A pesar de los enormes beneficios potenciales que ofrecen los cítricos genéticamente modificados (GM), su liberación en campo suscita preocupaciones acerca de su potencial impacto ambiental y posibilidad de que muestren efectos deletéreos inesperados desde un punto de vista agronómico. Las principales preocupaciones que plantea el uso de la transformación genética para la mejora de este cultivo de vida larga, propagación vegetativa y compleja biología reproductiva son: (1) la transferencia de los transgenes vía polen a variedades compatibles de especies de Citrus y afines; (2) la estabilidad de los transgenes a largo plazo; (3) la aparición de efectos pleiotrópicos adversos derivados de la integración y la expresión de los transgenes sobre las principales características agronómicas y fenotípicas del cultivo. Todas estas cuestiones han sido ampliamente estudiadas en otros cultivos anuales GM que ya son o no comerciales. Sin embargo, puesto que el empleo de la transformación genética en la mejora de árboles frutales todavía se encuentra en sus inicios, actualmente se dispone de muy poca información al respecto para estos cultivos. Por todo ello, el futuro de los arboles transgénicos en el ámbito comercial permanece aún incierto, aunque actualmente se dispone de la tecnología para producirlos. Por otro lado, en el caso concreto de los cítricos, no existen variedades transgénicas comerciales ni evidencias inequívocas de que esta herramienta sea realmente útil para afrontar con éxito objetivos de mejora concretos. Lograr cumplir objetivos de mejora tan importantes como la mejora de la calidad nutri-funcional de los frutos cítricos mediante ingeniería genética podría contribuir a una mayor aceptación de esta tecnología por parte del público, puesto que se trata de una mejora dirigida primeramente al consumidor. En este trabajo nos hemos planteado afrontar parte de los aspectos que en gran medida limitan la aceptación y comercialización de cítricos GM, mediante (1) la realización de un experimento de campo con cítricos GM para evaluar su seguridad ambiental y la ausencia de efectos agronómicos adversos (2) el abordaje de un objetivo de mejora de la calidad nutri-funcional de la naranja concreto mediante ingeniería metabólica con la finalidad de reforzar sus propiedades saludables. El experimento de campo consistió en una plantación de cítricos transgénicos que portaban únicamente los genes marcadores uidA y nptII cuya finalidad fue estudiar la viabilidad de la transformación genética en la mejora de genotipos cítricos comercialmente importantes. Este huerto experimental nos sirvió para estimar la frecuencia máxima de dispersión de los transgenes por polen bajo condiciones de polinización abierta y estudiar los factores ambientales, genéticos y fenológicos que la determinan, para así poder proponer medidas de contención apropiadas en futuras plantaciones de cítricos GM. También sirvió como primera aproximación para abordar cuestiones básicas como el estudio de la estabilidad de la expresión de los transgenes a largo plazo (tras 7 años de establecimiento en campo) bajo condiciones reales de cultivo y su potencial impacto sobre la morfología, fenología y calidad de la fruta de los cítricos transgénicos. Los estudios realizados, aunque no resuelven todas las preocupaciones concernientes a los cítricos GM, aportan información crucial relativa a su seguridad y comportamiento en campo, inexistente hasta el momento, que puede servir como base para futuros ensayos de campo con cítricos GM y como guía para las políticas de regulación de su plantación (caso-a-caso). Por otro lado, en este trabajo se ha logrado desarrollar una estrategia para inducir producción temprana de fruta e incrementar el contenido de b-caroteno (pro-vitamina A, con elevada capacidad antioxidante) en la pulpa de una variedad de naranjo dulce mediante ingeniería metabólica. Dicha estrategia consistió en el silenciamiento mediado por RNAi del gen de una β-caroteno hidroxilasa de naranjo (CsβCHX), implicada en la conversión de b-caroteno en xantofilas, combinado con la sobreexpresión del gen FLOWERING LOCUS T de naranjo (CsFT) en plantas transgénicas juveniles de naranjo dulce cv Pineapple. Posteriores ensayos con el animal modelo Caenorhabditis elegans demostraron que la naranjas enriquecidas ejercían un efecto antioxidante in vivo un 20% mayor que las naranjas control isogénicas. Este es el primer ejemplo exitoso de ingeniería metabólica para incrementar el contenido de β-caroteno (o cualquier fitonutriente) en naranjas y demuestra el potencial que tiene la ingeniería genética para el enriquecimiento nutricional de cultivos frutales leñosos. / Pons Bayarri, EA. (2014). Towards application of genetic engineering in citriculture: 1) assessing dispersal, long-term stability and phenotypic impact of transgenes in citrus trees and 2) improving nutri-functional quality of orange fruit through metabolic engineering [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/43588 / TESIS

The aim of this thesis was to study patterns of reproduction of Betula pendula and B. pubescens coll. along an altitudinal, coastal-inland, gradient in northern Sweden. The altitudinal variation was related to the distribution of the birch taxa along the gradient. Six years field data showed a steep decrease of seed germinability of B. pendula towards its altitudinal range limit in the Scandes every year. In contrast, B. pubescens ssp. pubescens showed significant positive correlations between seed germinability and altitude in three of the six years. Furthermore, there was a highly significant positive correlation between seed weight and altitude for B. pubescens coll., but not for B. pendula. Production of viable seeds fluctuated strongly between years in most populations, except in marginal B. pendula populations in the mountain area where it was constantly very low. On average 15 - 41 % of the seeds produced in B. pendula populations above 400 m altitude were attacked by gall midges (Semudobia ssp.). Corresponding values for B. pendula populations below 400 m altitude were 4 - 7 %. In B. pubescens populations, the seeds attacked by Semudobia ssp. never exceeded 3 %. The high frequency of Semudobia attackes in high altitude marginal B. pendula populations was suggested to be due to limited resources for defense against the seed predator. A 3-yr study documented large variations in pollination and seed quality between taxa, high and low altitude populations, and between years. Empty seeds (without embryos) dominated among the sampled seeds in most cases. This proportion was decreased by pollen addition, in both B. pendula and B. pubescens, in mountain populations, but not in coastal populations. The high percentage of empty seeds was therefore suggested to be partly caused by pollen-limitation, but failure of pollen tube penetration - fertilisation, or maternal resource supply could also have had an influence. A laboratory experiment showed increased pollen germination and length of the longest pollen tube per style after increased pollination. The correlations between number and length of pollen tubes per style were however mostly low in natural populations, suggesting low probability of pollen competition in the natural situation. Sowing experiments indicated that differences in initial seedling density between B. pendula and B. pubescens was more affected by interspecific differences in seed quality than by interspecific differences in survival of seedlings after establishment A study of the age structure of a B. pendula stand, planted about 250 m above its natural altitudinal limit, indicated that this birch may reproduce above its recent range limit during temporally warmer periods. It was concluded that the level of accumulated resources in B. pendula in marginal sites in the Scandes would mostly be too low for completion of the reproductive cycle. In contrast, B. pubescens ssp. pubescens is able to accumulate enough rescources for reproduction also at relative high altitudes. / <p>Diss. (sammanfattning) Umeå : Umeå universitet, 1994, härtill 5 uppsatser.</p> / digitalisering@umu