Submitted by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-05-21T19:09:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Leticia_Cunha.pdf: 1240005 bytes, checksum: 5fc9bc631519a87ecdaef8c7aac12b8e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-05-21T20:15:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Leticia_Cunha.pdf: 1240005 bytes, checksum: 5fc9bc631519a87ecdaef8c7aac12b8e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-05-21T20:15:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Leticia_Cunha.pdf: 1240005 bytes, checksum: 5fc9bc631519a87ecdaef8c7aac12b8e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-21T20:15:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Leticia_Cunha.pdf: 1240005 bytes, checksum: 5fc9bc631519a87ecdaef8c7aac12b8e (MD5) Previous issue date: 2016-12-23 / Sem bolsa / Atualmente observa-se em diversos estudos o potencial dos probióticos de modular o sistema imune do hospedeiro e reduzir o estresse oxidativo. O antineoplásico ciclofosfamida (CF) tem como efeitos colaterais, o comprometimento da função de células do sistema imune, a indução do aumento de marcadores de estresse oxidativo e a ocorrência de danos renais e hepáticos. A levedura Pichia pastoris é atualmente utilizada como sistema de expressão de proteínas recombinantes para a produção dos mais diferentes tipos de proteínas heterólogas. No entanto, alguns estudos vêm demonstrado que essa levedura possui propriedades probióticas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a segurança da utilização da levedura P. pastoris (P.p.) em camundongos imunossuprimidos, bem como seu efeito sobre parâmetros imunológicos, histopatológicos e de estresse oxidativo em um modelo de imunossupressão induzida por ciclofosfamida (CF). Foram utilizados 20 camundongos Swiss machos, divididos em quatro grupos: controle, controle CF (tratados com 250 mg.kg-1 de CF), controle P. p (suplementados com 109 UFC.mL-1) e CF + P.p. Foram realizados leucograma, análise histopatológica, pesagem dos animais e ensaio de TBARS. Foi observado que a CF reduziu os níveis de leucócitos, neutrófilos e linfócitos e P. pastoris foi capaz de aumentar o número de leucócitos e neutrófilos dos animais imunossuprimidos. Além disso, P. pastoris mostrou-se segura também em animais imunossuprimidos, não causando mortes. As análises histopatológicas demonstraram que a CF causou lesões renais e hepáticas e P. pastoris foi capaz de reduzir as lesões hepáticas causadas pelo quimioterápico. Quando avaliado o estresse oxidativo, foi observado que P. pastoris reduziu os níveis de espécies reativas ao TBA no rim e cérebro dos animais tratados com CF e no fígado e cérebro de animais saudáveis. Dessa forma, a levedura P. pastoris demonstra um efeito protetor aos danos causados pela CF. / Actually the potential of probiotics to modulate the host immune system and to reduce oxidative stress is being observed in several studies. Antineoplastic cyclophosphamide (CF) has the effect of compromising the immune system's cell function, inducing increased markers of oxidative stress, and causing renal and hepatic damage. Pichia pastoris yeast is currently used as a recombinant protein expression system for the production of the most different types of heterologous proteins. However, some studies have shown that this yeast possesses probiotic properties. The present study aimed to evaluate the safety of the use of the P. pastoris yeast, as well as its effect on immunological, histopathological and oxidative stress parameters in an immunosuppressive model. Twenty male Swiss mice were divided into four groups: control, CF control (250 mg.kg-1), P. p control(109 CFU.mL-1) and CF + P. p. Leukogram, histopathological analysis, animal weighing and TBARS assay were performed. It was observed that CF reduced the levels of leukocytes, neutrophils and lymphocytes, and P. pastoris was able to increase the number of leukocytes and neutrophils of immunosuppressed animals. In addition, P. pastoris was also safe in immunosuppressed animals, not causing deaths. Histopathological analyzes demonstrated that CF caused renal and hepatics lesions and P. pastoris was able to reduce the hepatics lesions caused by chemotherapy. When oxidative stress was evaluated, it was observed that P. pastoris reduced the levels of TBA reactive species in the kidney and brain of animals treated with CF, and in the liver and brain of healthy animals. Therefore, P. pastoris yeast demonstrates a protective effect to CF damage.

Este estudo teve como objetivo comparar o efeito agudo de três métodos de recuperação pós-exercício (recuperação ativa, passiva e crioterapia) sobre o desempenho físico, marcadores fisiológicos, psicológicos, bioquímicos e imunológicos, bem como os sentidos atribuídos por sujeitos treinados. Doze corredores treinados em provas de meio-fundo e fundo, voluntários, do gênero masculino (idade: 20,6 ± 1,7 anos; Massa corporal: 64,1 ± 5,6 Kg; Estatura: 1,74 ± 0,05 m.; Gordura corporal: 6,8 ± 2,7 %; VO2máx: 57,0 ± 5,9 mL.Kg-1.min-1; vVO2máx: 15,7 ± 1,7 Km/h; Tlim: 603 ± 243 s.) realizaram três corridas de 30 minutos, em esteira rolante, a 80% da vVO2max, estimado através de teste incremental. Em seguida foram aplicados os métodos de recuperação ativa (corrida a 40% da vVO2max), passiva (sentado em uma cadeira) e crioterapia (imersão em água com gelo quebrado a 5° [±1º] até a altura da crista ilíaca) por 20 minutos, em ordem contrabalanceada. Logo após, os sujeitos realizaram um teste de corrida (Tlim) a 100% da vVO2max. Uma semana antes da realização dos testes, foi realizado um procedimento de familiarização com os métodos de recuperação a serem aplicados. As taxas dos marcadores tempo limite de corrida, distúrbio de humor total, razão fadiga/vigor, percepção subjetiva de esforço, frequência cardíaca, lactato, IL-6, TNF-, leucócitos, neutrófilos, monócitos e linfócitos foram mensuradas no momento anterior a corrida (M1), após a corrida na esteira rolante (M2), imediatamente após a aplicação dos métodos recuperativos (M3) e após a aplicação do teste de corrida tempo limite (M4), exceto a PSE que foi mensurado no M1 e M4, e o Tlim e a entrevista (para análise de representações sociais) que foram realizadas no M4. Foram retirados 18ml de sangue venoso, em cada momento de coleta, para realização dos procedimentos de análise sanguínea. Após os resultados concluímos que o uso dos métodos de recuperação ativa, passiva ou crioterapia durante 20 minutos após uma corrida de 30 minutos a 80%vVO2máx não afetou o desempenho subsequente de corrida a 100%vVO2máx até a exaustão. A crioterapia promove maior queda na frequência cardíaca e menor remoção de lactato após exercício a 80%vVO2máx comparada aos métodos de recuperação ativa e passiva, promovendo maior produção de lactato e menor resposta cronotrópica durante corrida subsequente a 100%vVO2máx até a exaustão e que o uso da crioterapia não interfere na percepção de esforço e nas respostas psicológicas após o esforço, mas induz uma maior perturbação sobre os marcadores imunológicos, especificamente, sobre leucócitos e linfócitos. Na perspectiva qualitativa, verificou-se uma variedade discursiva sobre a escolha do melhor método de recuperação. Os sentidos que mais se destacaram foram: uma maior leveza do corpo, acalmando a musculatura e fica mais... assim, relaxado na crioterapia; ação natural do corpo e quando se está cansado paramos para descansar na recuperação passiva e; continuidade de movimentos, operabilidade, manutenção do ritmo e da normalidade na recuperação ativa / This study aimed at comparing the acute effect of three post-exercise recovering methods (active, passive and cryotherapy recovering) on the physical performance, physiological, psychological, biochemical, immunological, performance and sense markers attributed by trained subjects. Twelve male volunteer runners (aged 20.6 + 1.7 years old; Body mass: 64.1 + 5.6 kg; Height: 1.74 + 0.05 m; Body fat 6.8 + 2.7%; VO2máx: 57,0 ± 5,9 mL.Kg-1.min-1; vVO2máx: 15,7 ± 1,7 Km/h; Tlim: 603 ± 243 s.) trained in middle-distance and distance races have accomplished three 30-minute runnings on a treadmill at 80% of the vVO2, estimated through an incremental test. After that, the active (running at 40 % of the vVO2max), passive (sitting on a chair) and cryotherapy (immersion in water with broken ice at 5° [+ 1°] until the height of the iliac crest) recovering methods were applied for 20 minutes in counterbalanced order. Then, the subjects carried out a running test (Tlim) at 100% of the vVO2max. One week before the accomplishment of the tests, a procedure in order to familiarize them with the recovering methods to be applied was carried out. The running limit time markers, total humor disturb, fatigue/vigor ratio, subjective perception of effort, heart rate, lactate, IL-6, tnf-, leucocytes, neutrophils and lymphocytes rates were measured at the moment before the running (M1), after running on the treadmill (M2), immediately after applying the recovering methods (M3) and after doing the limit time running test (M4), except the PSE, which was measured in M1 and M4, and the Tlim and the interview (to analyze the social representations), which were carried out in M4. 18 ml of venous blood were taken, in each moment of the blood collecting so as to carry out the blood analysis procedures. After the results, we reached the conclusion that the use of active, passive and cryotherapy recovering methods within 20 minutes after a 30-minute running at 80%vVO2máx hasnt affect the performance of a following running at 100%vVO2máx until exhaustion. The cryotherapy promotes a higher fall in the heart rate and a smaller lactate removal after the exercise at 80%vVO2máx, compared to the active and passive recovering methods, thus promoting higher production of lactate and a smaller chronotropic response during the follow-up running at 100%vVO2máx until exhaustion; and that the use of cryotherapy does not interfere in the effort perception or in the psychological responses after effort, but it leads to a higher disorder on the immunologic markers, specifically on the leucocytes and lymphocytes. Within the qualitative perspective, it was verified a discursive variety about the choice of the best recovering method. The senses which were highlighted most were, a larger lightness of the body, calming the muscles down and it gets sort of, relaxed in cryotherapy; natural action of the body and when youre tired we stop to rest in the passive recovering; and, continuity of movement, operability, keeping the rhythm and the normality in the active recovering

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Julia de Miranda Moraes.pdf: 1781008 bytes, checksum: 240b1d82cc44d5f20591020197abd396 (MD5) Previous issue date: 2008-03-03 / The Curraleiro cattle are extremely docile and resistant to infectious diseases and parasites. They may be used in exploration of low-quality pastures, without great investments, when other breeds could show a low productivity or even survival difficulties. This genetic potential runs risk to extinction due to its replace by more productive breeds. The Curraleiro cattle resistence to illness is popularly known and many works has been published about it, although its immunologic system physiology is completely unknown. Such features are plausible reasons for the preservation of this potentially genetic resource. So, the mean aim of this study was to establish an immunological profile by marking and quantification of T and B lymphocytes in Curraleiro breed with immunocytochemistry. Thus, it was used 116 bovines, male and female, with different ages from two farms situated at Goiás State, Brazil. The animals were allotted in groups according to age, sex and origin. Blood samples were collected and processed in accordance with immunocytochemistry standard technique using lymphoid markers species-specific, anti-CD3 (MM1A BoCD3) and anti-LB (LCTB16A clone B-B14), for T and B lymphocytes counting, respectively. All procedures were accomplished at Veterinary School, Federal University of Goiás, Brazil. The data were submitted to descriptive statistics and then to Kruskall Wallis and Mann-Whitney tests. The results showed decreased levels of leukocytes, lymphocytes, T lymphocytes and B lymphocytes along the age advance. Absolute values of leukocytes, lymphocytes and T lymphocytes were higher in males than females. None of the evaluated parameters were affected by differences of the management carried out at two farms. / O gado Curraleiro é extremamente dócil, resistente às doenças e parasitas, que pode ser utilizado, sem grandes investimentos na exploração de pastagens naturais de baixa qualidade onde outras raças teriam baixa produtividade ou até mesmo dificuldades de sobrevivência. Todo esse potencial genético encontra-se em sério risco de extinção, uma vez que esses animais vêm sendo substituídos por outros com maior produtividade. A resistência do Curraleiro às enfermidades é popularmente conhecida e divulgada, porém desconhece-se por completo a fisiologia do sistema imunológico desses animais. Estas características são notáveis justificativas para conservar este recurso genético potencialmente importante. Assim, este estudo teve por objetivo traçar um perfil imunológico, através de marcação imunocitoquímica e quantificação de linfócitos T e B em bovinos da raça Curraleiro. Para tal, foram utilizados 116 animais entre machos e fêmeas, de diferentes faixas etárias, provenientes de duas propriedades de criação de gado Curraleiro do Estado de Goiás, sendo alocados em grupos conforme a faixa etária, sexo e origem. As amostras de sangue foram colhidas e processadas de acordo com o padrão da técnica de imunocitoquímica e posteriormente utilizados os marcadores linfóides espécieespecíficos, anti-CD3 (MM1A BoCD3) e anti-LB (LCTB16A clone B-B14), para a quantificação de linfócitos T e linfócitos B, respectivamente. Todo procedimento foi realizado na Escola de Veterinária da UFG. Inicialmente os dados foram submetidos à estatística descritiva e posteriormente ao teste de Kruskall Wallis e Mann-Whitney. Com o avançar da idade, diminuíram-se os níveis de leucócitos, linfócitos, linfócitos T e linfócitos B. Os valores absolutos de leucócitos, linfócitos e linfócitos T foram maiores nos machos em relação às fêmeas. Nenhum dos parâmetros avaliados sofreu influência em relação à diferença de qualidade de manejo nas duas propriedades.