Made available in DSpace on 2016-04-28T20:15:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tatiana Xavier de Almeida.pdf: 937180 bytes, checksum: e0cda53e5c0c9829836d98da482b3737 (MD5) Previous issue date: 2010-02-09 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Fungal and mycotoxin contamination in food is one of the greatest problems around the world. Some natural products, such as essential oils, have been shown to be effective inhibitors of fungal growth and production of their toxins. In this study, a total of 40 vegetal extracts were tested for inhibition on Aspergillus section Flavi growth. These extracts were obtained from ten herbs cultivated in Brazil: basil (Ocimum basilicum), cinnamon (Cinnamomum zeylanicum), clove (Eugenia caryophyllata), cumin (Cuminum cyminum), marjoram (Origanum majorana), nutmeg (Myristica fragrans), oregano (Origanum vulgare), rosemary (Rosmarinus officinalis), spearmint (Mentha piperita) and sweet fennel (Pimpinella anisum). Preliminary in vitro tests using the agar diffusion method showed that essential oils were more effective in inhibiting the fungal growth when compared with ethanol and aqueous extracts. Essential oils obtained from oregano and rosemary, clove and cumin ethanolic extracts and the essential hexanic oil of oregano and cinnamon were selected for advanced tests. Differents concentrations of plant material (0, 50, 100, 150, 300 and 600 μg/g) were added to culture medium. A suspension of 103 conidia per inoculation were used. Plates were incubated for ten days while daily measurements of colony diameters were made to obtain growth rate (mm/day) and lag phase (h) of toxigenic strains. The comparison of selected essential oils effect on A. flavus and A. parasiticus showed better inhibition by incorporating oregano essential oil in the culture medium at 600 μg/g concentration. Nevertheless, the hexanic essential oil of oregano showed no statistical difference with the control group, a change occurred in the plant product due to the extraction method. Among the evaluated ethanol extracts, clove had the best result. Aspergillus flavus showed a slight reduction of growth (4.5 to 3.5 mm/day) when compared to control group, but a large increase in the latency period (37 h at a 600 μg/g concentration). Aspergillus parasiticus showed gradual decreases as increased concentrations were assayed, except for the 150 μg/g concentration, and a significant increase on lag phase at the highest concentrations tested (45 and 48 h, respectively). The data presented here are very important for the continued efforts of microbiological control in food, especially when it comes to control fungi. / A contamina??o de alimentos por fungos e micotoxinas constitui um grande problema mundial. Alguns produtos naturais, como por exemplo, ?leos essenciais, s?o demonstrados como potenciais inibidores do crescimento f?ngico, bem como da produ??o de suas toxinas. Neste estudo, um total de 40 extratos de plantas foi avaliado como inibidores do desenvolvimento f?ngico de cepas pertencentes ao g?nero Aspergillus se??o Flavi. Tais extratos foram obtidos a partir de dez ervas, utilizadas especialmente como condimentos e cultivadas no Brasil: alecrim (Rosmarinus officinalis), canela (Cinnamomum zeylanicum), cominho (Cuminum cyminum), cravo-da-?ndia (Eugenia caryophyllata), erva-doce (Pimpinella anisum), hortel? (Mentha piperita), manjeric?o (Ocimum basilicum), manjerona (Origanum majorana), noz moscada (Myristica fragrans) e or?gano (Origanum vulgare). Ensaios preliminares in vitro utilizando o m?todo de difus?o em agar demonstraram que os ?leos essenciais foram os mais efetivos na inibi??o do crescimento f?ngico quando comparados com extratos etan?licos e aquosos. Foram selecionados os ?leos essenciais de or?gano e alecrim, os extratos etan?licos de cravo-da-?ndia e cominho e, os ?leos essenciais hex?nicos de or?gano e canela para ensaios mais aprofundados. Diferentes concentra??es de extratos de plantas arom?ticas (0, 50, 100, 150, 300 e 600 μg/g) foram adicionadas ao meio de cultivo. Utilizou-se uma suspens?o de 103 con?dios por inocula??o. As placas foram incubadas por dez dias enquanto medi??es di?rias do di?metro da col?nia eram realizadas a fim de obter velocidade de crescimento (mm/dia) e fase de lat?ncia (h) das cepas tox?genas. Comparando os ?leos essenciais selecionados, tanto A. flavus quanto A. parasiticus apresentaram uma melhor inibi??o atrav?s da incorpora??o do ?leo essencial de or?gano no meio de cultivo a uma concentra??o de 600 μg/g. Apesar disso, o ?leo essencial hex?nico de or?gano n?o demonstrou qualquer diferen?a estat?stica em rela??o ao grupo controle, havendo ent?o altera??o em algum componente do extrato devido a forma de extra??o. Entre os extratos etan?licos avaliados, o cravo-da-?ndia obteve o melhor resultado. Aspergillus flavus demonstrou uma discreta diminui??o de crescimento (4,5 a 3,5 mm/dia), quando comparado ao grupo controle, mas um grande aumento em sua fase de lat?ncia (37 h a 600 μg/g). Aspergillus parasiticus apresentou uma diminui??o gradativa conforme ocorria o aumento das concentra??es, exceto pela concentra??o de 150 μg/g, e um aumento significativo da fase lag nas maiores concentra??es testadas (45 e 48 h respectivamente). Os dados apresentados aqui s?o de extrema relev?ncia para os constantes esfor?os de controle microbiol?gico em alimentos, principalmente em se tratando de controle f?ngico.

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2017-09-13T12:31:48Z No. of bitstreams: 1 2017 - Daniel Paiva Barros de Abreu.pdf: 1307092 bytes, checksum: b384d4db2cb316d3f640b111bc8efba4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-13T12:31:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Daniel Paiva Barros de Abreu.pdf: 1307092 bytes, checksum: b384d4db2cb316d3f640b111bc8efba4 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Dimorphic fungi belonging to Sporothrix schenckii complex are responsible for sporotrichosis, important fungal infection with worldwide distribution. The anthropozoonotic characteristic is of high relevance in the state of Rio de Janeiro, where an increasing in the number of cases in human patients was observed in the last decades, highlighting the role of domestic cat as a transmitter agent. The description of new species compounding de Sporothrix genus, based on phenotypic and genotypic evaluations, showed the involvement of other members of this group in the epidemic status installed in Rio de Janeiro. The verification of strains resistant to itraconazole, a widely used antifungal in human and animal medicine for the treatment of this mycosis, is an important factor that possibly results in relapse and therapeutic failure of this disease. The present study aimed to identify, by phenotypic and molecular approaches, 168 isolates obtained from the routine of Veterinary Clinical Microbiology Laboratory ? UFRRJ, and the determination of minimal inhibitory concentration (MIC) for amphotericin B (AMB), ketoconazole (KTC), itraconazole (ITC), terbinafine (TRB) and voriconazole (VRC). Based on morphophysiological characteristics it was possible to identify 159 (94.64%) isolates as S. brasiliensis and 9 (5.36%) as S. luriei. However, applying PCR-RFLP of calmodulin 168 (100%) samples were identified as S. brasilensis. The susceptibility test, based on M38-A2 document (CLSI), showed that TRB was the most effective antifungal tested, followed by ITC, KTC, AMB, and VRC, respectively. No ITC resistant isolates were detected in the present study. These results demonstrate that the identification reached only by phenotypic evaluation is not recommended for the characterization of Sporothrix schenckii complex components. It also proves the predominance of S. brasiliensis in other regions of RJ state. The better efficacy of TRB added to the absence of isolates resistant to ITC support the necessity of pharmacodynamics and pharmacokinetics studies for the optimization of the therapeutic protocols. More information about isolates from dogs and cats correlated with the species from the S. schenckii complex, as well as in vitro antifungal efficacy evaluation provide knowledge about therapeutic alternatives. In this way, the present study also provides relevant information about the endemic status in Rio de Janeiro and important data for the treatment of human and animal sporotrichosis. / Fungos dim?rficos pertencentes ao complexo Sporothrix schenckii s?o respons?veis pela esporotricose, importante infec??o f?ngica que apresenta distribui??o mundial. Sua conhecida caracter?stica antropozoon?tica apresenta grande relev?ncia no estado do Rio de Janeiro, onde se verifica aumento significativo no n?mero de pacientes humanos e animais acometidos pela doen?a nas ?ltimas d?cadas, destacando-se em tais casos o papel do felino como agente transmissor. A descri??o de novas esp?cies pertencentes ao g?nero Sporothrix, baseada em caracter?sticas fenot?picas e genot?picas, demonstrou o envolvimento de outros componentes deste g?nero na epidemia instalada no estado. A verifica??o de isolados resistentes a itraconazol, antif?ngico amplamente utilizado na medicina humana e veterin?ria para o tratamento da doen?a, ? fato preocupante e tem poss?vel associa??o a recidivas e falhas terap?uticas. O presente estudo objetiva a identifica??o fenot?pica e genot?pica de 168 exemplares oriundos de pacientes felinos e caninos, obtidos na rotina do Diagn?stico Microbiol?gico Veterin?rio - UFRRJ, com determina??o da Concentra??o Inibit?ria M?nima (CIM) frente ? anfotericina B (AMB), cetoconazol (KTC), itraconazol (ITC), terbinafina (TRB) e voriconazol (VRC). A partir de caracter?sticas morfofisiol?gicas foi poss?vel identificar 159 (94,64%) isolados como S. brasiliensis e 9 (5,36%) como S. luriei. Contudo, metodologias moleculares identificaram 168 (100%) S. brasiliensis, a partir de PCR-RFLP em gene respons?vel pela s?ntese de calmodulina. O teste de sensibilidade, realizado a partir do documento M38-A2 (CLSI) determinou maior efic?cia in vitro para TRB, seguido por ITC, KTC, AMB e VRC, respectivamente. Cepas resistentes a ITC n?o foram detectadas no presente estudo. Tais resultados demonstram que a identifica??o alcan?ada exclusivamente por m?todos fenot?picos n?o ? recomendada para caracteriza??o de componentes do complexo Sporothrix schenckii. Comprova-se ainda a predomin?ncia de S. brasiliensis em outras regi?es do estado do RJ. A maior efic?cia de TRB, somada a aus?ncia de exemplares resistentes a ITC, refor?a a necessidade de estudos farmacodin?micos e farmacocin?ticos para otimiza??o dos protocolos terap?uticos atualmente utilizados. Obten??o de maiores informa??es acerca dos isolados provenientes de amostras provenientes de c?es e gatos correlacionados a esp?cies dentro do complexo S. schenckii, bem como a avalia??o da efic?cia in vitro de antif?ngicos proporcionam conhecimento sobre alternativas terap?uticas. Tais informa??es auxiliam no entendimento do quadro instalado no estado do Rio de Janeiro e fornece dados de grande utilidade para o tratamento humano e veterin?rio

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MaizaRA_TESE.pdf: 1687383 bytes, checksum: 6a89b25caa7db5fc536b4051629db0e3 (MD5) Previous issue date: 2013-12-06 / Candid?ase ? um problema de import?ncia crescente, devido o aumento do n?mero de indiv?duos imunocomprometidos e o surgimento de cepas resistentes aos antif?ngicos convencionais. ? de fundamental import?ncia a busca por novos agentes antif?ngicos mais eficazes, menos t?xicos, sendo os ?leos essenciais (OEs) excelentes alternativas para esse prop?sito. Esse estudo investigou a atividade biol?gica do OE de Mentha spicata L. sobre Candida guilliermondii de origem anal e vaginal. Para tanto foram determinadas a Concentra??o Inibit?ria M?nima (CIM), Concentra??o Fungicida M?nima (CFM), cin?tica do crescimento das leveduras (Time-Kill), altera??es micromorfol?gicas (t?cnica do microcultivo em c?mara ?mida) e investiga??o do mecanismo de a??o antif?ngico, utilizando o bioensaio do sorbitol. O OE de M. spicata foi obtido pelo processo de extra??o por destila??o a vapor. Na an?lise fitoqu?mica desse ?leo foi observada a presen?a de carvona com 84,32%, seguida pelo limoneno (13,70%) e tra?os de iso-dihidrocarvona (0,82%). Os resultados da an?lise da CIM variou entre 32 e 128 μg/mL. A CFM variou entre 64 e 1024 μg/mL. Na avalia??o da a??o de OE e da nistatina 100UI/mL, o antif?ngico padr?o apresentou o efeito fungicida a partir de 4 horas e para OE de M. spicata foi observado efeito fungist?tico na CIM, CIMX2 e CIMX4 frente ?s cepas avaliadas. O OE de M. spicata apresentou forte atividade antif?ngica contra as cepas de C. guilliermondii, promovendo altera??es micromorfol?gicas vis?veis por microscopia ?ptica, nas concentra??es testadas (CIM, CIMx2), resultado semelhante ao que se observou com a nistatina (100UI/mL). Na investiga??o do mecanismo de a??o antif?ngico foi constatado que houve altera??o da CIM na presen?a de sorbitol, com eleva??o dos valores quatro vezes maior que a concentra??o inicial, o que indica que os componentes desse OE apresentam a??o direta sobre a parede celular das leveduras. Conclui-se que o OE de Mentha spicata ? um potencial agente terap?utico no tratamento de candid?ase

Made available in DSpace on 2015-02-24T17:42:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MagdaRAF_DISSERT.pdf: 2639129 bytes, checksum: 3c6efd5066d343bdfde86e4cf41e1a70 (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The increase in the incidence of fungal infections due to the drug-resistance or to the number of patients with immune alterations such as AIDS, chemotherapy or organ transplantation, has done the research necesseray for new antifungal drugs. The species from Northeastern Brazil may become an important source of innovative natural molecules. To evaluate the antifungal activity of 10 medicinal plants from Northeastern Brazil, traditionally used as antimicrobial agents, 30 crude extracts (CE) were tested in vitro against four standard species of Candida spp. The CE most promising of these plants were evaluated against yeasts of the oral cavity of kidney transplant patients and through a bioassay-guided fractionation. The extracts form leaves of E. uniflora, the stem bark of L. ferrea and leaves of P. guajava showed significant activity against all yeasts evaluated, with MIC values between 15.62 and 62.5 μg/mL. E. uniflora also showed fungicidal properties against all yeasts, especially against Candida dubliniensis. In patients with immune systems compromised, such as transplanted, oral candidiasis manifests mainly due to immunosuppressive therapy, and resistance to conventional antifungals. The CE of E. uniflora presented range of MIC values between 1.95 to 1000 μg/mL, and lower MIC50 and MIC90 values were observed against C. non-albicans. Due the better results, the CE of E. uniflora was elected to performe the bioassay-guided fractionation. Thus it was possible to obtain enriched fractions, which showed good inhibitory ability against ATCC strains of Candida spp. It was also possible to perform experiments to verify the production of biofilm in two strains of C. dubliniensis and action of extracts and fractions on the same. With this, we observed a behavior between the yeast ATCC and clinical isolate. In addition, CE, fractions and subfractions of E. uniflora inhibit planktonic cells to preventing the growth of biofilm. The preliminary chemical characterization of the fractions obtained revealed the presence of polyphenols (especially flavonoids and tannins). Finally, the results suggests that among the plant species studied, E. uniflora showed a pattern very promising as regards the antifungal, requiring further study of purification and structural elucidation of compounds in order to verify that the antifungal effect found can be attributed to a specific compound or some mechanism depends on synergistic the mixture of polyphenols / O aumento na incid?ncia de infec??es por fungos, devido ? resist?ncia ?s drogas ou ao n?mero de pacientes com altera??es imunol?gicas, tais como SIDA, quimioterapia ou transplante de ?rg?os; tem feito a investiga??o de novas drogas antif?ngicas necess?ria. As esp?cies vegetais da regi?o Nordeste do Brasil podem se tornar uma importante fonte de mol?culas naturais inovadoras. Para avaliar a atividade antif?ngica de 10 plantas medicinais da regi?o Nordeste do Brasil, tradicionalmente usadas como antimicrobianas, 30 extratos brutos (EB) foram submetidos ? teste in vitro contra quatro cepas padr?o ATCC de Candida spp. Extratos das folhas de E. uniflora, cascas do caule de L. ferrea, e folhas de P. guajava mostraram atividade significativa contra as leveduras avaliadas, com valores MIC entre 15,62 e 62,5 μg/mL. E. uniflora tamb?m mostrou propriedade fungicida contra todas as leveduras, principalmente contra C. dubliniensis. O EB de E. uniflora apresentou intervalo de valores CIM entre 1,95-1000 μg/mL, e menores valores de MIC50 e MIC90 foram observados contra C. n?o albicans. Devido ao melhor desempenho, o EB de E. uniflora foi eleito para realiza??o do fracionamento biomonitorado. Assim, foi poss?vel obter fra??es enriquecidas, as quais apresentaram boa capacidade inibit?ria, na faixa entre 0,48 a 500 μg/mL, frente ?s cepas ATCC de Candida spp. Tamb?m foi poss?vel realizar experimentos para verificar a produ??o de biofilme de duas cepas de C. dubliniensis e a??o dos extratos e fra??es sobre o mesmo. Com isso, observou-se um comportamento diferente entre a levedura ATCC e o isolado cl?nico. Al?m disso, extrato bruto, fra??es e subfra??es de E. uniflora inibiram as c?lulas planct?nicas impedindo de se agragarem ao biofilme. A caracteriza??o qu?mica preliminar das fra??es obtidas revelou a presen?a de polifen?is (principalmente, flavon?ides e taninos). Por fim, os resultados permitiram afirmar que entre as esp?cies vegetais estudadas, E. uniflora apresentou comportamento bastante promissor no que diz respeito a a??o antif?ngica, sendo necess?rio a continua??o do estudo de purifica??o e elucida??o estrutural dos compostos presentes, a fim de verificar se a a??o antif?ngica encontrada poder? ser atribu?da a um composto espec?fico ou depende de algum mecanismo sin?rgico da mistura de polifen?is

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CinthiaBST.pdf: 1239764 bytes, checksum: b0f986e10d6574ec55e837255b634b41 (MD5) Previous issue date: 2010-02-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The exopolysaccharides are extracellular compounds produced by some species of fungi and bacteria. It is suggested that these molecules, even when in the form of complex polysaccharide-peptide, are the main bioactive molecules of many fungus. Some of the biological activities displayed by these compounds can be accentuated and others may arise when you add chemically polar or nonpolar groups to polysaccharides. The fruiting body of Pleurotus sajor-caju produces a heteropolysaccharide with antineoplastic and antimicrobial activity, but other biological activities of this polymer have not been evaluated. In this work the exopolysaccharide of Pleurotus sajor-caju was sulfated chemically and structurally characterized. We also evaluated the antiproliferative, antioxidant and anticoagulant activities from native exopolysaccharide (PN) and its sulfated derivated (PS). Polyacrylamide gel electrophoresis, infrared spectroscopy and nuclear magnetic resonance (??C) proved successful in sulfation of PN to obtain PS. Analysis by gas chromatography-mass spectroscopy showed that PN and PS are composed of mannose, galactose, 3-O-methyl-galactose and glucose in proportion percentage of 44,9:16,3:19,8:19 and 49, 7:14,4:17,7:18,2, respectively. The percentage of sulfate found in PS was 22.5%. Antioxidants assays revealed that the sulfation procedure affects differently the activities of exopolysaccharides, while the total antioxidant capacity, the scavenging activity of superoxide radical and ferric chelating were not affected by sulfation, on the other hand the chemical modification of PN enhanced the scavenging activity of hydroxyl radical and reducing power. PS also showed anticoagulant activity in a dose-dependent manner and clotting time was 3.0 times higher than the baseline value in APTT at 2 mg/mL. The exopolysaccharide not presented antiproliferative activity against HeLa tumor cells, but PS affects the cellular proliferation in a time-dependent manner. After 72 h, the inhibition rate of PS (2.0 mg/mL) on HeLa cells was about 60%. The results showed that PN sulfation increase some of their activities. / Os exopolissacar?deos s?o compostos extracelulares produzidos por algumas esp?cies de fungos e bact?rias. ? sugerido que estas mol?culas, inclusive quando na forma de complexo polissacar?deo-pept?deo, s?o as principais mol?culas bioativas de v?rios fungos. Muitas das atividades biol?gicas apresentadas por esses compostos podem ser acentuadas e outras podem surgir quando se adiciona quimicamente aos polissacar?deos grupamentos polares ou apolares. O corpo de frutifica??o de Pleurotus sajor-caju produz um heteropolissacar?deo com atividade antioneopl?sica e antimicrobiana, contudo outras atividades biol?gicas desse pol?mero ainda n?o foram avaliadas. Neste trabalho o exopolissacar?deo de Pleurotus sajor-caju foi sulfatado quimicamente e caracterizado estruturalmente. Tamb?m foram avaliadas as atividades antiproliferativa, antioxidante e anticoagulante do exopolissacar?deo nativo (PN) e de seu derivado sulfatado (PS). Eletroforese em gel de agarose, espectroscopia de infravermelho e resson?ncia magn?tica nuclear (??C) comprovaram o sucesso na sulfata??o de PN para a obten??o de PS. An?lise por cromatografia gasosa acoplada a espectroscopia de massa mostrou que PN e PS s?o constitu?dos de manose, galactose, 3-O-metil-galactose e glicose na propor??o percentual de 44,9:16,3:19,8:19 e 49,7:14,4:17,7:18,2, respectivamente. O percentual de sulfato encontrado em PS foi de 22,5%. Testes antioxidantes revelaram que o processo de sulfata??o influencia de forma diferente nas atividades do exopolissacar?deo. Enquanto a capacidade antioxidante total, a capacidade de seq?estro de radical super?xido e a quela??o f?rrica n?o foram influenciadas pela sulfata??o, essa potencializou a atividade seq?estradora de radicais hidroxila e o poder redutor do exopolissacar?deo. Ap?s o processo de sulfata??o o exopolissacar?deo passou a apresentar atividade anticoagulante de forma dose-dependente, triplicando o tempo de coagula??o em rela??o ao controle numa concentra??o de aproximadamente 2 mg/mL. O exopolissacar?deo n?o apresentou atividade antiproliferativa frente ?s c?lulas tumorais HeLa, por?m ap?s sulfata??o ele passou a apresentar essa atividade de forma tempo- ependente, chegando a inibir em 60% a taxa de prolifera??o das c?lulas com 2 mg/mL, ap?s 72 h de exposi??o. Os resultados aqui obtidos mostraram que a sulfata??o do exopolissacar?deo potencializou algumas de suas atividades.