n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFA), which have been suggested to be anti-inflammatory and are associated with improvement of several inflammatory diseases. In this study, we investigated the influence of FO on allergen-induced lung inflammation and airway hyperreactivity in mice. Male A/J mice were fed either a standard-chow (SC) or a FO diet (FO) for 8 weeks. After 4 weeks, each group was further randomized for ovalbumin (SC-OVA and FO-OVA) or saline (SC-SAL and FO-SAL) challenge. Resistance and elastance were measured at baseline and after aerosolized methacholine, 24h after the last challenge. Bronchoalveolar lavage (BAL) was performed for leukocyte counts and eotaxin-2 quantification. Lung tissue mucus deposition, peribronchiolar matrix deposition and eosinophil infiltration were quantified. Interleukin-13 expression was evaluated by immunohistochemistry and nuclear factor kappa B (NFκB), GATA-3 and peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) expression was measured by Western blot. OVA challenge resulted in increased eosinophil infiltration, increased inflammatory cytokine production, peribronchiolar matrix and mucus deposition and airway hyperreactivity to aerosolized methacholine. Elevated lung NFκB and GATA-3 expression was noted in OVA-challenged mice, which was attenuated in FO diet-fed mice. Higher PPARγ expression was also detected in the lungs from the FO-fed groups. In conclusion, FO intake attenuated classical asthma features by reducing inflammatory mediator production via GATA-3 and NFκB down-regulation and PPARγ up-regulation. Thus, FO might be an alternative therapy for asthma prevention and control.

Este estudo se propôs a avaliar o potencial inflamatório das partículas eliminadas na exaustão do diesel (PED) e 1,2-naftoquinona (1,2-NQ) sobre outros compartimentos, como o músculo liso vascular (aorta torácica; RTA) e do corpo cavernoso isolados de ratos (RCC) e os mecanismos envolvidos via ensaios funcionais e bioquímicos. A injeção i.tr. das PED e 1,2-NQ em ratos Wistar causou inflamação e hiporreatividade das vias aéreas associados ao aumento significativo do relaxamento evocado pela ACh na RTA. No RCC desses mesmos animais, tanto o GTN quanto o estímulo elétrico (EFS) causou maior relaxamento. O conteúdo basal de TBARs na RTA e pulmão foi reduzido, embora outros testes indicadores de estresse oxidativo e / ou atividade antioxidante não mostraram diferenças entre os grupos. As taxas de expressão gênica / protéica da nNOS no RCC de ratos não diferiram do grupo controle, mas a expressão da eNOS e iNOS foi reduzida na RTA e RCC. Não foram quantificadas concentrações séricas do TNF<font face=\"Symbol\">&#945 ou IL-1<font face=\"Symbol\">b, sugerindo que os efeitos sistêmicos ocorrem independentemente destas citocinas. Conclui-se que o tratamento agudo de ratos com a mistura de poluentes induziu inflamação das vias aéreas (e hiporreatividade), capaz de afetar outros compartimentos, como a musculatura lisa vascular (RTA) e do RCC. / We tested the hypothesis that local inflammation in the airways evoked by intra-tracheal instillation of the environmental chemical 1,2-naphthoquinone (1,2-NQ) and diesel exhaust particles (DEP) is capable of targeting other systemic compartments, such as vessels (rat thoracic aorta; RTA) and corpus cavernosum (RCC), and possible involved mechanisms. After 3h, this treatment induced airways hyporresponsiveness to ACh and local inflammation. This effect was associated with decreased numbers of leukocyte in the blood and spleen and increased number of leukocytes in the bone marrow. Pollutant treatment also markedly increased ACh-induced relaxation in RTA and by both GTN- and electrical stimulation-induced relaxation in RCC. Exposure to pollutants did not affect FE-induced contraction in RTA. Neither serum levels of cytokines (TNF<font face=\"Symbol\">&#945 e IL-1<font face=\"Symbol\">b) nor basal concentration of total nitrate were different amongst groups. No evidence of increased catalase activity in RTA, RCC and lung was found. The treatment reduced the eNOS e iNOS gene expression in RTA e RCC, without significantly affecting the nNOS gene expression in RCC. Our results are consistent with the hypothesis that DEP-induced airways hiporresponsiveness and inflammation can account to produce systemic changes, such as structural and functional changes in the RTA and RCC by means of substances derived from endothelium or due to the ability of these pollutants to act to stimulate the production of scavenger of free radical.