Tese de mestrado integrado. Engenharia Civil (Especialização em Construções). Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2009

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4596_1.pdf: 577464 bytes, checksum: 8a439febcc1913ee85c78e14e227bd43 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Há uma crescente demanda pelo monitoramento in situ da interação antígeno-anticorpo. Os imunossensores baseados nessa interação têm atraído grandes interesses nos anos recentes e em várias áreas. Para essa finalidade têm sido empregados numerosos sensores, como óptico, piezoelétrico e eletroquímico. Dentre eles, o capacitivo tem sido investigado com alta sensibilidade. Os imunossensores capacitivos são baseados nas mudanças das propriedades dielétricas, distribuição de cargas, dimensão e forma do complexo antígeno-anticorpo formados na superfície do eletrodo. Estes dispositivos apresentam como principais vantagens pouco influência de correntes farádicas e a falta da necessidade de marcação. Neste trabalho, uma nova plataforma de imunossensor capacitivo baseado em dispositivos interdigitados foi proposta, na tentativa de reduzir os custos na produção em massa de eletrodos. Em adição, suportes de alumínio foram empregados para imobilização de IgG usando monocamadas autoorganizadas (SAMs) e sua eficiência avaliada através de métodos enzimáticos.Os microeletrodos foram obtidos pela evaporação térmica de alumínio sobre o substrato de silicone (Si/SiO/Al), seguidos por posterior recozimento com a finalidade de executar um contato ôhmico entre os dois filamentos (área de aproximadamente 3mm2). O microeletrodo proposto foi acoplado a um analisador de parâmetro (Hewllet-Packer,USA) para medidas potentiostáticas da capacidade. A superfície do sensor capacitivo foi composta pela formação de monocamadas de tióis e subseqüente imobilização dos anticorpos. Como modelo de anticorpos foi usado imunoglobulinas G (Anti-IgG). A SAM sobre os eletrodos foi obtido pela imersão em uma solução do cisteamina (25mM) seguidos pelo glutaraldeído para ligação com anti-IgG imobilizado. A resposta capacitiva da imobilização foi proporcional à quantidade do IgG ligados ao anti-IgG imobilizado. Esta plataforma desenvolvida poderá ser aplicada para diversos sistemas de imunoensaio devido à rapidez e ao custo baixo que oferece. Este trabalho abre perspectivas para o desenvolvimento de imunossensores aplicados à saúde humana e animal, no diagnóstico ambiental e outros ensaios baseados na interação antígenoanticorpo

Tese de doutoramento. Engenharia Mecânica. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2009

Proteínas Inativadoras de Ribossomos (RIPs) são rRNA N-glicosilases capazes de inibir a síntese protéica pela remoção de uma adenina específica do RNA ribossomal. São geralmente classificadas em tipo 1 e tipo 2, sendo as últimas divididas em altamente tóxicas e não tóxicas. A maior parte das RIPs tipo 2 identificadas pertence a espécies de dicotiledôneas, como é o caso da pulchellina. As cadeias tóxicas das RIPs possuem uma região C-terminal hidrofóbica conservada, a qual se atribui a capacidade de interação com a membrana do retículo endoplasmático (RE), durante o transporte retrógrado da toxina para o citosol. Neste trabalho duas abordagens diferentes foram aplicadas para o estudo das RIPs tipo 2: identificação e caracterização de novos integrantes desta família de proteínas, e investigação da interação da cadeia-A da pulchellina (PAC) com sistemas miméticos da membrana celular. Na primeira abordagem, uma busca in silico em bancos de dados genéticos públicos permitiu identificar quatro novas RIPs do tipo 2 de monocotiledôneas. A análise da estrutura primária das proteínas identificadas mostrou a ocorrência de mutações em alguns dos principais aminoácidos que formam o sítio ativo nas RIPs, indicando uma possível perda de função. O representante de Saccharum officinarum (cana-de-açúcar) foi então analisado em maior detalhe, sendo sua cadeia-A clonada (soRIPA), expressa em sistema heterólogo e caracterizada em termos de atividade e estrutura secundária. Os ensaios in vitro mostraram que a soRIPA não foi capaz de depurinar ribossomos eucariotos. Porém, os ensaios de inibição da síntese proteica mostraram uma possível atividade inibitória da soRIP, que precisa ainda ser confirmada. A presença dos transcritos no banco do SUCEST sugere que estes genes não sejam pseudogenes, embora não tenha sido possível purificar a proteína a partir de extratos de folhas. Isto indica que se a soRIP está sendo traduzida, deve sofrer um rápido turnover, tornando difícil a sua detecção e purificação ou, ainda, que a ausência de sítios de ligação à galactose funcionais na cadeia-B impediu sua purificação por cromatografia de afinidade à galactose. A outra abordagem no estudo das RIPs tipo 2 foi centrada na cadeia-A recombinante da pulchellina (rPAC), estudando sua interação com monocamadas de Langmuir. Foram construídos 3 mutantes da rPAC, cada um com diferentes deleções na região C-terminal visando determinar a região responsável pela interação com a membrana do RE. A cinética de adsorção e pressão superficial exercida pela rPAC sobre a monocamada, assim como o estudo com os mutantes demontraram que a proteína interage fortemente com a monocamada fosfolipídica e que esta interação in vitro é dependente da presença da região C-terminal. De forma geral, os resultados obtidos neste trabalho contribuíram com novas informações sobre esta família de proteínas, identificando e analisando novos integrantes e, ainda, adicionando detalhes do mecanismo funcional do tráfego das toxinas RIPs. / Ribosome Inactivating Proteins (RIPs) are rRNA N-glycosilases which are able to inhibit the protein synthesis by removing a specific adenine from the ribosomal RNA. They are usually classified as type 1 and type 2, being the latter divided into highly toxic and nontoxic. The majority of type 2 RIPs currently identified are found in species of dicotyledons, as the pulchellin. The toxic chain of RIPs has a conserved hydrophobic C-terminal region, which is believed to be responsible for the interaction with the lipid membrane of the endoplasmic reticulum ER during the retrograde transport of the toxin to the cytosol. In this work, two different approaches were applied in the study of type 2 RIPs: identification and characterization of new members of this protein family, and investigation of the interaction of the pulchellin\'s A-chain (PAC) with systems that mimic the cellular membrane. In the first approach, an in silico search in public genetic databases was performed and allowed us to identify four new type 2 RIPs in monocots. The primary structure analysis of the identified proteins showed the presence of mutations in key amino acids that form the active site of RIPs, indicating a possible interference on its catalytic activity. The representative of Saccharum officinarum (sugar cane) was then analyzed in greater detail. Its A-chain clone (soRIPA) was expressed in a heterologous system and characterized in terms of activity and secondary structure. In vitro experiments showed that soRIPA was not able to perform the depurination of eukaryotic ribosomes. However, the inhibition of protein synthesis assays presented a possible low inhibitory activity of the soRIP, which still needs to be further investigated. The presence of transcripts on the bank of SUCEST indicates that these genes are not pseudogenes, although it was not possible to purify the protein from leaf extracts. If the soRIP is being translated, this may indicate that it undergoes a quick turnover, preventing its detection and purification. It is also possible that the absence of functional galactose binding sites in the B-chain has prevented its purification by galactose affinity chromatography. Our second approach to the study of type 2 RIPs was focused on the recombinant pulchellin A-chain (rPAC), by investigating its interaction with Langmuir monolayers. We have constructed three mutants of rPAC, each one with different deletions at the C-terminal to determine the region responsible for interaction with the membrane of the ER. The adsorption kinetic and surface pressure applied by rPAC on the monolayer, as well as the study of the mutants, have demonstrated that the protein has a strong interaction with the phospholipid monolayer and that this interaction in vitro is dependent on the presence of the C-terminal. The results of this work have provided new information about the type 2 RIP protein family, identifying and analyzing new members, and also bringing new details about the functional mechanism of the RIP\'s toxin traffic.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2170.pdf: 3787702 bytes, checksum: e49e823ecb1a8ed7966faacafdad327e (MD5) Previous issue date: 2008-07-18 / Financiadora de Estudos e Projetos / In this study a model that makes possible to foresee the limit of modifier oxide of surface that results in the complete support coating with a unit cells monolayer was proposed. From such limit, the lattice of the modifying material should be formed. According to the proposal, the identification of the crystalline phase of the modifier for coating levels lower than the delimited can be an indication that the deposition method adopted does not result in high dispersion. The model s applicability was demonstrated in aluminas coating with zirconium oxide by using a resin obtained through the polymeric precursors method for dispersion of modifier. The characterization results for X-ray diffraction (DRX) presented excellent correlation with the diagram built from the model. Concentrations maps obtained by energy dispersive x-ray spectroscopy (EDS) evidenced that the modifier deposition occurs on the support. Through high resolution transmission electron microscopy (HRTEM) analysis a monophase material (alumina) without indication of amorphous phase was observed below the saturation limit. Above the limit, two different lattice parameters were observed in the images, being one associated to the alumina and other to the tetragonal zirconium oxide. X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) analyses proved that the increase in the zirconium oxide concentration is accompanied by enrichment of the surface by the modifier due to the coating formation. With this technique a strong support-coating interaction, with formation of Al-O-Zr bonds, was also detected. X-ray absorption spectroscopy (XAS) analyses reinforced the argument that the lattice was formed for concentrations above the saturation limit proposed in the model. A better dispersion was evidenced using multiple steps for dispersion of the modifier. Zeta potential measurements indicated attractive interactions more intense between support and resin than between modifier and resin, which explain the better dispersion possible when multiple steps were used. / Neste estudo foi proposto um modelo que possibilita prever o limite de óxido modificador de superfície que resulta no completo recobrimento de um suporte com uma monocamada de células unitárias. A partir de tal limite, deve ser formada a rede cristalina do material modificador. De acordo com a proposição, a identificação da fase cristalina do modificador para teores de recobrimento inferiores ao delimitado, é um indício que o método de deposição adotado não resulte em elevada dispersão. A aplicabilidade do modelo foi demonstrada no recobrimento de aluminas por óxido de zircônio, utilizando uma resina obtida via método dos precursores poliméricos. Os resultados de caracterização por difração de raios X (DRX) apresentaram excelente correlação com o diagrama construído a partir do modelo. Mapas de concentrações obtidos por espectroscopia de dispersão de energia (EDS), evidenciaram que a deposição do modificador ocorre sobre o suporte. Através de análise por microscopia eletrônica de transmissão de alta resolução (HRTEM) observou-se, abaixo do limite de saturação, um material monofásico (alumina) sem indício de formação de fase amorfa. Acima do limite, dois parâmetros de rede distintos foram observados nas imagens, sendo um associado à alumina e outro ao óxido de zircônio tetragonal. Análises de espectroscopia fotoeletrônica de raios X (XPS) comprovaram que o aumento na concentração de zircônia é acompanhado do enriquecimento da superfície pelo modificador devido à formação do recobrimento. Com esta técnica detectou-se também uma forte interação suporte-recobrimento com formação de ligações Al-O-Zr. Análises de espectroscopia de absorção de raios X (XAS) reforçaram o argumento de que a rede cristalina foi formada para concentrações acima do limite de saturação proposto no modelo. Uma melhor dispersão do modificador sobre o suporte foi evidenciada quando o método de múltiplas etapas de deposição foi utilizado. Medidas de potencial zeta indicaram interações atrativas mais intensas entre suporte e resina frente à interações modificador e resina, o que explica a melhor dispersão obtida ao se utilizar múltiplas etapas de deposição.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-06-14T20:19:26Z No. of bitstreams: 1 EriemAllyneMedeirosAzevedo_DISSERT.pdf: 6333576 bytes, checksum: 4fb198cb10ff3117dbd15b989910b143 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-06-15T23:30:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 EriemAllyneMedeirosAzevedo_DISSERT.pdf: 6333576 bytes, checksum: 4fb198cb10ff3117dbd15b989910b143 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-15T23:30:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EriemAllyneMedeirosAzevedo_DISSERT.pdf: 6333576 bytes, checksum: 4fb198cb10ff3117dbd15b989910b143 (MD5) Previous issue date: 2015-12-17 / Embora que eficiente do ponto de vista t?cnico, as camadas de argamassa que constituem o revestimento tradicional de alvenaria (chapisco, embo?o e reboco) apresentam-se em contradi??o com as novas tecnologias construtivas e m?todos mais eficientes de consumo e racionaliza??o da obra. Do ponto de vista ambiental, o aproveitamento de res?duos em novos comp?sitos para a constru??o civil tem sido uma vertente de estudos em crescimento na comunidade cient?fica, podendo vir a ser uma solu??o econ?mica, em alguns casos. Assim sendo, essa pesquisa prop?e o desenvolvimento de uma argamassa para Revestimento Decorativo Monocamada (RDM), para aplica??o em fachadas, produzida em canteiro, incorporando res?duo de vidro temperado (RVT) na matriz ciment?cia, como substituto parcial do agregado. Para tanto, adotou-se a rela??o aglomerante/agregado de 1:6 (em volume), ?ndice de consist?ncia de 250mm ? 20, teores de substitui??o da areia por res?duo de vidro em 20%, 50% e 80%, e rela??o ?gua/cimento vari?vel em diversos tra?os. Foram utilizados dois aditivos, um polim?rico, ? base de estireno butadieno, e outro qu?mico, al?m da adi??o mineral de s?lica ativa e de pigmento inorg?nico nas cores vermelho, amarelo e azul. Foram realizados ensaios mec?nicos para a massa no estado fresco e endurecido, assim como para o revestimento aplicado sobre alvenaria, de modo a demonstrar a viabilidade do material. Al?m disso, verificou-se a adequabilidade do RDM ao ambiente constru?do, por meio de ensaios t?rmicos. Os resultados demonstram a exequibilidade do RDM proposto com valores expressivamente superiores, quando comparado ?s normatiza??es. Assim sendo, o estudo apresenta-se a comunidade cient?fica como um incentivo ao uso das inova??es tecnol?gicas na constru??o, aumentando o leque de alternativas dispon?veis para a produ??o habitacional, com a proposi??o de um material que alcan?a as funcionalidades pretendidas e obt?m ganho ambiental, podendo ser adotado em canteiros de obras, em contrapartida as argamassas industrializadas. / Although efficient from a technical point of view, mortar layers that make up the traditional masonry coating (slurry mortar, plaster and plaster) have to be in contradiction with the new construction technologies and more efficient methods of consumption and work rationalization. From an environmental point of view, the recovery of waste into new composites for the building has been a growing strand of studies in the scientific community, may prove to be a cost-effective solution in some cases. Thus, this research proposes the development of a mortar Decorative Coating Monolayer (RDM), for use in facades, produced on site, incorporating tempered glass waste (RVT) in the cement matrix, as a partial substitute for aggregate. Therefore, we adopted the binder respect / aggregate of 1: 6 (by volume), consistency index 250mm ? 20, sand substitution levels of glass waste 20%, 50% and 80% and relative water / cement varied in many traits. Two additives were used, a polymer, styrene-butadiene-based, and other chemical, besides mineral and silica fume inorganic pigment in colors red, yellow and blue. Mechanical tests were carried out on fresh pasta and hardened, as well as for the applied coating on masonry, so as to demonstrate the feasibility of the material. In addition, it verified the adequacy of the RDM built environment by means of thermal tests. The results demonstrated the feasibility of the proposed RDM with significantly higher values when compared to norms, especially the dash-added replacement content of 20% and addition of pigment in red. Therefore, the study shows the scientific community as an incentive to the use of technological innovations in construction, increasing the range of alternatives available for housing production, with the proposition of a material that achieves the desired functionality and obtain environmental gain, and may be adopted on construction sites as an alternative industrialized mortars.

Proteínas Inativadoras de Ribossomos (RIPs) são rRNA N-glicosilases capazes de inibir a síntese protéica pela remoção de uma adenina específica do RNA ribossomal. São geralmente classificadas em tipo 1 e tipo 2, sendo as últimas divididas em altamente tóxicas e não tóxicas. A maior parte das RIPs tipo 2 identificadas pertence a espécies de dicotiledôneas, como é o caso da pulchellina. As cadeias tóxicas das RIPs possuem uma região C-terminal hidrofóbica conservada, a qual se atribui a capacidade de interação com a membrana do retículo endoplasmático (RE), durante o transporte retrógrado da toxina para o citosol. Neste trabalho duas abordagens diferentes foram aplicadas para o estudo das RIPs tipo 2: identificação e caracterização de novos integrantes desta família de proteínas, e investigação da interação da cadeia-A da pulchellina (PAC) com sistemas miméticos da membrana celular. Na primeira abordagem, uma busca in silico em bancos de dados genéticos públicos permitiu identificar quatro novas RIPs do tipo 2 de monocotiledôneas. A análise da estrutura primária das proteínas identificadas mostrou a ocorrência de mutações em alguns dos principais aminoácidos que formam o sítio ativo nas RIPs, indicando uma possível perda de função. O representante de Saccharum officinarum (cana-de-açúcar) foi então analisado em maior detalhe, sendo sua cadeia-A clonada (soRIPA), expressa em sistema heterólogo e caracterizada em termos de atividade e estrutura secundária. Os ensaios in vitro mostraram que a soRIPA não foi capaz de depurinar ribossomos eucariotos. Porém, os ensaios de inibição da síntese proteica mostraram uma possível atividade inibitória da soRIP, que precisa ainda ser confirmada. A presença dos transcritos no banco do SUCEST sugere que estes genes não sejam pseudogenes, embora não tenha sido possível purificar a proteína a partir de extratos de folhas. Isto indica que se a soRIP está sendo traduzida, deve sofrer um rápido turnover, tornando difícil a sua detecção e purificação ou, ainda, que a ausência de sítios de ligação à galactose funcionais na cadeia-B impediu sua purificação por cromatografia de afinidade à galactose. A outra abordagem no estudo das RIPs tipo 2 foi centrada na cadeia-A recombinante da pulchellina (rPAC), estudando sua interação com monocamadas de Langmuir. Foram construídos 3 mutantes da rPAC, cada um com diferentes deleções na região C-terminal visando determinar a região responsável pela interação com a membrana do RE. A cinética de adsorção e pressão superficial exercida pela rPAC sobre a monocamada, assim como o estudo com os mutantes demontraram que a proteína interage fortemente com a monocamada fosfolipídica e que esta interação in vitro é dependente da presença da região C-terminal. De forma geral, os resultados obtidos neste trabalho contribuíram com novas informações sobre esta família de proteínas, identificando e analisando novos integrantes e, ainda, adicionando detalhes do mecanismo funcional do tráfego das toxinas RIPs. / Ribosome Inactivating Proteins (RIPs) are rRNA N-glycosilases which are able to inhibit the protein synthesis by removing a specific adenine from the ribosomal RNA. They are usually classified as type 1 and type 2, being the latter divided into highly toxic and nontoxic. The majority of type 2 RIPs currently identified are found in species of dicotyledons, as the pulchellin. The toxic chain of RIPs has a conserved hydrophobic C-terminal region, which is believed to be responsible for the interaction with the lipid membrane of the endoplasmic reticulum ER during the retrograde transport of the toxin to the cytosol. In this work, two different approaches were applied in the study of type 2 RIPs: identification and characterization of new members of this protein family, and investigation of the interaction of the pulchellin\'s A-chain (PAC) with systems that mimic the cellular membrane. In the first approach, an in silico search in public genetic databases was performed and allowed us to identify four new type 2 RIPs in monocots. The primary structure analysis of the identified proteins showed the presence of mutations in key amino acids that form the active site of RIPs, indicating a possible interference on its catalytic activity. The representative of Saccharum officinarum (sugar cane) was then analyzed in greater detail. Its A-chain clone (soRIPA) was expressed in a heterologous system and characterized in terms of activity and secondary structure. In vitro experiments showed that soRIPA was not able to perform the depurination of eukaryotic ribosomes. However, the inhibition of protein synthesis assays presented a possible low inhibitory activity of the soRIP, which still needs to be further investigated. The presence of transcripts on the bank of SUCEST indicates that these genes are not pseudogenes, although it was not possible to purify the protein from leaf extracts. If the soRIP is being translated, this may indicate that it undergoes a quick turnover, preventing its detection and purification. It is also possible that the absence of functional galactose binding sites in the B-chain has prevented its purification by galactose affinity chromatography. Our second approach to the study of type 2 RIPs was focused on the recombinant pulchellin A-chain (rPAC), by investigating its interaction with Langmuir monolayers. We have constructed three mutants of rPAC, each one with different deletions at the C-terminal to determine the region responsible for interaction with the membrane of the ER. The adsorption kinetic and surface pressure applied by rPAC on the monolayer, as well as the study of the mutants, have demonstrated that the protein has a strong interaction with the phospholipid monolayer and that this interaction in vitro is dependent on the presence of the C-terminal. The results of this work have provided new information about the type 2 RIP protein family, identifying and analyzing new members, and also bringing new details about the functional mechanism of the RIP\'s toxin traffic.

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-02T19:23:04Z No. of bitstreams: 1 RitaCarvalho.pdf: 1268991 bytes, checksum: 9f30de20b2377b94837ba5ffe305debe (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-02T19:23:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RitaCarvalho.pdf: 1268991 bytes, checksum: 9f30de20b2377b94837ba5ffe305debe (MD5) Previous issue date: 2016-07-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPQ) / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA) / Cardiovascular diseases (CVDs) are considered as an important cause of morbidity and premature mortality worldwide. Rapid diagnosis of CVD is extremely important to ensure the survival of the patient. Myoglobin (Mb), for its low molecular weight is quickly released in the body, resulting in high sensitivity in order to be as valuable biomarker of acute myocardial infarction (AMI). Therefore, this study aims to develop an efficient platform, sensitive and stable for the immobilization of antibodies (Ab) myoglobin applicable to the monitoring of antigens (Ag) myoglobin using surface plasmon resonance (SPR). In this sense, the cyclic voltammetry, differential pulse voltammetry and impedance spectroscopy were used in selfassembled monolayers research (SAMs) simple and mixed acid 11-mercaptoundecanoic (MUA) and 3-mercaptopropionic acid (MPA). The mixed SAM MPA / MUA 3: 1 ratio showed low resistance to charge transfer and high surface coverage. In order to investigate the SAM capacity MPA / MUA opposite the locking Ac-MB were made comparative studies for the evaluation of the interaction of Ac-MB SAM MPA / MUA well as for SAM MPA / MUA modified polyamidoamine dendrimer of generation 5 (G5 PAMAM). Then, after choosing the more sensitive platform made up AC-Mb interaction studies with different concentrations of Ag-Mb (0,001; 0,5; 0,8; 1 and 500 µg.mL-1) through immunoassay in a "sandwich". The three-dimensional structure of the dendrimer PAMAM G5 favored amplification of SPR signal as grants most accessible area for the immobilization of antibody Mb. The sandwich immunoassay amplified the interaction signal Ac / Ag Mb, with significant advantages in sensitivity immunosensor. The results show that it was possible to develop an immunosensor capable of detecting low concentrations (0.00067 μg.mL-1) Ag-Mb. In this sense, the proposed system has great potential alternative to early diagnosis, simple and fast IAM. / As doenças cardiovasculares (DCVs) são consideradas como importante causa de morbidade e mortalidade prematura em todo o mundo. O diagnóstico rápido das DCVs é extremamente importante para garantir a sobrevivência do paciente. A mioglobina (Mb), por seu baixo peso molecular, é rapidamente liberada no organismo, resultando em elevada sensibilidade de forma a se constituir como precioso biomarcador de infarto agudo do miocárdio (IAM). Portanto, este trabalho tem por objetivo o desenvolvimento de uma plataforma eficiente, sensível e estável para a imobilização de anticorpos (Ac) de mioglobina aplicável ao monitoramento de antígenos (Ag) de mioglobina empregando ressonância de plásmons de superfície (SPR). Neste sentido, as técnicas de voltametria cíclica, voltametria de pulso diferencial e impedância eletroquímica foram empregadas na investigação de monocamadas auto-organizadas (SAMs) simples e mistas de ácido 11-mercaptoundecanóico (MUA) e ácido 3-mercaptopropiônico (MPA). A SAM mista MPA/MUA de proporção 3:1 apresentou baixa resistência à transferência de carga e elevada cobertura de superfície. Com o propósito de investigar a capacidade da SAM de MPA/MUA frente à imobilização de Ac-Mb foram feitos estudos comparativos para a avaliação da interação da do Ac-Mb com a SAM de MPA/MUA bem como para a SAM de MPA/MUA modificada com dendrímero de poliamidoamina de geração 5 (PAMAM G5). Em seguida, após a escolha da plataforma mais sensível, fez-se os estudos da interação do Ac-Mb com diferentes concentrações do Ag-Mb (0,001; 0,5; 0,8; 1 e 500 µg mL-1) através de imunoensaio em formato “sanduíche”. A estrutura tridimensional do dendrímero PAMAM G5 favoreceu a amplificação do sinal de SPR, pois concede uma maior área acessível para a imobilização do anticorpo da Mb. O imunoensaio em sanduíche amplificou o sinal de interação Ac/Ag da Mb, apresentando vantagens significativas na sensibilidade do imunossensor. Os resultados mostram que foi possível desenvolver um imunossensor capaz de detectar baixas concentrações (0,00067 µg.mL-1) do Ag-Mb. Neste sentido, o sistema proposto apresenta grande potencial alternativo de diagnóstico precoce, simples e rápido do IAM.

Submitted by Bruna Rodrigues (bruna92rodrigues@yahoo.com.br) on 2016-09-21T11:45:38Z No. of bitstreams: 1 TeseRMLS.pdf: 5636372 bytes, checksum: d688285b419cdff8c436ade8ebc7728f (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-21T18:21:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseRMLS.pdf: 5636372 bytes, checksum: d688285b419cdff8c436ade8ebc7728f (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-21T18:21:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseRMLS.pdf: 5636372 bytes, checksum: d688285b419cdff8c436ade8ebc7728f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-21T18:21:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseRMLS.pdf: 5636372 bytes, checksum: d688285b419cdff8c436ade8ebc7728f (MD5) Previous issue date: 21-11-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Compact models of ionized and nonionized Langmuir monolayers of stearic acid adsorbed on the water were simulated by means of atomistic molecular dynamics. The electrostatic, structural and dynamic properties of the molecules of models were studied throughout time evaluating the calculated trajectory. The structural analyses indicate a significant increase of the water density at the interface in comparison to the bulk aqueous phase. These results also showed that the water molecules near the interface orient hydrogen atoms toward to organic phase. The distribution of water molecules at interface neutralizes partially the charges of the polar group of stearic acid, reducing the contribution of this group of the electrostatic potential in the monolayer. The charge densities indicated two possible mechanisms of partial charges neutralization on the head of stearic acid. At low stearate concentrations, the water had the highest positive charge density contribution at the interface. However, the positive charge density is predominantly derived from monovalent ions of sodium at electrical double layer, for the monolayers with more than 30 % of the stearate in the organic phase. It was observed that water molecules at the interface have lower mobility than the bulk aqueous phase, especially those coordinating around the carbonyl group and the stearate of the organic phase. / Modelos de monocamadas de Langmuir compactas de ácido esteárico ionizados e não ionizado adsorvido sobre água, foram simulados por dinâmica molecular atomística. As propriedades eletrostática, estrutural e dinâmica das moléculas dos modelos foram estudadas ao longo do tempo avaliando as trajetórias calculadas. As análises estruturais indicam um aumento significativo da densidade de água na interface das monocamadas parcialmente ionizadas em comparação ao interior da fase aquosa, também observou-se que as águas na interface orientam os hidrogênios preferencialmente em direção à interface. A distribuição das moléculas de água na interface neutraliza parcialmente as cargas do grupo polar do ácido esteárico, provocando à redução da contribuição desse grupo no potencial eletrostático do monocamada. As análises das densidades de cargas, indicaram dois possíveis mecanismos de neutralização parcial das cargas na cabeça do ácido esteárico. Em baixas concentrações de estearato, as moléculas de água apresentaram a maior contribuição de densidade de carga positiva na interface. Contudo, a densidade de carga positiva é predominantemente proveniente dos íons monovalentes de sódio da dupla camada elétrica, para as monocamadas com mais de 30 % de estearato na fase orgânica. Observou-se ainda que as moléculas de água apresentam mobilidade relativamente menor na interface do que no seio da fase aquosa, em especial as que se coordenaram aos grupos carbonila e estearato da fase orgânica.

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-09-28T16:02:22Z No. of bitstreams: 1 ILZA MARIA DO NASCIMENTO BRASILEIRO - DISSERTAÇÃO PPGEQ 1999..pdf: 7639390 bytes, checksum: b724d32e2a6b516b75a4b5d4b5ba3a6f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-28T16:02:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ILZA MARIA DO NASCIMENTO BRASILEIRO - DISSERTAÇÃO PPGEQ 1999..pdf: 7639390 bytes, checksum: b724d32e2a6b516b75a4b5d4b5ba3a6f (MD5) Previous issue date: 1999-03-26 / Capes / Cultivada há mais de cinquenta anos aqui no Brasil e com potencial em ácido ascórbico cem vezes superior ao da laranja, a acerola (Malpighia emarginata DC) poderia vir a ser a solução natural para a obtenção da vitamina C nacional. A maioria dos produtos vegetais são constituídos por mais de 80% de água, sendo facilmente perecíveis. A acerola possui um teor de umidade em torno de 90%. Como todas as frutas, grande parte da colheita de acerola é comercializada "in natura", havendo, portanto necessidade de um processo que possibilite sua armazenagem e comercialização por um maior período de tempo. A secagem é um dos procedimentos mais importantes de conservação de alimentos, por diminuição de sua atividade de água, evitando a deterioração sob a ação de fungos e outros microorganismos. Neste trabalho foi estudada a cinética de secagem de acerola "in natura" em monocamada utilizando um secador em escala de laboratório. Foi analisado o efeito da temperatura do ar de secagem entre 60 - 90°C, velocidade do ar de secagem entre 0,7 - 1,5m/s e também o encolhimento e a degradação da cor da acerola. Nos experimentos, comprovou-se que a velocidade do ar pouco influência na taxa de secagem, mas um considerável aumento da taxa de secagem foi obtido com o aumento da temperatura do ar de secagem. Observou-se o encolhimento e a degradação da cor da acerola, ao longo do processo de secagem, através de fotografias. Foram propostas equações empíricas para descrever a cinética de secagem de acerola, incluindo o efeito de encolhimento. / The West Indian cherry {Malpighia emarginata DC) also called acerola, has been cultivated in Brazil since more than fifty years ago. It has an ascorbic acid content a hundred time greater then the orange's one. Then, the West Indian cherry could be the natural solution to national vitamin C production. Almost ali of the vegetable products are constituted by more than 80% water. Because of this high moisture content they are very perishable. The West Indian cherry has a moisture content by about 90%. A great portion of the West Indian cherry harvest is commercialized "in natura", needing a process to storage and trade for a longer time period. The drying is one of the most important procedures to preserve foods, by decreasing their water activity, avoiding the deterioration under the fungi and other microorganisms action. In this work it was studied the drying kinetics of the West Indian cherry "in natura" in mono layer, using a laboratory scale dryer. The effect of the drying air temperature between 60 - 90°C, drying air velocity between 0,7 - 1,5 m/s and also the shrinkage and degradation of West Indian cherry color were analyzed. In the experiments, it was confirmed that the air velocity has a little effect on the drying rate. Nevertheless, the drying rate is strongly affected by the air temperature, increasing significantly at high temperatures. The shrinkage and degradation of West Indian cherry color, was observed along the drying process, by means of pictures. Empiric equations to describe the West Indian cherry drying kinetics were proposed, including the shrinkage effect.