Diss. med. vet. Bern. / Literaturverz.

Der zu den bedeutendsten Ektoparasiten des Schweines gehörende Erreger der Schweineräude, Sarcoptes scabiei var. suis, ist weltweit verbreitet und von wirtschaftlichen Interesse für Schweinezucht- und Mastbetriebe. Ziel dieser seroepidemiologischen Studie war die Gewinnung neuer Erkenntnisse über die Bestandsdynamik klinischer Räudeerscheinungen und dem Titerverlauf von IgG-Antikörpern gegen Sarcoptes scabiei var. suis im Serum von Sauen in Abhängigkeit vom Reproduktionszyklus (Trächtigkeit, Laktation, Besamung) und von Saugferkeln während der Säugeperiode sowie Aufzucht. Schlussfolgernd aufgrund der Ergebnisse dieser Studie eignen sich für die Kontrolle und Überwachung sowie Diagnostik der Sarcoptes-Räude von Beständen serologische Untersuchungen von Ferkeln bis zur zweiten Lebenswoche von räudeverdächtigen Sauen, „Jungsauen erster und zweiter Wurf“ sowie Sauen während der Trächtigkeit (vor allem letztes Drittel) und Deckeber. Eine Vorselektion auf räudeverdächtige Hautveränderungen sowie gesteigerte Kratzaktivitäten erhöht die Wahrscheinlichkeit serologisch positive Tiere zu identifizieren.

La gale humaine, récemment reconnue comme maladie tropicale négligée par l’OMS est due à l'acarien Sarcoptes scabiei variété hominis. La gale est un problème majeur de santé publique avec une prévalence mondiale estimée à 200 millions de cas/an. La morbidité est surtout liée aux surinfections bactériennes par Streptococcus pyogenes et Staphylococcus aureus. L’arsenal thérapeutique demeure limité. Plusieurs molécules sont disponibles, surtout des traitements topiques (dont la perméthrine). L’ivermectine de la famille des lactones macrocycliques est la seule molécule orale disponible. Elle a une efficacité prouvée mais pas absolue. La plupart des molécules ne sont pas ovicides et leurs demi-vies, plus courtes que le cycle du parasite, impliquent de proposer systématiquement une deuxième application/prise à une semaine d’intervalle. Des inquiétudes concernant l'apparition de sarcoptes résistants à la perméthrine et à l’ivermectine apparaissent. Des alternatives sont donc nécessaires à courte échéance. Le traitement de la gale comprend toujours un traitement médical pour le patient et ses contacts mais également une désinfection de son environnement mais aucune mesure de décontamination n’a pu réellement faire la preuve de son efficacité.L’objectif de cette thèse a été de proposer et d’évaluer des alternatives thérapeutiques pour la prise en charge de la gale en utilisant de nouveaux modèles expérimentaux, in vitro et in vivo, notamment dans un modèle animal porcin. Dans la première partie de la thèse, deux spécialités vétérinaires de la famille des lactones macrocycliques (moxidectine) ou des isoxazolines (afoxolaner) ont été évaluées dans deux essais thérapeutiques. L’efficacité d’une administration orale unique de moxidectine et d’afoxolaner a été évaluée sur des porcs expérimentalement infestés. Une évaluation pharmacologique plasmatique et cutanée a aussi pu être réalisée. La deuxième partie de la thèse a porté sur une meilleure connaissance des molécules déjà disponibles et sur leur amélioration. L’activité ovicide de différentes molécules a été évaluée. La possibilité d’utiliser une dose plus importante d’ivermectine a pu elle aussi être étudiée. Dans la troisième partie de la thèse, nous avons travaillé sur la prise en charge de l’environnement. Nous avons évalué in vitro l’efficacité́ de différentes procédures de lavage en machine pour l’éradication d’une population de Sarcoptes scabiei ainsi que l’effet de la congélation, du séchage en lave-linge et de l’utilité de sacs en plastique occlus. Nous avons aussi étudier l’activité de molécules répulsives ou de produits acaricides pour la prise en charge des sarcoptes dans l’environnement.L’ensemble des résultats de ces différentes études va nous permettre de proposer de nouvelles alternatives pour la prise en charge thérapeutique de la gale. Certaines nouvelles alternatives vont pourvoir être évaluées chez l’homme prochainement. Pour l’environnement, des recommandations précises et universelles à l’échelle individuelle mais aussi collective pourront être proposées dans les pays développés mais aussi dans les pays en voie de développement. / Human scabies is caused by the mite Sarcoptes scabiei variety hominis. Scabies was recently recognized as a neglected tropical disease, due to its high global prevalence estimated to be around 200 million cases/year and its high morbidity mainly related to bacterial superinfection by Streptococcus pyogenes and Staphylococcus aureus. The therapeutic arsenal remains limited. Several molecules are available, including topical treatments. Ivermectin, a member of the macrocyclic lactone family is the only oral drug available. It has proven efficacy but not absolute. Most molecules are not ovicidal and their half-lives are too short to cover the entire parasite cycle. Indeed, a second application/intake at one week interval is mandatory. Furthermore, resistance to the main acaricides has been reported. Thus, alternatives need to be found in the short term. Treatment of scabies always includes medical treatment for the patient and his contacts, but also a disinfection of his environment. However, the efficacy of decontamination procedures, especially those possible in resource poor settings, has not been determined with a good level of evidence.The aim of this thesis was to propose and evaluate therapeutic alternatives for the management of scabies by using new experimental models, in vitro and, in vivo in an experimental porcine animal model.In the first part of the thesis, two veterinary molecules from the macrocyclic lactones family (moxidectin) or the isoxazolines (afoxolaner) were evaluated in two therapeutic trials. Efficacy of a single oral administration of moxidectin and afoxolaner was evaluated in experimentally infested pigs. A plasma and cutaneous pharmacological evaluation was also possible.The second part of the thesis focused on increasing our knowledge on molecules already available and on their improvement. We studied the ovicidal activities of currently available molecules for human scabies treatment and molecules use in the veterinary clinic. Furthermore, we studied the potential of a higher dose of ivermectin for scabies treatment.In the third part of the thesis, we worked on the management of the environment. We evaluated in vitro the effectiveness of different machine washing procedures for the eradication of a population of Sarcoptes scabiei as well as the effect of freezing, drying and the usefulness of closed plastic bags. We also studied the activity of repellent molecules or acaricide products for the management of Sarcoptes mites in the environment.Using the results of these different studies it will be possible to propose new alternatives for the therapeutic management of human scabies. New alternatives will be evaluated in humans in the next future. For the environment, specific and universal recommendations at individual and collective level will be proposed.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Sveriges lantbruksuniversitet, 2005. / Härtill 4 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Sveriges lantbruksuniversitet, 2009. / Härtill 3 uppsatser.

Tierärztl. Hochsch., Diss., 2004--Hannover.

Die parasitische Milbe Sarcoptes scabiei, die im Stratum corneum ihres Wirtes lebt, ist weit verbreitet. Eine zuverlässige Diagnose mittels herkömmlicher Techniken ist unzulänglich. Serologische Tests unter Verwendung von Gesamtantigen sind aufwändig und teuer in der Herstellung, und Kreuzreaktionen mit freilebenden Milben können zu falsch positiven Ergebnissen führen. Von dem Einsatz spezifischer rekombinanter Antigene ist eine Verbesserung der Serodiagnostik zu erwarten. In dieser Arbeit wurde eine cDNA-Bank aller Entwicklungsstadien von S. scabiei var. suis erstellt. Unter Verwendung eines humanen Skabies-positiven Sammelserums wurden 61 rekombinante immunreaktive Klone von S. scabiei isoliert, und das Protein von sieben dieser Klone als Diagnostikkandidaten wurde aufgereinigt. Die identifizierten Sequenzen zeichnen sich z. T. durch das Vorhandensein repetitiver Bereiche aus. Die rekombinanten Proteine wurden im ELISA unter Verwendung von Human- und Schweineseren auf ihre Sensitivität geprüft. Die Antigene zeigten signifikante Differenzen zwischen den Reaktionen mit den humanen Positiv- bzw. Negativseren, während dies bezüglich der Reaktion mit den porzinen Seren, nur für vier der Antigene der Fall war. Unspezifische Reaktionen mit E. coli-Protein sowie GST bei einem als Fusionsprotein exprimierten Antigen erwiesen sich als störend. 42.6% der isolierten Klone enthalten eine repetitive zentrale Region, deren offener Leserahmen hauptsächlich für die Aminosäuren Glutamat und Lysin kodiert. Obwohl sie große Homologien aufweisen, unterscheiden sich die Transkripte sowohl im zentralen Bereich als auch am 3´-Ende voneinander. Mittels der Southern Blot-Analyse konnte in Sarcoptes nur eine Genkopie detektiert werden, während dieses Gen in Dermatophagoides-Milben nicht nachgewiesen werden konnte. Auf Grund der Spezifität des Antigens für die parasitischen Milben könnte dieses Antigen für die Serodiagnostik besonders geeignet sein. Anhand von immunhistochemischen Untersuchungen wurden entsprechende Proteine in einer Organstruktur, bei der es sich vermutlich um die Hoden der Milben handelt, detektiert. In dieser Arbeit wurden rekombinante Antigene für die Serodiagnostik der Sarcoptes-Infektion bereitgestellt. Es wurde gezeigt, dass das Expressionssystem E. coli als Produktionssystem rekombinanter Antigene für die Serodiagnostik von Sarcoptes-Infektionen möglicherweise ungeeignet ist. / The parasitic mite Sarcoptes scabiei, which lives in the Stratum corneum of the host, is prevalent worldwide. Reliable diagnosis using conventional methods is unsatisfying. Serological tests using the total antigen are labour intensive and expensive to produce, and moreover there exist unspecific crossreactions against house dust mites, which lead to false positive results. We expect an improvement of serological diagnosis using specific recombinant antigens of the Sarcoptes-mites. In this work, we constructed a cDNA-library of all stages from S. scabiei var. suis. Using scabies-positive pooled human sera, we isolated 61 recombinant immunoreactive clones and purified the protein of seven clones as potential candidates for diagnosis. The identified sequences are partially characterized by the presence of repetitive domains. The recombinant proteins were tested for their sensitivity in the ELISA, using positive and negative human- and porcine sera. There exist significant differences between the reactions of the positive and negative sera for all the seven antigens using human sera. In contrast, with the porcine sera, significant difference could be detected only in four antigens. Reactions against of E. coli-protein and the GST in the fusionprotein caused problems of unspecific background. 42.6% of the isolated clones contain a repetitive central region, and the ORF mainly encodes the aminoacids glutamate and lysine. Altough there exist high homologies, the sequences of the transcripts differ in the central region and at the 3´-end. By southern blot analysis we could show one copy of the gene, while it was not detected in the genome of the free-living Dermatophagoides-mites. As for the specificity for the parasitic mites, the antigens might be good candidates for immunodiagnosis. In immunohistochemical studies the proteins were detected in a paired structure in the posterior part of the mites opisthosoma, which might be the testis. In this study, recombinant antigens of S. scabiei were produced and tested for the use in immunodiagnosis. It was shown, that the E. coli-expression system might be unsuitable for the production of recombinant antigens for their use in immunodiagnosis of Sarcoptes-infections.

Der zu den bedeutendsten Ektoparasiten des Schweines gehörende Erreger der Schweineräude, Sarcoptes scabiei var. suis, ist weltweit verbreitet und von wirtschaftlichen Interesse für Schweinezucht- und Mastbetriebe. Ziel dieser seroepidemiologischen Studie war die Gewinnung neuer Erkenntnisse über die Bestandsdynamik klinischer Räudeerscheinungen und dem Titerverlauf von IgG-Antikörpern gegen Sarcoptes scabiei var. suis im Serum von Sauen in Abhängigkeit vom Reproduktionszyklus (Trächtigkeit, Laktation, Besamung) und von Saugferkeln während der Säugeperiode sowie Aufzucht. Schlussfolgernd aufgrund der Ergebnisse dieser Studie eignen sich für die Kontrolle und Überwachung sowie Diagnostik der Sarcoptes-Räude von Beständen serologische Untersuchungen von Ferkeln bis zur zweiten Lebenswoche von räudeverdächtigen Sauen, „Jungsauen erster und zweiter Wurf“ sowie Sauen während der Trächtigkeit (vor allem letztes Drittel) und Deckeber. Eine Vorselektion auf räudeverdächtige Hautveränderungen sowie gesteigerte Kratzaktivitäten erhöht die Wahrscheinlichkeit serologisch positive Tiere zu identifizieren.

Psoroptic mange, caused by the Astigmatid mite Psoroptes ovis, is an ectoparasitic disease of significant economic importance to agriculture on a global scale and poses a serious welfare concern. With the current chemotherapeutic controls considered unsustainable, there is pressing need for novel control strategies. RNA interference has been proposed as a potential high throughput approach for the identification of novel therapeutic targets with high specificity, speed and at a relatively low cost compared to the existing methods. The presence of the components of the RNA interference (RNAi) pathway in P. ovis was first confirmed through in silico analyses of the P. ovis transcriptome and, following development of a non-invasive immersion method of double stranded RNA (dsRNA) delivery, gene silencing by RNAi was demonstrated in P. ovis. Statistically-significant reduction of transcript level was measured for the three genes targeted: P. ovis mite group 2 allergen (Pso o 2), P. ovis mu class glutathione S-transferase (PoGST-mu1) and P. ovis beta tubulin (Poβtub). This is the first demonstration of gene silencing by RNAi in P. ovis and provides a key mechanism for mining transcriptomic and genomic datasets in the future for novel targets of intervention against P. ovis. The first assessment of gene silencing was also performed in two related Astigmatid mites of high medical importance; the European house dust mite Dermatophagoides pteronyssinus and the scabies mite Sarcoptes scabiei. A statistically-significant reduction in expression of a D. pteronyssinus mu class glutathione S-transferase (DpGST-mu1) transcript was observed. No significant reduction in expression of a S. scabiei mu class glutathione S-transferase (SsGST-mu1) transcript was observed. Additionally, microRNAs (miRNAs) from the related miRNA pathway were identified in a P. ovis small RNA sample and were sequenced and annotated.

No description available.