Listeria monocytogenes é um microrganismo patogênico psicrotrófico e consequentemente de grande importância para alimentos conservados em refrigeração. Vários estudos têm demonstrado que é possível utilizar antimicrobianos naturais, como bacteriocinas e compostos fenólicos, para retardar a multiplicação desse patógeno em produtos cárneos refrigerados. Entretanto, sabe-se que a atividade antimicrobiana desses compostos pode ser influenciada pelos componentes da matriz alimentar. Esse trabalho de mestrado pretendeu avaliar a influência dos ingredientes de lingüiça frescal de suíno na ação inibitória de óleo essencial de orégano (OEO) e nisina sobre Listeria monocytogenes. Foram realizados testes com diferentes modelos alimentares preparados com carne suína moída adicionada de cada um dos ingredientes utilizados na fabricação de lingüiça frescal (sais de cura, açúcar, antioxidante, emulsificante, condimentos e NaCl) separadamente, comparando-se os resultados com os obtidos no modelo contendo todos os ingredientes simultaneamente. Pretendeu-se também avaliar a interferência do tempo de contato da nisina e óleo essencial de orégano com os diferentes modelos alimentares na ação antimicrobiana sobre L. monocytogenes. Os resultados indicaram que os antimicrobianos foram capazes de inibir a multiplicação de L. monocytogenes em todos os modelos analisados armazenados à 5ºC por até 72h. Comparando-se todos os modelos compostos por carne adicionada de apenas um dos ingredientes, a maior atividade antilisterial foi observada no modelo composto de carne com antioxidante. Entretanto, essa atividade inibitória foi menor do que a obtida no modelo contendo todos os ingredientes em conjunto. Quanto à influência do tempo prévio de contato entre os antimicrobianos e os modelos estudados na ação antilisterial, observou-se que na formulação com todos os ingredientes a ação foi mais intensa quando o contato foi de 2h. Entretanto, neste modelo o efeito mais duradouro foi obtido com 12h de contato prévio. Nos demais modelos, o maior efeito foi obtido no tempo zero. Os resultados permitem concluir que cada um dos ingredientes da formulação da lingüiça contribui com uma parcela na ação antilisterial do OEO e nisina nesse produto, e que essa ação é influenciada pelo tempo de contato prévio entre os modelos e os agentes antimicrobianos. / Listeria monocytogenes is psychrotrophic pathogen and, consequently, very important for cold-preserved foods. Many studies have demonstrated that natural antimicrobials such as bacteriocins and phenolic compounds can be used to inhibit the growth of this pathogen in refrigerated meat products. However, it is known that the antimicrobial activity of these antimicrobials may be influenced by components of the food matrix. The aim of the present study was to evaluate the influence of the ingredients of \"lingüiça\" in the inhibitory activity of O.E.O. and nisin against L. monocytogenes. The study was carried out with different food models prepared with minced raw pork meat added separately of each ingredient used for manufacturing \"lingüiça\" (curing salts, sugar, antioxidants, emulsifiers, condiments and NaCl), and results were compared to those obtained in a model containing all ingredients simultaneously. The study also aimed to evaluate the interference of the contact time between the food models and the antimicrobials on the effect against L. monocytogenes. Results indicated that the antimicrobials added to the models were able to inhibit the growth of the pathogen at 5ºC up to 72h. Comparing the models, the highest antilisterial activity was observed in the model containing pork meat and antioxidants. However, this inhibitory activity was lower than that observed in the model with all ingredients. What concerns the influence of contact time in antilisterial activity, we observed that in the model containing all ingredients the antilisterial activity was more intense after 2h of contact, but the more lasting effect was observed after 12h of contact. In the other models, the most intense effect was noted in time zero. The conclusions of the study are that each ingredient used in manufacture of \"lingüiça\" has its share in the antilisterial activity of nisin and OEO in this product and that this activity is influenced by the contact time between the food matrix and the antimicrobials.

O objetivo do presente estudo foi identificar entre 10 óleos essenciais, os dois com maior capacidade mitigadora das emissões de metano proveniente da fermentação in vitro da microbiota ruminal de bovinos da raça Nelore (Etapa I), e o subsequente impacto da adoção destes dois óleos essenciais como estratégia nutricional para mitigação das emissões de metano in vivo por bovinos Nelore (Etapa II). Na primeira etapa, pela técnica de produção de gases in vitro foram avaliados a produção de gases acumulada, a degradabilidade, o fator de partição, a concentração de nitrogênio amoniacal, a produção de ácidos graxos de cadeia curta e a produção de metano com o uso dos óleos essenciais extraídos das seguintes plantas: anis estrelado (Illicium verum), citronela (Cymbopogon winterianus), cravo botão (Eugenia caryophyllus), eucalipto staigeriana (Eucalyptus staigeriana), eucalipto globulus (Eucalyptus globulus), gengibre (Zingiber officinale), ho wood (Cinnamomum camphora), melaleuca (Melaleuca alternifolia), orégano (Origanum vulgare) e tomilho branco (Thymus vulgaris). Todos os óleos essenciais foram testados em quatro doses; 0, 50, 250 e 500 mg/l de meio de incubação. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, com quatro blocos, 10 tratamentos, quatro doses e duas réplicas dentro de cada bloco. Os procedimentos estatísticos foram obtidos com auxílio do programa SAS 9.3. Os resultados foram submetidos a análise de variância e regressão, com graus de liberdade desdobrados em efeitos linear e quadrático. A produção de gases acumulada sofreu efeito linear negativo (P<0,05) com o aumento dos níveis de inclusão dos óleos essenciais de citronela, ho wood, orégano e tomilho. A degradabilidade do substrato, a produção total de ácidos graxos de cadeia curta e a concentração de nitrogênio amoniacal não foram afetadas (P>0,05) por nenhum dos tratamentos. As menores produções líquidas de metano estiveram associadas às menores produções acumuladas de gases, nas quais os óleos essenciais de orégano e de tomilho tiveram maior poder mitigador de metano em doses acima de 250 mg/l. Esses mesmos óleos essenciais (tomilho e orégano) mostraram ser os mais promissores para o uso em dietas de bovinos por apresentarem as maiores eficiências na mitigação da produção de metano sem afetar a degradação do substrato, sugerindo provável efeito inibitório sobre a população de arqueias metanogênicas. Na etapa II, os óleos essenciais de orégano e de tomilho foram avaliados através de um delineamento experimental em quadrados latinos 3x3 replicados com três períodos de 21 dias cada, no qual seis bovinos da raça Nelore foram alimentados com dieta total composta de 70% silagem de milho e 30% concentrado a base de milho e farelo de soja. Os óleos essenciais foram inclusos na dieta na quantidade de 3 ml por kg de concentrado. Foram mensurados o consumo, a digestibilidade aparente total (da MS, da FDN e da FDA), os parâmetros ruminais (pH, concentração de nitrogênio amoniacal e de ácidos graxos de cadeia curta) e a emissão de metano (através da técnica do gás traçador SF6). As análises estatísticas foram realizadas com auxílio do programa SAS 9.3, utilizando o procedimento MIXED. O efeito de tratamento foi separado pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. A inclusão dos óleos essenciais de orégano ou de tomilho na dosagem avaliada in vivo, não foi suficiente para promover mudanças significativas (P>0,05) em nenhum dos parâmetros avaliados. / The objective of this study was to identify two out of 10 essential oils with the greatest capacity to mitigate methane emissions through an in vitro fermentation assay using ruminal microorganisms of Nellore cattle (Step I), and the subsequent impact of the use of these two essential oils as a nutritional strategy to mitigate methane emissions in vivo trial with Nellore cattle (Step II). In the step 1, it was evaluated through in vitro gas production technique the accumulated gas production, degradability, partitioning factor, ammoniacal nitrogen concentration, short chain fatty acid production and methane production, with the use of essential oils extracted from the following plants: anise (Illicium verum), citronella (Cymbopogon winterianus), clove (Eugenia caryophyllus), eucalyptus staigeriana (Eucalyptus staigeriana), eucalyptus globulus (Eucalytus globulus), ginger (Zingiber officinale), melaleuca (Melaleuca alternifolia), oregano (Origanum vulgare) and white thyme (Thymus vulgaris). All essential oils were tested in four doses; 0, 50, 250 and 500 mg / l of incubation solution. The experimental design was in randomized blocks, with four blocks, 10 treatments, four doses and two replicates within each block. The statistical procedures were done with the help of the SAS 9.3 program. The results were analyzed by analysis of variance and regression, with degrees of freedom unfolded in linear and quadratic. Accumulated gas production had a linear negative effect (P <0.05) with increasing the inclusion level of the essential oils of citronella, ho wood, oregano and thyme. Substrate degradability, total short chain fatty acid production and ammoniacal nitrogen concentration were not affected (P> 0.05) by treatments. The lower liquid methane yields were associated with lower accumulated gas production, in which oregano and thyme essential oils were the more potent at doses greater than 250 mg / l. These essential oils (thyme and oregano) were the most promising for use in cattle diets because they were the most effective for methane mitigation without affecting substrate degradation, suggesting a probable inhibitory effect on the methanogenic arqueas. In step II, the essential oils of oregano and thyme were evaluated through an experimental design in replicate 3x3 Latin squares with three periods of 21 days each, in which six Nellore cattle were distributed in the control, oregano oil and thyme oil treatments, were fed a total diet composed of 70% corn silage and 30% of concentrate based on ground corn and soybean meal. The essential oils were included in the diet 3 ml per kg of concentrate. Intake, total apparent digestibility (DM, NDF and ADF), ruminal parameters (pH, concentration of ammoniacal nitrogen and short chain fatty acids) and methane emission (through SF6 tracer gas) were measured. The inclusion of the essential oils of oregano or thyme in the dosage evaluated was not sufficient to promote significant changes (P> 0.05) in any of the outcomes evaluated.

Las micosis ocasionadas por levaduras del género Candida generan afecciones de variable grado de severidad, desde infecciones cutáneas leves hasta candidiasis severas en pacientes inmunocomprometidos. El tratamiento más frecuente son los medicamentos de derivados imidazólicos; sin embargo, se ha visto un incremento de resistencia contra estos antifúngicos. El uso de plantas medicinales representa una alternativa al tratamiento. Por ello se determina el efecto antifúngico - in vitro- del aceite esencial de Origanum vulgare (orégano) en Candida albicans ATCC 90028 mediante un estudio experimental. Se realizaron pruebas de susceptibilidad antimicótica en Candida albicans ATCC 90028 empleando aceite esencial de Origanum vulgare (orégano) a las concentraciones de 100%, 75%, 50% y 25 %. Se evaluó el efecto antifúngico mediante la técnica de disco difusión. Además, se trabajó con Fluconazol 25 ug y DMSO (Dimetilsulfoxido) como controles. Población y muestra: Estuvo conformada por 180 repeticiones de los grupos experimentales, conformada por 30 repeticiones de cada concentración del Aceite esencial de Origanum vulgare al 100%, 75%, 50% y 25%, además de los controles (Fluconazol 25 ug y DMSO) en cepa estándar de Candida albicans Resultados: Se halló un promedio de halo inhibitorio del aceite esencial de Origanum vulgare al 100% ( =27,97 mm), aceite esencial de Origanum vulgare al 75%( =21, 48 mm), aceite esencial de Origanum vulgare al 50% ( =8,83 mm), aceite esencial de Origanum vulgare al 25%( =7,93 mm), el Fluconazol 25 ug ( =28.57 mm) y DMSO ( =6 mm) presentando las variables diferencia estadísticamente significativa mediante el test de ANOVA p=0.00. Llega a la conclusión de que al 95% de confianza estadística se comprobó mediante la prueba de ANOVA y prueba post hoc de comparaciones múltiples de HSD Tukey, que las medias de ambos grupos: el Fluconazol 25 ug y la concentración del aceite esencial de Origanum vulgare al 100% fueron similares; sin embargo, el Fluconazol 25 ug presenta una diferencia de media superior con respecto al aceite esencial de Origanum vulgare. / Tesis

Este trabalho de Mestrado teve por objetivo avaliar a atividade antifúngica in vitro e em queijo Minas Padrão de duas formulações (A e B) de nanoemulsões encapsulando óleo essencial de orégano (Origanum vulgare) produzidas pelo método da temperatura de inversão de fases (método PIT). Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp. foram os fungos identificados nas amostras de queijo Minas Padrão deteriorados. Tais cepas foram utilizadas na avaliação da atividade antifúngica in vitro e em queijo Minas Padrão do óleo de orégano nanoemulsionado. Nos testes in vitro foram determinadas as concentrações mínimas inibitórias (CMI) do óleo essencial de orégano puro e nanoemulsionado sobre o Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp. Foram utilizadas fatias de queijo Minas Padrão para avaliar o efeito inibitório das nanoemulsões contendo óleo essencial de orégano. Por último foi avaliado o efeito inibitório das nanoemulsões durante o processo de maturação de queijos Minas Padrão. Determinaram-se valores de CMI para óleo essencial puro de 0,2; 0,3 µg/ml para Fusarium sp. e Penicillium sp., respectivamente. Enquanto para as duas formulações de nanoemulsão; os valores de CMI dependeram da quantidade de óleo essencial de orégano que estava contido nelas, obtendo-se valores de 0,26; 0,11 e 1,62 µg/ml para a formulação A de óleo de orégano nanoemulsionado sobre Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp., respectivamente, e CMIs de 0,32; 0,1 e 0,8 µg/ml para a formulação B de nanoemulsão sobre os mesmos gêneros de fungos. Os ensaios nas fatias de queijo evidenciaram que o efeito das CMIs, quando aplicadas na matriz alimentícia, foi nulo, permitindo o desenvolvimento normal dos fungos avaliados, da mesma forma se determinou a importância da atividade de água no crescimento fúngico. Já nos queijos em ambiente de maturação o efeito inibitório do óleo de orégano foi pouco satisfatório, o que indicou a importância do controle dos demais parâmetros ambientais no ambiente de maturação. Pode-se concluir que o óleo essencial de orégano nanoemulsionado apresentou efeito inibitório contra os gêneros de fungos avaliados. Quando controlados parâmetros ambientais como temperatura de armazenamento e atividade de água, seu efeito inibitório pode ser amplamente melhorado, apresentando-o como potencial alternativa na conservação dos alimentos. / This Master Thesis aimed to evaluate the in vitro antifungal activity and in Minas Padrão cheese of two formulations (A and B) of nanoemulsions encapsulating essential oil of oregano (Origanum vulgare) produced by the method of phase inversion temperature (PIT method). Cladosporium sp., Fusarium sp. and Penicillium sp. fungi were identified in deteriorated cheese samples. These strains were used in the evaluation of antifungal activity of oregano essential oil nanoemulsions, both in vitro and in cheese. Minimum inhibitory concentrations (MIC) of essential oil of pure oregano oil and nanoemulsions were determined. Cheese slices were used to evaluate the inhibitory effect of nanoemulsions containing essential oil of oregano. Finally the inhibitory effect of encapsulated oregano oil was tested during cheese ripening. MIC values determined for pure essential oil were 0.20 and 0.3 µg/ml for Fusarium sp. and Penicillium sp., respectively. As for the two nanoemulsion formulations, MIC values depended on the amount of essential oil of oregano which was contained therein, and the values for formulation A were 0.26, 0.11 and 1.62 µg/ml for Cladosporium sp., Fusarium sp. and Penicillium sp, respectively. For formulation B, the values of MIC were 0.32, 0.10 and 0.80 µg/ml. The tests on the cheese slices showed that the effect of MIC when applied in the food matrix was null, as the fungi growth was not avoided. As for the tests during cheese ripening, the inhibitory effect of oregano oil in nanoemulsions was unsatisfactory, which indicated the importance of controlling other environmental parameters in the maturation chamber. It can be concluded that the nanoemulsions of essential oil presented inhibitory effect against the genera of fungi evaluated. Controlled environmental parameters such as storage temperature and water activity, its inhibitory effect can be highly improved, and the nanoemulsions of oregano oil can be seen as a potential system for food preservation.

A oxidação de produtos de base lipídica é um dos problemas enfrentados pela indústria alimentícia, resultando na formação de compostos indesejáveis que alteram as características sensoriais de alimentos lipídicos e reduzem sua qualidade nutricional. A incorporação de antioxidantes prolonga a vida útil dos produtos que contém lipídios em sua composição, retardando o processo de oxidação. Os antioxidantes utilizados pela indústria alimentícia são principalmente sintéticos, tais como o BHA, BHT, PG, e TBHQ. Entretanto, devido aos estudos sobre a possível toxicidade dos mesmos, o uso de antioxidantes naturais presentes em ervas e especiarias representa uma alternativa promissora. Visando encontrar alternativas aos antioxidantes sintéticos, neste trabalho foram utilizados extratos etanólicos de orégano (Origanum vulgare L.), alecrim (Rosmarinus officinalis L.) e tomilho (Thymus vulgaris L.), que apresentam compostos fenólicos e atividade antioxidante em sistemas in vitro, em emulsões lipídicas. O objetivo foi avaliar a capacidade antioxidante dos extratos e suas misturas binárias e ternárias em um sistema modelo (emulsão alimentícia) e o impacto da adição de extratos de ervas sobre o perfil sensorial dos produtos testados. Através do acompanhamento do valor de índice de peróxido, observou-se que a adição de extrato de alecrim, bem como suas misturas com extrato de tomilho, em doses de até 200 mg.kg-1 apresentaram proteção frente à oxidação das emulsões em condições aceleradas, com efeito semelhante à adição do antioxidante BHA. Em relação à analise sensorial descritiva, dos 13 atributos avaliados, dois apresentam diferença estatística entre amostras com antioxidantes naturais comparados ao antioxidante sintético, que são a aparência consiste e o sabor de ervas. Para teste de aceitação, emulsões adicionadas de misturas de extratos de tomilho e alecrim não deferiam de amostras adicionadas de BHA, indicando que não há alterações sensoriais perceptíveis nas doses utilizadas. Estes resultados demonstraram a promissora utilização de extratos de ervas em substituição ao uso de antioxidantes sintéticos. / The oxidation of lipid-based products is one of the problems faced by the food industry, due to production of undesirable compounds that affect organoleptic characteristics of food lipid and their nutritional quality. Antioxidants added to food lipids avoid the oxidation process and prolong product the shelf life. The antioxidants used by the food industry are mainly synthetic such as BHA, BHT, PG, and TBHQ. However, due to the possible toxicological effects for human consumption, natural antioxidants present in herbs and spices represents a promising alternative. In this work ethanolic extracts obtained from dried oregano (Origanum vulgare L.), rosemary (Rosmarinus officinalis L.) and thyme (Thymus vulgaris L.), presenting high polyphenol content and in vitro antioxidant activity, were applied to a lipid model systems. This project aimed to evaluate the antioxidant capacity of binary and ternary mixtures of these extracts and the impact on sensory profile of tested products. Rosemary extracts and its mixtures with thym extracts added to emulsions subject in concentrations up to 200 mg.kg-1 presented a effective protection under accelerated conditions, similar to the BHA effect. Regarding sensory description, according to Quantitative Descriptive Analysis (QDA) resulted only two from 13 evaluated attributes of emulsion added of herbal extracts showed significant difference when compared to BHA. However, there was no significant difference among emulsions added of natural and synthetic antioxidants when consumer test was applied. Results showed that rosmary and thym extracts presents a high potential to replace BHA in food emulsions.

No presente trabalho avaliaram-se os efeitos do óleo essencial do orégano (Origanum vulgare L.) sobre a fertilidade, desenvolvimento ponderal de ratos Wistar, potencial teratogênico, bem como o desenvolvimento físico, motor e comportamental das progênies. A dosagem inicial do óleo essencial foi obtida através de ensaio in vitro frente a linhagens de isolados de Candida spp. O óleo foi extraído pelo processo arraste de vapor e analisado por cromatografia GC/MS. Constituíram-se cinco grupos experimentais com 10 machos e 30 fêmeas cada, um grupo controle negativo (GC-) que recebeu o veículo da emulsão do óleo de orégano (água destilada + Tween 80 0, 001%) um grupo controle positivo (GC+) que recebeu os compostos majoritários do óleo, timol 3% e terpine-4-ol 3%, e três grupos tratados com a emulsão contendo óleo essencial do orégano contendo 3% V / V (GO1), 9% V/ V (GO2) e 27% V / V (GO3). Os animais foram tratados diariamente por via oral usando sonda oro-gástrica flexível, com mesmo volume (10 mg / mL). Os machos foram tratados durante 91 dias, sendo 70 dias antes do acasalamento e 21 dias de acasalamento, após este período, os machos foram eutanasiados para coleta de órgãos para análise histopatológica, coleta de sangue e processamento dos órgãos sexuais para contagens espermáticas. As fêmeas foram tratadas antes (14 dias) e durante o acasalamento, gestação (21 dias) e lactação (21 dias). Metade das fêmeas prenhes sofreu cesariana no 21º dia de gestação, e os fetos foram usados para a avaliação de teratogenia. O restante das fêmeas pariu a termo, tiveram o comportamento maternal avaliado e as suas proles foram avaliadas a partir do nascimento, quanto às características de desenvolvimento e testes reflexos. Na puberdade, aos 65 dias, um filhote de cada sexo por ninhada foi eutanasiado para avaliação histopatológica e contagens espermáticas e aos 75 dias de idade um macho de cada ninhada teve seu comportamento testado em campo aberto. Na idade adulta a prole formou casais não consaguineos para a realização do comportamento sexual. Os resultados mostram que a administração do óleo essencial nas diferentes doses não interferiu no desenvolvimento ponderal de machos e fêmeas tratados nem das suas progênies (ANOVA p > 0,05). Nos machos, o óleo essencial de orégano interferiu diminuindo o número de células espermáticas, o número total de espermatozóides armazenados na cauda do epidídimo e os níveis de testosterona plasmática, na morfologia espermática o óleo aumentou o percentual de malformações espermáticas nos grupos tratados, de forma dose dependentes, igualmente no controle positivo. Nas fêmeas a taxa de acasalamento apresentou diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo nas duas doses mais altas de óleo essencial (9% e 27%). Na dose mais alta houve perdas pós-implantação, diferentes estatisticamente do GC-. Na avaliação esquelética dos fetos, houve diferença estatisticamente significativa no percentual geral de fetos com anomalias esqueléticas, em relação ao controle negativo, em 3%, 9% e GC+. Com relação às progênies, não houve alterações estatísticamente significativas nos grupos, no que se refere ao desenvolvimento ponderal, nos testes reflexos, nas contagens espermáticas e dosagem de testosterona plasmática realizadas na puberdade, no teste de campo aberto e no teste de comportamento sexual. Com base nos resultados obtidos, é possível concluir que a dose inicial (3%), considerada terapêutica, é segura para a reprodução de ratos Wistar, no entanto quando esta dose é aumentada para 9% e 27%, alterações nas variáveis reprodutivas dos machos podem acontecer. / In the present study were evaluated the effects of the essential oil of oregano (Origanum vulgare L.) on fertility and weight development of rats on the teratogenic potential as well as the physical, motor and behavioral of the progenies. The initial dose was obtained by in vitro against strains of Candida isolates spp. The oil was extracted by the process of steam drag chromatography and analyzed by GC / MS. Constituted five experimental groups with 10 males and 30 females each, a negative control group (GC-) who received vehicle emulsion emulsion of oil of oregano (distilled water + Tween 80 0, 001%) a positive control group (CG + ) receiving the major compounds from the oil, thymol 3% and terpine-4-ol 3% and three groups treated with the emulsion containing essential oil of oregano containing 3% V / V (GO1 ), 9% V / V (GO2) and 27% V / V (GO3). The animals were treated daily orally using orogastric tube flexible, with the same volume (10 mg / ml). Males were treated for 91 days with 70 days prior to mating and during mating 21 days, after this period, males were euthanized to collect organs for histopathology, blood collection and processing of sexual organs for sperm counts. Females were treated before (14 days) and during mating, gestation (21 days) and lactation (21 days). Half of pregnant females underwent cesarean section on day 21 of gestation, and the fetuses were used for the evaluation of teratogenicity. The rest of the females gave birth at term, had evaluated whether maternal behavior and their offspring were evaluated from birth, for the development traits and reflex tests. At puberty, 65 days, a pup of each sex per litter was euthanized for histopathological assessment and sperm counts at 75 days of age a male from each litter had tested their behavior in the open field. In adulthood the offspring formed consaguineos couples not to perform sexual behavior. The results showed that administration of essential oil at different doses did not affect the weight development of males and females treated or their progeny (ANOVA p> 0.05). In males, the essential oil of oregano interfered decreasing the number of sperm cells, total number of sperm stored in the cauda epididymis and plasma testosterone levels on sperm morphology oil increasing the percentage of sperm abnormalities in the treated groups in a dose dependent manner, equally positive control. In females mating rate was statistically significantly different compared to negative control group in the two higher doses of essential oil (GO2 and GO3). At the higher dose (GO3) losses occurred before and after deployment, the GC-statistically different. In assessing skeletal fetuses of females who underwent cesarean section, there was a statistically significant difference in the overall percentage of fetuses with skeletal anomalies, relative to the negative control in GO1, GO2 and GC +. Regarding progenies, no significant statistics changes in groups, with regard to weight development, testing reflexes, sperm counts and measurement of plasma testosterone at puberty, in open field test, in the test of sexual behavior Based on these results, we conclude that the initial dose (3%), considered therapy is safe for reproduction of rats, however when this dose is increased to 9% and 27%, changes in the male reproductive variables can occur.

No presente trabalho avaliaram-se os efeitos do óleo essencial do orégano (Origanum vulgare L.) sobre a fertilidade, desenvolvimento ponderal de ratos Wistar, potencial teratogênico, bem como o desenvolvimento físico, motor e comportamental das progênies. A dosagem inicial do óleo essencial foi obtida através de ensaio in vitro frente a linhagens de isolados de Candida spp. O óleo foi extraído pelo processo arraste de vapor e analisado por cromatografia GC/MS. Constituíram-se cinco grupos experimentais com 10 machos e 30 fêmeas cada, um grupo controle negativo (GC-) que recebeu o veículo da emulsão do óleo de orégano (água destilada + Tween 80 0, 001%) um grupo controle positivo (GC+) que recebeu os compostos majoritários do óleo, timol 3% e terpine-4-ol 3%, e três grupos tratados com a emulsão contendo óleo essencial do orégano contendo 3% V / V (GO1), 9% V/ V (GO2) e 27% V / V (GO3). Os animais foram tratados diariamente por via oral usando sonda oro-gástrica flexível, com mesmo volume (10 mg / mL). Os machos foram tratados durante 91 dias, sendo 70 dias antes do acasalamento e 21 dias de acasalamento, após este período, os machos foram eutanasiados para coleta de órgãos para análise histopatológica, coleta de sangue e processamento dos órgãos sexuais para contagens espermáticas. As fêmeas foram tratadas antes (14 dias) e durante o acasalamento, gestação (21 dias) e lactação (21 dias). Metade das fêmeas prenhes sofreu cesariana no 21º dia de gestação, e os fetos foram usados para a avaliação de teratogenia. O restante das fêmeas pariu a termo, tiveram o comportamento maternal avaliado e as suas proles foram avaliadas a partir do nascimento, quanto às características de desenvolvimento e testes reflexos. Na puberdade, aos 65 dias, um filhote de cada sexo por ninhada foi eutanasiado para avaliação histopatológica e contagens espermáticas e aos 75 dias de idade um macho de cada ninhada teve seu comportamento testado em campo aberto. Na idade adulta a prole formou casais não consaguineos para a realização do comportamento sexual. Os resultados mostram que a administração do óleo essencial nas diferentes doses não interferiu no desenvolvimento ponderal de machos e fêmeas tratados nem das suas progênies (ANOVA p > 0,05). Nos machos, o óleo essencial de orégano interferiu diminuindo o número de células espermáticas, o número total de espermatozóides armazenados na cauda do epidídimo e os níveis de testosterona plasmática, na morfologia espermática o óleo aumentou o percentual de malformações espermáticas nos grupos tratados, de forma dose dependentes, igualmente no controle positivo. Nas fêmeas a taxa de acasalamento apresentou diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo nas duas doses mais altas de óleo essencial (9% e 27%). Na dose mais alta houve perdas pós-implantação, diferentes estatisticamente do GC-. Na avaliação esquelética dos fetos, houve diferença estatisticamente significativa no percentual geral de fetos com anomalias esqueléticas, em relação ao controle negativo, em 3%, 9% e GC+. Com relação às progênies, não houve alterações estatísticamente significativas nos grupos, no que se refere ao desenvolvimento ponderal, nos testes reflexos, nas contagens espermáticas e dosagem de testosterona plasmática realizadas na puberdade, no teste de campo aberto e no teste de comportamento sexual. Com base nos resultados obtidos, é possível concluir que a dose inicial (3%), considerada terapêutica, é segura para a reprodução de ratos Wistar, no entanto quando esta dose é aumentada para 9% e 27%, alterações nas variáveis reprodutivas dos machos podem acontecer. / In the present study were evaluated the effects of the essential oil of oregano (Origanum vulgare L.) on fertility and weight development of rats on the teratogenic potential as well as the physical, motor and behavioral of the progenies. The initial dose was obtained by in vitro against strains of Candida isolates spp. The oil was extracted by the process of steam drag chromatography and analyzed by GC / MS. Constituted five experimental groups with 10 males and 30 females each, a negative control group (GC-) who received vehicle emulsion emulsion of oil of oregano (distilled water + Tween 80 0, 001%) a positive control group (CG + ) receiving the major compounds from the oil, thymol 3% and terpine-4-ol 3% and three groups treated with the emulsion containing essential oil of oregano containing 3% V / V (GO1 ), 9% V / V (GO2) and 27% V / V (GO3). The animals were treated daily orally using orogastric tube flexible, with the same volume (10 mg / ml). Males were treated for 91 days with 70 days prior to mating and during mating 21 days, after this period, males were euthanized to collect organs for histopathology, blood collection and processing of sexual organs for sperm counts. Females were treated before (14 days) and during mating, gestation (21 days) and lactation (21 days). Half of pregnant females underwent cesarean section on day 21 of gestation, and the fetuses were used for the evaluation of teratogenicity. The rest of the females gave birth at term, had evaluated whether maternal behavior and their offspring were evaluated from birth, for the development traits and reflex tests. At puberty, 65 days, a pup of each sex per litter was euthanized for histopathological assessment and sperm counts at 75 days of age a male from each litter had tested their behavior in the open field. In adulthood the offspring formed consaguineos couples not to perform sexual behavior. The results showed that administration of essential oil at different doses did not affect the weight development of males and females treated or their progeny (ANOVA p> 0.05). In males, the essential oil of oregano interfered decreasing the number of sperm cells, total number of sperm stored in the cauda epididymis and plasma testosterone levels on sperm morphology oil increasing the percentage of sperm abnormalities in the treated groups in a dose dependent manner, equally positive control. In females mating rate was statistically significantly different compared to negative control group in the two higher doses of essential oil (GO2 and GO3). At the higher dose (GO3) losses occurred before and after deployment, the GC-statistically different. In assessing skeletal fetuses of females who underwent cesarean section, there was a statistically significant difference in the overall percentage of fetuses with skeletal anomalies, relative to the negative control in GO1, GO2 and GC +. Regarding progenies, no significant statistics changes in groups, with regard to weight development, testing reflexes, sperm counts and measurement of plasma testosterone at puberty, in open field test, in the test of sexual behavior Based on these results, we conclude that the initial dose (3%), considered therapy is safe for reproduction of rats, however when this dose is increased to 9% and 27%, changes in the male reproductive variables can occur.

No presente trabalho avaliaram-se os efeitos do óleo essencial do orégano (Origanum vulgare L.) sobre a fertilidade, desenvolvimento ponderal de ratos Wistar, potencial teratogênico, bem como o desenvolvimento físico, motor e comportamental das progênies. A dosagem inicial do óleo essencial foi obtida através de ensaio in vitro frente a linhagens de isolados de Candida spp. O óleo foi extraído pelo processo arraste de vapor e analisado por cromatografia GC/MS. Constituíram-se cinco grupos experimentais com 10 machos e 30 fêmeas cada, um grupo controle negativo (GC-) que recebeu o veículo da emulsão do óleo de orégano (água destilada + Tween 80 0, 001%) um grupo controle positivo (GC+) que recebeu os compostos majoritários do óleo, timol 3% e terpine-4-ol 3%, e três grupos tratados com a emulsão contendo óleo essencial do orégano contendo 3% V / V (GO1), 9% V/ V (GO2) e 27% V / V (GO3). Os animais foram tratados diariamente por via oral usando sonda oro-gástrica flexível, com mesmo volume (10 mg / mL). Os machos foram tratados durante 91 dias, sendo 70 dias antes do acasalamento e 21 dias de acasalamento, após este período, os machos foram eutanasiados para coleta de órgãos para análise histopatológica, coleta de sangue e processamento dos órgãos sexuais para contagens espermáticas. As fêmeas foram tratadas antes (14 dias) e durante o acasalamento, gestação (21 dias) e lactação (21 dias). Metade das fêmeas prenhes sofreu cesariana no 21º dia de gestação, e os fetos foram usados para a avaliação de teratogenia. O restante das fêmeas pariu a termo, tiveram o comportamento maternal avaliado e as suas proles foram avaliadas a partir do nascimento, quanto às características de desenvolvimento e testes reflexos. Na puberdade, aos 65 dias, um filhote de cada sexo por ninhada foi eutanasiado para avaliação histopatológica e contagens espermáticas e aos 75 dias de idade um macho de cada ninhada teve seu comportamento testado em campo aberto. Na idade adulta a prole formou casais não consaguineos para a realização do comportamento sexual. Os resultados mostram que a administração do óleo essencial nas diferentes doses não interferiu no desenvolvimento ponderal de machos e fêmeas tratados nem das suas progênies (ANOVA p > 0,05). Nos machos, o óleo essencial de orégano interferiu diminuindo o número de células espermáticas, o número total de espermatozóides armazenados na cauda do epidídimo e os níveis de testosterona plasmática, na morfologia espermática o óleo aumentou o percentual de malformações espermáticas nos grupos tratados, de forma dose dependentes, igualmente no controle positivo. Nas fêmeas a taxa de acasalamento apresentou diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo nas duas doses mais altas de óleo essencial (9% e 27%). Na dose mais alta houve perdas pós-implantação, diferentes estatisticamente do GC-. Na avaliação esquelética dos fetos, houve diferença estatisticamente significativa no percentual geral de fetos com anomalias esqueléticas, em relação ao controle negativo, em 3%, 9% e GC+. Com relação às progênies, não houve alterações estatísticamente significativas nos grupos, no que se refere ao desenvolvimento ponderal, nos testes reflexos, nas contagens espermáticas e dosagem de testosterona plasmática realizadas na puberdade, no teste de campo aberto e no teste de comportamento sexual. Com base nos resultados obtidos, é possível concluir que a dose inicial (3%), considerada terapêutica, é segura para a reprodução de ratos Wistar, no entanto quando esta dose é aumentada para 9% e 27%, alterações nas variáveis reprodutivas dos machos podem acontecer. / In the present study were evaluated the effects of the essential oil of oregano (Origanum vulgare L.) on fertility and weight development of rats on the teratogenic potential as well as the physical, motor and behavioral of the progenies. The initial dose was obtained by in vitro against strains of Candida isolates spp. The oil was extracted by the process of steam drag chromatography and analyzed by GC / MS. Constituted five experimental groups with 10 males and 30 females each, a negative control group (GC-) who received vehicle emulsion emulsion of oil of oregano (distilled water + Tween 80 0, 001%) a positive control group (CG + ) receiving the major compounds from the oil, thymol 3% and terpine-4-ol 3% and three groups treated with the emulsion containing essential oil of oregano containing 3% V / V (GO1 ), 9% V / V (GO2) and 27% V / V (GO3). The animals were treated daily orally using orogastric tube flexible, with the same volume (10 mg / ml). Males were treated for 91 days with 70 days prior to mating and during mating 21 days, after this period, males were euthanized to collect organs for histopathology, blood collection and processing of sexual organs for sperm counts. Females were treated before (14 days) and during mating, gestation (21 days) and lactation (21 days). Half of pregnant females underwent cesarean section on day 21 of gestation, and the fetuses were used for the evaluation of teratogenicity. The rest of the females gave birth at term, had evaluated whether maternal behavior and their offspring were evaluated from birth, for the development traits and reflex tests. At puberty, 65 days, a pup of each sex per litter was euthanized for histopathological assessment and sperm counts at 75 days of age a male from each litter had tested their behavior in the open field. In adulthood the offspring formed consaguineos couples not to perform sexual behavior. The results showed that administration of essential oil at different doses did not affect the weight development of males and females treated or their progeny (ANOVA p> 0.05). In males, the essential oil of oregano interfered decreasing the number of sperm cells, total number of sperm stored in the cauda epididymis and plasma testosterone levels on sperm morphology oil increasing the percentage of sperm abnormalities in the treated groups in a dose dependent manner, equally positive control. In females mating rate was statistically significantly different compared to negative control group in the two higher doses of essential oil (GO2 and GO3). At the higher dose (GO3) losses occurred before and after deployment, the GC-statistically different. In assessing skeletal fetuses of females who underwent cesarean section, there was a statistically significant difference in the overall percentage of fetuses with skeletal anomalies, relative to the negative control in GO1, GO2 and GC +. Regarding progenies, no significant statistics changes in groups, with regard to weight development, testing reflexes, sperm counts and measurement of plasma testosterone at puberty, in open field test, in the test of sexual behavior Based on these results, we conclude that the initial dose (3%), considered therapy is safe for reproduction of rats, however when this dose is increased to 9% and 27%, changes in the male reproductive variables can occur.

Este trabalho de Mestrado teve por objetivo avaliar a atividade antifúngica in vitro e em queijo Minas Padrão de duas formulações (A e B) de nanoemulsões encapsulando óleo essencial de orégano (Origanum vulgare) produzidas pelo método da temperatura de inversão de fases (método PIT). Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp. foram os fungos identificados nas amostras de queijo Minas Padrão deteriorados. Tais cepas foram utilizadas na avaliação da atividade antifúngica in vitro e em queijo Minas Padrão do óleo de orégano nanoemulsionado. Nos testes in vitro foram determinadas as concentrações mínimas inibitórias (CMI) do óleo essencial de orégano puro e nanoemulsionado sobre o Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp. Foram utilizadas fatias de queijo Minas Padrão para avaliar o efeito inibitório das nanoemulsões contendo óleo essencial de orégano. Por último foi avaliado o efeito inibitório das nanoemulsões durante o processo de maturação de queijos Minas Padrão. Determinaram-se valores de CMI para óleo essencial puro de 0,2; 0,3 µg/ml para Fusarium sp. e Penicillium sp., respectivamente. Enquanto para as duas formulações de nanoemulsão; os valores de CMI dependeram da quantidade de óleo essencial de orégano que estava contido nelas, obtendo-se valores de 0,26; 0,11 e 1,62 µg/ml para a formulação A de óleo de orégano nanoemulsionado sobre Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp., respectivamente, e CMIs de 0,32; 0,1 e 0,8 µg/ml para a formulação B de nanoemulsão sobre os mesmos gêneros de fungos. Os ensaios nas fatias de queijo evidenciaram que o efeito das CMIs, quando aplicadas na matriz alimentícia, foi nulo, permitindo o desenvolvimento normal dos fungos avaliados, da mesma forma se determinou a importância da atividade de água no crescimento fúngico. Já nos queijos em ambiente de maturação o efeito inibitório do óleo de orégano foi pouco satisfatório, o que indicou a importância do controle dos demais parâmetros ambientais no ambiente de maturação. Pode-se concluir que o óleo essencial de orégano nanoemulsionado apresentou efeito inibitório contra os gêneros de fungos avaliados. Quando controlados parâmetros ambientais como temperatura de armazenamento e atividade de água, seu efeito inibitório pode ser amplamente melhorado, apresentando-o como potencial alternativa na conservação dos alimentos. / This Master Thesis aimed to evaluate the in vitro antifungal activity and in Minas Padrão cheese of two formulations (A and B) of nanoemulsions encapsulating essential oil of oregano (Origanum vulgare) produced by the method of phase inversion temperature (PIT method). Cladosporium sp., Fusarium sp. and Penicillium sp. fungi were identified in deteriorated cheese samples. These strains were used in the evaluation of antifungal activity of oregano essential oil nanoemulsions, both in vitro and in cheese. Minimum inhibitory concentrations (MIC) of essential oil of pure oregano oil and nanoemulsions were determined. Cheese slices were used to evaluate the inhibitory effect of nanoemulsions containing essential oil of oregano. Finally the inhibitory effect of encapsulated oregano oil was tested during cheese ripening. MIC values determined for pure essential oil were 0.20 and 0.3 µg/ml for Fusarium sp. and Penicillium sp., respectively. As for the two nanoemulsion formulations, MIC values depended on the amount of essential oil of oregano which was contained therein, and the values for formulation A were 0.26, 0.11 and 1.62 µg/ml for Cladosporium sp., Fusarium sp. and Penicillium sp, respectively. For formulation B, the values of MIC were 0.32, 0.10 and 0.80 µg/ml. The tests on the cheese slices showed that the effect of MIC when applied in the food matrix was null, as the fungi growth was not avoided. As for the tests during cheese ripening, the inhibitory effect of oregano oil in nanoemulsions was unsatisfactory, which indicated the importance of controlling other environmental parameters in the maturation chamber. It can be concluded that the nanoemulsions of essential oil presented inhibitory effect against the genera of fungi evaluated. Controlled environmental parameters such as storage temperature and water activity, its inhibitory effect can be highly improved, and the nanoemulsions of oregano oil can be seen as a potential system for food preservation.

A oxidação de produtos de base lipídica é um dos problemas enfrentados pela indústria alimentícia, resultando na formação de compostos indesejáveis que alteram as características sensoriais de alimentos lipídicos e reduzem sua qualidade nutricional. A incorporação de antioxidantes prolonga a vida útil dos produtos que contém lipídios em sua composição, retardando o processo de oxidação. Os antioxidantes utilizados pela indústria alimentícia são principalmente sintéticos, tais como o BHA, BHT, PG, e TBHQ. Entretanto, devido aos estudos sobre a possível toxicidade dos mesmos, o uso de antioxidantes naturais presentes em ervas e especiarias representa uma alternativa promissora. Visando encontrar alternativas aos antioxidantes sintéticos, neste trabalho foram utilizados extratos etanólicos de orégano (Origanum vulgare L.), alecrim (Rosmarinus officinalis L.) e tomilho (Thymus vulgaris L.), que apresentam compostos fenólicos e atividade antioxidante em sistemas in vitro, em emulsões lipídicas. O objetivo foi avaliar a capacidade antioxidante dos extratos e suas misturas binárias e ternárias em um sistema modelo (emulsão alimentícia) e o impacto da adição de extratos de ervas sobre o perfil sensorial dos produtos testados. Através do acompanhamento do valor de índice de peróxido, observou-se que a adição de extrato de alecrim, bem como suas misturas com extrato de tomilho, em doses de até 200 mg.kg-1 apresentaram proteção frente à oxidação das emulsões em condições aceleradas, com efeito semelhante à adição do antioxidante BHA. Em relação à analise sensorial descritiva, dos 13 atributos avaliados, dois apresentam diferença estatística entre amostras com antioxidantes naturais comparados ao antioxidante sintético, que são a aparência consiste e o sabor de ervas. Para teste de aceitação, emulsões adicionadas de misturas de extratos de tomilho e alecrim não deferiam de amostras adicionadas de BHA, indicando que não há alterações sensoriais perceptíveis nas doses utilizadas. Estes resultados demonstraram a promissora utilização de extratos de ervas em substituição ao uso de antioxidantes sintéticos. / The oxidation of lipid-based products is one of the problems faced by the food industry, due to production of undesirable compounds that affect organoleptic characteristics of food lipid and their nutritional quality. Antioxidants added to food lipids avoid the oxidation process and prolong product the shelf life. The antioxidants used by the food industry are mainly synthetic such as BHA, BHT, PG, and TBHQ. However, due to the possible toxicological effects for human consumption, natural antioxidants present in herbs and spices represents a promising alternative. In this work ethanolic extracts obtained from dried oregano (Origanum vulgare L.), rosemary (Rosmarinus officinalis L.) and thyme (Thymus vulgaris L.), presenting high polyphenol content and in vitro antioxidant activity, were applied to a lipid model systems. This project aimed to evaluate the antioxidant capacity of binary and ternary mixtures of these extracts and the impact on sensory profile of tested products. Rosemary extracts and its mixtures with thym extracts added to emulsions subject in concentrations up to 200 mg.kg-1 presented a effective protection under accelerated conditions, similar to the BHA effect. Regarding sensory description, according to Quantitative Descriptive Analysis (QDA) resulted only two from 13 evaluated attributes of emulsion added of herbal extracts showed significant difference when compared to BHA. However, there was no significant difference among emulsions added of natural and synthetic antioxidants when consumer test was applied. Results showed that rosmary and thym extracts presents a high potential to replace BHA in food emulsions.