O guabijuzeiro é uma árvore perenifólia de 15 a 25 metros de altura, produtora de frutos comestíveis. Ocorre no Brasil desde São Paulo até o Rio Grande do Sul. A propagação do guabijuzeiro é realizada por sementes e são escassas as informações sobre a propagação vegetativa desta espécie. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade dos frutos e estudar métodos de propagação. Frutos maduros, coletados em três locais: Porto Alegre (2) e Maquiné (1) foram avaliados quanto ao teor de sólidos solúveis totais (SST), acidez total titulável (ATT), teor de vitamina C, pH e o diâmetro dos frutos. A propagação vegetativa foi estudada através das técnicas de estaquia (tratamentos: AIB a 0, 2, 4, 6 g.L-1 e vitamina C a 3 g.L-1), enxertia (tratamentos: idades e diâmetros de portas-enxertos) e micropropagação (tratamentos: desinfestação de sementes com hipoclorito de sódio a 0, 2, 4, 6 e 8% por vinte minutos; testes de multiplicação em meio WPM com BAP, BAP+ANA, BAP+GA3+ANA ou sem fitorregulador e teste de enraizamento em meio WPM com diferentes concentrações de ANA e AIB: 0,2; 0,4 e 0,6 mg.L-1). Os frutos das três localidades apresentaram resultados distintos em alguns parâmetros analisados, o SST da polpa variou de 8,9 a 23,6 %, da casca ficou entre 4,6 a 9,3 %, a ATT da polpa variou de 0,07a 0,19, e da casca de 0,14 a 0,27. Já o SST/ATT da polpa variou de 109 a 127 e da casca 33 a 56, o pH da polpa e da casca ficaram em torno de 4,7. Apenas os frutos de uma localidade apresentaram valores de vitamina C (13,67 mg/100g de polpa). Os diâmetros variaram de 15,71 a 19,38 mm. A propagação vegetativa pelos métodos utilizados é viável necessitado ampliar os estudos. A estaquia foi viável quando utilizadas estacas apicais com quatro folhas cultivadas em fevereiro, sem a utilização de AIB, em condição de nebulização intermitente. A enxertia de garfagem tipo fenda cheia em enxerto e porta-enxerto de guabijuzeiro com textura do caule lenhosa apresentaram maior eficiência. Na micropropagação o hipoclorito de sódio na concentração de 4% por vinte minutos é eficiente para desinfestação das sementes, na fase de multiplicação e enraizamento o BAP e ANA respectivamente, se mostraram mais eficientes. / The guabijuzeiro is a tree that comes from a dense, thick and compact forest; that is always green and measures from 15 to 25 meters of height, which produces eatable fruits. Its production takes place in Brazil, coming from the states of São Paulo up to Rio Grande do Sul. The propagation of the guabijuzeiro happens through seeds, and the information of these vegetative propagation are uncommon. This kind of vegetative fruit is rare. The purpose of this essay was to evaluate the quality of its fruit and study the methods of vegetative propagation . Mature fruit, collected from three different places: Porto Alegre (2) and Maquiné (1); they were evaluated as to the quantity of the total dissoluable solids (TDS), entitled total acidity (ETA), quantity of vitamin C, pH and the diameters of the fruit. The vegetative propagation was studied through the techniques of pile driving, which consists on the plantation of small stakes of the plant stalk (treatments: concentrations of BAP 0, 2, 4, 6 g.L-1 and vitamin C 3 g.L-1), grafting (treatments: disinfection of the peeds with chlorine bleaching lye on the following concentrations (0, 2, 4, 6 and 8% during 20 minutes, tests of environmental multiplication WPM with BAP, BAP+NAA, BAP+GA3+NAA or without aim regulator, rooting test in WPM environmental with different concentrations 0,2; 0,4; e 0,6 mg. L-1 ). The fruits from the three settlements presented distinct results in some analysed parameters, the TDS of the pulp had a variation of 8,9 to 23,6%, the skin showed a variation between 4,6 to 9,3%, the ETA of the pulp changed from 0,07 to 0,19, and of the skin changed to 0,14 to 0,27. At the some time, the TDS/ETA of the pulp changed from 109 to 127 and of the skin from 33 to 56, the pH of the pulp and the skin stayed ground 4,7. The fruit of only one locality showed values of vitamin C (13,67mg/100g of pulp). The diameters were assorted, from 15,71 to 19,38mm. The vegetative propagation by the used methods are possible, needing to amplify the studies. When the propagation is through the technique of cutting, it was feasible when used apical cuttings with four leaves grown in February without the use of IBA, on condition of intermittent mist. The grafting of grafting type cleft in the graft and rootstock of guabijuzeiro textured woody stem showed greater efficiency. In micropropagation sodium hypochlorite at a concentration of 4% for twenty minutes is effective for seed disinfestation, during multiplication and rooting, the BAP and NAA, respectively, showed more efficiency.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Vegetal, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:35:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319146.pdf: 1347141 bytes, checksum: a63bc2c32c89961eae521b236babccad (MD5) Previous issue date: 2013 / Kappaphycus alvarezii (Doty) Doty ex P. C. Silva é uma alga vermelha de grande importância comercial por ser a principal fonte de carragenana, um ficocolóide amplamente utilizado nas indústrias alimentícia, têxtil e farmacêutica. A espécie é originária das Filipinas e da Indonésia onde é cultivada desde meados da década de 1970, sendo que sua principal forma de propagação é vegetativa, por meio da simples fragmentação do talo, fato este que pode ocasionar em perda da variabilidade genética e consequente redução na taxa de crescimento e aumento na susceptibilidade a pragas e doenças, resultando em perda da produtividade. Para contornar o problema, diversos estudos envolvendo técnicas de micropropagação vem sendo realizados para a espécie. Os objetivos deste trabalho foram: 1. caracterizar os níveis de ploidia de núcleos de células do calo; 2. analisar os efeitos de bloqueadores das fibras do fuso e de fitorreguladores no processo de regeneração indireta; 3. analisar os efeitos de bloqueadores das fibras do fuso e de fitorreguladores no processo de regeneração direta. Para o primeiro objetivo, núcleos de calos do tetrasporófito marrom com 30 e 60 dias de cultura foram marcados com DAPI e sua fluorescência foi captada em Microscópio Confocal de Fluorescência e quantificada por meio do software Image J. Os núcleos apresentaram variações na intensidade de fluorescência de 11.972 a 100.386 pixels µm-2 e 20.000 a 80.975 para calos de 30 e 60 dias respectivamente. Este padrão de variação pode sugerir a ocorrência de núcleos com diversos níveis de ploidia e tendência a redução nesta variação decorrente da reorganização celular como consequência do processo de diferenciação. Para o segundo objetivo, calos com 60 dias do tetrasporófito marrom foram transferidos para meios de cultura líquidos e submetidos a 14 tratamentos com diferentes combinações e concentrações de bloqueadores de fibras do fuso e de fitorreguladores por 30 dias. Os tratamentos não interferiram na viabilidade dos calos, entretanto não foram observadas regenerações indiretas. Para o terceiro objetivo, explantes do tetrasporófito marrom foram submetidos a 7 tratamentos com diferentes concentrações de bloqueadores de fibras do fuso e 12 tratamentos com diferentes combinações e concentrações de fitorreguladores combinados com orizalina a 1,0 mg L-1, adicionados ao meio de cultura líquido durante 2 semanas. Os tratamentos não influenciaram na taxa de sobrevivência. A orizalina sozinha ou combinada com fitorreguladores IAA ou K estimulou a maior produção de eixos eretos por explante. A taxa de crescimento foi estimulada pela orizalina em combinação com a espermina ou com outros fitorreguladores (IAA e K; IAA e S; K e S; IAA, K e S). O presente trabalho demonstrou que a regeneração indireta é de difícil obtenção, por outro lado a regeneração direta é observada com freqüência, sendo recomendada para a propagação da espécie, sendo que com a utilização de orizalina e com fitorreguladores há um aumento na formação de micropropágulos e da biomassa, sem afetar a taxa de sobrevivência dos explantes. Ambos os casos são importantes alternativas para aumentar a produtividade da macroalga Kappaphycus alvarezii. <br> / Abstract: Kappapphycus alvarezii (Dotty) Doty ex P. C. Silva is a red algae with great commercial importance because it is the main source of carrageenan, a phycocoloid largely used in food, textile andpharmaceutical industries. This species is original from the Phillipines and Indonesia, where is cultivated since early 1970's, and the main form of cultivation is through vegetatively propagation, by simple thallus fragmentation. This fact can be causing reduction in growth rates and a possible increase in the susceptibility to pests and diseases, resulting in productivity loss. To solve this problem, several studies evolving micropropagation techniques have been done for this species. The objectives of this study were: 1. Characterize the levels of ploidy in calli cells nuclei; 2. Analyze the effects of spindle inhibitors and plant growth regulators on the indirect regeneration process; 3. Analyse the effects of spindle inhibitors and phytorregulators on direct regeneraticon process. For the first objective, brown tetrasporophyte calli nuclei with 30 and 60 days were marked with DAPI and its fluorescence was captured in Confocal Microscopy of Fluorescence and measured with Image J software. The nuclei presented fluorescence intensity variation of 11.972 to 100.386 pixels µm-2 and 20.000 to 80.975 to 30 and 60 days old calli, respectivelly. This pattern of variation can suggest the occurrence of nuclei in several degrees of ploidy and a trend to reduction in this variation due to a cellular reorganization as consequence of differentiation process. For the second objective, 60 days old brown tetrasporophyte calli were transferred to liquid medium and submitted to 14 treatments with different combinations and concentrations of spindle inhibitors and phytoregulators for 30 days. Treatments had no influence in survival rates of the explants, although no indirect regeneration were observed. For the third objective, brown tetrasporophyte thalli were submitted to 7 treatments with different spindle inhibitors concentrations, and 12 different concentrations and combinations of phytoregulators combined with 1,0 mg L-1 oryzalin added to liquid culture media for 2 weeks. The treatments did not influenced on survival rates. The oryzalin alone or in combination with IAA or K phytorregulators further stimulated the upright axes production per explant. The growth rates were stimulated by oryzalin in combination with spermine or the others phytorregulators (IAA and K; IAA and S; K and S; IAA, K and S). This study demonstrated that indirect egeneration is hard to obtain, but direct regeneration is frequently observed and recommended for propagation of this species. Also, with utilization of oryzalin and phytorregulators, there is an increase on micropropagule formation and biomass without any effect on explant survival. Both cases are important alternatives to improve the production of the seaweed Kappaphycus alvarezii.

A pitangueira (Eugenia uniflora) é uma importante espécie frutífera representante do gênero Eugenia, família Myrtaceae, possui potencial ornamental e fitoterápico, podendo ser incluída em projetos de revegetação de áreas degradadas. No Brasil a maioria dos pomares dessa espécie são formados por mudas do tipo péfranco, o que torna os plantios com baixa uniformidade genética. Métodos de propagação vegetativa como o cultivo in vitro e a miniestaquia são alternativas viáveis para propagação de diversas espécies frutíferas, podendo ser utilizado também com as espécies nativas proporcionando a formação de pomares com populações de plantas homogêneas, além de acelerar o processo de propagação. No entanto, um dos maiores entraves na propagação vegetativa da pitangueira está na dificuldade de obter tecidos livres de contaminações provocadas por fungos e bactérias e, ainda, por oxidações causadas pela liberação de compostos fenólicos no ponto de incisão. Neste contexto, conduziu-se dois estudos visando a multiplicação da pitangueira, no Departamento de Horticultura e Silvicultura da Faculdade de Agronomia da UFRGS, no período de 2008 a 2010. O estudo 1 concentrou-se em métodos de assepsia e tratamento de plantas matrizes, meios de cultivo e concentrações de reguladores de crescimento. No estudo 2 testou-se a estaquia com material herbáceo de pitangueira. Os resultados obtidos indicam a possibilidade do cultivo in vitro de pitangueira, quando tratados os explantes com solução bactericida e estabelecendo-os em meio WPM com 0,2mg.L-1 de BAP para a fase de multiplicação e 0,1mg.L-1 de ANA para a fase de enraizamento. No entanto, ainda há necessidade de melhoria nos percentuais de enraizamento e brotação dos explantes, bem como na redução de explantes oxidados e contaminados. A miniestaquia foi eficiente para produzir mudas, especialmente, quando utilizadas estacas oriundas de plantas jovens na ausência de auxinas exógenas. Contudo, ainda há a necessidade de aprimorar a técnica visando a multiplicação a partir de estacas coletadas de planta adulta de genótipos promissores. / The surinam cherry (Eugenia uniflora) is an important fruit species, representative of the genus Eugenia, Family Myrtaceae, wich has ornamental and herbal potential and could be included in projects in degraded disturbed areas. In Brazil, most of this species orchards are formed by planting ungrafted plants, which gives low genetic uniformity to the plantations. Vegetative propagation methods, such as micropropagation and minicutting, are viable alternatives for the propagation of several fruit species and can also be used with the native species, allowing the formation of orchards with homogeneous populations and accelerating the propagation process. However, one of the biggest obstacles in surinam cherry propagation is the difficulty of obtaining free from funghi and bacteria contamination tissue and also by oxidation due to the phenolic compounds liberation at the incision point. In this context, two surinam cherry multiplication studies were carried out, both at the Departamento de Horticultura e Silvicultura, Faculdade de Agronomia, UFRGS, for the period 2008 to 2010. Study 1 focused on sterilization methods and mother plants treatment, culture medium and growth regulators concentrations. In study 2 minicuttings of surinam cherry were tested. The results indicate the possibility of in vitro cultivation of surinam cherry when the explants were treated with antibacterial solution and established in culture medium with 0.2 mg.L-1 BAP for multiplication and 0.1 mg.L-1 NAA for rooting. However, there is still a need for improvement of rooting and sprouting percentage of the explants, and the reduction of oxidized and contaminated explants. The minicutting was efficient to produce seedlings, especially when obtained from young plants with not exogenous auxin. Although, the necessity to improve the technique continues, aiming to multiply starting from adult plant collected cuttings from promising genotypes.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2017-03-10T17:17:55Z No. of bitstreams: 1 2016_PatríciaMonahCunhaBartos_Parcial.pdf: 450830 bytes, checksum: dd052eba7cbb7314b7b1801a4a1eed38 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-04-06T22:32:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_PatríciaMonahCunhaBartos_Parcial.pdf: 450830 bytes, checksum: dd052eba7cbb7314b7b1801a4a1eed38 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-06T22:32:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_PatríciaMonahCunhaBartos_Parcial.pdf: 450830 bytes, checksum: dd052eba7cbb7314b7b1801a4a1eed38 (MD5) / O objetivo do presente trabalho foi aperfeiçoar e avaliar estruturalmente e bioquimicamente as etapas de indução e multiplicação de linhagens embriogênicas de dendezeiro (Elaeis guineensis Jacq.) originadas a partir de folhas imaturas de plantas adultas de alto rendimento. Para a indução, segmentos de folhas da variedade B35-17-29 foram inoculadas em meio de cultura de MS, contendo cinco concentrações (0, 225, 450, 675 e 900 μM) de ANA, 2,4-D e Picloram. Em seguida foram avaliadas duas regiões do palmito (apical e basal) na indução de calos em seis variedades (B35-29-32, B35-29-33, B35-17-33, B35-17-29, A25-15-11 e A25-14- 28). Para a multiplicação, duas consistências de meio (líquido e sólido) e dois tipos de explantes (calo primário e embriogênico) da variedade B35-17-29 foram testados. A caracterização morfoanatômica e a extração e quantificação dos açúcares, amido, ácidos graxos, aminoácidos, proteínas e a análise do perfil metabólico contidos em explantes foliares aos zero dias de cultivo, com raízes, com calos e que não reagiaram, além de calo primário, calo embriogênico e calo embriogênico formado, a partir de calo primário, foi realizada utilizando-se materiais do genótipo B35-17-33. Verificou-se que as melhores taxas de indução de calos da variedade B35-17-29 foram obtidas com a utilização de 2,4-D (900 μM) e Picloram (225 μM). Analisando os genótipos e as posições das folhas verificou-se que as melhores taxas foram observadas com a inoculação da parte apical em todos os genótipos testados. Na multiplicação, verificou-se que o maior ganho de biomassa fresca foi observado com a multiplicação de calos embriogênicos em meio líquido sob agitação. Anatomicamente, verificou-se que os explantes foliares utilizados para a indução de calos apresentavam epiderme unisseriada, com estômatos apenas na face abaxial da folha, presença de hipoderme bi-estratificada, em ambas as faces, com mesofilo dorsiventral. Foi possível observar o desenvolvimento inicial dos calos associados aos feixes vasculares em 100% dos propágulos analisados. Na formação do calo primário, as divisões celulares começam próximo aos feixes vasculares. Foi observado que calos primários são constituídos por células meristemáticas apenas em sua região mais interna, enquanto que calos embriogênicos são compostos inteiramente por este tipo celular. A partir do calo embriogênico, é verificada a formação de embriões somáticos. Com relação às análises bioquímicas, verificou-se que não há diferenças significativas entre as concentrações de açúcares nos segmentos foliares que se mostraram responsivos ou não à indução da embriogênese somática. Em contrapartida, folhas com calos apresentaram níveis inferiores de frutose, e maiores concentrações de amido, quando comparadas àquelas que não reagiram. Verificou-se que calos primários apresentaram maiores concentrações de açúcares e amido quando comparados com calos embriogênicos, diferindo também por apresentarem concentrações mais elevadas de sacarose. Com relação à concentração dos ácidos graxos, não houve diferença significativa entre explantes foliares com calos e aqueles que não reagiram. Os teores de aminoácidos apresentam um acúmulo gradativo durante a etapa da indução de calos. Em todo o cultivo, apenas calos embriogênicos apresentaram as maiores concentrações de prolina. Explantes foliares com zero dias de cultivo e aqueles que não reagiram apresentaram níveis intermediários de proteínas, sendo observada a redução das taxas com a formação dos calos primários e aumento quando no caso de tratarse de calos embriogênicos. / The main goal of the current project was enhancing and evaluating biochemically and structurally the induction and multiplication steps of the African oil palm tree’s (Elaeis guineensis Jacq.) embryogenic lineage spread originally from high performance adult plant’s half-grown leaves. In order to induct, leave’s cantle from the variety B35-17-29 were inoculated in MS cultivation environment, containing 5 concentrations (0, 225, 450, 675 e 900 μM) of NAA, 2,4-D and Picloram. Subsequently, two heart of palm’s zones were evaluated (apical and basal) during calluses induction in 6 varieties (B35-29-32, B35-29-33, B35-17-33, B35-17-29, A25-15- 11 e A25-14-28). For the multiplication, two media consistencies (solid and liquid) and two sorts of explant (primary and embryogenic callus) from B35-17-29’s variety were tested. The morphoanatomic characterization and the extraction and quantification of the sugars, starch, fatty acids, amino acids and proteins and the metabolic profile analysis contained in foliar explants on zero days of cultivation with roots, with callus and which did not react, besides primary callus, embryogenic callus and full-grown embryogenic callus, from primary callus, was carried out using materials from the genotype B35-17-33. It has been observed that the best calluses induction rates from the variety B35-17-29 were obtained with the use of 2,4-D (900 μM) and Picloram (225 μM). Analyzing the genotypes and the position of the leaves it’s been found that the best rates were observed with the inoculation of the apical part in all tested genotypes. On the multiplication, it was verified that the best fresh biomass gain was seen with embryogenic calluses multiplication in stirring liquid media. Anatomically, it was verified that the foliar explants used for calluses induction presented uniseriate epidermis, with stomas only on the abaxial face, bi-stratified hypodermis presence, on both faces, with dorsiventral mesophilic. It could be observed the initial development of the calluses associated to vascular bundles in 100% out of the propagating material analyzed. On the primary callus formation, the cell divisions begin around the vascular bundles. It’s been observed that the primary calluses are only made up of meristematic cells in its more internal area, whilst embryogenic calluses are fully made up of these cells. From the embryogenic callus, the somatic embryos formation is seen. Regarding the biochemical analysis, it’s verified that there are no considerable differences between the sugar content in the foliar segments which was proved to be responsive or not to the somatic embryogenic induction. On the other hand, leaves with calluses presented lower fructose levels and higher starch concentration when compared with those that didn’t react. It was found that primary calluses presented higher concentration of sugar compared with embryogenic calluses, which also differs for presenting higher sucrose concentration. In regard to fatty acids concentration, there wasn’t a major difference between foliar explants with calluses and those that didn’t react. The amino acids content presented gradual increase during the calluses induction step. In every cultivation, only embryogenic calluses presented higher proline concentration. Foliar explants with zero cultivation days and those that didn’t react presented intermediate protein levels, being noticed a reduction of the rates with the formation of primary calluses and enhancement in case of embryogenic calluses.

O guabijuzeiro é uma árvore perenifólia de 15 a 25 metros de altura, produtora de frutos comestíveis. Ocorre no Brasil desde São Paulo até o Rio Grande do Sul. A propagação do guabijuzeiro é realizada por sementes e são escassas as informações sobre a propagação vegetativa desta espécie. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade dos frutos e estudar métodos de propagação. Frutos maduros, coletados em três locais: Porto Alegre (2) e Maquiné (1) foram avaliados quanto ao teor de sólidos solúveis totais (SST), acidez total titulável (ATT), teor de vitamina C, pH e o diâmetro dos frutos. A propagação vegetativa foi estudada através das técnicas de estaquia (tratamentos: AIB a 0, 2, 4, 6 g.L-1 e vitamina C a 3 g.L-1), enxertia (tratamentos: idades e diâmetros de portas-enxertos) e micropropagação (tratamentos: desinfestação de sementes com hipoclorito de sódio a 0, 2, 4, 6 e 8% por vinte minutos; testes de multiplicação em meio WPM com BAP, BAP+ANA, BAP+GA3+ANA ou sem fitorregulador e teste de enraizamento em meio WPM com diferentes concentrações de ANA e AIB: 0,2; 0,4 e 0,6 mg.L-1). Os frutos das três localidades apresentaram resultados distintos em alguns parâmetros analisados, o SST da polpa variou de 8,9 a 23,6 %, da casca ficou entre 4,6 a 9,3 %, a ATT da polpa variou de 0,07a 0,19, e da casca de 0,14 a 0,27. Já o SST/ATT da polpa variou de 109 a 127 e da casca 33 a 56, o pH da polpa e da casca ficaram em torno de 4,7. Apenas os frutos de uma localidade apresentaram valores de vitamina C (13,67 mg/100g de polpa). Os diâmetros variaram de 15,71 a 19,38 mm. A propagação vegetativa pelos métodos utilizados é viável necessitado ampliar os estudos. A estaquia foi viável quando utilizadas estacas apicais com quatro folhas cultivadas em fevereiro, sem a utilização de AIB, em condição de nebulização intermitente. A enxertia de garfagem tipo fenda cheia em enxerto e porta-enxerto de guabijuzeiro com textura do caule lenhosa apresentaram maior eficiência. Na micropropagação o hipoclorito de sódio na concentração de 4% por vinte minutos é eficiente para desinfestação das sementes, na fase de multiplicação e enraizamento o BAP e ANA respectivamente, se mostraram mais eficientes. / The guabijuzeiro is a tree that comes from a dense, thick and compact forest; that is always green and measures from 15 to 25 meters of height, which produces eatable fruits. Its production takes place in Brazil, coming from the states of São Paulo up to Rio Grande do Sul. The propagation of the guabijuzeiro happens through seeds, and the information of these vegetative propagation are uncommon. This kind of vegetative fruit is rare. The purpose of this essay was to evaluate the quality of its fruit and study the methods of vegetative propagation . Mature fruit, collected from three different places: Porto Alegre (2) and Maquiné (1); they were evaluated as to the quantity of the total dissoluable solids (TDS), entitled total acidity (ETA), quantity of vitamin C, pH and the diameters of the fruit. The vegetative propagation was studied through the techniques of pile driving, which consists on the plantation of small stakes of the plant stalk (treatments: concentrations of BAP 0, 2, 4, 6 g.L-1 and vitamin C 3 g.L-1), grafting (treatments: disinfection of the peeds with chlorine bleaching lye on the following concentrations (0, 2, 4, 6 and 8% during 20 minutes, tests of environmental multiplication WPM with BAP, BAP+NAA, BAP+GA3+NAA or without aim regulator, rooting test in WPM environmental with different concentrations 0,2; 0,4; e 0,6 mg. L-1 ). The fruits from the three settlements presented distinct results in some analysed parameters, the TDS of the pulp had a variation of 8,9 to 23,6%, the skin showed a variation between 4,6 to 9,3%, the ETA of the pulp changed from 0,07 to 0,19, and of the skin changed to 0,14 to 0,27. At the some time, the TDS/ETA of the pulp changed from 109 to 127 and of the skin from 33 to 56, the pH of the pulp and the skin stayed ground 4,7. The fruit of only one locality showed values of vitamin C (13,67mg/100g of pulp). The diameters were assorted, from 15,71 to 19,38mm. The vegetative propagation by the used methods are possible, needing to amplify the studies. When the propagation is through the technique of cutting, it was feasible when used apical cuttings with four leaves grown in February without the use of IBA, on condition of intermittent mist. The grafting of grafting type cleft in the graft and rootstock of guabijuzeiro textured woody stem showed greater efficiency. In micropropagation sodium hypochlorite at a concentration of 4% for twenty minutes is effective for seed disinfestation, during multiplication and rooting, the BAP and NAA, respectively, showed more efficiency.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-01-28T15:36:03Z No. of bitstreams: 1 2012_WagnerSantosFukuda.pdf: 2307176 bytes, checksum: 85df1a33f4e78b649025c317e1ae41f2 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-01-30T14:26:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_WagnerSantosFukuda.pdf: 2307176 bytes, checksum: 85df1a33f4e78b649025c317e1ae41f2 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-30T14:26:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_WagnerSantosFukuda.pdf: 2307176 bytes, checksum: 85df1a33f4e78b649025c317e1ae41f2 (MD5) / Um protocolo de micropropagação foi desenvolvido para Jacaranda ulei, um importante subarbusto medicinal do Cerrado. A espécie também apresenta potencial ornamental pela cor vermelho-vináceo das flores e pela arquitetura peculiar dos foliólulos. As culturas foram iniciadas por segmentos nodais de plântulas provenientes de sementes de cinco matrizes. A germinação e o cultivo das sementes foram realizados in vitro, em água e ágar (8%), após a desinfestação, realizada por imersão em álcool 70%, hipoclorito de sódio (NaOCl) comercial (2-2,5% de cloro ativo) e três enxagues em água destilada autoclavada. Em todas as matrizes testadas a desinfestação das sementes foi acima de 95%. A germinabilidade foi elevada nas sementes recém-coletadas de quatro matrizes (acima de 90%). A porcentagem de plântulas normais foi elevada em todas as matrizes (acima de 90%). Nas sementes armazenadas por seis e doze meses, a germinabilidade foi baixa, respectivamente 47,9% e 29,2%. A germinação é epígea fanerocotiledonar e se inicia com a expansão da raiz primária. A morfologia da plântula e da planta jovem foi descrita até o o120 dia de cultivo. Os eofilos são pinados e com número crescente de foliólulos de três a sete. O desenvolvimento do sistema radicular é lento e sem diferenciação de raízes laterais no período observado. A formação de plântulas anormais ocorreu em todas as matrizes testadas e as anormalidades observadas estão relacionadas principalmente à má formação do sistema radicular, que comumente possui a região apical da raiz primária com sinais de necrose. Os segmentos nodais, provenientes de plântulas de 60 dias, foram cultivados em MS com macro e micro nutrientes diluídos a quarta parte (¼ MS) -1e BAP e AIB nas concentrações 0,0; 0,01 e 0,05 mg.L , em quatro subcultivos sucessivos de 60 dias cada, formando um fatorial 2x3x4. A indução e o alongamento dos brotos foram observados em todos os tratamentos, inclusive -1no controle, nos quatro subcultivos. No tratamento BAP/AIB 0,05/0,05 mg.L ocorreu maiores médias de multiplicação (2 brotos por explante) e comprimento (3,5 cm) dos brotos. Brotos provenientes do segundo e terceiro subcultivos foram enraizados in vitro, em ¼ MS, com e sem carvão ativado, e ex vitro, em vermiculita. Após 90 dias de cultivo foi observado que o carvão inibiu totalmente o enraizamento. Em ¼ MS, sem carvão, e ex vitro, respectivamente, 67% e 79% dos brotos enraizaram. A análise anatômica da base do caule na região na qual a raiz adventícia emerge, confirma que a vascularização da raiz está conectada à do caule e que o amido presente é hidrolisado durante a diferenciação da raiz. O enraizamento também foi observado aos 90 dias de ocultivo, em todos os tratamentos com BAP/AIB, no 7 subcultivo. A maior -1porcentagem de enraizamento foi de 63%, em meio com 0,01 mg.L de AIB. Mais de 71% das plantas enraizadas foram aclimatizadas em estufa após 18 meses. Após 24 meses, 100% das plantas transferidas para casa de vegetação sobreviveram e começam a produzir folhas bipinadas, como a planta adulta. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / A micropropagation protocol has been developed for Jacaranda ulei, an important medicinal subshrub of Cerrado. This species has also potential as ornamental due to the vinaceous-red color of its flowers and the peculiar architecture of the leaflets. Seeds of five different mother-plants were germinated in vitro, and nodal segments taken from these seedlings were used to initiate the cultures. In vitro germination and cultivation was accomplished in water/agar (8%) medium, just after the seeds had been disinfested, which was performed by their immersion in 70% alcohol, commercial bleach (NaOCl, 2- 2.5% active chlorine) and three washes in sterilized distilled water. Seeds from all five mother-plants tested had a disinfestation rate above 95%. The seed germination was higher in freshly collected seeds (above 90%). Independently of the origin, the percentage of normally developed seedlings was high (above 90%). When seeds were stored for six to twelve months, the germinability decreased and presented rates of 47.9% and 29.2%,respectively. J.ulei germination is epigealphanerocotylar and began with the protrusion of the primary root. Seedling and young plant morphology was described using specimens grown for up to 120 days. Eophylls were pinnate, and the number of leaflets increased from three to seven. The development of the root system was relatively slow and there was no differentiation of lateral roots during the observation period. The formation of abnormal seedlings did occur from seeds of all mother plants, and the most common abnormalities were related to an impaired root system formation, which was manifested by necrosissigns in the root tip region. Nodal segments from 60-day old seedlings were grown in ¼ MS -1with BAP and IBA (0.0, 0.01 and 0.05 mg.L ) in four successive subcultures of 60 days each, which formed a 2x3x4 factorial. Shoot induction and elongation was observed in all treatments, including the control, in all four subcultures. The -1 treatment BAP-IBA that contained 0.05-0.05 mg.L showed the highest multiplication average (2 shoots/explant), as well as the highest shoot length (3.5 cm). Shoots from the second and third subcultures rooted in vitro in ¼ MS medium, with or without activated charcoal, and also ex vitro, in vermiculite. After 90 days of culture, it was observed that the activated charcoal completely inhibited rooting. Shoot rooting rates in ¼ MS without activated charcoal as well as ex vitro were 67% and 79%, respectively. The anatomical analysis of stem basal region, where the adventitious root rose, confirmed that the root vasculature was connected to that of the stem, and the starch was hydrolyzed during the differentiation of the root. Shoot rooting was also observed at 90 thdays of culture, in all treatments with BAP-IBA (7 subculture). The highest -1rooting percentage was 63% in medium with 0.01 mg.L of IBA. After 18 months, over 71% of rooted plants had been acclimatized in a greenhouse, and after 24 months, 100% of the plants transferred to the greenhouse survived and began to produce leaves bipinnate, such as those seen inmature plant.

O guabijuzeiro é uma árvore perenifólia de 15 a 25 metros de altura, produtora de frutos comestíveis. Ocorre no Brasil desde São Paulo até o Rio Grande do Sul. A propagação do guabijuzeiro é realizada por sementes e são escassas as informações sobre a propagação vegetativa desta espécie. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade dos frutos e estudar métodos de propagação. Frutos maduros, coletados em três locais: Porto Alegre (2) e Maquiné (1) foram avaliados quanto ao teor de sólidos solúveis totais (SST), acidez total titulável (ATT), teor de vitamina C, pH e o diâmetro dos frutos. A propagação vegetativa foi estudada através das técnicas de estaquia (tratamentos: AIB a 0, 2, 4, 6 g.L-1 e vitamina C a 3 g.L-1), enxertia (tratamentos: idades e diâmetros de portas-enxertos) e micropropagação (tratamentos: desinfestação de sementes com hipoclorito de sódio a 0, 2, 4, 6 e 8% por vinte minutos; testes de multiplicação em meio WPM com BAP, BAP+ANA, BAP+GA3+ANA ou sem fitorregulador e teste de enraizamento em meio WPM com diferentes concentrações de ANA e AIB: 0,2; 0,4 e 0,6 mg.L-1). Os frutos das três localidades apresentaram resultados distintos em alguns parâmetros analisados, o SST da polpa variou de 8,9 a 23,6 %, da casca ficou entre 4,6 a 9,3 %, a ATT da polpa variou de 0,07a 0,19, e da casca de 0,14 a 0,27. Já o SST/ATT da polpa variou de 109 a 127 e da casca 33 a 56, o pH da polpa e da casca ficaram em torno de 4,7. Apenas os frutos de uma localidade apresentaram valores de vitamina C (13,67 mg/100g de polpa). Os diâmetros variaram de 15,71 a 19,38 mm. A propagação vegetativa pelos métodos utilizados é viável necessitado ampliar os estudos. A estaquia foi viável quando utilizadas estacas apicais com quatro folhas cultivadas em fevereiro, sem a utilização de AIB, em condição de nebulização intermitente. A enxertia de garfagem tipo fenda cheia em enxerto e porta-enxerto de guabijuzeiro com textura do caule lenhosa apresentaram maior eficiência. Na micropropagação o hipoclorito de sódio na concentração de 4% por vinte minutos é eficiente para desinfestação das sementes, na fase de multiplicação e enraizamento o BAP e ANA respectivamente, se mostraram mais eficientes. / The guabijuzeiro is a tree that comes from a dense, thick and compact forest; that is always green and measures from 15 to 25 meters of height, which produces eatable fruits. Its production takes place in Brazil, coming from the states of São Paulo up to Rio Grande do Sul. The propagation of the guabijuzeiro happens through seeds, and the information of these vegetative propagation are uncommon. This kind of vegetative fruit is rare. The purpose of this essay was to evaluate the quality of its fruit and study the methods of vegetative propagation . Mature fruit, collected from three different places: Porto Alegre (2) and Maquiné (1); they were evaluated as to the quantity of the total dissoluable solids (TDS), entitled total acidity (ETA), quantity of vitamin C, pH and the diameters of the fruit. The vegetative propagation was studied through the techniques of pile driving, which consists on the plantation of small stakes of the plant stalk (treatments: concentrations of BAP 0, 2, 4, 6 g.L-1 and vitamin C 3 g.L-1), grafting (treatments: disinfection of the peeds with chlorine bleaching lye on the following concentrations (0, 2, 4, 6 and 8% during 20 minutes, tests of environmental multiplication WPM with BAP, BAP+NAA, BAP+GA3+NAA or without aim regulator, rooting test in WPM environmental with different concentrations 0,2; 0,4; e 0,6 mg. L-1 ). The fruits from the three settlements presented distinct results in some analysed parameters, the TDS of the pulp had a variation of 8,9 to 23,6%, the skin showed a variation between 4,6 to 9,3%, the ETA of the pulp changed from 0,07 to 0,19, and of the skin changed to 0,14 to 0,27. At the some time, the TDS/ETA of the pulp changed from 109 to 127 and of the skin from 33 to 56, the pH of the pulp and the skin stayed ground 4,7. The fruit of only one locality showed values of vitamin C (13,67mg/100g of pulp). The diameters were assorted, from 15,71 to 19,38mm. The vegetative propagation by the used methods are possible, needing to amplify the studies. When the propagation is through the technique of cutting, it was feasible when used apical cuttings with four leaves grown in February without the use of IBA, on condition of intermittent mist. The grafting of grafting type cleft in the graft and rootstock of guabijuzeiro textured woody stem showed greater efficiency. In micropropagation sodium hypochlorite at a concentration of 4% for twenty minutes is effective for seed disinfestation, during multiplication and rooting, the BAP and NAA, respectively, showed more efficiency.

Plantas de pimenta-do-reino (Piper nigrum L.) é a especiaria de maior importância econômica no Brasil e no Mundo. Entretanto, a produção comercial desta planta vem enfrentando problemas fitosanitários e de propagação, sendo que o método convencional de multiplicação tem se mostrado anti-econômico. O presente trabalho procurou estabelecer um protocolo de propagação “in vitro” (micropropagação) que permite a multiplicação de um material selecionado para se obter plantas clonadas isentas de patógenos, determinando-se as dosagens de fitorreguladores a serem utilizados nas fases de: multiplicação, alongamento, enraizamento e aclimatação"ex vitro” das cultivares 'Kudaravally' e 'Kuthirravally'. Na fase de multiplicação"in vitro"determinou-se que a presença de 16 &#181;M de benzil-amino-purina (BAP) foi mais efetiva para ambas as cultivares. O alongamento da cultivar 'Kudaravally' foi mais efetivo em presença de 10 &#181;M de BAP até a idade de 75 dias. Já a cultivar 'Kuthiravally' alongou-se melhor na presença de 6 &#181;M de BAP, aos 75 dias. As duas cultivares enraizam melhor"in vitro"na presença da auxina ácido naftaleno-acético (NAA) do que das auxinas ácido indol-acético (IAA) e ácido indolbutírico (IBA), sendo que a dose de 10 &#181;M é a que produz maior número de raízes, mais longas e de massa de matéria seca mais elevada. As plântulas com raízes induzidas por NAA aclimatam melhor do que as enraizadas sem auxinas. Dos fungos endomicorrízicos testados ,Glomus macrocarpum mostrou ser vantajoso na aclimatação de plantas da cultivar 'Kudaravally' com raízes induzidas por NAA / not available

Cerca de um terço das mudas de cana-de-açúcar, plantadas no Estado de São Paulo, tem sido produzida por micropropagação. Quando se pratica micropropagação pretende-se conservar a integridade genética da planta doadora de explante, visto que a finalidade desta técnica é a obtenção de muitos clones com características idênticas às da planta doadora. Porém, tem-se observado elevados níveis de instabilidade fenotípica em plantas micropropagadas, como na variedade RB83-5486. Neste, trabalho utilizou-se a técnica do RAPD com a finalidade de detectar a variação induzida pela cultura de tecidos em cana-de-açúcar. Foram analisadas 48 plantas propagadas via colmos e 48 plantas micropropagadas (via cultura de meristema) da variedade RB83-5486. Calculou-se a taxa de polimorfismo a partir de 98 locos, sendo constatado um aumento do polimorfismo de 1,02% para 7,14%, com incremento de cerca de sete vezes na taxa de polimorfismo. Posteriormente, foram analisadas 50 plantas no campo, provenientes de dez meristemas nas cinco fases de repicagens, e 30 plantas in vitro provenientes de 5 meristemas nas seis fases de repicagens, em duas variedades. Encontrou-se taxas de polimorfismo variáveis em todas as fases do cultivo in vitro. E a variedade RB83-5486 mostrou ter um comportamento in vitro mais instável quando comparada com a variedade SP80-185. / Approximately a third part of sugar cane plants in São Paulo State has been produced by micropropagation. As far as micropropagation is concerned, it is desirable to preserve genetic integrity of the explant donor plant, since the aim of this technique is to obtain many clones with characteristics identical to the donor plant. However, high levels of phenotypic instability has been observed in micropropagated plants, such as variety RB83-5486. In the present work, RADP technique was employed in order to detect tissue culture-induced variations in sugar cane. Forty-eight plants propagated via stem and forty-eight micropropagated plants (via meristem culture) from variety RB83-5486 were analised. The polymorphism rate was calculated from ninety-eight loci and an increase from 1,02% to 7,14% was observed, representing approximately a sevenfold higher polymorphism rate. Fifty field-grown plants, from ten meristems at each one of the five subcultivation stages, and thirty in vitro plants from five meristems at each one of the six subcultivation stages, from two varieties were analysed. Different polymorphism rates were found at every in vitro cultivation phase. Concerning to the multiplication phase, we found variable polymorphism rates. Variety RB83- 5486 appeared to have a more unstable in vitro behavior than variety SP80-185.

Catasetum fimbriatum (Morren) Lindl. é uma orquídea estudada no Laboratório de Fisiologia Vegetal do IBUSP desde 1990. As plantas deste gênero, quando incubadas in vitro no escuro, apresentam crescimento contínuo do caule na ausência de qualquer regulador de crescimento. Quando as gemas laterais dos caules estiolados são isoladas e incubadas na presença de luz, originam novas plantas, constituindo-se, desta forma, uma técnica relativamente simples e geneticamente segura de clonagem de plantas. Baseando-se no conhecimento consolidado com esta planta, procurou-se por um lado aprofundar conhecimentos básicos a respeito dos processos envolvidos na indução do crescimento caulinar em C. fimbriatum, e por outro, tomando-a como parâmetro de referência, estendê-los às plantas de Cymbidium e Cattleya labiata tratadas com etileno, giberelina (GA) e óxido nítrico (NO). Foram utilizadas plantas micropropagadas de C. fimbriatum e Cymbidium, enquanto as de Cattleya foram obtidas por meio de germinação assimbiótica. Após 120 dias de incubação, as plantas foram transferidas para o escuro e tratadas com diferentes concentrações de GA, paclobutrazol (PA), um inibidor de biossíntese de GA, etileno, 1-metilciclopropeno (1-MCP), um inibidor da ação do etileno, e NO. No 30º e 60º dia de incubação no escuro, foram mensurados o número de nós formados e de gemas laterais liberadas, bem como o tamanho e as massas fresca e seca dos estolões. Análises dos teores de etileno e CO2 acumulados nos frascos foram determinadas por meio de cromatografia gasosa. Os três gêneros estudados apresentaram respostas diferentes quanto ao estiolamento. Nitidamente, sob as condições utilizadas, as plantas de Cattleya labiata mostraram-se recalcitrantes à formação de estolões e à quebra da dominância apical, mantendo inalterado o crescimento foliar ao longo de todo o período de tratamento. Não obstante os caules de C. fimbriatum e Cymbidium tenham estiolado conspicuamente, na primeira planta eles se formaram na base do pseudobulbo, enquanto na segunda houve a retomada da atividade meristemática apical já nos primeiros 30 dias de incubação. Os tratamentos com GA promoveram significativamente o alongamento caulinar em C. fimbriatum, enquanto que nas plantas de Cymbidium a concentração mais elevada inibiu esse processo. Os tratamentos com PA e 1-MCP reduziram o alongamento caulinar em ambos os gêneros. O etileno aumentou a liberação de gemas laterais e a ramificação das mesmas em C. fimbriatum e promoveu incremento no tamanho do caule principal e no número de segmentos nodais em Cymbidium. Os efeitos mais marcantes da aplicação de NO ocorreram após 30 dias de tratamento, refletindo positivamente sobre o alongamento caulinar e o número de segmentos nodais em C. fimbriatum. Nas plantas de Cymbidium, contudo, a presença de NO inibiu esse processo. No que se refere à emissão de etileno e CO2, observou-se uma variação acentuada entre os gêneros e os tratamentos realizados. Quanto ao etileno, a liberação mais elevada deu-se nos tratamentos com etileno nas três plantas estudadas. A liberação deste hormônio foi mais proeminente nas plantas de C. fimbriatum do que nas de Cymbidium, o que, em princípio, poderia ser relacionado à rápida retomada da atividade meristemática nestas últimas e a manutenção da dominância apical, tendo aparentemente o oposto ocorrido com plantas de C. fimbriatum. Embora ambas originem estolões, os meristemas envolvidos comportam-se de forma distintas, podendo ser separados em três grupos. Nos primeiros dois se enquadrariam os gêneros Catasetum e Cymbidium, com inibição do crescimento foliar e formação de estolões a partir apenas da atividade do MAC (Cymbidium), ou a partir da liberação de gemas laterais (Catasetum), enquanto no terceiro grupo se enquadraria o gênero Cattleya, com manutenção do crescimento foliar e não formação de caules estiolados. / Catasetum fimbriatum (Morren) Lindl. is an epiphytic orchid that has been studied since 1990 in our Laboratory. Plants of this genus have the peculiarity of being easily propagated, using the lateral buds of its etiolated shoot. This is possible because the shoot apical meristem shows a sustained activity when kept in darkness, resulting in an expressive shoot elongation. When the etiolated nodal segments are incubated under light, they rapidly form new plants. This micropropagation process dismisses the application of any plant growth regulators, representing an efficient in vitro multiplication method. The aim of this study was to apply the existing knowledge about the physiology of dark-grown C. fimbriatum plants, to other two genera, Cymbidium and Cattleya, intending to characterize the role of ethylene, gibberellin and nitric oxide in the signaling of shoot elongation process of these plants. C. fimbriatum and Cymbidium plants were obtained by micropropagation technique, using etiolated nodal segments, whereas Cattleya plants were obtained by assimbiotic germination. After 3 months, these plants were incubated in the dark under different levels of concentration of gibberellin (GA), ethylene, nitric oxid (NO), paclobutrazol (PA, inhibitor of gibberellin biosynthesis) and 1-methylcyclopropene (1-MCP, inhibitor of ethylene perception),. After 30 and 60 days, the treatments effects were measured through the number of nodal segments of the stolons, shoot size, and wet and dry mass. Ethylene and CO2 contents were determined using gas chromatography. The three studied genera showed different responses to dark incubation and treatments. Cattleya was not able to recover shoot apical meristem (SAM) activity and its phenotype remained unaltered, maintaining foliar growth until the end of the treatment. C. fimbriatum originated stolons from the base of the pseudobulb, forming etiolated shoots. On the other hand, Cymbidium showed a different meristematic activity, giving rise to an elongated stem from the apical end of the pseudobulb within the first 30 days of the experiment. GA promoted a significant increase in stem elongation in C. fimbriatum whereas in Cymbidium plants this parameter was inhibited at the highest level of hormone. PA and 1-MCP reduced stem elongation in both C. fimbriatum and Cymbidium plants. Ethylene treatment increased the development of lateral buds and their branching in C. fimbriatum and increased the size of Cymbidium etiolated stem and the number of node segments. The most conspicuous effects of the application of NO occurred after 30 days of treatment, increasing shoot elongation and number of node segments in C. fimbriatum and reducing these parameters in Cymbidium plants. With regard to ethylene and CO2 emission the different genera presented different responses. C. fimbriatum, Cattleya and Cymbidium showed increasing hormone liberation within the ethylene treatments. Furthermore, C. fimbriatum showed conspicuously higher ethylene and CO2 emission than Cymbidium plants. When incubated in the absence of light, the three orchid genera showed distinct behavior, separated into three groups: (1) etiolated stem formation only from SAM activity, and development of reduced leaves (Cymbidium) (2) etiolated stem formation from lateral buds and development of reduced leaves (C. fimbriatum), (3) absence of etiolated stems, with maintenance of foliar growth (Cattleya).