Made available in DSpace on 2016-04-26T19:39:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007- Liamara Perin.pdf: 5126010 bytes, checksum: 0973e83f604e8d397ec95ef00c19da99 (MD5) Previous issue date: 2007-02-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The sugarcane crop in Brazil occupies almost six million hectares and it is economically important for the generation of jobs and energy production. Among the Poaceas species, it is the crop that receives more contributions from the biological nitrogen fixation, however until this moment it is unknown what organisms are responsible for the best results observed. Innumerable genuses of diazotrophic bacteria were found in association with sugarcane, among them the genus Burkholderia. However little is known about this genus in association with sugarcane. The objective of this study was to isolate and to characterize diazotrophic Burkholderia bacteria in association with sugarcane, and to describe a new species of diazotrophic Burkholderia bacteria. For that, samples of plants were collected in four crop areas, in different Brazilian states, for counting and isolating the bacteria community using the culture medias LGI and JMV. The isolates were characterized physiological, morphologically and molecularly. Sixty-four Burkholderia diazotrophic isolates were gotten that presented versatile metabolism, and the majority differing from the analyzed species patterns. Only five isolates were identified by the ARDRA technique, two belonging to B. tropica species and three to B. unamae. A big group, with 32 isolates, presented the same restriction profile by the ARDRA technique and differed from the analyzed species. The sequencing of the 16S rDNA region of two of these isolates showed that they don t belong to the already described species. This group, from sugarcane plants together with similar maize and pineapple isolates, was described as a new species named B. silvatlantica. The characterization of this new Burkholderia specie was confirmed by the hybridization DNA: DNA technique, presenting only 30% of similarity with the closest species, and the sequencing of the 16S rDNA region. B. Silvatlantica fixed nitrogen in microaerophilic conditions, and it had no capacity of inorganic phosphate solubilization, it did not produce vegetal hormones and had no nodulation capacity in leguminous. These results confirmed that Burkholderia is a rich genus in diazotrophics species and colonize different habitats. / A cultura da cana-de-a??car no Brasil ocupa mais de seis milh?es de hectares sendo importante economicamente pela gera??o de empregos e bastante promissora para a produ??o de energia. Dentre as Poaceas (gram?neas), ? a cultura que mais recebe contribui??es da fixa??o biol?gica de nitrog?nio, por?m ainda n?o se sabe ou n?o se conhece qual ou quais organismos s?o respons?veis pelos melhores resultados observados. In?meros g?neros de bact?rias diazotr?ficas foram encontrados em associa??o com cana-de-a??car, dentre eles o g?nero Burkholderia, at? o momento pouco estudado em associa??o com esta cultura. O objetivo deste estudo foi isolar e caracterizar bact?rias diazotr?ficas do g?nero Burkholderia em associa??o com cana-de-a??car e descrever uma nova esp?cie de bact?ria diazotr?fica do g?nero Burkholderia. Para tal, foram coletadas amostras de plantas em canaviais de quatro estados brasileiros para contagem e isolamento da comunidade de bact?rias utilizando os meios de cultura LGI e JMV. Os isolados foram caracterizados fisiologicamente, morfologicamente e molecularmente. Foram obtidos 64 isolados diazotr?ficos do g?nero Burkholderia, que apresentaram metabolismo vers?til e diferiram dos padr?es das esp?cies analisadas. Apenas cinco isolados foram identificados pela t?cnica de ARDRA, dois pertenceram a esp?cie B. tropica e tr?s a B. unamae. Um grande grupo, com 32 isolados, apresentou mesmo perfil de restri??o pela t?cnica de ARDRA e diferiu das esp?cies analisadas. O sequ?nciamento da regi?o 16S rDNA de dois destes isolados mostrou que eles n?o pertencem ?s esp?cies j? descritas. Este grupo obtido de plantas de cana-de-a??car, juntamente com isolados similares, obtidos de milho e abacaxi, foi descrito como uma nova esp?cie de nome B. silvatlantica. A nova esp?cie de Burkholderia foi confirmada pelos experimentos de hibridiza??o DNA:DNA, com apenas 30% de similaridade com a esp?cie mais pr?xima. B. silvatlantica fixou nitrog?nio em condi??es microaerof?licas, n?o apresentou capacidade de solubiliza??o de fosfato inorg?nico, n?o produziu horm?nios vegetais e n?o apresentou capacidade de nodula??o em leguminosas. Estes resultados confirmaram que o g?nero Burkholderia ? rico em esp?cies diazotr?ficas e est?o presentes em diferentes habitats.