Um bom modelo experimental deve contar com métodos de avaliação eficazes de seus parâmetros. Esta é uma observação importante quando se faz necessária a avaliação da nocicepção e da incapacitação articular em animais experimentais. O estabelecimento de novos critérios aos testes animais é fundamental para que processos inflamatórios articulares possam continuar sendo estudados, entendidos e resolvidos. Buscando contribuir neste sentido, este trabalho realizou a padronização do teste de incapacitação dinâmico (TID) para avaliação da incapacitação articular em modelos experimentais de artrite. Os resultados obtidos mostram que o TID é sensível na avaliação da incapacitação articular em modelos de artrite induzida por antígeno (AIA) ou por zimosana. Além disso é preditivo para o estudo do efeito farmacológico de drogas que interfiram na incapacitação articular como anti-inflamatórias ou analgésicas. Desde o início da década de 90, quando participação das células da glia na dor foi descrita, diversos trabalhos surgiram mostrando seu papel em diferentes modelos animais. A participação das células da glia espinais na dor e incapacitação em modelos experimentais de artrite e artrite reumatoide têm sido relatada, mas não há descrição desta participação em função do tempo de indução do processo inflamatório articular. Por meio de ferramentas farmacológicas e moleculares, este trabalho mostra que as células da glia, tanto espinais como do gânglio da raiz dorsal estão participando na gênese e manutenção da incapacitação inflamatória articular em modelo de AIA. A participação destas células ocorre por meio da liberação de IL-1? e TNF? em nível medular e pela primeira vez é mostrado que a ativação astrocítica parece preceder a ativação microglial neste modelo. / A good experimental model must rely on effective methods of evaluation of its parameters. This is an important observation when it is necessary to evaluate the articular nociception and disability in experimental animals. Establishing new criteria to test animals is essential for inflammatory joint can continue being studied, understood and resolved. Seeking help in this sense, this work constitutes a test dynamic weight bearing (DWB) standardization for assessment of articular incapacitation in experimental models of arthritis. The results show that the DWB is sensitive in assessing the impairment models articular antigen-induced arthritis (AIA) or zimosana. Furthermore is predictive for studying the pharmacological effects of drugs that interfere with articular incapacitation as antiinflammatory or analgesic. Since the early 90s, when participation of glial cells in pain was described, several studies have emerged showing its role in different animal models. The involvement of glial cells in the spinal pain and disability in experimental models of arthritis and rheumatoid arthritis have been reported, but no description of this contribution versus time of induction of joint inflammation. Through molecular and pharmacological tools, this work shows that the glial cells, both as the spinal dorsal root ganglio are participating in the genesis and maintenance of inflammatory joint incapacitation in AIA model. The participation of these cells occurs through the release of IL-1? and TNF? in the spinal cord and the first time it is shown that astrocytic activation appears to precede the microglial activation in this model.

OBJETIVOS: Avaliar o perfil e o número absoluto e percentual de células NK verdadeiras (CD56+CD16+CD3-) e de células NK e NKT (CD56+) no sangue periférico de uma coorte de pacientes com artrite reumatóide (AR) antes e durante o tratamento com rituximabe (RTX). MÉTODOS: Foram analisados dez pacientes do grupo controle (doadores de sangue) e dez pacientes com AR que receberam duas infusões de RTX 1g separadas por intervalo de 14 dias. As análises imunofenotípicas para avaliação do perfil e quantificação de células NK foram realizadas pré e após a infusão ou até a recaída clínica. Pacientes respondedores e não respondedores foram classificados de acordo com os critérios do Colégio Americano de Reumatologia (ACR) em 6 meses. RESULTADOS: A quantidade de células NK verdadeiras não demonstrou variação significativa pré e após o tratamento com RTX. Contudo, houve aumento percentual de células CD56+ entre o primeiro e o segundo mês após a infusão com RTX. Além disso, os pacientes respondedores apresentaram uma tendência de aumento do número absoluto de células NK verdadeiras após dois meses de tratamento. Já em relação ao grupo controle, observou-se um aumento significativo do número de células NK basais nos pacientes com AR (p<0,05). CONCLUSÕES: Foi identificada uma tendência de aumento nos valores absolutos de células NK verdadeiras entre os pacientes respondedores no segundo mês após a infusão com RTX. Não foi identificada uma variação significativa no perfil e quantidade de células NK nos pacientes com AR pré e após o tratamento com RTX. Contudo, foi observado que os pacientes com AR possuem uma quantidade maior de células NK do que os controles, sugerindo um possível envolvimento destas células na AR. / OBJECTIVES: To assess the profile as well as the absolute number and percentage of true NK cells (CD56+CD16+CD3-), and NK and NKT cells (CD56+) in the peripheral blood of a cohort of patients with rheumatoid arthritis (RA) before and during rituximab (RTX) therapy. METHODS: Ten control patients (blood donors) and ten patients with RA were assessed. The latter group received two intravenous infusions of 1g RTX, separated by a 14 day interval. Immunophenotypic analyses of NK cells were conducted before and after infusion, or until clinical relapse. After six months, respondents and nonrespondents were reassessed according to American Rheumatology Criteria (ARC). RESULTS: The number of true NK cells did not significantly change after treatment with RTX. However, an increase in the percentage of CD56+ cells was observed between the first and second month after RTX infusion. Respondents also displayed a tendency toward an increased number of true NK cells after two months of treatment. At baseline, the number of NK cells was also found to be significantly higher in patients with RA than in control individuals (p<0.05). CONCLUSIONS: Respondents displayed a tendency toward an increase in the absolute number of true NK cells in the second month after RTX infusion. No significant changes in the profile and frequency of NK cells were found between preand post-RTX treatment assessments of patients with RA. However, it was found that patients with RA have a higher number of NK cells than control partcipants, suggesting a possible role of these cells in RA.

Foram estimados custos diretos de diferentes opções de tratamento para artrite reumatóide com base em dados de eficácia obtidos por revisão de literatura. O modelo analítico de tomada de decisão para o tratamento e desfechos durante um período de 48 meses baseado no modelo de Markov foi fundamentado em protocolos clínicos recomendados pela Sociedade Brasileira de Reumatologia, com esquemas alternativos para cinco ciclos de tratamento durante o período de quatro anos. O paciente pode permanecer em algumas das etapas ou migrar entre elas, de acordo com a resposta à terapia. Foram analisados custos diretos (medicamentos, materiais médico-hospitalares e exames laboratoriais). As doses dos medicamentos e o monitoramento foram baseados no Consenso Brasileiro para o Diagnóstico e Tratamento da Artrite Reumatóide, considerando-se o peso médio do paciente de 70 kg. Na comparação entre o custo das cinco etapas de tratamento os resultados mostram que a etapa que usa o medicamento infliximabe tem um custo superior às outras, este causado pelo preço de aquisição do medicamento. O custo do monitoramento tem impacto nas etapas que utilizam os medicamentos com preço de aquisição menor. O ciclo com a menor razão custo/efetividade foi o 1 (respondedor ao MTX). Aquele que usa o biológico desde o início do tratamento é responsável pela maior razão de custo/efetividade. A variação do custo entre os outros ciclos não foi muito grande, mas todas devem ser consideradas quando da escolha do prescritor. Estes resultados se mostraram robustos com a análise de sensibilidade. / The costs of the different rheumatoid arthritis therapy options were estimated and they were compared by cos/efficacy reason, through the development of an analytical model for a 48-month period. For the calculation of these costs, it was developed an analytical decision model based on the Markov Analysis, where five different therapy stages were elaborated based on clinical protocols recommended by the Brazilian Society of Rheumatology, and then five therapy cycles, where patients may continue in some of those stages or shift between them according to the therapy response, for a time horizon of 4 years. Only direct costs with drugs, medical-hospital materials for drug administration and laboratory examinations required for the patient monitoring because of the use of some drugs, were comprised in the analyzed data. The doses of drugs and the monitoring were based on the Brazilian Consensus for the Diagnosis and Treatment of Rheumatoid Arthritis, considering the average patient weight of 70 kg. When comparing the cost of the five treatment stages, the results show that the stage in which the infleximabe drug is used has a cost higher than that of the other stages and that the impact is caused by the drug acquisition price. The monitoring cost impacts the stages that employ drugs with smaller acquisition price. The cost-effectiveness cycle was the number 1 (good response with MTX). When we use de biologic in the beginning, it is responsible for the higher cost-effectiveness reason. The cost variation between cycles 2, 3 and 4 was smaller, but they have to be considered for the decision maker. The sensitivity analysis confirm this results.

Os microRNAs são pequenos RNAs, não-codificantes que funcionam como reguladores a nível pós-transcricional da expressão gênica. Nos últimos anos, novas evidências demonstram o papel importante dos microRNAs na regulação e desenvolvimento do sistema imune. Apesar da função de poucos microRNAs ser conhecida, a sua expressão alterada vêm sendo associada a patogênese de diversas doenças autoimunes, incluindo a artrite reumatóide (AR). Recentemente a expressão desregulada de uma série de microRNAs está sendo descrita em pacientes com AR, e o papel patogênico de apenas uma parte deles foi investigada em modelos animais. A artrite reumatóide é uma doença autoimune sistêmica caracterizada por um intenso processo inflamatório na sinóvia, podendo causar destruição óssea e articular. Os linfócitos T apresentam papel importante na indução, manutenção e progressão da doença. A artrite induzida por colágeno é um modelo animal amplamente utilizado por suas características fisiopatológicas muito similares à doença em humanos. A linhagem de camundongos DBA-1/J desenvolve a doença após imunização e booster com colágeno do tipo II, enquanto que a linhagem DBA-2/J se mostra refratária. Isso confere um sistema modelo de susceptibilidade/resistência à artrite, que pode ser estudado em diferentes abordagens. O objetivo do nosso estudo foi identificar o perfil transcricional e as redes de interação entre um grupo de microRNAs e seus respectivos alvos nos timócitos e linfócitos T CD3+ periféricos nos camundongos da linhagem DBA-1/J e DBA-2/J. Para a avaliação da expressão gênica, utilizou-se a tecnologia de microarrays. O uso de programas de análise e para a construção das redes foi imprescindível. Os resultados encontrados evidenciam uma expressão diferenciada de mRNAs e microRNAs em timócitos e linfócitos T CD3+ periféricos entre as duas linhagens utilizadas. Novos microRNAs foram encontrados nos diferentes estágios de desenvolvimento do linfócito T. Nas redes de interação microRNA-RNAm obtidas, genes importantes associados aos processos de sistema imune, adesão e diferenciação celular, apoptose, recombinação, ativação de linfócitos T e resposta inflamatória, foram encontrados como potenciais alvos. Além disso, em uma perspectiva clínica, baseados nos resultados obtidos em camundongo, nos encontramos a expressão do miR-505 nos linfócitos T de pacientes com AR. Nossos resultados contribuem para a melhor compreensão dos mecanismos molecular envolvidos na resistência/susceptibilidade a CIA. / MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNA molecules that modulate the expression of multiple protein-encoding genes at the post-transcriptional level. During the last several years, evidence has emerged to show their critical role for the regulation and development of immune system. Although the function of most mammalian miRNAs has yet to be determined, their aberrant expression has been associated with several autoimmune conditions, including rheumatoid arthritis (RA). Recently, the deregulated expression of a dozen miRNAs has been reported in patients with RA, and the pathogenic role of only a few of these has been investigated in experimental mouse models. RA is a systemic autoimmune disorder mainly characterized by the inflammation of synovial tissue that can lead to destruction of bone and cartilage. The role of effectors T cells in induction, maintenance and progression of the disease is now becoming better understood. Collagen-induced arthritis is an animal model widely studied due to its similarities to human disease. The DBA-1/J mouse strain develops arthritis after immunization process and booster with Type II collagen, and the DBA-2/J strain is refractory to the disease induction. This offers an useful susceptibility/resistance model-system to study RA. The aim of this study was to identify the expression profiles and interaction networks between a set of microRNAs and their mRNA targets in thymocytes and peripheral CD3+ T lymphocytes in DBA-1/J and DBA-2/J mice strain. For this purpose we used the microarray technology to evaluate the expression of the miRNAs and mRNAs as possible targets involved in this process. The use of bioinformatics software to reconstruct the networks was essential. The results show differential expression of mRNAs and miRNAs in thymocytes and peripheral CD3+ T lymphocytes between both strains. New miRNAs were found during all the stages of T cells development. The microRNA-mRNA interaction networks obtained in this study showed that important genes related to apoptose, immune system, recombination, cell adhesion and differentiation, inflammatory process and T cell activation were found as potential targets. In addition, in a clinical prospects, based on the results obtained in mice, we found the expression of the miRNA miR-505 in T cells of RA patients. Our results contribute to a better understand of the molecular mechanisms evolved in the resistance/susceptibility to CIA.

A artrite reumatoide (AR) é uma doença auto-imune de etiologia desconhecida caracterizada por uma inflamação poliarticular simétrica da membrana sinovial que acomete com maior frequência as articulações das mãos, punhos e pés. Estudos mostram que há um aumento do estresse oxidativo nestes pacientes e este fato pode ser atribuído à diminuição da ingestão de substâncias antioxidantes refletindo no aumento da produção de espécies reativas de oxigênio (ERO). Além disso, a presença de polimorfismos em enzimas antioxidantes como o Arg213Gli no gene da enzima superóxido dismutase 3 podem influenciar neste dano oxidativo. Portanto, o estudo teve como objetivo avaliar o estado nutricional relativo ao zinco de pacientes com artrite reumatoide e sua relação com o estresse oxidativo e o polimorfismo Arg213Gli no gene da SOD3. Foram selecionadas 59 mulheres diagnosticadas com AR (59,9±18,3 anos) atendidas no Setor de Reumatologia do Hospital São Paulo/Universidade Federal de São Paulo, que fizeram parte do grupo caso, e 56 mulheres saudáveis (35,5±9,9 anos) recrutadas no campus da Universidade de São Paulo, que fizeram parte do grupo controle. A coleta de sangue venoso foi destinada para avaliação das concentrações plasmática e eritrocitária de zinco, da atividade das enzimas glutationa peroxidase (GPx) e superóxido dismutase (SOD), e do polimorfismo Arg213Gli. A urina de 24 horas foi coletada para as análises de zinco, creatinina e 8-isoprostanos. A avaliação do consumo dietético de zinco foi feita por meio de três recordatórios alimentares de 24 horas. A análise estatística foi feita no software SPSS 14.0 por meio de testes de comparações de médias e correlações selecionados de acordo com a distribuição da normalidade e considerando p significativo menor que 5%. As concentrações plasmáticas de zinco foram significativamente menores para o grupo caso quando comparadas ao grupo controle (53,4±9,8 &#181;g/dL e 58,2±10,1 &#181;g/dL, respectivamente; p=0,011). Com relação às concentrações de zinco eritrocitário e urinário não houve diferença significativa entre os grupos (p=0,219 e p=0,695, respectivamente). O percentual de inadequação do consumo de zinco foi de 98,9% para o grupo caso e 58% para o grupo controle. A atividade da SOD foi significativamente menor no grupo caso (1333,8 ±420,8 U/gHb) do que no grupo controle (1755,0 ±525,5 U/gHb) (p<0,001), assim como a atividade da GPx (38,2 ±17,0 U/gHb e 52,6 ±14,4 U/gHB, respectivamente) (p<0,001). As concentrações de 8-isoprostanos não diferiram entre os grupos caso e controle, (133,8 ±175,4 ng/mmol de creatinina e 139,3 ± 52,7 ng/mmol de creatinina; p=0,836, respectivamente). Em relação à genotipagem do SNP Arg213Gli não foi encontrado nenhuma participante com o genótipo homozigoto (Gli/Gli) para o polimorfismo. No grupo caso, apenas uma participante apresentou o genótipo heterozigoto (Arg/Gli). Os resultados apresentados indicam que as pacientes com AR estão deficientes em zinco e apresentam um aumento do estresse oxidativo, sugerindo a necessidade de uma suplementação deste mineral. / Rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune disease of unknown etiology characterized by a symmetrical polyarticular inflammation of synovial membrane that affects most often the joints of the hands, wrists and feet. Studies show that there is an increase of oxidative stress in these patients and this fact can be attributed to decreased intake of antioxidants reflecting in the increased production of reactive oxygen species (ROS). Furthermore, the presence of polymorphisms in antioxidant enzymes such as Arg213Gli in the superoxide dismutase gene may influence this oxidative damage. Thus, the study aimed to evaluate the nutritional status of zinc in patients with rheumatoid arthritis and its relation to oxidative stress and the polymorphism Arg213Gli in SOD3 gene. We selected 59 women diagnosed with RA ( 59.9 ± 18.3 years) which make clinical monitoring at the Hospital São Paulo/Federal University of São Paulo, who were part of the case group, and 56 healthy women ( 35.5 ± 9 , 9 years) recruited on the campus of the University of São Paulo, who were part of the control group. The venous blood collection was destined to evaluate plasma and erythrocyte zinc, activity of glutathione peroxidase (GPx) and superoxide dismutase (SOD), and the polymorphism Arg213Gli. The 24-hour urine was collected for the analyzes of zinc, creatinine and 8- isoprostane. The assessment of dietary intake of zinc was performed by three 24-hour dietary recall. Statistical analysis was performed with SPSS 14.0 by testing of mean comparisons and correlations selected according to the distribution of normality and considering significant p less than 5 %. The plasma zinc concentrations were significantly lower in the case group compared to the control group (53.4 ± 9.8 &#181;g/dL and 58.2 ± 10.1&#181;g/dL, respectively, p= 0.011). In relation to the concentrations of erythrocyte and urinary zinc, no significant difference was observed between groups (p= 0.219 and p=0.695, respectively). The percentage of inadequate zinc intake was 98.9% for the case group and 58% for the control group . The SOD activity was significantly lower in the case group (1333.8 ± 420.8 U/gHb) than in the control group (1755.0 ± 525.5 U/gHb) (p < 0.001), as well as the activity of GPx (38.2 ± 17.0 U/gHb and 52.6 ± 14.4 U/gHb, respectively) (p< 0.001). The 8-isoprostane concentrations did not differ between case and control groups (133.8 ± 175.4 ng/mmol creatinine and 139.3 ± 52.7 ng/mmol creatinine, p= 0.836, respectively). Regarding Arg213Gli SNP genotyping was not found any participant with the homozygous genotype (Gly/Gly) for the polymorphism. In case group, only one participant had the heterozygous genotype (Arg/Gly). The presented results indicate that RA patients are deficient in zinc and have an increased oxidative stress, suggesting the need for a supplementation of this mineral.

Um bom modelo experimental deve contar com métodos de avaliação eficazes de seus parâmetros. Esta é uma observação importante quando se faz necessária a avaliação da nocicepção e da incapacitação articular em animais experimentais. O estabelecimento de novos critérios aos testes animais é fundamental para que processos inflamatórios articulares possam continuar sendo estudados, entendidos e resolvidos. Buscando contribuir neste sentido, este trabalho realizou a padronização do teste de incapacitação dinâmico (TID) para avaliação da incapacitação articular em modelos experimentais de artrite. Os resultados obtidos mostram que o TID é sensível na avaliação da incapacitação articular em modelos de artrite induzida por antígeno (AIA) ou por zimosana. Além disso é preditivo para o estudo do efeito farmacológico de drogas que interfiram na incapacitação articular como anti-inflamatórias ou analgésicas. Desde o início da década de 90, quando participação das células da glia na dor foi descrita, diversos trabalhos surgiram mostrando seu papel em diferentes modelos animais. A participação das células da glia espinais na dor e incapacitação em modelos experimentais de artrite e artrite reumatoide têm sido relatada, mas não há descrição desta participação em função do tempo de indução do processo inflamatório articular. Por meio de ferramentas farmacológicas e moleculares, este trabalho mostra que as células da glia, tanto espinais como do gânglio da raiz dorsal estão participando na gênese e manutenção da incapacitação inflamatória articular em modelo de AIA. A participação destas células ocorre por meio da liberação de IL-1? e TNF? em nível medular e pela primeira vez é mostrado que a ativação astrocítica parece preceder a ativação microglial neste modelo. / A good experimental model must rely on effective methods of evaluation of its parameters. This is an important observation when it is necessary to evaluate the articular nociception and disability in experimental animals. Establishing new criteria to test animals is essential for inflammatory joint can continue being studied, understood and resolved. Seeking help in this sense, this work constitutes a test dynamic weight bearing (DWB) standardization for assessment of articular incapacitation in experimental models of arthritis. The results show that the DWB is sensitive in assessing the impairment models articular antigen-induced arthritis (AIA) or zimosana. Furthermore is predictive for studying the pharmacological effects of drugs that interfere with articular incapacitation as antiinflammatory or analgesic. Since the early 90s, when participation of glial cells in pain was described, several studies have emerged showing its role in different animal models. The involvement of glial cells in the spinal pain and disability in experimental models of arthritis and rheumatoid arthritis have been reported, but no description of this contribution versus time of induction of joint inflammation. Through molecular and pharmacological tools, this work shows that the glial cells, both as the spinal dorsal root ganglio are participating in the genesis and maintenance of inflammatory joint incapacitation in AIA model. The participation of these cells occurs through the release of IL-1? and TNF? in the spinal cord and the first time it is shown that astrocytic activation appears to precede the microglial activation in this model.

No description available.

Abstract not available

Includes bibliographical references (leaves 182-240). Explores alternate strategies that may alter inflammatory cytokine production, particularly tumour necrosis factor đ [tumor necrosis factor-alpha], and therefore provide a possible treatment for rheumatoid arthritis.

x, 156 leaves : / Title page, contents and abstract only. The complete thesis in print form is available from the University Library. / Thesis (M.D.)--University of Adelaide, Dept. of Medicine, 1988