Mestre -- Escola Nacional de Saude Publica, Rio de Janeiro, 1999.

Os impactos em ambientes aquáticos causados pela presença de pesticidas, dentre eles os organofosforados, podem provocar lesões em peixes. Assim, os efeitos o organofosforado Azodrin® 400 cujo princípio ativo é o monocrotofós, sobre as brânquias de juvenis de Piaractus mesopotamicus (pacu), foram investigados. Os peixes foram aclimatados às condições laboratoriais por uma semana. Para a determinação da faixa subletal do organofosforado Azodrin® 400, foram testadas as concentrações 6 mg/L, 3 mg/L, 1,5 mg/L e 0,75 mg/L. A faixa subletal obtida ficou entre 0.75 mg/L e 1.5 mg/L. Assim, a concentração utilizada para os testes em nível subletal foi 1,08 mg/L do organofosforado. Após a aclimatação os peixes foram expostos, via hídrica, a 1,08 mg/L do organofosforado. Os tecidos foram coletadas nos tempos 1h, 4h, 12h, 24h, 48h, 72h e 96h de exposição. Os peixes foram sacrificados após secção medular e a segunda brânquia direita foi fixada em Alfac e processada para microscopia de luz. Os cortes foram corados em Hematoxilina e Eosina (HE) e as imagens foram capturadas em fotomicroscópio Olympus BX 51 acoplado a computador através do programa Image-Pro Express. Para o estudo ultraestrutural, amostras da segunda brânquia esquerda foram fixadas em Karnovsky e em tampão cacodilato 0,2 M, pH 7,2, pós fixadas em tetróxido de ósmio 2%, pH 7,2, tratadas com acetato de uranila, desidratadas em série alcoólica crescente e emblocadas em resina (Poly/EMBED 812). Os cortes ultrafinos foram contrastados com acetato de uranila 2% e Reynolds. Para o estudo ultraestrutural micrografias foram capturadas em microscópio eletrônico de transmissão e as patologias descritas e quantificadas foram: o descolamento epitelial, hiperplasia, fusão e aneurisma. O descolamento epitelial foi quantificado a partir de uma classificação estabelecida neste trabalho em mínimo, brando, moderado, severo e intenso. O descolamento foi encontrado em todos os tempos analisados, sendo mais intenso após 48 horas de exposição. Hiperplasia de células epiteliais foi mais freqüente após 24 horas de exposição. A fusão entre lamelas secundárias adjacentes foi predominante em 96 horas de exposição. O aneurisma foi mais freqüente após 12 horas de exposição. Estas histopatologias sugerem diminuição na eficiência das trocas gasosas com conseqüentes danos para a saúde dos juvenis de pacu

Made available in DSpace on 2012-09-06T01:12:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 170.pdf: 2818039 bytes, checksum: edcd3108582a855857651e89e009720d (MD5) Previous issue date: 1999 / Devido à disseminaçao do uso de inseticidas no mundo moderno, pode-se observar uma grande ocorrência de intoxicaçoes humanas, quer intoxicaçoes agudas (principalmente ingestao acidental, em crianças, e tentativa de suicídio, em adultos), quer intoxicaçoes crônicas ocupacionais. Dentre os inseticidas mais importantes na toxicologia ocupacional, clínica e de urgência, encontram-se os compostos inibidores da colinesterase, os inseticidas carbamatos e organofosforados. Tais produtos têm uma alta toxicidade, sendo bem absorvidos por todas as vias. Sao responsáveis por um grande número de intoxicaçoes, muitas destas fatais. Atualmente, no Rio de Janeiro, um pesticida agrícola da classe dos carbamatos, o aldicarb, tem sido usado ilegalmente (como raticida), sendo responsável por um grande número de intoxicaçoes humanas. Propoe-se a fazer uma caracterizaçao epidemiológica do evento Intoxicaçoes por "Chumbinho" no Rio de Janeiro, e uma revisao clínica, laboratorial e terapêutica a respeito do tema, seguidas de uma discussao de 40 casos que deram entrada no Serviço de Emergência do Hospital Universitário Antônio Pedro, com suspeita de intoxicaçao por "Chumbinho". A partir desta análise, apresenta-se uma proposta de abordagem inicial destes pacientes, tentando, desta forma, contribuir para o entendimento destas intoxicaçoes, e para a diminuiçao da mortalidade referente às mesmas, além de promover um forum de discussao sobre um tema que vem preocupando profissionais de saúde em todo o Estado.

En 1845 Thénard sintetizó los primeros compuestos organofosforadospor interacción de fosfuro de calcio y cloruro de metilo. Hoy en día es posibleobtener compu_estos como fosfinas primarias, secundarias o terciarias, aminofosfinas, estanilfosfinas, bifosfinas, ciclotetrafosfinas, sales de fosfonio, óxidos de fosfinas secundarias o terciarias, haluros fosfonosos y fosfinosos, haluros de fosfonilo y fosfinilo, ácidos fosfónicos, difosfónicos o fosfínicos, fosfitos, tiofosfitos, tiofosfonitos, fosfatos y polihidroxifosfatos [1]. Si se tratara de hacer una lista de compuestos de fósforo, la extensión de la misma sería considerable.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-05-05T11:39:09Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 7385250 bytes, checksum: 2983ca16275fda4bacce5f9621eb5a0f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-05T11:39:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 7385250 bytes, checksum: 2983ca16275fda4bacce5f9621eb5a0f (MD5) Previous issue date: 2014-12-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Os fosforamidatos são uma classe de compostos que apresentam pelo menos um grupo –NR1R2 (R1 e R2 = alquila, arila) em suas estruturas. Relatos na literatura evidenciam diversas atividades biológicas, seja na área médica, agrícola ou industrial para esses compostos. O presente trabalho teve por objetivo sintetizar novos fosforamidatos, visando à avaliação de suas atividades fitotóxica e inibitória de urease. A síntese baseou-se em fenóis substituídos como material de partida. O tratamento dos fenóis com cloreto de fosforila na presença de trietilamina forneceu os respectivos compostos organofosfatos diclorados. A subsequente reação destes organofosfatos com aminas na presença de trietilamina resultou na formação de 19 compostos fosforamidatos. Estes compostos foram reunidos com mais 12 substâncias dessa classe sintetizados no Laboratório de Síntese e Análise de Agroquímicos e suas atividades biológicas foram avaliadas contra Sorghum bicolor e Cucumis sativus. Os compostos tris(4-bromofenil)fosfato e 4-fluorofenil-N,N ́-dimorfolin- 1-ilfosfinato apresentaram valores de inibição superiores ao observado para o Glifosato sobre S. bicolor, enquanto que para C. sativus os mais ativos foram os compostos 4-clorofenil-di(piperidin-1-il)fosfinato e bis(3-clorofenil)- dietilfosforamidato, que apresentaram 82 e 83% de inibição, respectivamente, sobre o sistema aéreo na maior concentração (1 mmol L-1). Essas substâncias também tiveram suas atividades avaliadas contra a inibição de urease. Das 25 substâncias testadas, seis apresentaram atividade comparável ou superior ao controle positivo (tiouréia), sendo que o composto bis(4-bromofenil)-N- cicloexilamidofosfato parece ser o mais promissor. As propriedades ADMET previstas para estes fosforoamidatos estão de acordo com os requisitos gerais para potenciais fármacos, confirmando que estes compostos possuem propriedades físico-químicas que os qualificam para apresentarem satisfatórias farmacocinética e biodisponibilidade. Além disso, não foram observadas violações da regra de Lipinski para a maioria dos fosforoamidatos. A relação estrutura-atividade analisada para as 25 substâncias sugere que a presença do grupo cicloexila é uma característica estrutural importante associada com a atividade inibitória apresentada pelos compostos contra a enzima. Cálculos baseados na teoria de funcional da densidade foram realizados para obtenção dos valores de energia de HOMO e LUMO, momento de dipolo molecular e potencial eletrostático dos compostos avaliados. Descrevemos ainda neste trabalho um estudo experimental e teórico combinando estrutura molecular e RMN dos fosforoamidatos furano-2-il-N,N- diisopropilamidoclorofosfato e furan-2-il-N,N,N ́,N ́-diciclohexilamidofosfato. Na escala de tempo da RMN uma rotação livre das ligações simples C-N/P-N foi observada em temperatura ambiente (298 K), enquanto que a rotação é interrompida abaixo de 195 K para o furano-2-il-N,N- diisopropilamidoclorofosfato. A partir das análises dos dados da RMN, a energia de ativação livre (G#) para a rotação das ligações C-N/P-N foi calculada como 9,9 ± 0,3 kcal mol-1. Os dados experimentais foram reforçados por cálculos teóricos utilizando o método da teoria da densidade funcional B3LYP e conjunto de bases 6-31G(d) que forneceu energia de ativação (E#) igual a 9,2 kcal mol-1. As estruturas dos compostos foram investigadas por difração de raios-X, e verificou-se que o furano-2-il-N,N- diisopropilamidoclorofosfato está na forma de mistura racêmica. Por fim, foram determinados os deslocamentos químicos de RMN de 1H e 13 C para três fosforamidatos empregando-se cálculos DFT, nos níveis B3LYP, WP04, TPSSh, M062X and wB97XD, e diferentes bases, levando-se em consideração a distribuição de Boltzamann para cada confôrmero. Os valores experimentais foram comparados com os teóricos e avaliados usando correlação linear, erro absoluto médio, desvio médio quadrático. Para o caso do RMN de 13 C, os resultados obtidos com GIAO/wB97XD/cc-pVTZ/SCRF apresentaram o menor RMSD (2,073), mas requerendo maior tempo de processamento. O melhor custo-benefício neste caso foi obtido empregando-se GIAO/B3LYP/6-31G(d,p)/SCRF que forneceu o valor de desvio médio quadrático igual a 2,121 a um custo de CPU vinte e seis vezes menor. No caso do RMN de 1H a combinação CSGT/TPSSh/cc-pVTZ/SCRF forneceu o valor de desvio médio quadrático igual a 0,070. Reduzindo o tempo computacional uma vez e meia (CSGT/B3LYP/6-311++G(2d,p)/SCRF) foi possível obter um bom resultado (desvio médio quadrático igual a 0,088). De modo geral, avaliando-se os parâmetros estatísticos, o método que se mostrou mais adequado a essa classe de compostos foi CSGT/wB97XD/cc-pVTZ/SCRF. / Phosphoramidates is a class of compounds which has at least one -NR1R2 group in its structure (R1 and R2 = alkyl, aryl). Reports in the literature show that these compounds have several biological activities, whether in medical, agricultural or industrial area. This study aimed to synthesize new phosphoramidates in order to evaluate their phytotoxic and urease inhibitory activities. Substituted phenols were used as starting material in the synthesis route. The reaction of phenols with phosphoryl chloride, in the presence of trimethylamine, provided the respective dichlorinated organophosphates compounds. The subsequent reaction of these organophosphates with amines and trimethylamine resulted in the formation of 19 phosphoramidate compounds. These compounds were combined with 12 other substances previously synthetized at “Laboratório de Síntese e Análise de Agroquímicos”. Their biological activities were evaluated for Sorghum bicolor and Cucumis sativus. Compunds tris(4-bromophenyl)phosphate and 4-fluorophenyl-N,N'-dimorfolin-1- ylphosphinate showed higher inhibition values than glyphosate over Sorghum bicolor. For C. sativus, the most active compounds were 4-chlorophenyl- di(piperidin-1-yl)phosphinate and bis(3-chlorophenyl)-diethylphosphoramidate with 82 and 83% of inhibition, respectively. This is the result for the aerial system at the higher concentration (1 mmol L-1). These substances were also tested for urease inhibition. From the 25 tested substances, six had their activity comparable to or higher than the positive control (thiourea). From all the tested compounds, bis(4-bromophenyl)-N-cyclohexylaminophosphate seems to be the most promising molecule. The predicted ADMET properties for these phosphoramidates are in accordance with the general requirements for potential drugs. This fact confirms that these compounds have the physicochemical properties that qualify them to present satisfactory pharmacokinetics and bioavailability. Furthermore, there were no violations of Lipinski rule for most phosphoramidates. The analyzed structure-activity relationship of the 25 substances suggests that the presence of the cyclohexyl group is an important structural feature for the inhibitory activity showed by these compounds against the enzyme. Calculations based on density functional theory were carried out to obtain the energy values of HOMO and LUMO, molecular dipole moment, and electrostatic potential for the evaluated compounds. This work also presents an experimental and theoretical study combining NMR and molecular structure of the diisopropylamidochlorophosphate phosphoramidates and furan-2-yl-N,N- furan-2-yl-N,N,N',N'- dicyclohexylamidophosphate. On a time dependent NMR study, a free rotation was observed for the single bonds C-N/P-N at room temperature (298 K). However, this rotation is not observed at temperatures lower than 195 K for furan-2-yl-N,N-diisopropylamidochlorophosphate. Based on the NMR data, the free activation energy (G#) for the rotation of C-N/P-N bonds was calculated as 9.9 ± 0.3 kcal mol-1. The experimental data was supported by theoretical calculations using the density functional theory B3LYP method and the 6- 31G(d) basis set, which provided an activation energy (E#) of 9.2 kcal mol-1. The structures of the compounds were investigated by X-ray diffraction, and it was found that furan-2-yl-N,N-diisopropylamidochlorophosphate is in the form of racemic mixture. Ultimately, it was determined the 1H and 13 C NMR chemical shifts for three phosphoramidates employing DFT calculations on B3LYP, WP04, TPSSh, M062X, wB97XD levels and different bases. The distribution for each Boltzmann conformer was taken into consideration. The experimental and theoretical values were compared and evaluated using linear correlation, mean absolute error and root-mean-square deviation (RMSD). For 13 C NMR, the results obtained with GIAO/wB97XD/cc-pVTZ/SCRF showed the lowest RMSD (2.073), but requiring more processing time. The best cost-benefit was obtained employing GIAO/B3LYP/6-31G(d,p)/SCRF, which provided RMSD value of xxv 2.121 with a twenty-six times smaller CPU cost. For 1H NMR, the combination CSGT/TPSSh/cc-pVTZ/SCRF provided a RMSD value of 0.070. Reducing the computational time by a factor of one and a half (CSGT/B3LYP/6- 311++G(2d,p)/SCRF), it was possible to obtain a good result (RMSD of 0.088). In general, after evaluating the statistical parameters, the method that was more suitable for this class of compounds was CSGT/wB97XD/cc-pVTZ/SCRF.

Made available in DSpace on 2012-05-07T14:44:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000006.pdf: 936340 bytes, checksum: 0878be8d8a1fa6d47b55bd1be9adbfca (MD5) Previous issue date: 2006 / O objetivo principal deste trabalho foi analisar o polimorfismo genético do gene da esterase e, avaliar o seu papel em possíveis mecanismos de resistência ao temephos em populações de Aedes aegypti. Com este propósito, foram utilizadas duas linhagens de laboratório: a Rockefeller (padrão de susceptibilidade a todas as classes de inseticidas) e a Recife-Resistente (mantida sob forte pressão de seleção pelo temephos durante cinco gerações); e nove populações naturais: oito provenientes da região metropolitana do Recife e uma de Araripe (CE). Elas foram coletadas em forma de ovos, durante os anos de 2004 e 2005. Foram realizados ensaios bioquímicos, eletroforese de isoenzimas, PCR e seqüenciamento de parte do gene, e PCR em Tempo Real para comparar a quantidade de cópias do gene na linhagem resistente e susceptível, e em populações naturais. Testes bioquímicos realizados apenas na linhagem Recife-Resistente demonstraram a presença do mecanismo de resistência metabólica através de uma alta atividade esterásica. O padrão das esterases foi observado em nove populações, em géis de poliacrilamida 6 por cento, corados com substratos específicos para as enzimas alfa e beta-esterase. Os valores de heterozigosidade observada (Ho) variaram de 0,278 a 0,533 em 2004, e em 2005, de 0,388 a 0,608. Estes géis ainda apresentaram um loco de alta atividade esterásica, denominado de loco 1. Neste loco, o alelo responsável pela maior atividade esterásica foi chamado de 3. Sua freqüência variou em 2004 de 0,100 em Dois Irmãos a 0,191 em Alto José do Pinho, e em 2005, caiu para 0,071 e 0,107 respectivamente. Na linhagem Recife-Resistente, a freqüência deste alelo foi de 0,214. O seqüenciamento de parte do exon 4 do gene da alfa-esterase, mostrou que o fragmento analisado, de aproximadamente 180 pb, é relativamente conservado, apresentando somente quatro sítios polimórficos em seis populações estudadas. Os resultados da PCR em Tempo Real indicaram que as populações estudadas não apresentam amplificação gênica para o gene da alfa-esterase, quando comparadas à linhagem Rockefeller, com exceção das populações de Engenho do Meio e Araripe. [...] estes resultados ainda precisam de maiores comprovações a fim de se assegurar que a superexpressão dos genes é a possível causa da resistência. A freqüência do alelo superexpresso pode ser monitorada ao longo do tempo e auxiliar no manejo da resistência ao inseticida químico em populações tratadas

COSTA, Tacyana Pires de Carvalho. Biomonitoramento citogenético, hematológico e bioquímico em agentes de endemias expostos à agrotóxicos no município de Valença - Piauí. 2014. 128 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-10-27T16:35:21Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_tpccosta.pdf: 1458814 bytes, checksum: d0e95bbb1250b437ee52f6cda0ae2b6e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-10-27T16:36:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_tpccosta.pdf: 1458814 bytes, checksum: d0e95bbb1250b437ee52f6cda0ae2b6e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-27T16:36:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_tpccosta.pdf: 1458814 bytes, checksum: d0e95bbb1250b437ee52f6cda0ae2b6e (MD5) Previous issue date: 2014 / Insecticides based on organophosphates are widely used in eradication campaigns and high application of these products, without the use of biosecurity measures, contributes to the increased incidence of occupational poisoning in endemic agents. The study aimed to conduct a biomonitoring through biochemical, hematological and cytogenetic analyzes of agents of endemic occupationally exposed to organophosphate insecticides in the city of Valencia Piauí. The survey was conducted with 20 agents endemic and 20 non exposed workers. Applied a questionnaire recommended by the International Commission for Protection Against Environmental Mutagens and Carcinogens-ICPEMC, and biological material was collected for hematological, biochemical and cytogenetic analyzes. The population studied had a mean age of 44.15 years, working time of 14.75 years, weekly workload of 40 hours and 55% of agents said they use PPE. As for lifestyle 25% were smokers, 85% consumed alcohol and 30% report some underlying disease. Evaluating the hematological parameters no statistical significance when comparing the two groups. As biochemical variables for urea, creatinine, ALT, AST and BChE showed significant changes. In dosages of alkaline phosphatase and gamma glutamyl transferase, significant (p <0.01) compared to the unexposed group. Regarding the genotoxic analysis (cells with micronuclei), there was a statistically significant difference between the exposed groups (2.78) and unexposed (0.56). The nuclear changes were evidenced cariorrex (184.1 versus 717.0), karyolysis (138.5 versus 47.48), and binucleated cells (0.1413 versus 0.06087) of the exposed compared to the control group respectively. Although the numbers of karyorrhexis were more evident in the control group, and karyolysis binucleation parameters were genotoxicity along with micronuclei. / Os inseticidas à base de organofosforados são amplamente utilizados em campanhas antivetoriais e a elevada aplicação desses produtos, sem o emprego de medidas de biossegurança, contribui para o aumento da incidência de intoxicação ocupacional em agentes de endemias. O estudo objetivou realizar um biomonitoramento através de análises bioquímica, hematológica e citogenética de agentes de endemias expostos ocupacionalmente a inseticidas organofosforados no município de Valença do Piauí. A pesquisa foi realizada com 20 agentes de endemias e 20 trabalhadores não expostos ocupacionalmente. Aplicou-se um questionário recomendado pela International Commission for Protection Against Environmental Mutagens and Carcinogens-ICPEMC, e coletou-se material biológico para as análises hematológicas, bioquímicas e citogenética. A população exposta apresentou média de idade de 44,15 anos, tempo de trabalho de 14,75 anos, carga horária semanal de 40 horas e 55% dos agentes afirmaram utilizar EPIs. Quanto aos hábitos de vida 25% são tabagistas, 85% etilistas e 30% referem alguma doença de base. Avaliando os parâmetros hematológicos não houve significância estatística quando comparados os dois grupos. Quanto as variáveis bioquímicas para ureia, creatinina, ALT, AST e BChE não apresentaram alterações significantes. Nas dosagens de fosfatase alcalina e gama glutamiltransferase, houve significância (p<0,01) em relação ao grupo não exposto. Em relação à análise genotóxica (células com micronúcleos), houve diferença estatística significativa entre os grupos exposto (2,78) e não exposto (0,56). As alterações nucleares evidenciadas foram cariorrex (184,1 contra 717,0), cariólise (138,5 contra 47,48), células binucleadas (0,1413 contra 0,06087) do grupo exposto em relação ao controle respectivamente. Embora os números de cariorrex tenham sido mais evidenciados no grupo controle, as cariólises e as binucleações foram parâmetros de genotoxicidade juntamente com os micronúcleos

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:37:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6908_Dissertaca Alexandre pos defesa Final.pdf: 2253239 bytes, checksum: 05427e0f214a9f39421c5a0ecf64dd3d (MD5) Previous issue date: 2014-07-23 / Dentre os agrotóxicos disponíveis para utilização, se destacam os organofosforados, considerados um dos principais responsáveis por intoxicações, óbitos e tentativas de suicídio no Brasil. O clorpirifós, organofosforado extensamente utilizado, exerce sua ação tóxica, em parte, devido à inibição da enzima acetilcolinesterase, o que resulta em excesso de acetilcolina nas sinapses colinérgicas, promovendo sinais e efeitos diversos resultantes do aumento de ativação tanto de receptores no sistema nervoso central quanto de receptores periféricos muscarínicos e nicotínicos. Tendo em vista as profundas alterações promovidas em diversos sistemas nos indivíduos expostos, desperta um particular interesse os efeitos causados pela intoxicação pelo clorpirifós sobre o sistema cardiovascular e sobre o comportamento. Assim sendo, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da exposição aguda a doses subletais do inseticida clorpirifós sobre três reflexos cardiovasculares (barorreflexo, reflexo de BezoldJarisch e quimiorreflexo), sobre a atividade de algumas enzimas (colinesterase plasmática, creatina-quinase fração MB e lactato desidrogenase) e sobre alguns parâmetros comportamentais em animais experimentais. Para os testes cardiovasculares, os animais foram inicialmente submetidos à cateterização da artéria e veia femoral e, 24 horas após, tratados com clorpirifós 30 mg/kg ou salina. Um dia após o tratamento, foram realizados os registros cardiovasculares para avaliação desses reflexos. Estes mesmo animais forneceram amostras para as dosagens enzimáticas, coletadas antes e após o tratamento. Para a avaliação comportamental, os animais foram tratados com clorpirifós 20, 25 e 30 mg/kg ou com salina. Em seguida, foram submetidos ao teste do campo aberto, labirinto em cruz elevado e teste do nado forçado. Sobre o comportamento, o tratamento com o organofosforado induziu um possível efeito ansiogênico e depressivo nos animais testados. Nas dosagens enzimáticas, a atividade da colinesterase plasmática foi significativamente reduzida e, em alguns dos animais tratados, foram observados indícios de lesão cardiovascular, evidenciados por aumento da atividade das enzimas CK-MB e LDH. Em relação aos testes cardiovasculares, o tratamento com o clorpirifós foi capaz de causar prejuízo na resposta bradicárdica dos três reflexos testados. Adicionalmente, a exposição ao clorpirifós foi capaz de promover redução 14 na resposta hipertensora do quimiorreflexo, na hipotensora do RBJ e no range e ganho do barorreflexo.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:38:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_8526_Dissertação - GRAZIANY LEITE MOREIRA MARQUES.pdf: 2996843 bytes, checksum: 504a2f29ef3ec45afc1a9509ba13e9f3 (MD5) Previous issue date: 2016-03-22 / Os organofosforados (OFs) são, provavelmente, os praguicidas mais utilizados no mundo. No Brasil, esses compostos são considerados um dos principais responsáveis por intoxicações. Um OF de ampla utilização nacional é o clorpirifós (CPF), que assim como os demais OFs promove a inibição das colinesterases (ChEs), provocando acúmulo de acetilcolina nas sinapses colinérgicas centrais e periféricas. O tratamento dessa intoxicação envolve o uso combinado de antagonistas muscarínicos, como a atropina (ATR); reativadores da ChE, oximas, representadas principalmente pela pralidoxima (2-PAM); e benzodiazepínicos, geralmente diazepam, para tratamento de eventuais convulsões. Entretanto, a eficácia das oximas em humanos é duvidosa, principalmente devido a sua diferença de polaridade quando comparada aos OFs, o que leva a uma pobre penetração do fármaco no sistema nervoso central (SNC). Este trabalho, portanto, visa investigar a eficácia dos antídotos sobre os sinais clínicos e sobre a reativação da atividade das ChEs na intoxicação aguda por CPF, assim como validar método de análise para identificação e quantificação de vários OFs, ATR e 2-PAM, de forma conjunta, utilizando cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrômetro de massas (HPLC-MS/MS). Para isso, ratos adultos (n=280) foram divididos em 8 grupos: Salina (SAL), CPF, SAL+ATR, CPF+ATR, SAL+2-PAM, CPF+2-PAM, SAL+ATR+2-PAM e CPF+ATR+2-PAM. O tratamento com ATR (10mg/kg); 2-PAM (40mg/Kg) ou ATR (10mg/kg) + 2-PAM (40mg/kg) foi realizado por injeções intraperitoneais (i.p.) uma hora após a administração de CPF (30mg/kg; i.p.) ou SAL (0,9%, i.p.) e os animais foram observados quanto aos sinais de toxicidade aguda por até 5 horas. Decorridos períodos de 15 minutos, 30 minutos, 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas e 24 horas após a administração do tratamento (ATR, 2-PAM ou ambos), os animais foram decapitados e amostras de sangue e encéfalo (com exceção do cerebelo) foram coletadas para posteriores dosagens das ChEs, assim como para análise do CPF e CPF-oxon por HPLC-MS/MS. O método desenvolvido para análise de OFs e antídotos se mostrou rápido e eficiente para o que se propõe, atendendo os critérios de validação da RDC nº 27 da ANVISA (BRASIL, 2012). Os dados obtidos demonstram que a concentração de CPF inalterado no sangue sofre intensa queda ao longo das primeiras 24 horas após a administração. O CPF causou inibição da ChE plasmática e o tratamento com 2-PAM foi capaz de reverter essa inibição por até 1 hora após sua administração. Entretanto, sobre a atividade da AChE cerebral, a 2-PAM promoveu somente uma pequena reativação a partir da segunda hora da sua administração. Apesar de não terem sido completamente eficazes, os tratamentos com ATR, 2-PAM ou ATR+2-PAM preveniram ou reverteram, em diferentes níveis, as manifestações colinérgicas típicas da intoxicação por OFs.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-04-08T12:17:59Z No. of bitstreams: 2 Kaline Catiely Campos Silva.pdf: 1297818 bytes, checksum: 91b2b6186f6fff1365681ee92858b720 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T12:17:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Kaline Catiely Campos Silva.pdf: 1297818 bytes, checksum: 91b2b6186f6fff1365681ee92858b720 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / CAPES / A acetilcolinesterase (AChE) é uma enzima que vem sendo testada como biomarcador da presença de pesticidas. Trata-se de uma hidrolase, do grupo das colinesterases, que atua nos processos de transmissão de impulsos nervosos em vertebrados e invertebrados. A AChE hidrolisa rapidamente o neurotransmissor acetilcolina, na fenda sináptica, encerrando sua ação e garantindo a intermitência dos impulsos nervosos. A inibição desse mecanismo resulta no acúmulo de acetilcolina nas fendas sinápticas levando a uma hiperestimulação colinérgica. Tal inibição é o modo de ação de organofosforados e carbamatos, os inseticidas mais utilizados mundialmente. Diferentes compartimentos do ecossistema estão expostos aos agrotóxicos e uma vez presentes no ambiente aquático, eles podem ser absorvidos pelos organismos onde sofrerão bioacumulação, podendo ser utilizados como bioindicadores no monitoramento de pesticidas. O objetivo deste trabalho foi caracterizar físico-química e cineticamente a enzima acetilcolinesterase cerebral do tucunaré (Cichla ocellaris), bem como avaliar o efeito de pesticidas organofosforados e carbamatos, e íons sobre sua atividade com a finalidade de fornecer subsídios para o uso da referida enzima como ferramenta bioindicadora de contaminação ambiental. As amostras analisadas foram preparadas a partir de extratos de cérebro de tucunaré. Foram determinados parâmetros cinéticos como Km e Vmax. A atividade enzimática foi analisada após exposição aos inibidores selectivos BW284c51, Iso-OMPA, neostigmina e eserina que confirmaram AChE como responsável pela atividade analisada. A AChE foi submetida também a 05 pesticidas organofosforados (diclorvós, clorpirifós, diazinon, temefós e TEPP) e 02 carbamatos (carbofuran e carbaril), em diferentes concentrações. A atividade colinesterásica foi observada na presença de 14 íons catiônicos: Mn2+; Cu2+; Zn2+; Al3+; Ca2+; Pb2+; Cd2+; Hg2+; Fe2+; Ba2+; Mg2+; K+; As3+; Li+ e 1 íon complexo aniônico quelante: EDTA2-. Os resultados demonstraram que o pesticida diclorvós provocou forte inibição na atividade da enzima estudada. O organofosforado tetraetil-pirofosfato (TEPP) também a inibiu fortemente e os dois carbamatos utilizados, sobretudo o carbofuran, apresentaram valores baixos de CI50. Os íons que causaram maior inibição foram Cu2+, Zn2+, Hg2+, Cd2+, As3+ e Pb2+, enquanto que o íon complexo EDTA2- só inibiu a enzima estudada a partir de 10 mM. Desta forma, a inibição in vitro da acetilcolinesterase de tucunaré demonstra ser uma ferramenta promissora para o monitoramento ambiental de recursos hídricos A facilidade de obtenção e a sensibilidade da enzima aos inseticidas utilizados, apontam para a possibilidade de um monitoramento rotineiro e eficiente.