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Improved Survival of Ischemic Random Skin Flaps Through the Use of Bone Marrow Nonhematopoietic Stem Cells and Angiogenic Growth Factors

Simman, Richard, Craft, Chris, McKinney, Bart 01 May 2005 (has links)
Surgical skin flaps are frequently used in plastic and reconstructive surgery to repair acquired or congenital defects. Necrosis is a common complication associated with these flaps postoperatively as a result of inadequate blood supply. Stem cells are precursor cells with the potential to differentiate into more specialized cells. Angiogenic factors act to direct cellular differentiation and organization to form new vascular elements. Our theory was that the combination of angiogenic growth factors with stem cells derived from the subject preoperatively would augment neovascularization, thereby increasing blood supply to the flap, which may ultimately improve flap survival. In phase I, 40 Lewis rats were randomized into 4 groups of 10. Random dorsal skin flaps were elevated and treated at the same time. The first group was injected with only medium, the second with stem cells, the third with stem cells and angiogenic factors, and the fourth with angiogenic growth factors. Millimetric measurements of flap viability at 7 and 14 days did not show any statistically significant differences between the studied groups. In phase II, 24 rats were also randomized into 4 groups of 6, but this time were treated 1 week before flap elevation. The viability measurements showed an increased rate of viability in the group in which stem cells and the angiogenic factors were administered simultaneously (84.5% ± 3.2%) as compared with the unmodified control group (62.6% ± 7.3%) or to the groups in which only precursor cells (60.4% ± 7.9%) or angiogenic factors (62.3% ± 10.1%). Increased blood supply brought by these manipulations is believed translated to increased tissue flap survival. Punch biopsies showed that "green fluorescent protein"-labeled precursor cells was noted to form luminal structures in the treated flaps. The vascular cast of all flaps was filled with Mercox plastic resin. After euthanasia, the soft tissues of the harvested flaps were dissolved and the remaining vascular cast was weighted. The weight-based ratio of the vascular composition was determined. The flaps injected with both stem cells and angiogenic factors showed higher values. We conclude that the administration of bone marrow stem cells with angiogenic factors 1 week before flap creation improves the survival of ischemic random skin flaps.
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Influência da pressão negativa na sobrevivência de retalhos cutâneos ao acaso: estudo experimental em porcos / Influence of negative pressure on survival of random skin flaps: experimental study in pigs

Wada, Alexandre 19 August 2013 (has links)
INTRODUÇÃO: Dentre os mecanismos de ação da pressão negativa no tratamento de feridas, que não são totalmente compreendidos até o momento, a melhora do fluxo sanguíneo local pode ser um dos mais importantes. A melhora da circulação sanguínea local promovida pela pressão negativa poderia resultar em maior sobrevida de tecidos submetidos a redução do fluxo sanguíneo. A aplicação clínica deste fenômeno seria um dos mecanismos de ação mais importantes da pressão negativa no tratamento de feridas complexas, e poderia ainda levar à utilização do método em outras situações clínicas, como em ferimentos descolantes de extremidades, e no salvamento de retalhos cutâneos mal perfundidos. OBJETIVO: Baseado na teoria de aumento do fluxo sanguíneo submetido a pressão negativa, este trabalho tem como objetivo avaliar a eficiência da pressão negativa na sobrevivência de retalhos cutâneos ao acaso, em suínos. MATERIAL E MÉTODO: Foram utilizados dez animais, divididos em dois grupos experimentais. No primeiro grupo, foram elevados dois retalhos cutâneos no dorso dos animais, um em cada lado, medindo 3 x 12 cm. Em um dos lados, foi aplicada pressão negativa de 125 mmHg por 48 horas sobre o retalho; no retalho contralateral (controle), o retalho foi apenas elevado e suturado novamente ao leito. No segundo grupo, foram também elevados dois retalhos cutâneos, um em cada lado, porém a pressão negativa foi aplicada abaixo dos retalhos no lado experimental; da mesma forma como no primeiro grupo, o outro lado contralateral foi o controle deste grupo (retalho apenas elevado e suturado ao leito). Também neste grupo a pressão negativa foi aplicada por 48 horas. Os animais dos dois grupos experimentais foram mantidos por sete dias, quando foi realizada a observação final. RESULTADOS: Ao final do experimento, foi observada maior quantidade de tecido viável e menor necrose distal dos retalhos no segundo grupo (pressão negativa abaixo dos retalhos), comparativamente ao seu grupo controle, nos dois períodos observacionais, com 48 horas e com sete dias. Não houve diferença estatisticamente significativa no grupo em que a pressão negativa foi aplicada sobre os retalhos. CONCLUSÃO: Este trabalho demonstrou a eficiência da pressão negativa na melhora da sobrevivência de retalhos cutâneos ao acaso, em modelo experimental de suínos, quando aplicada abaixo dos retalhos / INTRODUCTION: Among theories that could explain the mechanisms of action of negative pressure on wound treatment, which are not entirely understood, improvement of blood circulation can be one of the most important ones. The enhancement of blood flow could result in better outcome of tissues submmitted to ischemia. Clinical application of this phenomenom may be one of the most importante mechanisms of action of negative pressure over complex wounds, and could lead to its use in other clinical situations, such as \"degloving\" injuries of limbs and in salvage of poorly irrigated skin flaps. OBJECTIVE: Based on theory of improved blood flow caused by negative pressure, this experiment aimed to evaluate efficiency of negative pressure on survival of random skin flaps, in a swine experimental model. MATERIAL AND METHOD: Ten animals were operated on, and divided in two groups. In the first group, two skin flaps were dissected and elevated, one on each side of dorsum of the animals, measuring 3 x 12 cm. Negative pressure of 125 mmHg was applied over one of the flaps for 48 hours. The opposite flaps were just elevated and sutured to the wound bed, in order to be the control group. In the second group, two flaps were also elevated, one in each side of dorsum, but negative pressure was applied under the flaps in the experimental side; flaps elevated on the other side were the control group, just elevated and sutured to the wound bed. Negative pressure was also applied for 48 hours in the second group. All animals were kept alive for seven days, when final evaluation was done. RESULTS: At the end of the experiment, it was observed greater amount of viable tissue in group submmited to negative pressure under the flaps, compared to control group. There were no significant estatistical differences concerning flap survival in group 1 (negative pressure over flaps). CONCLUSION: This experiment demonstrated the efficiency of negative pressure on improvement of survival of random skin flaps in a swine experimental model, when applied under the flaps
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Influência da pressão negativa na sobrevivência de retalhos cutâneos ao acaso: estudo experimental em porcos / Influence of negative pressure on survival of random skin flaps: experimental study in pigs

Alexandre Wada 19 August 2013 (has links)
INTRODUÇÃO: Dentre os mecanismos de ação da pressão negativa no tratamento de feridas, que não são totalmente compreendidos até o momento, a melhora do fluxo sanguíneo local pode ser um dos mais importantes. A melhora da circulação sanguínea local promovida pela pressão negativa poderia resultar em maior sobrevida de tecidos submetidos a redução do fluxo sanguíneo. A aplicação clínica deste fenômeno seria um dos mecanismos de ação mais importantes da pressão negativa no tratamento de feridas complexas, e poderia ainda levar à utilização do método em outras situações clínicas, como em ferimentos descolantes de extremidades, e no salvamento de retalhos cutâneos mal perfundidos. OBJETIVO: Baseado na teoria de aumento do fluxo sanguíneo submetido a pressão negativa, este trabalho tem como objetivo avaliar a eficiência da pressão negativa na sobrevivência de retalhos cutâneos ao acaso, em suínos. MATERIAL E MÉTODO: Foram utilizados dez animais, divididos em dois grupos experimentais. No primeiro grupo, foram elevados dois retalhos cutâneos no dorso dos animais, um em cada lado, medindo 3 x 12 cm. Em um dos lados, foi aplicada pressão negativa de 125 mmHg por 48 horas sobre o retalho; no retalho contralateral (controle), o retalho foi apenas elevado e suturado novamente ao leito. No segundo grupo, foram também elevados dois retalhos cutâneos, um em cada lado, porém a pressão negativa foi aplicada abaixo dos retalhos no lado experimental; da mesma forma como no primeiro grupo, o outro lado contralateral foi o controle deste grupo (retalho apenas elevado e suturado ao leito). Também neste grupo a pressão negativa foi aplicada por 48 horas. Os animais dos dois grupos experimentais foram mantidos por sete dias, quando foi realizada a observação final. RESULTADOS: Ao final do experimento, foi observada maior quantidade de tecido viável e menor necrose distal dos retalhos no segundo grupo (pressão negativa abaixo dos retalhos), comparativamente ao seu grupo controle, nos dois períodos observacionais, com 48 horas e com sete dias. Não houve diferença estatisticamente significativa no grupo em que a pressão negativa foi aplicada sobre os retalhos. CONCLUSÃO: Este trabalho demonstrou a eficiência da pressão negativa na melhora da sobrevivência de retalhos cutâneos ao acaso, em modelo experimental de suínos, quando aplicada abaixo dos retalhos / INTRODUCTION: Among theories that could explain the mechanisms of action of negative pressure on wound treatment, which are not entirely understood, improvement of blood circulation can be one of the most important ones. The enhancement of blood flow could result in better outcome of tissues submmitted to ischemia. Clinical application of this phenomenom may be one of the most importante mechanisms of action of negative pressure over complex wounds, and could lead to its use in other clinical situations, such as \"degloving\" injuries of limbs and in salvage of poorly irrigated skin flaps. OBJECTIVE: Based on theory of improved blood flow caused by negative pressure, this experiment aimed to evaluate efficiency of negative pressure on survival of random skin flaps, in a swine experimental model. MATERIAL AND METHOD: Ten animals were operated on, and divided in two groups. In the first group, two skin flaps were dissected and elevated, one on each side of dorsum of the animals, measuring 3 x 12 cm. Negative pressure of 125 mmHg was applied over one of the flaps for 48 hours. The opposite flaps were just elevated and sutured to the wound bed, in order to be the control group. In the second group, two flaps were also elevated, one in each side of dorsum, but negative pressure was applied under the flaps in the experimental side; flaps elevated on the other side were the control group, just elevated and sutured to the wound bed. Negative pressure was also applied for 48 hours in the second group. All animals were kept alive for seven days, when final evaluation was done. RESULTS: At the end of the experiment, it was observed greater amount of viable tissue in group submmited to negative pressure under the flaps, compared to control group. There were no significant estatistical differences concerning flap survival in group 1 (negative pressure over flaps). CONCLUSION: This experiment demonstrated the efficiency of negative pressure on improvement of survival of random skin flaps in a swine experimental model, when applied under the flaps
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Estudo crítico de mastocitomas caninos e avaliação termográfica de técnicas de anaplastia / Critical study of canine mast cell tumors and thermographic evaluation of reconstructive surgery

Melo, Samanta Rios 26 July 2017 (has links)
Em grande parte das vezes, a excisão cirúrgica apropriada de mastocitomas em cães requer a realização de técnicas de reconstrução para o fechamento da ferida resultante, e o seu conhecimento se torna essencial para todo o cirurgião. Alcançar margens livres tem uma influência significativa sobre o tempo de sobrevida, e deve ser o objetivo para a maioria dos pacientes. A avaliação da evolução de retalhos cutâneos e a mensuração da aderência e neovascularização do tecido no local intencionado é extremamente importante para diagnóstico precoce de falhas na implantação do tecido. Não há evidências em literatura de trabalhos relacionados a avaliação da perfusão tecidual de retalhos cutâneos em animais de companhia, com o uso de técnicas de termografia. Neste trabalho, foram obtidas imagens, do tipo padrão e do tipo termográficas, de 63 mastocitomas, provenientes de 60 cães. A classificação histológica determinada neste estudo foi significativa na influência à sobrevida (p<0,001). A pontuação prognóstica (0-13) aqui proposta, adaptada de Melo e colaboradores (2015) teve forte associação com sobrevida (p<0,001). A presença de metástase foi observada em 17% dos casos, e de recidiva em 14%. Em ambas as ocorrências 90% dos animais acometidos vieram a óbito. Por meio de analises estatísticas comprovamos a associação entre esses dois fatores (metástase e recidiva) com o tempo de sobrevida (em ambas p<0,001). Dentro do nosso estudo foi observado que, em tumores com a presença de AIM (agrupamentos independentes de mastócitos) há um risco de mortalidade 8,57 vezes maior do que animais com margens livres ou mesmo comprometidas. Esse risco é inclusive maior do que o risco de óbito em animais com recidiva (HR 5,13). VEGF-A se mostrou de significância estatística perante sobrevida; confirmando estudo anteriores e sugerido mais uma vez a inclusão desse marcador no perfil prognóstico do mastocitomas. Todas as formações apresentadas neste estudo tiveram análise termográfica concluída e documentada. Nota-se que mesmo quando considerado ponto central ou quando considerada toda área tumoral, 65 e 67% respectivamente, dos mastocitomas eram mais quentes que a pele sadia circundante. A causa destas mudanças de temperatura não é totalmente compreendida, mas sugere-se que esteja associada a neoangiogênese e inflamação local (XIE et al., 2004). Por meio das análises estatísticas é possível afirmar que as regiões tumoral e não tumoral são significativamente diferentes, tanto na avaliação de ponto central (SpT e SPNT) como na avaliação da área (AT e ANT) do tumor e pele circundante sadia (p < 0,001). Ainda por meio de termografia, pudemos estabelecer que retalhos cutâneos pediculados apresentaram chance de deiscência 5,57 vezes maior do que o uso de outras técnicas de anaplastia e deslizamento de tecidos. Por fim, conseguimos estabelecer uma curva térmica de evolução das feridas da nossa população do estudo, bem como diferenciar o comportamento térmico quando há ou não deiscência. Isso pode ser útil a estudos futuros ou mesmo à prática clínico-cirúrgica, de modo a comparar a evolução de pacientes com as curvas previamente aqui estabelecidas, sendo factível assim prever a cicatrização da ferida. Acreditamos, por meio deste estudo, que a análise termográfica da evolução de retalhos cutâneos pode ser usada como correspondente a perfusão tecidual, conforme indicado em literatura e ser usada como ferramenta de reconhecimento precoces de deiscência da ferida cirúrgica, conforme proposto por diversos autores (SALMI et al., 1995; EICHHORN et al., 2009; WEERD et al., 2009; WEERD et al., 2011). / In most cases, proper surgical excision of mast cell tumors in dogs requires reconstructive techniques for the closure of the resulting wound, and it knowledge becomes essential for the surgeon. Achieving free margins has a significant influence on survival time, and should be the goal for most patients. The evaluation of the evolution of cutaneous flaps and the measurement of tissue adherence and vascularization at the intended site is extremely important for early diagnosis of defects in tissue implantation. There is no evidence in literature of studies related to evaluate tissue perfusion of skin flaps in companion animals, using thermography techniques. In this study, standard images and thermographic ones were obtained from 63 mast cell tumors from 60 dogs. The histological classification of the tumors in this study was significant in survival time (p <0.001). The prognostic score (0-13) proposed here, adapted from Melo et al. (2015), had also strong association with survival time (p <0.001). The presence of metastasis was observed in 17% of cases, and relapse in 14%. In both cases, 90% of the affected animals died. By means of statistical analyzes, we verified the association between these two factors (metastasis and relapse) in survival time (for both p <0.001). Within our study it was observed that in tumors with the presence of AIM (independent mast cell groups) there is a mortality risk 8.57 times higher than animals with free or even compromised margins. This risk is even greater than the risk of death in animals with relapse (HR 5,13). Also, VEGF-A was shown to be statistically significant at survival time; confirming previous studys and leading us to suggets once again the inclusion of this marker in the prognostic profile of mast cell tumors. All the tumors presented in this study had a thermographic analysis completed and documented. It is noted that even when considered central point or tumor area, 65 and 67% respectively, of the mast cell tumors were warmer than the surrounding healthy tissue. The cause of these temperature changes is not fully understood, but it is suggested to be associated with neoangiogenesis and local inflammation (XIE et al., 2004). By means of the statistical analyzes it is possible to affirm that the tumoral and non-tumoral regions are significantly different, as well as in the evaluation of the central point (SpT and SPNT) and in the evaluation of the tumoral area (TA and ANT) im comparison with healthy surrounding skin (p <0.001 ). Also through thermography, we could establish that skin flaps had a chance of dehiscence 5.57 times greater than the use of other techniques of reconstructive surgery. Finally, we were able to establish a thermal curve of evolution of the wounds of our study population, as well as to differentiate the thermal behavior when there is or not dehiscence. This may be useful for future studies or even clinical-surgical practice, in order to compare the evolution of patients with the curves previously established here, and it is feasible to predict wound healing. We believe, by means of this study, that the thermographic analysis of the evolution of cutaneous flaps can be used as corresponding to tissue perfusion, as indicated in the literature and be used as an early recognition tool for surgical wound dehiscence, as proposed by several authors (SALMI et al., 1995; EICHHORN et al., 2009; WEERD et al., 2009; WEERD et al., 2011).
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Estudo crítico de mastocitomas caninos e avaliação termográfica de técnicas de anaplastia / Critical study of canine mast cell tumors and thermographic evaluation of reconstructive surgery

Samanta Rios Melo 26 July 2017 (has links)
Em grande parte das vezes, a excisão cirúrgica apropriada de mastocitomas em cães requer a realização de técnicas de reconstrução para o fechamento da ferida resultante, e o seu conhecimento se torna essencial para todo o cirurgião. Alcançar margens livres tem uma influência significativa sobre o tempo de sobrevida, e deve ser o objetivo para a maioria dos pacientes. A avaliação da evolução de retalhos cutâneos e a mensuração da aderência e neovascularização do tecido no local intencionado é extremamente importante para diagnóstico precoce de falhas na implantação do tecido. Não há evidências em literatura de trabalhos relacionados a avaliação da perfusão tecidual de retalhos cutâneos em animais de companhia, com o uso de técnicas de termografia. Neste trabalho, foram obtidas imagens, do tipo padrão e do tipo termográficas, de 63 mastocitomas, provenientes de 60 cães. A classificação histológica determinada neste estudo foi significativa na influência à sobrevida (p<0,001). A pontuação prognóstica (0-13) aqui proposta, adaptada de Melo e colaboradores (2015) teve forte associação com sobrevida (p<0,001). A presença de metástase foi observada em 17% dos casos, e de recidiva em 14%. Em ambas as ocorrências 90% dos animais acometidos vieram a óbito. Por meio de analises estatísticas comprovamos a associação entre esses dois fatores (metástase e recidiva) com o tempo de sobrevida (em ambas p<0,001). Dentro do nosso estudo foi observado que, em tumores com a presença de AIM (agrupamentos independentes de mastócitos) há um risco de mortalidade 8,57 vezes maior do que animais com margens livres ou mesmo comprometidas. Esse risco é inclusive maior do que o risco de óbito em animais com recidiva (HR 5,13). VEGF-A se mostrou de significância estatística perante sobrevida; confirmando estudo anteriores e sugerido mais uma vez a inclusão desse marcador no perfil prognóstico do mastocitomas. Todas as formações apresentadas neste estudo tiveram análise termográfica concluída e documentada. Nota-se que mesmo quando considerado ponto central ou quando considerada toda área tumoral, 65 e 67% respectivamente, dos mastocitomas eram mais quentes que a pele sadia circundante. A causa destas mudanças de temperatura não é totalmente compreendida, mas sugere-se que esteja associada a neoangiogênese e inflamação local (XIE et al., 2004). Por meio das análises estatísticas é possível afirmar que as regiões tumoral e não tumoral são significativamente diferentes, tanto na avaliação de ponto central (SpT e SPNT) como na avaliação da área (AT e ANT) do tumor e pele circundante sadia (p < 0,001). Ainda por meio de termografia, pudemos estabelecer que retalhos cutâneos pediculados apresentaram chance de deiscência 5,57 vezes maior do que o uso de outras técnicas de anaplastia e deslizamento de tecidos. Por fim, conseguimos estabelecer uma curva térmica de evolução das feridas da nossa população do estudo, bem como diferenciar o comportamento térmico quando há ou não deiscência. Isso pode ser útil a estudos futuros ou mesmo à prática clínico-cirúrgica, de modo a comparar a evolução de pacientes com as curvas previamente aqui estabelecidas, sendo factível assim prever a cicatrização da ferida. Acreditamos, por meio deste estudo, que a análise termográfica da evolução de retalhos cutâneos pode ser usada como correspondente a perfusão tecidual, conforme indicado em literatura e ser usada como ferramenta de reconhecimento precoces de deiscência da ferida cirúrgica, conforme proposto por diversos autores (SALMI et al., 1995; EICHHORN et al., 2009; WEERD et al., 2009; WEERD et al., 2011). / In most cases, proper surgical excision of mast cell tumors in dogs requires reconstructive techniques for the closure of the resulting wound, and it knowledge becomes essential for the surgeon. Achieving free margins has a significant influence on survival time, and should be the goal for most patients. The evaluation of the evolution of cutaneous flaps and the measurement of tissue adherence and vascularization at the intended site is extremely important for early diagnosis of defects in tissue implantation. There is no evidence in literature of studies related to evaluate tissue perfusion of skin flaps in companion animals, using thermography techniques. In this study, standard images and thermographic ones were obtained from 63 mast cell tumors from 60 dogs. The histological classification of the tumors in this study was significant in survival time (p <0.001). The prognostic score (0-13) proposed here, adapted from Melo et al. (2015), had also strong association with survival time (p <0.001). The presence of metastasis was observed in 17% of cases, and relapse in 14%. In both cases, 90% of the affected animals died. By means of statistical analyzes, we verified the association between these two factors (metastasis and relapse) in survival time (for both p <0.001). Within our study it was observed that in tumors with the presence of AIM (independent mast cell groups) there is a mortality risk 8.57 times higher than animals with free or even compromised margins. This risk is even greater than the risk of death in animals with relapse (HR 5,13). Also, VEGF-A was shown to be statistically significant at survival time; confirming previous studys and leading us to suggets once again the inclusion of this marker in the prognostic profile of mast cell tumors. All the tumors presented in this study had a thermographic analysis completed and documented. It is noted that even when considered central point or tumor area, 65 and 67% respectively, of the mast cell tumors were warmer than the surrounding healthy tissue. The cause of these temperature changes is not fully understood, but it is suggested to be associated with neoangiogenesis and local inflammation (XIE et al., 2004). By means of the statistical analyzes it is possible to affirm that the tumoral and non-tumoral regions are significantly different, as well as in the evaluation of the central point (SpT and SPNT) and in the evaluation of the tumoral area (TA and ANT) im comparison with healthy surrounding skin (p <0.001 ). Also through thermography, we could establish that skin flaps had a chance of dehiscence 5.57 times greater than the use of other techniques of reconstructive surgery. Finally, we were able to establish a thermal curve of evolution of the wounds of our study population, as well as to differentiate the thermal behavior when there is or not dehiscence. This may be useful for future studies or even clinical-surgical practice, in order to compare the evolution of patients with the curves previously established here, and it is feasible to predict wound healing. We believe, by means of this study, that the thermographic analysis of the evolution of cutaneous flaps can be used as corresponding to tissue perfusion, as indicated in the literature and be used as an early recognition tool for surgical wound dehiscence, as proposed by several authors (SALMI et al., 1995; EICHHORN et al., 2009; WEERD et al., 2009; WEERD et al., 2011).

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