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Ocorrência de populações naturais de Ampelozizyphus amazonicus ducke. e Piper peltatum l. ao longo dos rios Solimões e Amazonas e estratégias de conservação ex situ de germoplasma por técnicas in vitro, temperaturas sub zero e criogênicasSiqueira, Aldecinei Bastos 11 June 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-06-11 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Piper peltatum (Piperaceae) and Ampelozizyphus amazonicus (Rhamnaceae) are species
that have important medicinal features proven, for example, the action against malaria.
Both are used as medicinal by the Amazonian peoples, and are obtained exclusively by
the practice of extraction. These species are not scientifically well-known, and, due to
their potential, studies about methodologies for the conservation of genetic resources
and the domestication of these species are necessary. The objectives of this study were
to locate and characterize, based on field observation and environmental data base, the
natural populations of these species along the Amazon River, and developing strategies
for conservation of Ampelozizyphus amazonicus and Piper peltatum germplasm by
minimum growth techniques and sub-zero and cryogenic temperatures. For in vitro
conservation minimum growth techniques were used. The maintenance of P. peltatum
microshoots was evaluated under different temperatures (10 °C, 20 °C and 25 °C) and
different salts concentrations in MS medium. Microshoots of P. peltatum and
Ampelozizyphus amazonicus were subjected to different concentrations of sucrose,
mannitol and sorbitol (1%, 2% and 3%). Microshots of P. peltatum were also subjected
to culture media with different concentrations of sucrose, mannitol and sorbitol (1%, 2%
and 3%) with or without salicylic acid (SA). Seeds conservation of Piper peltatum were
evaluated under sub-zero (-20 °C) and cryogenic (-196 °C) temperatures. For seeds
preservation under sub-zero temperatures, the seeds were desiccated for 0h, 24h and 48h
and maintained for 0, 90 and 180 days in temperature of -20 °C. For cryopreservation,
seeds were immersed in liquid Nitrogen for 24h, and stored with or without other
cryoprotectors. Field observation and the data base demonstrate that most of sampling
areas visited are under anthropic deforestation. The In vitro maintenance of P. peltatum
microshoots was more efficient in the temperature of 20 °C. The use of mannitol for
conservation in vitro resulted in high mortality rates of the microshoots of both species.
In vitro conservation of P. peltatum in function of sucrose, mannitol e sorbitol and
different concentrations of SA, the best results are obtained in the absence of AS.
Germination rates were satisfactory when the seeds of Piper peltatum were dried for up
to 48 hours and stored for up to 180 days at -20 ° C. The seeds were also tolerant to
cryopreservation, regardless of the use of cryoprotectants. It is possible the conservation
of the species in vitro for up to 180 days by reducing the growth temperature. The
addition of mannitol and sorbitol, for the concentrations tested, are inadequate for in
vitro conservation of A. amazonicus microshoots. Sorbitol may be used in P. peltatum
conservation in concentrations between 1% and 2% in MS medium. Piper peltatum
seeds are tolerant to desiccation and exposure to subzero and cryogenic temperatures,
suggesting that Piper peltatum seeds are orthodox. / Ampelozizyphus amazonicus Ducke (Rhamnaceae) e Piper peltatum L. (Piperaceae) são
espécies que possuem características medicinais importantes comprovadas
cientificamente, dentre essas a ação contra a malária. Ambas são usadas como
medicinais pelas populações da Amazônia, que as obtêm exclusivamente pela prática do
extrativismo. As espécies são pouco conhecidas sob o ponto de vista científico e devido
ao potencial que estas apresentam, são necessários estudos a respeito de metodologias
para a conservação dos recursos genéticos e domesticação destas espécies. Este trabalho
teve por objetivo localizar populações naturais de Ampelozizyphus amazonicus e Piper
peltatum ao longo dos rios Solimões e Amazonas, caracterizar por meio de observações
nas áreas de coleta e informações de bases de dados as condições ambientais das
populações, e desenvolver estratégias para a conservação de germoplasma por técnicas
de crescimento mínimo, temperaturas sub zero e criogênicas. Para a conservação in
vitro utilizaram-se técnicas de conservação in vitro por crescimento mínimo. Foi
avaliada a manutenção de microestacas de Piper peltatum sob diferentes temperaturas
(10 °C, 20 °C e 25 °C) e o cultivo em diferentes concentrações dos sais do meio de
cultura MS. Microestacas de Ampelozizyphus amazonicus e Piper peltatum foram
submetidas a diferentes concentrações de sacarose, manitol e sorbitol (1%, 2% e 3%).
Em outro ensaio microestacas de Piper peltatum foram cultivadas em meio de cultura
com diferentes concentrações de sacarose, manitol e sorbitol (1%, 2% e 3%) adicionado
ou não de ácido salicílico (AS). Foram realizados ensaios de conservação de sementes
de Piper peltatum, estas foram submetidas a conservação por temperaturas sub zero (-20
oC) e criogênicas (-196 oC). Para a conservação de sementes sob temperatura sub zero,
inicialmente as sementes foram dessecadas por 0h, 24h e 48h e conservadas por 0, 90 e
180 dias, a -20 °C de temperatura. Para a criopreservação, as sementes foram testadas
quanto à tolerância a imersão por 24 horas em Nitrogênio líquido (NL) e quanto ao uso
ou não de diferentes tipos de crioprotetores. As observações ambientais realizadas e as
informações das bases de dados demonstram que a maior parte das áreas de coleta
visitadas está sob ação antrópica de desmatamento. A manutenção in vitro de
microestacas de Piper peltatum a 20 °C de temperatura foi a mais eficiente na
conservação in vitro sob diferentes temperaturas. O uso do manitol para a conservação
in vitro resultou no aumento das taxas de mortalidade das microestacas de ambas as
espécies estudadas. Para a conservação in vitro de P. peltatum em função da sacarose,
manitol e sorbitol e diferentes concentrações de AS, os melhores resultados das culturas
sobreviventes são obtidos na ausência de AS. A conservação de sementes de Piper
peltatum apresentou taxa de germinação satisfatória quando dessecadas por até 48 horas
e conservadas por até 180 dias à -20 °C de temperatura. As sementes foram tolerantes à
criopreservação independentemente do uso de crioprotetores. Conclui-se que é possível
a conservação in vitro de P. peltatum por até 180 dias pela redução da temperatura de
crescimento. A adição de manitol e sorbitol, nas concentrações testadas, são
inadequadas para a conservação in vitro de microestacas de A. amazonicus. O sorbitol
pode ser usado na conservação de P. peltatum em intervalo de 1% a 2% da concentração
adicionado ao meio de cultura de MS. As sementes de Piper peltatum são tolerantes à
dessecação e à exposição às temperaturas sub zero e criogênicas, sugerindo que se trata
de semente do tipo ortodoxa.
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