Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2018. / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq). / O gênero Colletotrichum reúne vários dos principais patógenos do morangueiro. Devido à sua agressividade elevada e a capacidade de infectar vários tecidos da planta, ocasionando antracnose, podridão da coroa e flor preta, o gênero é responsável por prejuízos econômicos constantes nas regiões produtoras. Várias espécies de Colletotrichum são associadas às doenças em diferentes partes da planta e sua identificação precisa é fundamental para a recomendação de estratégias de controle eficientes. No Brasil, apenas a espécie C. siamense já foi identificada utilizando uma abordagem molecular, não havendo informação sobre as espécies que ocorrem nas demais regiões produtoras, incluindo o Distrito Federal, onde o cultivo do morangueiro é uma atividade agrícola de considerável importância econômica. Assim, os objetivos desse trabalho foram: (i) determinar espécies de Colletotrichum que ocorrem no morangueiro com ênfase no Distrito Federal, Brasil; (ii) estabelecer as relações filogenéticas entre as espécies de Colletotrichum associadas aos diferentes tecidos da planta. Foram realizadas coletas de frutos, flores e coroas de morangueiro apresentando sintomas típicos da infecção por Colletotrichum em propriedades de Brazlândia e Recanto das Emas no Distrito Federal; Atibaia em São Paulo; São Francisco de Paula no Rio Grande do Sul; Castelo e Domingos Martins, no Espírito Santo; Goianápolis e Padre Bernardo, no Goiás. Foram obtidos 52 isolados de Colletotrichum spp. dos quais o DNA total foi extraído. A amplificação e sequenciamento da região gênica GAPDH foi realizado para todos isolados para identificação prévia. As regiões gênicas ITS e β-tubulina de nove isolados representativos foram amplificadas e sequenciadas para identificação e análise filogenética. Foram identificadas as espécies C. nymphaeae e C. tamarilloi, sendo este o primeiro relato de C. nymphaeae causando antracnose e flor preta em morangueiro no Brasil e o primeiro relato de C. tamarilloi associado ao morangueiro no mundo. Quatro isolados pertencentes ao complexo C. acutatum não puderam ser inequivocamente identificados ao nível de espécie. / The genus Colletotrichum gathers several of the main strawberry pathogens due to the genus high aggressiveness and the ability to infect several plant tissues, causing anthracnose, crown rot and flower blight, and is responsible for constant economic losses in the growing regions worldwide. Several species of Colletotrichum are associated with strawberry diseases in different parts of the plant, and thus, the precise identification of Colletotrichum is essential for the recommendation of efficient control strategies and reduction of residues of agrochemicals in the commercialized fruits. Therefore, the objectives of this project are (i) to determine the species of Colletotrichum occurring in the strawberry plants in Brazil, with emphasis in the Distrito Federal; (ii) to establish the phylogenetic and pathogenicity relationships among Colletotrichum genotypes associated with different plant tissues. Fruit, flowers and strawberry crowns showing typical symptoms of Colletotrichum infection were collected in growing properties in the administrative regions Brazlândia and Recanto das Emas in Distrito Federal; in the municipalities of Atibaia in São Paulo; São Franciso de Paula in Rio Grande do Sul; Castelo and Domingos Martins, in Espírito Santo; and Goianápolis and Padre Bernardo, in Goiás. In total, 50 isolates were obtained and had genomic DNA extracted. The amplification and sequencing of the GAPDH gene region of all the isolates was performed in order to carry out the preliminar identification. The ITS and β-tubulin gene regions of nine representative isolates were amplified and sequenced for more detailed identification and phylogenetic analysis. The species C. nymphaeae and C. tamarilloi were identified and associated with strawberry symptoms in the evaluated regions, representing the first report of C. nymphaeae causing anthracnose and flower blight in strawberry in Brazil and the first worldwide report of C. tamarilloi associated with strawberry to science. It was not possible to accurately identify four isolates of C. acutatum complex, which may belong to the species C. paranaense, C. costaricense or C. limetticola.

Orientador : Prof. Dr. Paulo H. Gorgatti Zarbin / Coorientadora : Profa. Dra. Camila Borges da Cruz Martins / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (Entomologia). Defesa: Curitiba, 16/02/2017 / Inclui referências / Área de concentração : Entomologia / Resumo: A broca-do-morangueiro, Lobiopa insularis (Coleoptera: Nitidulidae), é uma importante praga do morangueiro. Tanto larvas quanto adultos se alimentam dos frutos, inviabilizando-os para consumo e comercialização. A medida de controle mais utilizada é através de inseticidas sintéticos, que apresentam longo período de carência, baixa eficiência e alto impacto ambiental. Assim, visando minimizar o uso de inseticidas, contribuir no monitoramento da população da praga e no controle mais efetivo, objetivou-se extrair e identificar o feromônio de Lobiopa insularis e testar sua atratividade em campo. Os semioquímicos foram coletados através da técnica de aeração entre 12 a 24 horas em câmaras de vidro contendo separadamente, machos e fêmeas mais a fonte alimentar (morango). Os extratos contendo os voláteis adsorvidos foram analisados em Cromatógrafo Gasoso (CG) e CG acoplado ao espectrômetro de massas (CG-EM) e a caracterização química foi concluída através de coinjeções com os compostos sintéticos e sintético mais o extrato natural, além das comparações de Índices de Kovats (KI) e com a biblioteca do CG-EM. Armadilhas do tipo pitfall iscadas com diferentes combinações dos compostos mais a dieta (morango) foram instaladas aleatoriamente em canteiros de morangueiros para avaliar a atratividade dos compostos extraídos. Nos extratos analisados foram identificados três compostos macho-específicos, sendo duas cetonas e um álcool, 2-nonanona, 2-undecanona e 2-undecanol, respectivamente. Estes foram liberados nas quantidades de 0,3:6,03:1,5 ng/inseto/24h ou na proporção de 3:88:9, respectivamente, apenas durante a escotofase. O composto 2- undecanol apresentou a composição enantiomérica na proporção de 3,5:1, dos isômeros S e R, respectivamente. O tratamento T3 (2-undecanona + 2-nonanona + morango) diferiu dos tratamentos T2 (2-undecanona + 2-undecanol + morango), T4 (2-undecanona + morango) (P = 0,01) e T5 (hexano + morango) (P = 0,001). Nas armadilhas com iscadas, foram capturados 59% de machos e 41% de fêmeas, indicando que o feromônio de L. insularis tem função de agregação. A mistura ternária (T1) não diferiu da binária (T2) e da mistura binária de cetonas (T3). A mistura das cetonas (T3) é a mais promissora como atrativo em campo para adultos de L. insularis pela eficiência e menor custo Palavras-chave: Agregação 2-undecanona. 2-undecanol. 2-nonanona. Broca-domorangueiro. Semioquímicos. / Abstract: Lobiopa insularis (Coleoptera: Nitidulidae) is an important pest of strawberry crops. Its larvae and adults feed on strawberry fruits, damaging them for consumption and commercialization. The most used measure of control is still based on pesticides, which have long grace periods, low efficiency, and high environmental impact. In this context, aiming to minimize the use of pesticides and to contribute for the monitoring of this pest in the field using a control method that is more effective, the objectives of this study were to extract and identify the pheromone of L. insularis and to test its attractiveness to adults in the field. Semiochemicals were collected using the aeration technique in periods of collection of 12-24 hours using glass chambers containing separately males and females, and a food source (strawberry). Extracts, which contained the adsorbed volatiles, were analyzed using a gas chromatograph (GC) and a GC coupled with a mass spectrometer (GC-MS). The chemical characterization was done through co-injections with synthetic standards, and synthetic standards and the natural extract, besides comparisons of Kovats Indices and the GC-MS library. Pitfall traps baited with different combinations of the identified compounds plus the food source (strawberry) were installed randomly in the crops to evaluate the attractiveness of the extracted compounds. The extracts showed the presence of three male specific compounds, identified as two ketones and an alcohol, 2-nonanone, 2-undecanone and 2-undecanol, respectively. These compounds were emitted in quantities of 0.3:6.03:1.5 ng/insect/24h or in proportions of 3:88:9, respectively, only during scotophase. The compound 2-undecanol presented its enantiomeric composition in a proportion of 3.5:1, of the isomers S and R, respectively. Treatment T3 (2-undecanone + 2-nonanone + strawberry) was different from treatments T2 (2-undecanone + 2-undecanol + strawberry), T4 (2- undecanone + strawberry) (P = 0,01) and T5 (hexane + strawberry) (P = 0,001). Pitfall traps captured 59% of males and 41% of females, indicating that the pheromone of L. insularis has an aggregation function. The ternary mixture of compounds (T1) did not differ from the binary mixture (T2) and from the binary mixtre of ketones (T3). The binary mixture of ketones (T3) is the most promising attractant mixture to use in the field to capture adults of L. insularis because of its efficiency and reduced cost. Keywords: Aggregation. 2-undecanone. 2-undecanol. 2-nonanone. Strawberry sap beetle. Semiochemicals.

Orientadora : Profª Drª Ida Chapaval Pimentel / Coorientadora : Maria Aparecida Cassilha Zawadneak / Coorientadora : Patricia do Rocio Dalzoto / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 26/03/2014 / Inclui referências : f. 42-51 / Resumo: A lagarta-da-coroa, Duponchelia fovealis, tem causado danos nas lavouras de morangueiro, podendo levá-la à morte quando em altas infestações. Uma das possíveis alternativas para o manejo da praga é o controle biológico por fungos endofíticos que melhoram a aptidão competitiva da planta; aumentam a tolerância ao estresse abiótico e protegem contra patógenos e herbívoros. Embora muitos gêneros de fungos endófitos sejam citados como entomopatogênicos, não há trabalhos que avaliem seu potencial na cultura ao morangueiro. Este trabalho visa avaliar o potencial de fungos endofíticos isolados de folhas de morangueiro para o controle biológico de D. fovealis. Para isso, foram coletadas 400 folhas do morangueiro da cultivar 'Albion' de quatro áreas de cultivo no Município de São José dos Pinhais e Pinhais, Paraná - Áreas A, B (cultivo orgânico); C, D (cultivo convencional). As folhas passaram por um processo de desinfecção superficial, foram cortadas em fragmentos de 1cm2 e depositadas em 400 placas de Petri contendo meio de cultura BDA acrescido de tetraciclina. As placas foram incubadas a 27 ±2ºC por 30 dias. Os fungos foram identificados com base na macro e micromorfologia. Foram isoladas 517 colônias, o que equivale à taxa de colonização de 32,10%. A área A, por empregar práticas agroecológicas por um longo período, apresentou números significativamente superiores de colônias isoladas em relação às demais. Treze gêneros foram identificados Cladosporium, Aspergillus, Nigrospora, Fusarium, Trichoderma, Chaetomium, Alternaria, Paecilomyces, Penicillium; Ulocladium, Biopolaris, Lecanicillium e Phoma. Para os bioensaios de virulência contra lagartas de 3° ínstar de D. fovealis foram selecionados oito isolados pertencentes aos gêneros: Aspergilus, Lecanicillium, Paecilomyces e Cladosporium. A mortalidade das lagartas entre os tratamentos com os fungos na concentração1,0 x 108 esporos/mL variou entre 54 e 98%, os fungos mais virulentos pertencem ao gênero Fusarium e Paecilomyces. O isolado Paecilomyces (G41) foi selecionado para ser empregado em bioensaios para determinação da concentração letal (CL50). Foram testadas cinco concentrações diferentes (104, 105, 106, 107 e 108) sobre as lagartas de 3° instar de D. fovealis, obtendo-se uma CL50 de 4,7x108esporos por mL. Palavras- chave: Fragaria x ananassa. Controle microbiano. Lagarta-da-coroa. / Abstract: The European pepper moth, Duponchelia fovealis has caused damage to strawberry crops by drilling the crown of the plant area, with progressive drying of leaves and can take her to death while in high infestations . One of the alternatives for pest anagement is biological control fungal endophytes that improve the competitive ability of the plant; increased tolerance to abiotic stress and protect against pathogens and herbivores. Although many genera of endophytic fungi are cited as entomopathogenic , no studies assessing its potential in the strawberry crop . This study aims to evaluate the potential of endophytic fungi isolated from strawberry leaves for the biological control of D.fovealis. For this, 400 were collected in strawberry leaves ' Albion ' four growing areas in the city of Pinhais , Paraná areas A, B (organic cultivation) C , D (conventional farming). Leaves have undergone a process of surface disinfection were cut into 1cm2 pieces and placed in a Petri dish containing 400 PDA culture medium plus tetracycline (100 ?g.mL -1). plates were incubated at 27 ± 2 °C for 30 days. fungi were identified based on macro and micromorphology. Were isolated 517, which is equivalent to the fungi colonization rate of 32.10% . The area A, to employ agroecological practices over a long period, showed significantly higher numbers of fungi isolated over others. 13 groups were identified , belonging to the genera Cladosporium , Aspergillus , Nigrospora , Fusarium , Trichoderma , Chaetomium , Alternaria , Paecilomyces , Penicillium , Ulocladium , Biopolaris , Lecanicillium and Phoma . For bioassays of virulence against larvae of 3rd instar D. fovealis were selected isolates belonging to eight genera : Aspergillus , Lecanicillium , Paecilomyces and Cladosporium . The mortality of larvae between treatments with fungi in concentração1,0 x 108 spores / mL ranged between 54 and 98 % , the most virulent fungi belong to the genus Fusarium and Paecilomyces . The isolated Paecilomyces (G41) was selected to be used in bioassays to determine the lethal concentration (LC50) . Five different concentrations (104,105 ,106,107 and 108) on the third instar larvae of D. fovealis were tested , yielding a LC50 of 4.7 x108 spores/mL. Keywords: Fragaria x ananassa. Microbial control. European pepper moth.

CAPES / O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos eliciadores acibenzolar-S-metil (ASM) e da proteína harpina em pré e pós-colheita na indução de resistência a Botrytis cinerea, causador do mofo-cinzento em morangos, e sobre outros agentes infestantes. Quatro experimentos foram conduzidos, dois deles em pré-colheita, e outros dois em pós-colheita. No primeiro experimento (1) em pré-colheita, conduzido em casa-de-vegetação, testou-se dois produtos à base de harpina (ProActTM 2,5 g L-1 com 1% do i.a., e Messenger® 0,75 g L-1 com 3% do i.a) e um à base de ASM (Bion® 500WG 0,5 g L-1 com 50% do i.a.), mais a testemunha (água destilada). Após 24 horas da segunda pulverização dos tratamentos foi realizada inoculação do fungo B. cinerea (105 conídios mL-1). Neste experimento foram avaliadas: produtividade, incidência e severidade da mancha-de-dendrofoma, flores abortadas, incidência de ácaros e incidência de frutos com mofo-cinzento, além do teor de proteínas totais, atividade da enzima fenilalanina amônia-liase (FAL), fenóis totais e taxa de assimilação de CO2. No segundo experimento (2) em pré-colheita, foram testadas doses de harpina (ProActTM 100, 200 e 300 mg L-1) e de ASM (Bion® 500 WG 100, 200, 300 e 400 mg L-1), mais a testemunha (água destilada). Após 24 horas da primeira aplicação dos tratamentos foi realizada inoculação de B. cinerea (104 conídios mL-1). Neste experimento foram realizadas avaliações para os parâmetros de produtividade, incidência de podridões e taxa de assimilação de CO2. Além disso, após a quarta aplicação dos tratamentos, foram coletados frutos para um dos experimentos (4) em pós-colheita. Foram realizados mais dois experimentos em pós-colheita, e o terceiro experimento (3) foi conduzido em parcelas subdivididas, com e sem ferimentos nos frutos. Os frutos foram pulverizados com ASM (Actigar® 50WG 5,0 mg do i.a. mL-1), dois produtos comerciais contendo proteína harpina (80 mg do i.a. L-1 - ProActTM e Messenger®) e uma testemunha (água destilada). Para o quarto experimento (4), frutos tratados em pré-colheita com 100, 200 e 300 mg L-1 ProActTM (1% de harpina), e 100, 200, 300 e 400 mg L-1 de Bion® (50% de ASM), mais a testemunha (água destilada). No experimento 3, os tratamentos foram aplicados por meio de pulverização e 12 horas após efetuou-se a inoculação do fungo B. cinerea (105 conídios mL-1). Após 48 horas da inoculação os frutos foram avaliados quanto à área lesionada e firmeza de polpa. Foi coletada amostra do material vegetal para análise do teor de proteínas totais e da atividade da FAL. Os frutos do experimento 4 foram colhidos do experimento 2, depois da quarta aplicação dos tratamentos. Após a desinfecção em HCl (1%) os frutos foram inoculados com o fungo B. cinerea (105 conídios mL-1) e passadas 96 horas foram avaliadas a área lesionada e a firmeza da polpa. Nos experimentos em pré-colheita foi observada indução de resistência à B. cinerea pelos eliciadores, inclusive com efeito de doses. No experimento 1, verificou-se maior atividade da FAL e maior acúmulo de fenóis totais, sendo estes parâmetros relacionados à redução da porcentagem de frutos podres e a menor incidência e severidade da mancha-de-dendrofoma. Em pós-colheita, no experimento 3, houve redução de área lesionada por B. cinera mediante aplicação dos eliciadores. A atividade da fenilalanina amônia-liase aumentou em relação à testemunha e foi relacionada ao maior controle do mofo-cinzento, como também, à maior firmeza de polpa. No experimento 4, também houve a redução da área lesionada, bem como o aumento da firmeza de polpa com o aumento das doses de ambos os produtos. As doses 300 e 9 400 mg L-1 de ProActTM e Bion®, respectivamente, apresentaram os menores valores de área lesionada e a dosagem de 200 mg L-1 de ambos os produtos apresentou maior firmeza de polpa. / The objective of this work was to evaluate the effects of elicitors acibenzolar-S-metil (ASM) and harpin protein in pre and post harvest in the induction of resistance against Botrytis cinerea, responsible to the gray-mold in strawberries, and about other infestent agents. Four experiments had been led, two of them in pre harvest, and other two in post harvest. The first experiment (1) in pre harvest, was carried out in a greenhouse. It was tested two products from harpin protein (ProActTM 2,5 g L-1 with 1% of i.a, and Messenger® 0,75 g L-1 with 3% of i.a) and one from ASM (0,5 Bion® 500WG g L-1 with 50% of i.a), more the control (distilled water). 24 hours after the second spraying of the treatments was carried through inoculation of B. cinerea (105 conidia mL-1). To this experiment we had also been evaluated: productivity, incidence and severity of the one leaf blight fungus (Dendrophoma obscurans), percentage of aborted flowers, incidence of mites and percentage of fruits with the gray-mold, beyond the content of total proteins, activity of the phenylalanine ammonia-lyase enzyme (PAL), total phenols and the CO2 assimilation rate. In the second experiment (2) in pre harvest, doses of harpin (ProActTM 100, 200 and 300 mg L-1) and of ASM had been tested (Bion® 500 WG 100, 200, 300 and 400 mg L-1), more the control (distilled water). 24 hours after the first application of the treatments inoculation of B. cinerea (104 conidia mL-1) was carried through. In this experiment evaluations for the productivity parameters, percentage of putrid fruits and the CO2 assimilation rate had been carried through. Besides that, after the fourth application of the treatments, had been collected fruits for one of the experiments (4) in post harvest. Two experiments had been led more, in post harvest, the third experiment (3) was led in subdivided parts, with and without wounds in the fruits. The fruits had been sprayed with acibenzolar-Smetil (Actigar® 50WG 5.0 mg of i.a. mL-1), two commercial products having harpin protein (80 mg of i.a. L-1 - ProActTM e Messenger®) and one control (distilled water). The fruits of experiment 4 had been harvested of experiment 2, after the fourth application of the treatments. To the fourth experiment (4), fruits in pre harvest with 100, 200 and 300 mg L-1 ProActTM (1% of harpin), and 100, 200, 300 and 400 mg L-1 of Bion® (50% of ASM), more the control (distilled water), were evaluated in post harvest. In experiment 3, the treatments had been applied by means of spraying and 12 hours after the B. cinerea fungus was inoculated (105 conidia mL-1). After 48 hours of the inoculation the fruits had been evaluated as for the injured area and pulp firmness. Sample of the vegetal material was collected for analysis of the total proteins content and the activity of the PAL. After the disinfection in HCl (1%) the fruits had been inoculated with B. cinerea fungus (105 conidia mL-1) and passed 96 hours had been evaluated the injured area and the firmness of the pulp. In the experiments in pre harvest the induction of resistance against B. cinerea was observed by the use of elicitors, including with effect of doses. In experiment 1, it was verified bigger activity of the PAL and bigger accumulation of total phenols, being these parameters related to the reduction of the 11 percentage of rotten fruits and the smaller incidence and severity of the one leaf blight. In post harvest, in the experiment 3, there was reduction of injured area by B. cinerea through the application of the elicitors. Plants sprayed with the elicitors increased the activity of phenylalanine ammonia-lyase and it was related to the biggest control of the gray mold, as well as, the biggest pulp firmness. In experiment 4, there was also had the reduction of the injured area, as well as the increase of the pulp firmness with the increase of the doses of both the products. The doses of 300 and 400 mg L-1 of ProActTM and Bion®, respectively, had presented the smaller values of injured area, and the dosage of 200 mg L-1 of both the products presented greater pulp firmness.

O mofo cinzento é causado pelo fungo Botrytis cinerea (Pers.: Fr.), causador de grandes perdas econômicas em várias culturas. Este patógeno é de difícil controle, devido à ampla gama de hospedeiros, sua atividade saprófita e por formar estruturas de resistência (escleródios). Uma das formas de controle deste patógeno é a utilização de produtos químicos, no entanto, principalmente na pós-colheita de frutos, a tolerância por resíduos químicos nos alimentos, é cada vez menos desejável do ponto de vista ecológico e de saúde pública. Os tratamentos alternativos, como a utilização de extratos de plantas, vêm sendo pesquisados na fitopatologia, para reduzir o uso dos fungicidas sintéticos. A canola (Brassica napus) é uma planta que possui compostos biocidas, com potencial de controle de pragas e doenças. Este trabalho teve como objetivos avaliar o efeito de diferentes extratos da canola (alcoólico, macerado, aquoso sem tempo de reserva e infusão) no controle de Botrytis cinerea in vitro e em pós-colheita de morangos. Foram realizados dois experimentos in vitro, sendo um para avaliar o crescimento micelial e outro a germinação de conídios. O delineamento experimental para os dois experimentos foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 4 x 5, sendo o fator modos de extração de extratos e concentrações (0, 3, 6, 9 e 12%), em 4 repetições. No ensaio de crescimento micelial, a unidade experimental foi uma placa de Petri, e um tubo de ensaio no teste de germinação de conídios. Em pós-colheita foram testados os quatro tipos de extratos na concentração de 16%. O delineamento foi inteiramente casualizado, com 4 repetições por tratamento, sendo a parcela composta por 10 frutos/bandeja. Os parâmetros físico-quimicos avaliados foram podridões, perda de massa, firmeza de polpa e acidez titulável. As análises bioquímicas avaliadas foram proteínas totais, antocianinas e flavonóides, e a atividade da enzima fenilalanina amônia-liase (FAL) e peroxidases. Os resultados obtidos permitiram concluir que houve redução do crescimento micelial e da germinação de conídios, em função das concentrações, mas não ocorreram diferenças entre os extratos. A maior eficiência dos extratos ocorreu na concentração de 8,31%, na avaliação com 96horas. Para a germinação o comportamento foi linear decrescente, ou seja, o aumento das concentrações influenciou na menor germinação dos conídios. Os extratos: alcoólico, maceração e infusão reduziram as podridões causadas por B. cinerea em pós-colheita de morangos. Os extratos atuaram na alteração do teor de acidez dos frutos, e no comportamento das peroxidases, mas não apresentaram efeito sobre sólidos solúveis totais (SST), firmeza de polpa, perda de massa, antocianinas, flavonoides,e atividade da FAL. Os resultados obtidos neste trabalho, comprovam o potencial da canola no controle do mofo cinzento em pós-colheita de morangos, bem como do fungo Botrytis cinerea. / The gray mold is caused by the fungus Botrytis cinerea (Pers.: Fr.), causer of great economic losses in various cultures. This pathogen is difficult to control, due to the wide range of hosts, its saprophytic activity and by forming structures of resistance (esclerodios). One of the ways to control this pathogen is the use of chemical products, however, mainly in post-harvest fruit, tolerance by chemical residues in foods is increasingly less desirable from an ecological and public health point of view. The alternative treatments, such as the use of plant extracts, are being probed in phytopathology, to reduce the use of synthetic fungicides. The canola (Brassica napus) is a plant that has biocidal compounds, with potential to control pests and diseases. This study aimed to evaluate the effect of different extracts of canola (alcoholic, macerate, aqueous without reserve time and infusion) in the control of Botrytis cinerea in vitro and in post-harvest of strawberries. Two experiments were conducted in vitro, being one to evaluate the mycelial growth and another the germination of conidia. The experimental design for the two experiments was completely randomized, in a 4 x 5 factorial scheme, and the modes of extraction of extracts and concentrations (0, 3, 6, 9 and 12 %), in 4 repetitions. In the trial mycelial growth, the experimental unit was a Petri dish, and a test tube in germination test of conidia. In post-harvest were tested four types of extracts at a concentration of 16 %. The experimental design was completely randomized, with 4 repetitions per treatment, being the plot composed by10 fruits/tray. The physico-chemical parameters evaluated were rotting, weight loss, firmness and titratable acidity. The biochemical analyzes were evaluated total proteins, anthocyanins and flavonoids, and the activity of the enzyme phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and peroxidases. The results obtained allowed us to conclude that there was a reduction of mycelial growth and germination of conidia, as a function of the concentrations, but there were no differences between the extracts. The greater efficiency of extracts occurred at a concentration of 8.31 %, in evaluation with 96 hours. For germination, the behavior was decreasing linear, in other words, the increase of concentrations influenced the lower germination of conidia. The extracts: alcoholic, maceration and infusion reduced the rot caused by B. cinerea in post-harvest of strawberries. The extracts operate in fruits acidity modification, and in the behavior of peroxidases, but they had no effect on total soluble solids (TSS), pulp firmness, weight loss, anthocyanins, flavonoids,and activity of the PAL. The results obtained in this work, have demonstrate the potential of canola in the control of gray mold on post-harvest of strawberries, as well as the fungus Botrytis cinerea.

O mofo cinzento é causado pelo fungo Botrytis cinerea (Pers.: Fr.), causador de grandes perdas econômicas em várias culturas. Este patógeno é de difícil controle, devido à ampla gama de hospedeiros, sua atividade saprófita e por formar estruturas de resistência (escleródios). Uma das formas de controle deste patógeno é a utilização de produtos químicos, no entanto, principalmente na pós-colheita de frutos, a tolerância por resíduos químicos nos alimentos, é cada vez menos desejável do ponto de vista ecológico e de saúde pública. Os tratamentos alternativos, como a utilização de extratos de plantas, vêm sendo pesquisados na fitopatologia, para reduzir o uso dos fungicidas sintéticos. A canola (Brassica napus) é uma planta que possui compostos biocidas, com potencial de controle de pragas e doenças. Este trabalho teve como objetivos avaliar o efeito de diferentes extratos da canola (alcoólico, macerado, aquoso sem tempo de reserva e infusão) no controle de Botrytis cinerea in vitro e em pós-colheita de morangos. Foram realizados dois experimentos in vitro, sendo um para avaliar o crescimento micelial e outro a germinação de conídios. O delineamento experimental para os dois experimentos foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 4 x 5, sendo o fator modos de extração de extratos e concentrações (0, 3, 6, 9 e 12%), em 4 repetições. No ensaio de crescimento micelial, a unidade experimental foi uma placa de Petri, e um tubo de ensaio no teste de germinação de conídios. Em pós-colheita foram testados os quatro tipos de extratos na concentração de 16%. O delineamento foi inteiramente casualizado, com 4 repetições por tratamento, sendo a parcela composta por 10 frutos/bandeja. Os parâmetros físico-quimicos avaliados foram podridões, perda de massa, firmeza de polpa e acidez titulável. As análises bioquímicas avaliadas foram proteínas totais, antocianinas e flavonóides, e a atividade da enzima fenilalanina amônia-liase (FAL) e peroxidases. Os resultados obtidos permitiram concluir que houve redução do crescimento micelial e da germinação de conídios, em função das concentrações, mas não ocorreram diferenças entre os extratos. A maior eficiência dos extratos ocorreu na concentração de 8,31%, na avaliação com 96horas. Para a germinação o comportamento foi linear decrescente, ou seja, o aumento das concentrações influenciou na menor germinação dos conídios. Os extratos: alcoólico, maceração e infusão reduziram as podridões causadas por B. cinerea em pós-colheita de morangos. Os extratos atuaram na alteração do teor de acidez dos frutos, e no comportamento das peroxidases, mas não apresentaram efeito sobre sólidos solúveis totais (SST), firmeza de polpa, perda de massa, antocianinas, flavonoides,e atividade da FAL. Os resultados obtidos neste trabalho, comprovam o potencial da canola no controle do mofo cinzento em pós-colheita de morangos, bem como do fungo Botrytis cinerea. / The gray mold is caused by the fungus Botrytis cinerea (Pers.: Fr.), causer of great economic losses in various cultures. This pathogen is difficult to control, due to the wide range of hosts, its saprophytic activity and by forming structures of resistance (esclerodios). One of the ways to control this pathogen is the use of chemical products, however, mainly in post-harvest fruit, tolerance by chemical residues in foods is increasingly less desirable from an ecological and public health point of view. The alternative treatments, such as the use of plant extracts, are being probed in phytopathology, to reduce the use of synthetic fungicides. The canola (Brassica napus) is a plant that has biocidal compounds, with potential to control pests and diseases. This study aimed to evaluate the effect of different extracts of canola (alcoholic, macerate, aqueous without reserve time and infusion) in the control of Botrytis cinerea in vitro and in post-harvest of strawberries. Two experiments were conducted in vitro, being one to evaluate the mycelial growth and another the germination of conidia. The experimental design for the two experiments was completely randomized, in a 4 x 5 factorial scheme, and the modes of extraction of extracts and concentrations (0, 3, 6, 9 and 12 %), in 4 repetitions. In the trial mycelial growth, the experimental unit was a Petri dish, and a test tube in germination test of conidia. In post-harvest were tested four types of extracts at a concentration of 16 %. The experimental design was completely randomized, with 4 repetitions per treatment, being the plot composed by10 fruits/tray. The physico-chemical parameters evaluated were rotting, weight loss, firmness and titratable acidity. The biochemical analyzes were evaluated total proteins, anthocyanins and flavonoids, and the activity of the enzyme phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and peroxidases. The results obtained allowed us to conclude that there was a reduction of mycelial growth and germination of conidia, as a function of the concentrations, but there were no differences between the extracts. The greater efficiency of extracts occurred at a concentration of 8.31 %, in evaluation with 96 hours. For germination, the behavior was decreasing linear, in other words, the increase of concentrations influenced the lower germination of conidia. The extracts: alcoholic, maceration and infusion reduced the rot caused by B. cinerea in post-harvest of strawberries. The extracts operate in fruits acidity modification, and in the behavior of peroxidases, but they had no effect on total soluble solids (TSS), pulp firmness, weight loss, anthocyanins, flavonoids,and activity of the PAL. The results obtained in this work, have demonstrate the potential of canola in the control of gray mold on post-harvest of strawberries, as well as the fungus Botrytis cinerea.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-05T13:25:49Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 442561 bytes, checksum: 436255b4a2ddd60ae47426064fb6ecb9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-05T13:25:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 442561 bytes, checksum: 436255b4a2ddd60ae47426064fb6ecb9 (MD5) Previous issue date: 2005-11-14 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / As plantas têm papel ativo no controle do processo de herbivoria pela influência sobre as populações de fitófagos e/ou de inimigos naturais, atuando diretamente sobre o comportamento dos herbívoros ou indiretamente, atraindo populações de inimigos naturais. As investigações dessa tese tiveram como objetivo estudar interações em uma teia alimentar formada pelo morangueiro, Fragaria x ananassa, pelo ácaro-rajado Tetranychus urticae Koch (Acari: Tetranychidae), pelo ácaro-vermelho Oligonychus ilicis e pelo predador Phytoseiulus macropilis. Espera-se que tais estudos sirvam de base para a definição de um programa de controle biológico de ácaros fitófagos na cultura do morangueiro em sistemas de produção orgânica ou integrada. No capítulo I, investigou-se a interação direta entre O. ilicis e T. urticae sobre plantas de morangueiro avaliando-se os padrões de escolha de O. ilicis e T. urticae por sítios de alimentação nessas plantas. Duas hipóteses foram formuladas: a primeira, que a escolha por sítios de alimentação estaria relacionada à aptidão das espécies; a segunda, que essa escolha seria determinada pela presença do ácaro heteroespecífico. Essas hipóteses foram testadas avaliando-se a preferência, a biologia e o sucesso reprodutivo de O. ilicis e T. urticae sobre as faces abaxial e adaxial de folhas de morangueiro infestadas ou não pelo heteroespecífico. Os resultados obtidos permitiram discutir a possibilidade de interação entre O. ilicis e T. urticae sobre plantas de morangueiro. No capítulo II, estudou-se em laboratório a resposta olfativa do ácaro predador P. macropilis à planta de morangueiro infestada por T. urticae e/ou por O. ilicis, com o objetivo de avaliar o efeito da infestação simples e múltipla de plantas por ácaros fitófagos sobre a atração do ácaro predador. Hipotetisou-se que, plantas de morangueiro infestadas por mais de uma espécie de ácaro fitófago seriam menos atrativas ao ácaro predador P. macropilis quando exposto aos voláteis da planta. No capítulo III, testou-se a hipótese de que o risco de predação afetaria a escolha por sítios de alimentação. Primeiramente, foi avaliado o desempenho do predador P. macropilis alimentado com adultos e ovos de O. ilicis e T. urticae. Tal informação forneceu indicativos sobre o valor nutricional dessas espécies para o predador. Em seguida, foi avaliada a escolha de T. urticae e O. ilicis por faces de folhas de morangueiro com pistas do predador P. macropilis. Previamente, era conhecido que T. urticae e O. ilicis possuem maior sucesso reprodutivo sobre as faces abaxial e adaxial de folha de morangueiro, respectivamente. Isto devido, provavelmente, à qualidade do alimento nessas respectivas faces foliares. No capítulo IV, testou-se a hipótese que plantas de morangueiro que sofressem infestações prévias por T. urticae seriam capazes de responder às injúrias com maior rapidez em comparação àquelas que não foram atacadas. As plantas que apresentam defesa direta podem reduzir o desempenho dos predadores pela redução da quantidade e qualidade de presas. Nesse caso, haveria um efeito oposto entre defesas diretas e indiretas em plantas de morangueiro. Ou seja, enquanto as defesas diretas reduzem o efeito do ataque dos fitófagos, os predadores, atraídos pelas defesas indiretas, teriam menor disponibilidade de alimento. / Plants can affect herbivores or natural enemies to reduce the effects of herbivory. This can be done directly through reduction of the population growth of herbivorous population, or indirectly, by attracting or arresting natural enemies to the plant. The interactions in a food web composed of strawberry plants, Fragaria x ananassa, the Two-Spotted Spider Mite Tetranychus urticae Koch, the Southern Red Mite Oligonychus ilicis (McGregor) (Acari: Tetranychidae) and the predatory mite Phytoseiulus macropilis have been studied. The results will provide information that is useful in defining a biological control program for spider mites on organically produced strawberries and in integrated production systems. In the first chapter, the direct interaction and choice for feeding sites of O. ilicis and T. urticae on strawberry plants are investigated, using two hypotheses: 1. the choice of feeding site is related to the fitness of the individual; 2. the choice of feeding site is affected by the presence of a heterospecific mite. The preference, biology and reproductive success of O. ilicis and T. urticae were evaluated on both sides of strawberry leaves either infested by the heterospecific mite or without previous damage. O. icilis preferred to stay on the upper side while T. urticae preferred the underside. The preference for the leaf surface correlated with the reproductive success of the species. The results provide information on the interaction between O. ilicis and T. urticae on strawberry plants. In the second chapter, the attraction of predatory mites by plants damaged by T. urticae and/or by O. ilicis was studied under laboratory conditions. The role of multiple infestations in the attraction of predatory mite was studied. In the third chapter, the hypothesis that predation risk is an important factor on food site selection by spider mites was tested. An experiment on the effect of predation risk by Phytoseiulus macropilis on the food site choice of the spider mites Tetranychus urticae and Oligonychus ilicis was carried out on strawberry plants. The performance of the predator P. macropilis fed with adults and eggs of O. ilicis and T. urticae was evaluated. The effect of pre-infestation of strawberry plants by Tetranychus urticae on the development and reproduction of the mite species was discussed in the fourth chapter. The preinfestation induced the production of direct defenses, which can reduce the population growth rate of the herbivores. Possibly, an opposite effect between direct and indirect defenses in strawberry plants could occur. Whereas direct defenses reduce the effects of herbivore attack, predators attracted by indirect defenses could have low food availability. This requires further investigation. / Não foi localizado o cpf do autor.

Made available in DSpace on 2015-03-26T12:42:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1309198 bytes, checksum: d65db94e2ef0c47a8b4a59379f09b014 (MD5) Previous issue date: 2014-01-31 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The culture of strawberry , Fragaria x ananassa Duch, has faced several problems, among which we highlight those caused by pathogens. In addition to widely known diseases such as gray mold, new diseases have caused serious damage to the crop. In order to study the various problems of strawberry culture, this study aimed to: i) identify the causal agent of a postharvest fruit rot in strawberry , ii) to study the temporal and spatial dynamics of the redness in strawberry, whose etiology is still unknown; iii) determine the species of Botrytis that cause gray mold in strawberry in Brazil iv) conduct a survey of the current situation of fungicides for control of gray mold on strawberry v) to study the sensitivity of isolates of B. cinerea to dicarboxamide and benzimidazole fungicides. In order to identify the causal agent of post harvest fruit rot of strawberry, isolates from symptomatic fruits were analyzed by morphologic and phylogenetic analyzes. After confirming the pathogenicity of the isolates, species identification as Neofusicoccum kwambonambiense and N. parvum was taken. This is the first report of the occurrence of Neofusicoccum kwambonambiense in Brazil and the first report of Neofusicoccum spp. causing rot in strawberry. By studying the pattern of temporal and spatial distribution of the redness of strawberry was conducted in four areas of commercial cultivation. With the data on incidence of disease progress curves and dispersion maps were constructed, and analysis of aggregation of plants by ordinary runs test. The results showed that the disease has a similar disease biotic distribution pattern similar to diseases which are dispersed in the row. To achieve other goals, isolates were obtained from plants with symptoms of gray mold on various properties of different cities in the states of Espírito Santo, Minas Gerais and São Paulo, totaling 200 isolates. Initially, a study was conducted to verify the occurrence of other species of Botrytis in the fields of strawberry cultivation in Brazil. For this, the extraction of DNA from all strains was performed, followed by PCR with the specific species and B. cinerea and B. caroliniana primers. Despite the morphological variation observed among isolates , all were identified as B. cinerea . The survey on the practices used to control gray mold on strawberry was performed directly with the producers, who were asked about the products used for the control of disease, efficiency of these products and use of the practice of removing diseased material . It was possible to observe many problems, especially reduced use of cultural control measures, the use of products not recommended for culture and the low level of knowledge of the farmers. Finally, the sensitivity analysis of the isolated main culture fungicides (iprodione , procymidone and thiophanate- methyl) was carried. Thus, a total of 100 isolates were grown in culture medium containing different doses of the fungicide was used. The results showed that 89% of isolates were insensitive to thiophanate-methyl fungicide, 36% to and 54% to procymidone. Considering the limited number of fungicides registered for the control of gray mold and the low sensitivity of isolates of B. cinerea to these products , it becomes difficult to manage this important disease of strawberry. / A cultura do morangueiro, Fragaria x ananassa Duch, tem enfrentado diversos problemas, dentre os quais destacam-se os causados por patógenos. Além de doenças amplamente conhecidas, como o mofo cinzento, novas doenças vêm causando sérios danos à cultura. Visando estudar os diversos problemas da cultura do morangueiro, este trabalho teve por objetivos: i) identificar o agente causal de uma podridão pós-colheita em frutos de morango; ii) estudar a dinâmica temporal e espacial do vermelhão do morangueiro, cuja etiologia é ainda desconhecida; iii) determinar as espécies de Botrytis que causam mofo cinzento em morangueiro no Brasil; iv) realizar um levantamento da situação atual do uso de fungicidas para controle do mofo cinzento do morangueiro; v) estudar a sensibilidade de isolados de B. cinerea aos fungicidas dicarboxamidas e benzimidazóis. A fim de identificar o agente causal da podridão pós-colheita de frutos de morango, isolados obtidos a partir de frutos sintomáticos foram analisados por meio de análises morfológicas e filogenéticas. Após a confirmação da patogenicidade dos isolados, foi feita a identificação das espécies como Neofusicoccum kwambonambiense e N. parvum. Este é o primeiro relato da ocorrência de Neofusicoccum kwambonambiense no Brasil e o primeiro relato de Neofusicoccum spp. causando podridão em morango. O estudo do padrão de distribuição temporal e espacial do vermelhão do morangueiro foi realizado em quatro áreas de cultivo comercial. Com os dados de incidência da doença foram construídas curvas de progresso e mapas de dispersão, além da análise de agregação de plantas pelo teste de ordinário runs. Os resultados mostraram que a doença apresenta comportamento semelhante a uma doença biótica com padrão de distribuição semelhante ao de doenças que se dispersam na linha de plantio. Para atingir os demais objetivos, foram obtidos isolados a partir de plantas com sintomas do mofo cinzento, em diversas propriedades de diferentes cidades nos estados do Espírito Santo, Minas Gerais e São Paulo, totalizando 200 isolados. Inicialmente, foi realizado um estudo para verificar a ocorrência de outra espécie de Botrytis nos campos de cultivo de morango no Brasil. Para isso, foi feita a extração de DNA de todos os isolados, seguindo-se à reação de PCR com primers específicos para as espécies B. cinerea e B. caroliniana. Apesar da variação morfológica observada entre os isolados, todos foram identificados como B. cinerea. O levantamento sobre as práticas utilizadas para controle do mofo cinzento do morangueiro foi realizado diretamente com os produtores, que foram questionados quanto aos produtos utilizados para o controle da doença, eficiência de controle dos produtos e uso da prática de retirada de material doente. Foi possível observar diversos problemas, destacando-se o reduzido uso de medidas de controle cultural, o uso de produtos não recomendados para a cultura e o baixo nível de conhecimento dos produtores. Por fim, foi realizada a análise de sensibilidade dos isolados aos principais fungicidas utilizados na cultura (iprodiona, procimidona e tiofanato-metílico). Para isso, foi utilizado um total de 100 isolados, os quais foram crescidos em meio de cultura contendo diferentes doses dos fungicidas. Os resultados mostraram que 89% dos isolados foram insensíveis ao fungicida tiofanato-metílico, 36% ao iprodiona e 54% ao procimidona. Considerando o número restrito de fungicidas registrados para o controle do mofo cinzento e a baixa sensibilidade dos isolados de B. cinerea a estes produtos, torna-se difícil o manejo dessa importante doença do morangueiro.