Thèse d'exercice : Médecine. Biologie médicale : Université de Nantes : 2004. / Bibliogr. f. 73-80.

Thèse de doctorat : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie. Pharmacologie moléculaire et cellulaire : Strasbourg 1 : 2007. / Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr. p. 233-258.

Thesis (M.A.)--University of Hawaii at Manoa, 2005. / Includes bibliographical references (leaves 115-118). / vii, 118 leaves, bound 29 cm

Thèses (M.Sc.)--Université de Sherbrooke (Canada), 1999. / Titre de l'écran-titre (visionné le 20 juin 2006). Publié aussi en version papier.

Les granulocytes neutrophiles sont les cellules immunitaires les plus abondantes dans l'organisme. Elles constituent notre première ligne de défense contre les infections microbiennes. Les personnes neutropéniques sont à haut risque de mortalité en cas d'infections microbiennes graves. Lorsque les traitements antimicrobiens standards sont inefficaces, les patients peuvent recevoir une transfusion de concentré de granulocytes (CG) pour rétablir temporairement un nombre de neutrophiles en circulation permettant d'éradiquer l'infection. Au Canada, les CG sont préparés par Héma-Québec à partir de donneurs stimulés avec une dose de prednisone augmentant le nombre de neutrophiles en circulation. Aux États-Unis le G-CSF sert d'agent de stimulation des donneurs. Les neutrophiles sont récoltés par leucaphérèse et certifiés pour la transfusion selon le nombre de neutrophiles récoltés. Or, ce critère ne reflète pas la viabilité et l'état fonctionnel des cellules transfusées. Notre étude compare la viabilité, le phénotype et les fonctions antimicrobiennes des neutrophiles obtenus des CG dérivés de prednisone et de G-CSF. La prednisone mobilise des neutrophiles matures avec une phagocytose augmentée mais le nombre de neutrophiles est souvent proche de la limite transfusable. Le G-CSF augmente considérablement le nombre de neutrophiles récoltés, dont près de la moitié sont immatures, en plus d'abaisser la chimiotaxie et d'augmenter la production de cytokines. D'après nos résultats, la durée d'entreposage des CG est le paramètre le plus critique pour le maintien de la viabilité et des fonctions antimicrobiennes des neutrophiles, particulièrement pour ceux dérivés du G-CSF alors que la leucaphérèse a un effet négligeable sur les deux types de CG. L'amélioration des processus de fabrication, d'entreposage des CG et leur certification avec un critère fonctionnel permettra de maintenir la viabilité et les fonctions des neutrophiles et d'assurer leur efficacité in vivo. / Neutrophil granulocyte are the most abundant immune cells in the organism. They constitute our first line of defence against invasive pathogens. Neutropenic patients with life-threatening infections can be transfused with granulocyte concentrates (GCs) to temporarily restore a sufficient number of circulating neutrophils to eradicate infection. In Canada, GC are prepared by Héma-Québec from donors pre-treated with a unique dose of prednisone enhancing the number of circulating neutrophils. In the U.S, G-CSF is used as mobilizing agent in the donors. Neutrophils are collected by leukapheresis and certified for transfusion according to the number of neutrophils collected. This criterion, however, does not reflect the viability and the functional capacity of the transfused cells. Our study compare the viability, the phenotype and antimicrobial functions of neutrophils from prednisone and G-CSF-derived GCs. Prednisone mobilizes mature neutrophils with enhanced phagocytosis although the number of collected neutrophils is sometimes below the required transfusion dose of 1 x10¹⁰ granulocytes per unit. G-CSF significantly increases the number of collected neutrophils, though almost half are immature, along with decreasing chemotaxis and increasing cytokine production. According to our results, storage duration is the most critical parameter for the preservation of neutrophils viability and antimicrobial functions, particularly for G-CSF-derived GC neutrophils whereas leukapheresis had negligible effect for both type of GCs. The improvement of GCs supply chain and storage as well as certification based on a functional criterion will allow to preserve the viability and effector functions of neutrophils and guaranty GCs in vivo efficacy.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

L'implantologie dentaire est en constante évolution et l'objectif de ces innovations est d'assurer le succès de la thérapie implantaire. Des protocoles utilisant la fibrine riche en plaquettes (PRF) ont d'ailleurs trouvé des indications dans ce domaine. Le but de cette revue systématique est d'évaluer les effets du PRF sur la guérison osseuse et gingivale péri-implantaire. La question de recherche, basée sur la méthode PICOS, a été définie comme suit : "Chez les sujets nécessitant le remplacement d'une dent manquante par un implant dentaire, est-ce que l'utilisation du PRF démontre un bénéfice significatif comparativement à la pose d'un implant dentaire sans utilisation conjointe de PRF sur les résultats cliniques, basé sur des études humaines cliniques contrôlées? ". Les paramètres évalués incluaient la stabilité implantaire, les changements gingivaux dimensionnels, le remodelage osseux crestal et le taux de survie implantaire. Une recherche sur les bases de données MEDLINE (PubMed), Embase et Cochrane Library a été effectuée suivant une stratégie de recherche déterminée. Cinq études ont été retenues. Les résultats démontrent que l'ajout de PRF n'a généralement pas d'impact sur la stabilité implantaire. En ce qui concerne la profondeur au sondage, aucune différence significative n'a été obtenue entre les groupes. Parmi les trois études ayant mesuré la variation du niveau osseux crestal péri-implantaire, deux études rapportent que l'utilisation du PRF a réduit le remodelage osseux crestal alors qu'une étude n'a observé aucun effet positif. Le taux de survie implantaire était de 100% à l'exception d'une étude dans laquelle deux implants ont été perdus dans le groupe expérimental. La présente revue met en lumière l'effet modeste du PRF sur la guérison péri-implantaire. Il faudrait cependant prendre en considération le risque de biais élevé, la grande hétérogénéité des études et le nombre limité d'études fiables sur le sujet. Davantage d'études de bonne qualité sont nécessaires. / Dental implantology is in continuous evolution, and the objectives of these innovations are to ensure treatment success. Protocols using platelet-rich fibrin (PRF) have found indications in this field. The main goal of this systematic review is to assess the effects of PRF on peri-implant osseous and gingival healing. Based on the PICOS method, the research question has been defined as follows: " On subjects who need to replace a tooth with a dental implant, does PRF have a significant clinical benefit compared to dental implant placement without using PRF, based on human-controlled trials? " Assessed parameters included implant stability, dimensional gingival changes, crestal bone remodeling, and implant survival rate. A systematic literature search comprised three databases: MEDLINE (Pubmed), Embase, and Cochrane Library. Following a determined search strategy, five studies have been included. The results demonstrated that adding PRF generally has no positive effects on implant stability. No significant difference has been measured between groups when it comes to probing depth. Among the three studies that have evaluated peri-implant crestal bone height, PRF reduced crestal bone remodeling in two studies, whereas one study reported no positive effect. The implant survival rate was 100%, except for one study in which two implants were lost in the experimental group. This review highlights the modest positive effect of PRF on peri-implant healing. However, it is important to consider the high risk of bias, the high heterogeneity of the included studies, and the limited number of reliable studies. More research is necessary.

Thèse ou mémoire avec insertion d'articles. / La transfusion de concentrés de granulocytes (CG) représente une option thérapeutique pour les patients neutropéniques confrontés à des infections potentiellement mortelles résistantes aux agents antimicrobiens. Cette approche vise à augmenter temporairement le nombre de neutrophiles circulants afin de combattre les agents pathogènes. L'une des principales limites de la transfusion de CG réside dans la brève durée de vie des neutrophiles et la diminution rapide de leur efficacité clinique (< 24 h). Cette contrainte accroît la charge logistique des centres de collecte, complique le transport et restreint l'accès à une thérapie cellulaire efficace. Des études ont rapporté que la concentration cellulaire élevée contenue dans les CG entraîne une diminution significative de la viabilité et de la fonction antimicrobienne des cellules après 24 heures. Bien que la dilution 1 pour 8 et l'ajout de solutions additives aux CG aient permis de prolonger ces facteurs jusqu'à 48 heures, ces méthodes n'étaient pas entièrement adaptées à l'utilisation clinique en raison du volume excessif des transfusions. La présente étude a permis de développé une solution additive adaptée à la clinique, permettant de maintenir la viabilité des neutrophiles pendant 48 heures. Cette solution, composée principalement d'une solution additive pour globules rouges (AS-3) ainsi qu'une pour plaquettes (Plasma-Lyte) supplémentée de tampons et d'albumine (Alburex), a réussi à étendre l'activité antimicrobienne des neutrophiles, dont la phagocytose et la production intracellulaire d'espèces réactives de l'oxygène (ROS), jusqu'à 72 heures. Même la fonction la plus touchée par l'entreposage, à savoir la migration, a été maintenue pendant au moins 24 heures. Cependant, après 24 heures, on observe une augmentation significative de la production de ROS extracellulaires en présence de cette solution, ce qui pourrait avoir des conséquences négatives pour le receveur. Si, lors de l'entreposage, l'on tient compte des autres types cellulaires, comme les globules rouges et les plaquettes, et du délai de traitement du sang de 16 à 24 heures nécessaires pour la préparation de CG à partir du pool de leucocytes résiduels, cette solution ne semble pas suffisante pour prolonger la conservation des neutrophiles. Une éventuelle amélioration des conditions d'entreposage des CG pourrait garantir l'efficacité thérapeutique des produits sanguins destinés à la transfusion, malgré les délais de production et de transport qui peuvent parfois excéder 24 heures. / Transfusion of granulocyte concentrates (GCs) represents a therapeutic alternative for neutropenic patients with life-threatening infections resistant to antimicrobial treatments. This approach offers temporary antimicrobial protection by increasing the circulating neutrophil count. The main limitations of GC transfusion is the short shelf-life of neutrophils and the rapid decline in their clinical efficacy (< 24 h). This constraint increases the logistical burden on collection centers, complicates transport and restricts access to effective cell therapy. Previous studies have reported that the high cell concentration contained in CGs leads to a significant decrease in cell viability and antimicrobial function after 24 h. While dilution 1-in-8 and supplementation of GCs with additive solutions was successful in prolonging these factors for up to 48 h, these methods were not entirely suitable for clinical use due to excessive transfusion volume. The present study developed an additive solution specifically adapted for clinical use, allowing neutrophil viability to be maintained for up to 48 hours. The present study developed an additive solution specifically adapted for clinical use, allowing neutrophil viability to be maintained for up to 48 hours. This solution, composed mainly of a red blood cell additive solution (AS-3) and platelet additive solution (Plasma-Lyte) supplemented with buffers and albumin (Alburex), successfully extended the antimicrobial activity of neutrophils, including phagocytosis and intracellular production of reactive oxygen species (ROS), for up to 72 hours. Even the most affected function, e.g. migration, was maintained for at least 24 hours. However, after 24 hours, there was a significant increase in extracellular ROS production in the presence of this solution, which could have negative consequences for the recipient. If other cell types, such as red blood cells and platelets, are considered during storage, along with the 16 to 24-hour blood processing time required to prepare GCs from the residual leukocyte pool, this solution does not appear to be sufficient to prolong neutrophil preservation. Improving GC storage conditions could guarantee the therapeutic efficacy of blood products intended for transfusion, despite production and transport times that can sometimes exceed 24 hours.

Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2015-2016 / Les plaquettes sanguines contiennent une quantité abondante et diversifiée de microARN, qui sont de petits ARN non-codants d’une vingtaine de nucléotides de long capables de réguler l’expression des gènes de manière post-transcriptionnelle et séquence spécifique. Suite à leur activation, les plaquettes libèrent des microparticules (MPs), qui contiennent du matériel génétique issu de leur cellule d’origine et susceptible d’être transmis à une autre cellule afin d’y exécuter une fonction biologique. Durant mes travaux de thèse, j’ai étudié le rôle extra-plaquettaire des microARN et la capacité des MPs de plaquettes à participer aux communications intercellulaires. Les résultats que j’ai obtenus démontrent que les plaquettes activées à la thrombine libèrent la majorité de leur contenu en microARN dans les MPs, notamment miR-223. Les MPs sont internalisées par les cellules endothéliales HUVEC, et y délivrent leur contenu en miR-223. De plus, les MPs contiennent des complexes effecteurs Argonaute 2 (Ago2)•miR-223 fonctionnels et capables de réguler l’expression d’un gène rapporteur dans les cellules cibles endothéliales. Enfin, miR-223 provenant des MPs est capable de réguler l’expression de deux gènes endogènes prédits pour être ciblés par miR-223 et présents dans les HUVEC, à la fois au niveau de l’ARN messager (ARNm) et de la protéine. Dans une deuxième étude, j’ai démontré que ce phénomène n’est pas exclusif aux cellules endothéliales et qu’il peut également se produire avec les macrophages primaires humains. Les MPs sont effectivement internalisées par les macrophages et y délivrent leur contenu en miR-126-3p, qui y est fonctionnel et y régule l’expression d’un gène rapporteur et de gènes endogènes. De plus, l’internalisation des MPs induit une modification du transcriptome des macrophages receveurs, avec 66 microARN et 653 ARN codants ou non codants dont les profils d’expression sont modifiés. Ces changements sont accompagnés d’une diminution de la sécrétion de cytokines et de chimiokines, et d’une augmentation de la capacité de phagocytose par les macrophages. Mes travaux de doctorat démontrent que les microARN véhiculés par les MPs plaquettaires sont impliqués dans la reprogrammation de l’expression des gènes et des fonctions des cellules les internalisant, reflétant ainsi la complexité des communications intercellulaires. / Blood platelets contain an abundant and diverse array of microRNAs, which are small non-coding RNAs of ~20 nucleotides involved in post-transcriptional regulation of gene expression in a sequence-specific manner. Upon activation, platelets release microparticles (MPs) containing genetic materials from their parental cells that may be transferred to, and exert potent biological effects in, recipient cells. During my PhD thesis, I studied the extra-platelet role of microRNAs, and the ability of platelet-derived MPs to mediate cell-to-cell communications. The results that I obtained demonstrate that thrombin-activated platelets preferentially release their microRNA content in MPs, including miR-223. MPs can be internalized by human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), to which they transfer their miR-223 content. Moreover, platelet MPs contain functional effector Argonaute 2 (Ago2)•miR-223 complexes that are capable of regulating expression of a reporter gene in recipient HUVEC. Finally, platelet MP-derived miR-223 could regulate expression of two endogenous genes in recipient HUVEC, both at the mRNA and protein levels. In a second study, I demonstrated that this process is not exclusive to endothelial cells, and could take place also in primary human macrophages. Following their internalization by macrophages, MPs deliver functional miR-126-3p, which regulated expression of both a reporter gene and endogenous genes. Furthermore, MP internalization modified the transcriptome of recipient macrophages, with 66 microRNAs and 464 coding and non-coding RNAs that are differentially expressed. These changes are associated with a reduced secretion of cytokines and chemokines, and a marked increase in the phagocytic capacity of macrophages. My doctoral work demonstrate that platelet-derived microRNAs transfered by MPs are involved in reprograming recipient cells’ gene expression and functions, which illustrate the growing complexity of cell-to-cell communications.

Le préconditionnement ischémique (IPC) consiste à induire des épisodes ischémiques brefs et répétés, entrecoupés d’épisodes de reperfusion. Cette technique initialement testée pour ses effets protecteurs sur le myocarde rendrait différents tissus du corps plus résistants à une réduction d’oxygénation, comme retrouvée durant l’exercice maximal. Très peu d’études ont étudié les effets de l’IPC sur l’oxygénation musculaire. À l’aide de la spectroscopie proche infrarouge, nous avons examiné les effets du préconditionnement sur l’hémodynamique et l’extraction d’oxygène pendant un protocole de contractions volontaires maximales répétées. Nos résultats démontrent que ce préconditionnement entraîne une augmentation du volume sanguin local au repos et pendant la récupération après les contractions, ainsi qu’une plus grande extraction d’oxygène en début d’effort. Ces améliorations s’accompagnent d’une augmentation de la force musculaire tout au long du protocole. L’utilisation de l’IPC comme aide ergogénique pourrait s’avérer utile pour optimiser l’oxygénation et la force musculaire avant une compétition ou un entraînement. / Repeated episodes of ischemia and reperfusion, commonly known as ischemic preconditioning (IPC), initially tested for its protective effects on the myocardium, renders different tissues more resistant to a subsequent reduction in oxygenation (i.e., tissue O2 saturation), as found during maximal exercise. Despite its likely effects on the oxidative function, studies examining the effects of IPC on tissue oxygenation are very scarce. We used near-infrared spectroscopy to study the effects of IPC on muscle haemodynamics and peripheral O2 extraction during repeated maximal efforts in resistance-trained participants. Our results demonstrate that IPC increased muscle blood volume at rest and during recovery between contractions, as well as muscle oxygen uptake during exercise. These acute physiological adaptations were associated with increased muscle strength throughout the protocol. The use of IPC as an ergogenic aid could be useful to optimize oxygenation and muscle strength during competition and training.