Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Luiz Eduardo Corrêa Fonseca / Banca: Alex Akira Nakamura / Banca: Luiz da Silveira Neto / Banca: Jancarlo Ferreira Gomes / Resumo: Este estudo foi elaborado com o objetivo de investigar a ocorrência de Cryptosporidium spp. em quirópteros da região sul do Brasil. Cento e quarenta e sete amostras fecais de morcegos foram colhidas na cidade de Maringá (PR) e submetidas aos processos de purificação para a microscopia e extração de DNA genômico. A microscopia óptica de luz convencional foi utilizada com o uso da coloração negativa de verde malaquita para pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. e a PCR foi utilizada para a amplificação de fragmentos do gene da subunidade 18S do rRNA na detecção de Cryptosporidium spp. A presença de Cryptosporidium spp. não foi constatada nas amostras fecais dos morcegos. Esse resultado pode ser considerado bom no aspecto que os morcegos são possíveis reservatórios e consequentemente, dispersores deste patógeno, sendo estes parques visitados diariamente por um grande número de pessoas. Esta é a primeira investigação do referido protozoário em morcegos nesta região. / Abstract: This study was elaborated with the objective to investigate the occurrence of Cryptosporidium spp. in chiroptera of southern Brazil. One hundred and forty-seven fecal samples of bats were collected in the city of Maringá (PR) and submitted to purification processes for microscopy and extraction of genomic DNA. Optical microscopy of conventional light with negative malachite green staining was performed to investigate oocysts of Cryptosporidium spp. and PCR for the amplification of fragments of the 18S rRNA subunit gene in the detection of Cryptosporidium spp. This coccidium was not found in faecal samples of bats. This result can be considered good in the aspect that bats are possible reservoirs and consequently dispersers of this pathogen, being these parks visited daily by a large number of people. It is the first investigation of this protozoan into bats in this region / Doutor

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA13MA115.pdf: 2445554 bytes, checksum: 3ef0e43758000b9d20b09e8f978e7502 (MD5) Previous issue date: 2013-07-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The species of the genus Eimeria are responsible for the greatest economic impact among the parasitic diseases that affect broilers. The control of coccidiosis is mainly performed with anticoccidial, however, the development of resistance to these drugs, together with the public opinion against the use of drugs in food, they tend to promote the use of vaccines, increasing the importance of the identification of species of Eimeria circulating. Aiming to identify the species of Eimeria and study the occurrence of these species in poultry farms in the southern state of Santa Catarina, samples were collected (pool of feces) in 21 municipalities, from 251 flocks of broilers aged 28 to 48 days. The oocysts were recovered by techniques of filtration, centrifugation and flotation using supersaturated solution of NaCl and quantified using a Neubauer chamber. The samples were stratified by age of the birds in three intervals (28 to 34, 35 to 41 and 42 to 48). The species were identified by Multiplex PCR technique. Amplicons of the seven species of Eimeria originating from the PCR positive samples have been cloned and sequenced. The occurrence of the genus Eimeria was 96.02%. It was found that in chickens aged 42 to 48 days the average number of oocytes was significantly reduced when compared to the intervals age of 28 to 34, and 35 to 41 days (p<0.05). Were found Eimeria acervulina (63.3%), Eimeria maxima (63,7%), Eimeria tenella (54.6%), Eimeria praecox (25.1%), Eimeria mitis (38.6%), Eimeria necatrix (24.3%) and Eimeria brunetti (13.1%). The average number of species detected by property was 2.96 and was the most frequent combination of E. acervulina, E. maxima and E. tenella (9.16%). The sequencing of the clones confirmed the specificity and effectiveness of the Multiplex PCR technique for identification of species of Eimeria. It can be concluded that in the South of the State, prophylactic measures should consider the control of the seven Eimeria species that parasitize chickens / As espécies do gênero Eimeria são responsáveis pelo maior impacto econômico dentre as doenças parasitárias que acometem frangos de corte. O controle da coccidiose é realizado principalmente com anticoccidianos, porém, o desenvolvimento da resistência a esses fármacos, aliada à opinião pública contra o uso de drogas na ração, tendem a fomentar a utilização de vacinas, aumentando a importância da identificação das espécies de Eimeria circulantes. Com os objetivos de identificar as espécies de Eimeria e estudar a ocorrência destas em instalações avícolas da mesorregião Sul do estado de Santa Catarina, foram coletadas amostras (pool de fezes) em 21 municípios, provenientes de 251 lotes de frangos de corte com idade entre 28 a 48 dias. Os oocistos foram recuperados por meio de técnicas de filtragem, centrifugação e centrífugo-flutuação utilizando solução hipersaturada de NaCl e quantificados utilizando câmara de Neubauer. As amostras foram estratificadas, por idade das aves em três intervalos (28 a 34; 35 a 41 e 42 a 48). As espécies foram identificadas por meio da técnica de Multiplex PCR. Amplicons das sete espécies de Eimeria originados da PCR de amostras positivas foram clonados e sequenciados. A ocorrência do gênero Eimeria foi de 96,02%. Verificou-se que em frangos com idade entre 42 a 48 dias a média do número de oocistos foi significativamente menor quando comparada com os intervalos de idade de 28 a 34 e 35 a 41 dias (P<0,05). Foram encontradas Eimeria acervulina (63,3%), Eimeria maxima (63,7%), Eimeria tenella (54,6%), Eimeria praecox (25,1%), Eimeria mitis (38,6%), Eimeria necatrix (24,3%) e Eimeria brunetti (13,1%). O número médio de espécies detectadas por propriedade foi de 2,96 e a associação mais frequente foi de E. acervulina, E. maxima e E. tenella (9,16%). Por meio do sequenciamento dos clones confirmou-se a especificidade e eficácia da técnica de Multiplex PCR para a identificação das espécies de Eimeria. Concluí-se que na mesorregião Sul do Estado, a adoção de medidas profiláticas deve considerar o controle das sete espécies de Eimeria que parasitam frangos

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-01-14T16:38:41Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rebeka Cristine de Bastos Costa - 2015.pdf: 2127820 bytes, checksum: 8789b51096d386c4def09d0d1ee4da0d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-01-15T09:55:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rebeka Cristine de Bastos Costa - 2015.pdf: 2127820 bytes, checksum: 8789b51096d386c4def09d0d1ee4da0d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-15T09:55:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rebeka Cristine de Bastos Costa - 2015.pdf: 2127820 bytes, checksum: 8789b51096d386c4def09d0d1ee4da0d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-08-25 / Toxoplasmosis is a zoonotic disease in which mammals and birds can join the cycle as intermediate hosts, and felids as definitive hosts. Felis catus is recognized as the main responsible for the environmental contamination by Toxoplasma gondii oocysts. Serological diagnosis reveals little about the elimination of oocysts of T. gondii into the environment, principally by F. catus, which plays an important role in Public Health. There are few data on the frequency of feline toxoplasmosis in the State of Goiás. Therefore, the aim of this research was to evaluate the frequency of toxoplasmosis infection in domestic cats and their potential role in its transmission through the oocyst elimination into the environment and the respective factors associated with the infection. For this, we collected 102 blood samples and 98 fecal samples from 102 cats from Goiânia, State of Goiás. The animals were divided into groups according to age, gender and free access to the street or not. Indirect hemagglutination test was performed to determine the level of anti-T. gondii and indirect ELISA for the detection of infection by feline immunodeficiency virus (FIV). For search and detection of T. gondii oocysts elimination in the feces of cats we performed a centrifugal-flotation with Sheather's solution, subsequently we extracted DNA and used conventional PCR. The results showed that 18.63% (19/102) of the cats were positive for T. gondii, with titers ranging from 1:32 to 1: 8.192, while none of the fecal samples were positive in the PCR. The frequency of positive animals for FIV was 55.91% (52/93), and 18.28% (17/93) presented coinfection. By multivariate logistic regression we found the associated factors were the same for both infections, but one did not interfere with another. The factors associated with infection by T. gondii and feline immunodeficiency virus were free life and age under six months, since the sex was not statistically related to any of the illnesses. / A toxoplasmose é uma zoonose na qual, mamíferos e aves podem participar do seu ciclo como hospedeiros intermediários e os felídeos como hospedeiros definitivos. O Felis catus é reconhecido como o principal responsável pela contaminação ambiental por oocistos de Toxoplasma gondii. O diagnóstico sorológico pouco revela sobre a eliminação de tal fase no ambiente, o que representa o real impacto daquela espécie na Saúde Pública frente à toxoplasmose. São escassos os dados da frequência da toxoplasmose felina no Estado de Goiás. Assim sendo, objetivou-se com esta pesquisa avaliar a frequência da infecção da toxoplasmose em gatos domésticos e o seu potencial papel na sua transmissão, através da eliminação de oocistos no ambiente e dos respectivos fatores associados à infecção. Para isto, foram coletadas 102 amostras de sangue e 98 amostras fecais, de 102 gatos provenientes de Goiânia-Goiás. Os animais foram divididos em grupos de acordo com a faixa etária, gênero e livre acesso à rua ou não. Foi realizada a hemaglutinção indireta para a determinação do nível de anticorpos anti-T. gondii e o ELISA indireto para a detecção da infecção pelo vírus da imunodeficiência felina (FIV). Para a pesquisa e detecção da eliminação de oocistos de T. gondii nas fezes dos gatos foi feita a centrifugo-flutuação em solução de Sheather, posterior extração de DNA e realização da PCR convencional. Os resultados revelaram que 18,63% (19/102) dos gatos foram positivos para o T. gondii, com títulos variando entre 1:32 a 1:8.192, sendo que nenhuma das amostras fecais foi positiva na PCR. A frequência de positivos para o FIV foi de 55,91% (52/93), com coinfecção de 18,28% (17/93). Com a regressão logística multivariada verificou-se que os fatores associados foram os mesmos para as duas infecções, porém uma não interferiu diretamente na outra. Os fatores associados para a infecção pelo T. gondii e pelo vírus da imunodeficiência felina foram a vida livre e a idade igual ou superior a seis meses, já o gênero não apresentou relação estatística com nenhuma das enfermidades.