A inseminação artificial em tempo fixo (IATF), juntamente com a inseminação artificial pós-cervical (IAPC), permite uma redução expressiva da mão de obra e uma melhor utilização dos machos geneticamente superiores. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência do eCG associado agonista de GnRH (buserelina) ou apenas buserelina para indução e sincronização da ovulação em porcas desmamadas e submetidos a apenas uma IATF. Um total de 495 femeas suínas desmamadas foram utilizadas, cuja detecção de estro foi realizada uma vez ao dia (07:30). As fêmeas foram divididas em três tratamentos: Controle (n = 165) - a primeira IA foi realizada no início do estro (0 h) e repetida a cada 24 h, posteriormente, durante o estro; Tratamento 2: eCG + GnRH (n = 165) – femeas receberam uma injeção intramuscular de 600 UI de eCG após o desmame, e uma injeção intramuscular de buserelina (10 μg) 86-89 h após a administração de eCG; Tratamento 3: GnRH - fêmeas receberam uma injeção intramuscular de buserelina (10 μg) 86-89 h após o desmame. Nos três grupos era realizada a exposição ao macho no dia seguinte ao desmame uma vez ao dia, e aquelas fêmeas que demostrassem estro eram retiradas dos protocolos de IATF. Os grupos tratados receberam uma única IA, 118-120 h após o desmame (30-33 h após a buserelina). A IAPC contou com doses homospérmicas (1,5 x 109 células de espermáticas/50 ml) que foram utilizadas nas femeas em todos os três tratamentos. Não houve diferenças entre os tratamentos quanto ao número de femeas em estro até o terceiro dia (P>0,05). O intervalo entre o desmame e a ovulação foi significativamente maior (P< 0,05) no grupo controle (141,5 ± 1,58 h) comparativamente aos tratamentos eCG+GnRH (133,3 ± 1,60 h) e GnRH (135,9 ± 1,57 h). As femeas do tratamento eCG+GnRH ovularam em média antes (P<0,05) em relação ao grupo GnRH (44,5 ± 1,74 vs 48,2 ± 1,73 h). A taxa de parto foi superior (P<0,05) no grupo de controle, comparativamente aos tratamentos eCG + GnRH e GnRH, mas não houve diferença (P>0,05) em leitões nascidos totais entre os tratamentos. O uso do GnRH, com ou sem a administração prévia de eCG, antecipa a ovulação nas fêmeas suínas desmamadas. Nas fêmeas tratadas com eCG+GnRH ou GnRH, há em maior percentual de fêmeas inseminadas fora do momento ideal, em relação à ovulação, o que pode prejudicar o desempenho reprodutivo, sendo necessários ajustes no momento de aplicação dos hormônios ou no momento da inseminação para estudos subsequentes. / Fixed-time artificial insemination (FTAI) together with post-cervical artificial insemination (PCAI), allows an expressive reduction in labor requirements and a wider use of higher indexing boars. The aim of this study was to evaluate the efficiency of eCG agonist of GnRH (buserelin) or just buserelin for induction and synchronization of ovulation in weaned sows and submitted to FTAI .A total of 495 weaned sows whose estrus detection was performed once daily (07:30 A.M), starting a day after weaning. The sows were allocated into three treatment groups: Control (n=165) – the first AI was performed at estrus onset (0 h) and repeated every 24 h thereafter during estrus; Treatment 2: eCG + GnRH (n=165) – sows received an intramuscular injection of 600 UI eCG after weaning, and an intramuscular injection of buserelin (10 μg) 86-89 h after eCG administration; Treatment 3: GnRH - sows received an intramuscular injection of buserelina (10 μg) 86-89 h after weaning. . In the three groups it was performed boar exposure in the following day to weaning once a day, and those sows that demonstrated oestrus were removed from FTAI protocols. Treated groups received a single AI, 118-120 h after weaning (30-33 h after buserelin). PCAI with homospermic doses (1.5 x 109 total of sperm cells/50 ml) were respectively performed in sows in all treatment group. There were no differences (P> 0,05) in number of sows that showed oestrus until the third day between treatments. The interval between weaning and ovulation was significantly higher (P< 0,05) in the control group (141,5 ± 1,58 h) comparatively the treatments eCG+GnRH (133,3 ± 1,60 h) and GnRH (135,9 ± 1,57 h). Sows of treatment eCG+GnRH ovulated earlier (P< 0,05) comparing to the GnRH group (44,5 ± 1,74 vs 48,2 ± 1,73 h). Higher (P<0,05) farrowing rate in control group comparatively to treatments eCG+GnRH e GnRH was observed, but there were no differences (P> 0,05) in total piglets born between treatments. Use of GnRH, with or without previous administration of eCG anticipates ovulation in sows weaned, in the sows treated with eCG + GnRH or GnRH, there is a greater percentage of females inseminated outside the ideal time, with respect to ovulation, it can harm the reproductive performance, with necessary adjustments at the time of application hormones or at the time of insemination for subsequent studies.

A técnica de inseminação artificial (IA) por laparoscopia em ovinos foi utilizada pela primeira vez em 1982, o que tornou viável a utilização econômica do sêmen congelado nesta espécie. Os experimentos foram realizados com o objetivo de determinar as taxas de prenhez de ovelhas inseminadas por laparoscopia, utilizando 50 x 106 espermatozóides descongelados e capacitados in vitro. No experimento 1, foi utilizado sêmen de um reprodutor e 67 ovelhas com estros sincronizados, divididas aleatoriamente entre os grupos: sêmen congelado (SC1) e sêmen congelado capacitado in vitro (SCC1). As ovelhas foram submetidas à IA, com 50x106 espermatozóides, 56 e 60 horas, respectivamente, após a retirada das esponjas impregnadas com progesterona. No grupo SCC1, a taxa de prenhez foi de 48,39% (15/31) significativamente superior a do grupo SC1 de 25% (9/36). No experimento 2, utilizou-se um reprodutor e 100 ovelhas com os estros sincronizados, distribuídas aleatoriamente entre três grupos: sêmen fresco (SF2), SC2 e SCC2. Nos grupos SF2 e SC2 as fêmeas foram inseminadas com 100x106 espermatozóides e 56 horas após a retirada da progesterona. No grupo das fêmeas inseminadas com espermatozóides capacitados in vitro, utilizou-se 50x106 espermatozóides e um intervalo de 60 horas após retirada da progesterona. As taxas de prenhez diagnosticadas nos diferentes grupos experimentais foram: SF2 60,9% (25/41), SC2 56,70% (17/30) e SCC2 44,90% (13/29), não existindo diferença estatística entre os grupos. Os experimentos realizados mostraram a viabilidade doemprego, na espécie ovina, da IA por laparoscopia utilizando 50x106 espermatozóides descongelados e capacitados in vitro. / The ovine artificial insemination (AI) by laparoscopy was described the first time in 1982, since this time frozen semen became a tool for use under field conditions. Today one research goal is to achieve high preganancies rates after AI using a reduced number of frozen/thawed spermatozoa per dosis. The experiments were carried out with the objective to determine the pregnancy rate of ewes inseminated by laparoscopy, using 50 x 106 thawed and in vitro capacited spermatozoa. In the experiment 1 was used semen of one fertily ram and 67 ewes with synchronized estrus. The females were randomly distributed among two experimental groups: inseminated with frozen semen (SC1) or frozen and in vitro capacitated semen (SCC1). The ewes were submitted to the AI with 50x106 spermatozoa, 56 (SC1) or 60 (SCC1) hours, respectively, after retreat of the intra vaginal device impregnated with progesterona. In the group SCC1 the pregnancy rate was 48,39% (15/31) significantly different from the 25% (9/36) observed in the group SC1. In the experiment 2 was used one fertily ram and 100 ewes with synchronized estrus, distributed randomly among three groups: inseminated with fresh semen (SF2), 100 x 106 spermatozoa, SC2, 100 x 106 frozen spermatozoa and SCC2, 50 x 106 frozen and in vitro capacited spermatozoa. The moment of the laparoscopic AI was the same as used in the experiment 1: 56 (SF2 and SC2) or 60 (SCC2) hours, respectively, after retreat of the intra vaginal device impregnated with progesterona. The observed pregnancy rates were similar among the experimental groups: SF2 60,9% (25/41), SC2 56,70% (17/30) and SCC2 44,90% (13/29). Our experiments showed the ability of frozen/thawed and in vitro capacitated ovine spermatozoa to in vivo fertilize and promote the development of pregancies. In conclusion, itis possible to use 50x106 frozen/thawed and in vitro capacited spermatozoa for ovine laparoscopic AI.

A inseminação artificial em tempo fixo (IATF), juntamente com a inseminação artificial pós-cervical (IAPC), permite uma redução expressiva da mão de obra e uma melhor utilização dos machos geneticamente superiores. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência do eCG associado agonista de GnRH (buserelina) ou apenas buserelina para indução e sincronização da ovulação em porcas desmamadas e submetidos a apenas uma IATF. Um total de 495 femeas suínas desmamadas foram utilizadas, cuja detecção de estro foi realizada uma vez ao dia (07:30). As fêmeas foram divididas em três tratamentos: Controle (n = 165) - a primeira IA foi realizada no início do estro (0 h) e repetida a cada 24 h, posteriormente, durante o estro; Tratamento 2: eCG + GnRH (n = 165) – femeas receberam uma injeção intramuscular de 600 UI de eCG após o desmame, e uma injeção intramuscular de buserelina (10 μg) 86-89 h após a administração de eCG; Tratamento 3: GnRH - fêmeas receberam uma injeção intramuscular de buserelina (10 μg) 86-89 h após o desmame. Nos três grupos era realizada a exposição ao macho no dia seguinte ao desmame uma vez ao dia, e aquelas fêmeas que demostrassem estro eram retiradas dos protocolos de IATF. Os grupos tratados receberam uma única IA, 118-120 h após o desmame (30-33 h após a buserelina). A IAPC contou com doses homospérmicas (1,5 x 109 células de espermáticas/50 ml) que foram utilizadas nas femeas em todos os três tratamentos. Não houve diferenças entre os tratamentos quanto ao número de femeas em estro até o terceiro dia (P>0,05). O intervalo entre o desmame e a ovulação foi significativamente maior (P< 0,05) no grupo controle (141,5 ± 1,58 h) comparativamente aos tratamentos eCG+GnRH (133,3 ± 1,60 h) e GnRH (135,9 ± 1,57 h). As femeas do tratamento eCG+GnRH ovularam em média antes (P<0,05) em relação ao grupo GnRH (44,5 ± 1,74 vs 48,2 ± 1,73 h). A taxa de parto foi superior (P<0,05) no grupo de controle, comparativamente aos tratamentos eCG + GnRH e GnRH, mas não houve diferença (P>0,05) em leitões nascidos totais entre os tratamentos. O uso do GnRH, com ou sem a administração prévia de eCG, antecipa a ovulação nas fêmeas suínas desmamadas. Nas fêmeas tratadas com eCG+GnRH ou GnRH, há em maior percentual de fêmeas inseminadas fora do momento ideal, em relação à ovulação, o que pode prejudicar o desempenho reprodutivo, sendo necessários ajustes no momento de aplicação dos hormônios ou no momento da inseminação para estudos subsequentes. / Fixed-time artificial insemination (FTAI) together with post-cervical artificial insemination (PCAI), allows an expressive reduction in labor requirements and a wider use of higher indexing boars. The aim of this study was to evaluate the efficiency of eCG agonist of GnRH (buserelin) or just buserelin for induction and synchronization of ovulation in weaned sows and submitted to FTAI .A total of 495 weaned sows whose estrus detection was performed once daily (07:30 A.M), starting a day after weaning. The sows were allocated into three treatment groups: Control (n=165) – the first AI was performed at estrus onset (0 h) and repeated every 24 h thereafter during estrus; Treatment 2: eCG + GnRH (n=165) – sows received an intramuscular injection of 600 UI eCG after weaning, and an intramuscular injection of buserelin (10 μg) 86-89 h after eCG administration; Treatment 3: GnRH - sows received an intramuscular injection of buserelina (10 μg) 86-89 h after weaning. . In the three groups it was performed boar exposure in the following day to weaning once a day, and those sows that demonstrated oestrus were removed from FTAI protocols. Treated groups received a single AI, 118-120 h after weaning (30-33 h after buserelin). PCAI with homospermic doses (1.5 x 109 total of sperm cells/50 ml) were respectively performed in sows in all treatment group. There were no differences (P> 0,05) in number of sows that showed oestrus until the third day between treatments. The interval between weaning and ovulation was significantly higher (P< 0,05) in the control group (141,5 ± 1,58 h) comparatively the treatments eCG+GnRH (133,3 ± 1,60 h) and GnRH (135,9 ± 1,57 h). Sows of treatment eCG+GnRH ovulated earlier (P< 0,05) comparing to the GnRH group (44,5 ± 1,74 vs 48,2 ± 1,73 h). Higher (P<0,05) farrowing rate in control group comparatively to treatments eCG+GnRH e GnRH was observed, but there were no differences (P> 0,05) in total piglets born between treatments. Use of GnRH, with or without previous administration of eCG anticipates ovulation in sows weaned, in the sows treated with eCG + GnRH or GnRH, there is a greater percentage of females inseminated outside the ideal time, with respect to ovulation, it can harm the reproductive performance, with necessary adjustments at the time of application hormones or at the time of insemination for subsequent studies.

A técnica de inseminação artificial (IA) por laparoscopia em ovinos foi utilizada pela primeira vez em 1982, o que tornou viável a utilização econômica do sêmen congelado nesta espécie. Os experimentos foram realizados com o objetivo de determinar as taxas de prenhez de ovelhas inseminadas por laparoscopia, utilizando 50 x 106 espermatozóides descongelados e capacitados in vitro. No experimento 1, foi utilizado sêmen de um reprodutor e 67 ovelhas com estros sincronizados, divididas aleatoriamente entre os grupos: sêmen congelado (SC1) e sêmen congelado capacitado in vitro (SCC1). As ovelhas foram submetidas à IA, com 50x106 espermatozóides, 56 e 60 horas, respectivamente, após a retirada das esponjas impregnadas com progesterona. No grupo SCC1, a taxa de prenhez foi de 48,39% (15/31) significativamente superior a do grupo SC1 de 25% (9/36). No experimento 2, utilizou-se um reprodutor e 100 ovelhas com os estros sincronizados, distribuídas aleatoriamente entre três grupos: sêmen fresco (SF2), SC2 e SCC2. Nos grupos SF2 e SC2 as fêmeas foram inseminadas com 100x106 espermatozóides e 56 horas após a retirada da progesterona. No grupo das fêmeas inseminadas com espermatozóides capacitados in vitro, utilizou-se 50x106 espermatozóides e um intervalo de 60 horas após retirada da progesterona. As taxas de prenhez diagnosticadas nos diferentes grupos experimentais foram: SF2 60,9% (25/41), SC2 56,70% (17/30) e SCC2 44,90% (13/29), não existindo diferença estatística entre os grupos. Os experimentos realizados mostraram a viabilidade doemprego, na espécie ovina, da IA por laparoscopia utilizando 50x106 espermatozóides descongelados e capacitados in vitro. / The ovine artificial insemination (AI) by laparoscopy was described the first time in 1982, since this time frozen semen became a tool for use under field conditions. Today one research goal is to achieve high preganancies rates after AI using a reduced number of frozen/thawed spermatozoa per dosis. The experiments were carried out with the objective to determine the pregnancy rate of ewes inseminated by laparoscopy, using 50 x 106 thawed and in vitro capacited spermatozoa. In the experiment 1 was used semen of one fertily ram and 67 ewes with synchronized estrus. The females were randomly distributed among two experimental groups: inseminated with frozen semen (SC1) or frozen and in vitro capacitated semen (SCC1). The ewes were submitted to the AI with 50x106 spermatozoa, 56 (SC1) or 60 (SCC1) hours, respectively, after retreat of the intra vaginal device impregnated with progesterona. In the group SCC1 the pregnancy rate was 48,39% (15/31) significantly different from the 25% (9/36) observed in the group SC1. In the experiment 2 was used one fertily ram and 100 ewes with synchronized estrus, distributed randomly among three groups: inseminated with fresh semen (SF2), 100 x 106 spermatozoa, SC2, 100 x 106 frozen spermatozoa and SCC2, 50 x 106 frozen and in vitro capacited spermatozoa. The moment of the laparoscopic AI was the same as used in the experiment 1: 56 (SF2 and SC2) or 60 (SCC2) hours, respectively, after retreat of the intra vaginal device impregnated with progesterona. The observed pregnancy rates were similar among the experimental groups: SF2 60,9% (25/41), SC2 56,70% (17/30) and SCC2 44,90% (13/29). Our experiments showed the ability of frozen/thawed and in vitro capacitated ovine spermatozoa to in vivo fertilize and promote the development of pregancies. In conclusion, itis possible to use 50x106 frozen/thawed and in vitro capacited spermatozoa for ovine laparoscopic AI.

A inseminação artificial em tempo fixo (IATF), juntamente com a inseminação artificial pós-cervical (IAPC), permite uma redução expressiva da mão de obra e uma melhor utilização dos machos geneticamente superiores. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência do eCG associado agonista de GnRH (buserelina) ou apenas buserelina para indução e sincronização da ovulação em porcas desmamadas e submetidos a apenas uma IATF. Um total de 495 femeas suínas desmamadas foram utilizadas, cuja detecção de estro foi realizada uma vez ao dia (07:30). As fêmeas foram divididas em três tratamentos: Controle (n = 165) - a primeira IA foi realizada no início do estro (0 h) e repetida a cada 24 h, posteriormente, durante o estro; Tratamento 2: eCG + GnRH (n = 165) – femeas receberam uma injeção intramuscular de 600 UI de eCG após o desmame, e uma injeção intramuscular de buserelina (10 μg) 86-89 h após a administração de eCG; Tratamento 3: GnRH - fêmeas receberam uma injeção intramuscular de buserelina (10 μg) 86-89 h após o desmame. Nos três grupos era realizada a exposição ao macho no dia seguinte ao desmame uma vez ao dia, e aquelas fêmeas que demostrassem estro eram retiradas dos protocolos de IATF. Os grupos tratados receberam uma única IA, 118-120 h após o desmame (30-33 h após a buserelina). A IAPC contou com doses homospérmicas (1,5 x 109 células de espermáticas/50 ml) que foram utilizadas nas femeas em todos os três tratamentos. Não houve diferenças entre os tratamentos quanto ao número de femeas em estro até o terceiro dia (P>0,05). O intervalo entre o desmame e a ovulação foi significativamente maior (P< 0,05) no grupo controle (141,5 ± 1,58 h) comparativamente aos tratamentos eCG+GnRH (133,3 ± 1,60 h) e GnRH (135,9 ± 1,57 h). As femeas do tratamento eCG+GnRH ovularam em média antes (P<0,05) em relação ao grupo GnRH (44,5 ± 1,74 vs 48,2 ± 1,73 h). A taxa de parto foi superior (P<0,05) no grupo de controle, comparativamente aos tratamentos eCG + GnRH e GnRH, mas não houve diferença (P>0,05) em leitões nascidos totais entre os tratamentos. O uso do GnRH, com ou sem a administração prévia de eCG, antecipa a ovulação nas fêmeas suínas desmamadas. Nas fêmeas tratadas com eCG+GnRH ou GnRH, há em maior percentual de fêmeas inseminadas fora do momento ideal, em relação à ovulação, o que pode prejudicar o desempenho reprodutivo, sendo necessários ajustes no momento de aplicação dos hormônios ou no momento da inseminação para estudos subsequentes. / Fixed-time artificial insemination (FTAI) together with post-cervical artificial insemination (PCAI), allows an expressive reduction in labor requirements and a wider use of higher indexing boars. The aim of this study was to evaluate the efficiency of eCG agonist of GnRH (buserelin) or just buserelin for induction and synchronization of ovulation in weaned sows and submitted to FTAI .A total of 495 weaned sows whose estrus detection was performed once daily (07:30 A.M), starting a day after weaning. The sows were allocated into three treatment groups: Control (n=165) – the first AI was performed at estrus onset (0 h) and repeated every 24 h thereafter during estrus; Treatment 2: eCG + GnRH (n=165) – sows received an intramuscular injection of 600 UI eCG after weaning, and an intramuscular injection of buserelin (10 μg) 86-89 h after eCG administration; Treatment 3: GnRH - sows received an intramuscular injection of buserelina (10 μg) 86-89 h after weaning. . In the three groups it was performed boar exposure in the following day to weaning once a day, and those sows that demonstrated oestrus were removed from FTAI protocols. Treated groups received a single AI, 118-120 h after weaning (30-33 h after buserelin). PCAI with homospermic doses (1.5 x 109 total of sperm cells/50 ml) were respectively performed in sows in all treatment group. There were no differences (P> 0,05) in number of sows that showed oestrus until the third day between treatments. The interval between weaning and ovulation was significantly higher (P< 0,05) in the control group (141,5 ± 1,58 h) comparatively the treatments eCG+GnRH (133,3 ± 1,60 h) and GnRH (135,9 ± 1,57 h). Sows of treatment eCG+GnRH ovulated earlier (P< 0,05) comparing to the GnRH group (44,5 ± 1,74 vs 48,2 ± 1,73 h). Higher (P<0,05) farrowing rate in control group comparatively to treatments eCG+GnRH e GnRH was observed, but there were no differences (P> 0,05) in total piglets born between treatments. Use of GnRH, with or without previous administration of eCG anticipates ovulation in sows weaned, in the sows treated with eCG + GnRH or GnRH, there is a greater percentage of females inseminated outside the ideal time, with respect to ovulation, it can harm the reproductive performance, with necessary adjustments at the time of application hormones or at the time of insemination for subsequent studies.

A inseminação artificial em caninos representa uma atividade importante no manejo reprodutivo desta espécie. O uso de sêmen resfriado, preservado por um determinado espaço de tempo, com a conservação da viabilidade espermática torna-se indispensável. Para a preservação a 4ºC torna-se necessário o conhecimento de curvas de resfriamento mais adequadas para um determinado diluente a ser utilizado. No presente experimento foram utilizados 11 cães adultos, dos quais foram colhidos 5 ejaculados de cada e que após exame imediato avaliando aspecto, volume, motilidade, vigor, concentração, HOST (teste hiposmótico), IME (integridade de membrana) e formas patológicas, foram submetidos a diluição com tris-gema. Após a diluição os ejaculados foram novamente avaliados quanto à motilidade, vigor, HOST e IME. Foram iniciados dois procedimentos de refrigeração dos ejaculados fracionados, um a uma velocidade de -0,1ºC/minuto e outro a -0,3ºC/minuto. Vinte quatro e quarenta e oito horas após foram avaliados motilidade e vigor nas duas amostras. Os exames de HOST e IME foram realizados após quarenta e oito horas de resfriamento. Diferenças quanto à qualidade do sêmen dos diferentes cães foram encontradas. Quanto as diferentes velocidade de resfriamento não foram observadas diferenças. Foram constatadas diferenças na qualidade do sêmen recém diluído e após o resfriamento, porém a qualidade do sêmen se manteve inalterada entre vinte e quatro e quarenta e oito horas após o resfriamento. / The artificial insemination in canines represents an important activity in reproductive management of this species. The use of chilled semen, preserved for a determined amount of time, with conserved spermatic viability has become a necessity. For the preservation at 4o C it has become necessary to know the most adequate chilling curve for the chosen extender. In this experiment, 11 adult dogs were used, who each contributed 5 ejaculates which were immediately examined for volume, motility, vigor, concentration, HOST (hyposmotic test), IME (membrane integrity) and pathological forms, and then diluted with tris-egg yolk. The ejaculates were mixed with extender then evaluated for motility, vigor, HOST and IME. Two cooling procedures were started on the fractionate ejaculates, one at a velocity of -0.1oC per minute and the other at -0.3oC per minute. Twenty-four and fortyeight hours later the two samples were evaluated for motility and vigor. The HOST and IME exams were performed forty-eight hours after chilling. Differences in semen quality were found between the different dogs. There were no differences with the two cooling rates. Differences were found in semen quality right after dilution and after the colling process; however semen quality shows no difference between twenty-four and forty-eight hours after chilling.

O uso de protocolos de diluição bitérmica está aumentando em centros de inseminação artificial e é necessário garantir que as doses de inseminação tenham a mesma qualidade quando comparado com protocolos de diluição isotérmica. Quatro ejaculados de cada 19 reprodutores PIC® foram coletados e distribuídos em split sample em três tratamentos: diluição bitérmica em duas etapas (T1), diluição isotérmica em duas etapas (T2) e diluição isotérmica em uma etapa (T3). A curva de temperatura para os três tratamentos foi feita utilizando um data logger com sensor de temperatura. As doses inseminantes foram preparadas utilizando o diluente BTS e armazenadas a 16ºC e usadas para avaliação dos parâmetros espermáticos através do Sistema CASA e avaliação de morfologia espermática, durante 120 horas. A temperatura das amostras de sêmen submetidas à diluição bitérmica em duas etapas alcançou 24,1ºC durante 120 minutos , enquanto que as amostras submetidas à diluição isotérmica em uma ou duas etapas alcançou 26,8ºC e 27,0ºC, respectivamente. A motilidade total, a progressiva e BCF foram influenciadas (P<0,05) pelo tempo de diluição, mas não pelo protocolo de diluição. A motilidade total e progressiva diminuiu com o tempo de armazenamento (91.0 ± 0.91 para 81.5 ± 1.08 % e 74.0 ± 2.48 para 60.4 ± 2.59% de 24h para 120h, para MOT e PROG, respectivamente) enquanto BCF diferiu entre 24 e 120h (28.6 ± 0.76 e 27.3 ± 0.79 Hz). As seguintes características de motilidade não foram afetadas pelo protocolo de diluição e pelo tempo de armazenamento: DAP, DCL, DSL, VAP, VCL, VSL, STR, LIN, WOB e ALH. Às 72 h de armazenamento, a morfologia espermática não diferiu entre os tratamentos (P>0.05), apresentando uma média geral de 9.2 ± 0.36 defeitos totais. Concluindo, a diluição bitérmica torna o processo de produção de doses inseminantes mais rápido, pois demoraram menos tempo para alcançar a temperatura próxima de armazenamento, sem comprometer a qualidade das doses inseminantes produzidas. / The use of bithermic dilution protocols is increasing in artificial insemination centers, being necessary to guarantee that the quality of insemination doses remain the same when compared to isothermic dilution protocols. Four ejaculates from each one of 19 crossbreed PIC® boars were collected and assigned, in a split sample design, in to three treatments: two step bithermic dilution (T1), two step isothermic dilution (T2) and one step isothermic dilution (T3). Temperature curve for the three treatments was recorded using a temperature sensor data logger. Semen doses prepared with BTS extender were stored at 16°C and were used to evaluate sperm parameters through CASA system and sperm morphology, during 120 h. The temperature in semen samples submitted to a two-step bithermic dilution reached 24.1ºC during 120 min, whereas one or two-step isothermic dilution samples reached 26.8ºC and 27.0ºC, respectively. Total motility, progressive motility and BCF were influenced (P<0.05) by the storage time but not by the dilution procedure. Total and progressive motility reduced throughout the storage time (91.0 ± 0.91 to 81.5 ± 1.08 % and 74.0 ± 2.48 to 60.4 ± 2.59% from 24h to 120h, for MOT and PROG respectively) whereas BCF differed between 24 and 120h (28.6 ± 0.76 and 27.3 ± 0.79 Hz). The following motility traits were neither affected by the dilution procedure nor by the time of storage: DAP, DCL, DSL, VAP, VCL, VSL, STR, LIN, WOB, and ALH. At 72 h of storage, sperm morphology was not different among treatments (P>0.05), showing an overall mean of 9.2 ± 0.36 total defects. In conclusion, the bithermic dilution makes the process of artificial insemination doses production faster by taking less time to reach a temperature close to that of storage, without impairing semen quality.

As espécies de peixes de água doce neotropicais constituem um dos agrupamentos mais diversos do planeta, tanto em termos de riqueza de espécies como em relação à diversidade de formas, comportamentos e modos de vida. A reprodução é um dos aspectos mais interessantes e importantes desta plasticidade, podendo-se encontrar praticamente todos os mecanismos de reprodução sexuada entre as espécies de peixes. Apesar da importância do conhecimento sobre a reprodução dos peixes, relativamente poucos estudos tratam deste tema, sobretudo se considerado o número de espécies descritas para o Neotrópico. Há poucos anos, a maioria dos trabalhos sobre reprodução de peixes contemplavam as espécies de maior porte, de interesse comercial. Nos últimos anos, vem aumentando o volume de informações disponíveis acerca das características reprodutivas de espécies de menor porte, sobretudo aquelas da família Characidae, a mais numerosa entre os Characiformes neotropicais. Embora represente um importante avanço, o conhecimento da biologia reprodutiva das espécies de água doce de grande ou pequeno porte é ainda incipiente. Além disso, muitos trabalhos deixam de abordar vários aspectos da reprodução das espécies estudadas, dificultando a análise comparada do conjunto de dados disponíveis, bem como o estabelecimento de padrões reprodutivos para a ictiofauna do Neotrópico. Este trabalho visa contribuir para o conhecimento da biologia reprodutiva de espécies de peixes de água doce da família Characidae, oferecendo novas informações sobre diversos aspectos da reprodução de três espécies que apresentam uma estratégia reprodutiva peculiar, a inseminação, pertencentes a três linhagens diferentes de caracídeos.O trabalho objetiva ainda analizar estes dados, juntamente com os disponíveis na literatura, dentro do contexto da filogenia e da biologia comparada, procurando compreender melhor os padrões e processos envolvidos nos aspectos reprodutivos destas espécies. O primeiro trabalho apresentado (“Evolução, comportamento, história de vida e filogenia: um estudo de caso em peixes caracídeos com inseminação”) discute a influência das relações genealógicas e filéticas na reprodução e no comportamento, e o uso de caracteres reprodutivos e comportamentais como ferramentas em análises filogenéticas. No segundo trabalho (“Biologia reprodutiva de Diapoma terofali (Eigenmann, 1915) (Teleostei: Glandulocaudinae) do rio Ibicui da Faxina, sul do Brasil”), são apresentados diversos dados sobre reprodução e desenvolvimento de caracteres sexuais secundários de Diapoma terofali, da subfamília Glandulocaudinae. Da mesma forma, o terceiro trabalho (“Biologia reprodutiva de Macropsobrycon uruguayanae Eigenmann, 1915 (Characidae: Cheirodontinae: Compsurini) do rio Ibicui, Rio Grande do Sul, Brasil”) trata sobre os aspectos da reprodução e desenvolvimento de caracteres sexuais secundários em Macropsobrycon uruguayanae, um caracídeo inseminado pertencente subfamília Cheirodontinae. No quarto trabalho (“Ocorrência de inseminação e descrição da morfologia do testículo e ultraestrutura do espermatozóide de espécies de Hollandichthys (Eigenmann, 1909) (Ostariophysi: Characidae)”), é descrita a ocorrência de inseminação em espécies do gênero Hollandichthys, pertencente a uma terceira linhagem de Characidae com inseminação. Também são descritas as características morfológicas e da ultraestrutura dos espermatozóides destas espécies. Por fim, o quinto trabalho que compõe esta tese (“Características da reprodução de espécies de Characidae (Teleostei: Characiformes) e suas relações com o tamanho corporal e filogenia”), reúne as informações existentes na literatura sobre reprodução de espécies de Characidae e formula hipóteses sobre a existência de alguns padrões reprodutivos em Characidae e sobre suas possíveis explicações evolutivas. São também discutidas as relações entre estes supostos padrões, o tamanho corporal e as relações filogenéticas das espécies da família.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho reprodutivo de fêmeas suínas inseminadas com a técnica intra-uterina (IAU) ou tradicional (IAT), considerando o refluxo de sêmen após a IA, as taxas de retorno ao estro e de parto, além do número de leitões nascidos. As fêmeas do grupo IAU foram inseminadas com doses de 1,5 bilhão de espermatozóides em 60 ml de volume e as do grupo IAT com 3 bilhões em 90 ml. A passagem do cateter de IAU através da cérvix foi possível em 97,4% das fêmeas. Houve presença de sangue no cateter, após a realização da IAU, em 9,5% das fêmeas em pelo menos uma das inseminações, e estas apresentaram retorno ao estro superior ao das fêmeas sem sangramento (P<0,05). Foi coletado o refluxo no momento e até duas horas após a inseminação. Apesar do percentual de volume refluído ter sido maior (P<0,05) na IAU (75,4%) do que na IAT (62,7%), o percentual de espermatozóides presentes no refluxo foi semelhante (22,7 e 23,0%, respectivamente). Foi realizado diagnóstico de retorno ao estro a partir do 18º dia e diagnóstico de gestação por ultra-sonografia transcutânea entre o 21º e 23º dias após a inseminação. Não houve diferença (P>0,05) nas taxas de retorno ao estro (3,6% e 4,3%), de prenhez aos 21-23 dias (99,5% e 97,2%), de parto ajustada (94,9% e 94,4%) e no tamanho da leitegada (11,6 e 11,8 leitões) entre IAU e IAT, respectivamente. Independentemente do número de espermatozóides da dose inseminante, a perda por refluxo, superior ou inferior a 20% do total infundido, não influenciou a taxa de parto e o número de leitões nascidos. O desempenho reprodutivo de fêmeas suínas de ordem de parto dois a quatro, inseminadas pela técnica intra-uterina, com doses de 1,5 bilhão de espermatozóides, foi semelhante àquele observado com a inseminação tradicional cervical com doses de 3 bilhões de espermatozóides.

Na espécie equina, ao contrário do obtido com ruminantes, as técnicas de criopreservação de sêmen progridem lentamente, mas apesar das barreiras técnicas o emprego da inseminação artificial com sêmen congelado vem crescendo. Este experimento foi dividido em três etapas: na primeira comparou-se a utilização de diferentes diluentes e técnicas de congelação; determinação da eficiência do criotubo para envase do sêmen para a criopreservação; e na terceira determinou-se as taxas de prenhez das éguas artificialmente inseminadas com sêmen congelado envasado em criotubo. Seis garanhões foram submetidos à coleta do sêmen e doze éguas foram inseminadas artificialmente no primeiro estro da estação reprodutiva. As amostras foram diluídas em INRA82 ou Nagase, contendo 5% de glicerol, com concentração de 200 x 106 espermatozóides/ml. Parte do sêmen diluído foi envasado em palhetas (0,5ml), das quais uma parte foi imediatamente congelada. As palhetas restantes foram resfriadas previamente da temperatura ambiente (24ºC) até 5ºC antes do congelamento. As amostras foram descongeladas em banho-maria a 37ºC por 30seg. O mesmo protocolo de congelamento com resfriamento prévio foi realizado com as amostras envasadas em criotubos, sendo estas amostras descongeladas a 50ºC por 100seg em banho-maria. A eficiência in vivo do sêmen criopreservado, foi determinada através da inseminação artificial. O diagnóstico de prenhez foi realizado 20 dias após a inseminação artificial através de exame ultrassonográfico. Após a análise dos dados verificou-se que não houve diferença significativa entre os diluentes testados na motilidade progressiva e vigor dos espermatozóides. As médias da motilidade espermática após o aquecimento das amostras foram de: 43,32% e 26,66%, para o sêmen diluído com INRA82 submetido ao resfriamento ou não antes do congelamento, respectivamente, e para o sêmen diluído com Nagase revelou motilidade espermática de 41,08% e 24,44%, respectivamente. De acordo com esses resultados, os grupos experimentais submetidos ao resfriamento prévio apresentaram taxas de motilidade espermática superiores aos grupos que foram congelados diretamente. Não se verificou diferenças quanto ao vigor, motilidade e defeitos espermáticos entre os diluentes testados e os tipos de envase. As éguas inseminadas com criotubo apresentaram taxa de prenhez de 50% (3/6), já com as éguas do grupo controle (palheta) observou-se 16,66% (1/6), provando a viabilidade do congelamento do sêmen envasado em criotubo. / In the horse industry, unlike obtained with catle, the development of sperm cryopreservation techniques are very slow but despite the technical barriers the artificial insemination with frozen semen is growing. This experiment was divided into three steps. The first one compared the use of different diluents and freezing techniques. The other two stages were the use of cryogenic tubes for filling the semen and the determination of mare pregnancy rates that were artificially inseminated with frozen semen packaged in cryogenic tubes. Six stallions were submitted to semen collection and twelve mares were artificially inseminated at first estrus of the breeding season. The samples were diluted in INRA82 or Nagase, containing 5% glycerol, with a concentration of 200 x 106 sperm / ml. A fraction of the diluted semen was stored in straws (0.5 ml), some of those straws were immediately frozen. The remaining straws were cooled from room temperature (24ºC) to 5º C before freezing. The samples were thawed in a water bath at 37° C during 30sec. The same protocol with cooling prior to freezing was performed with samples filled into cryogenic tubes, and these samples were thawed in a water bath at 50° C during 100seg. The in vivo efficiency of cryopreserved semen was determined through artificial insemination. The diagnosis of pregnancy was performed after 20 days by ultrasound examination. After analyzing the data it was found that there was no significant difference in sperm motility and vigor among the tested diluents. Motility was INRA82: 43.32% / 26.66% and Nagase: 41.08% / 24.44%, when the semen was previously cooled or frozen directly, respectively. According to these results, the experimental groups subjected to cooling prior freezing showed better motility rates than the groups that were frozen directly. There were no differences regarding the vigor, motility and sperm defects among the diluents and the semen containers. The mares inseminated with cryotubes showed 50% (3/6) pregnancy rate, and 16.66% (1/6) pregnancy rate was observed in the group of mares inseminated with straws.