Made available in DSpace on 2014-10-09T12:38:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:00:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 02759.pdf: 4084534 bytes, checksum: 9f566ae8144088d7793859fc3ba3a449 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:27:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:32:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:09:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 03268.pdf: 1411071 bytes, checksum: 329c08d164e3d0d4d2a4ce77f1e2aa13 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IEA/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:32:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:10:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 03181.pdf: 1949463 bytes, checksum: c34e1f3d7f43777cbd9147685ab2ea6e (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

As serpentes da tribo Pseudoboini apresentam grande diversidade quanto à sua ecologia, são consideradas um grupo monofilético e possuem uma filogenia conhecida. A partir disso, tornou-se possível a análise, sob um contexto evolutivo, das possíveis associações entre a morfologia e a ecologia neste grupo. Neste estudo, analisamos a dieta da tribo, bem como, testamos hipóteses de possíveis relações adaptativas entre a morfologia e a dieta e entre a morfologia e o uso do ambiente arborícola, e exploramos a evolução destes aspectos em serpentes da tribo. Nove espécies foram consideradas generalistas e 13, especialistas, sendo seis em lagartos, três em pequenos mamíferos, duas em serpentes, uma em ovos de lagarto e uma em ovos de ave. Um aumento no consumo de pequenos mamíferos, não esteve associado com um aumento da robustez e do volume da cabeça. Especializações em lagartos, pequenos mamíferos e serpentes surgiram independentemente em táxons terminais ao menos duas vezes durante a história evolutiva da tribo. A especialização em ovos de ave é uma autapomorfia de Rhachidelus brazili. A robustez decresceu no ancestral do gênero Siphlophis, e aumentou substancialmente em R. brazili. O tamanho da cabeça decresceu no ancestral do gênero Siphlophis e em Oxyrhopus petola e aumentou substancialmente em Phimophis guianensis, no ancestral de O. trigeminus e O. rhombifer e em R. brazili. Siphlophis cervinus, S. compressus, S. pulcher e D. anomalus foram consideradas espécies semi arborícolas. A reconstrução do hábito semi-arborícola indica que este surgiu independentemente pelo menos duas vezes durante a diversificação do grupo. Não foram encontrados indícios de efeito da freqüência do uso da vegetação sobre o tamanho do corpo, a robustez, o formato da cabeça e o número de vértebras por unidade corporal. Entretanto, o hábito arborícola parece ter levado a um aumento no tamanho da cauda. O tamanho corporal diminuiu substancialmente em P. guianensis e aumentou substancialmente em Clelia rustica e no ancestral de C. clelia e C. plumbea. Já o número de vértebras por unidade corporal diminuiu substancialmente em C. rustica, no ancestral de C. clelia e C. plumbea, e em Pseudoboa haasi; aumentou substancialmente no ancestral de O. trigeminus e O. rhombifer, e em O. melanogenys e P. guianensis. O tamanho da cauda diminuiu significativamente em C. rustica, Boiruna maculata e P. haasi e aumentou consideravelmente no ancestral do gênero Siphlophis, O. petola, D. anomalus, R. brazili e no ancestral do gênero Pseudoboa. A largura da cabeça diminuiu substancialmente em Pseudoboa neuwiedii e aumentou substancialmente em S. compressus, P. guianensis e em B. maculata. As ausências de relações possivelmente adaptativas podem estar ligadas a uma forte inércia filogenética e/ou ao efeito de outros agentes seletivos. Um ancestral morfologicamente adequado a uma dieta baseada em pequenos mamíferos e ao uso da vegetação também pode ter influenciado os resultados. O conhecimento do grupo externo da tribo Pseudoboini ajudaria a esclarecer ainda mais as relações entre morfologia e ecologia nestas serpentes. / Snakes of the tribe Pseudoboini are ecological diversity, considered as a monophyletic group and have a known phylogeny. Thus, the analyses of possible associations between the morphology and the ecology of this group in an evolutionary framework became possible. In the present study, we analyze the diet of pseudoboine species, and we test hypotheses of possible adaptative relationships between morphology and diet, and between morphology and microhabitat use in pseudoboine snakes. We also explore how these traits evolved during the diversification of the tribe. Nine species were considered as diet generalists and 13, as diet specialists, being six lizard specialists, three small mammal specialists, two snake specialists, one a lizard egg specialist, and one a bird egg specialist. An increase in the consumption of small mammals was not associated with an increase in robustness and head volume. Lizard, small mammal and snake specializations occurred independently at least twice in terminal taxa during the diversification of the tribe. A specialization in bird eggs seems to be an autapomorphy of Rhachidelus brazili. Robustness decreased in the ancestor of Siphlophis species, and increased substantially in R. brazili. Head volume descreased in the ancestor ofSiphlophis species and in Oxyrhopus petola, and increased substantially in Phimophis guianensis, in the ancestor of O. trigeminus and O. rhombifer and in R. brazili. Siphlophis cervinus, S. compressus, S. pulcher and D. anomalus were considered as semi-arboreal. The semi-arboreal habit reconstruction indicates that this habit evolved independently at least twice during the diversification of the group. We did not find indications of the effect of vegetation use on body size, robustness, head shape and the number of ventral scales per body unit. However, vegetation use seems to have led to an increase in tail length. Body size substantially decreased in P. guianensis and substantially increased in Clelia rustica and in the ancestor of C. clelia and C. plumbea. The number of vertebrae per body unit decreased substantially in C. rustica, in the ancestor of C. clelia and C. plumbea, and in Pseudoboa haasi. It substantially increased in the ancestor of O. trigeminus and O. rhombifer, and in O. melanogenys and P. guianensis. Tail length significantly decreased in C. rustica, Boiruna maculata and P. haasi, and increased substantially in the ancestor of the genus Siphlophis, in O. petola, D. anomalu ,R. brazili and in the ancestor of Pseudoboa spp.. Head width decreased substantially in Pseudoboa neuwiedii and increased significantly in S. compressus, P. guianensis and in B.maculata. Strong influence of phylogenetic inertia and/or the effect of alternative selective agents could be related to the absences of these possible adaptative 69 relationships. An ancestor with a morphology adequate to a diet based on small mammals and to arboreality could also have influenced the results. Knowing the outgroup of the tribe Pseudoboini would help to further clarify the relationships between morphology and ecology of these snakes.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:52:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:57:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O veneno de C. d. terrificus tem sido descrito como sendo de pouca complexidade, tendo 4 frações caracterizadas, convulxina, giroxina. crotoxina e crotamina. O presente trabalho visou o isolamento e caracterização da Delta toxina cuja existência havia sido aventada em trabalhos anteriores. Após a realização de uma varredura de tampões em uma coluna de exclusão molecular Superdex-75 acoplada a um sistema FPLC, na presença de três diferentes tampões, chegou-se a uma condição ideal de fracionamento do veneno crotálico. Em seqüência realizou-se a segunda etapa de purificação em sistema HPLC em uma coluna C4, onde foi possível identificar o pico de interesse. O pico puro passou por análises em MALDI-ToF sendo sua massa estimada em 14.074,92 Da, Quando analisado por eletroforese em gel de poiiacrilamida, a delta toxina apresentou massa molecular de cerca de 14 kDa e uma migração anômala, Por eletroforese 2D, a proteína apresentou caráter ácido, com pl entre 4 e 5 e massa molecular de aproximadamente 42 kDa, revelando \"spots\" muito semelhantes podendo ser isoformas com características de uma proteína glicosiiada. Após digestão dos spots com tripsina, os fragmentos foram confrontados com o banco de dados do \"swissprot\", mostrando alto grau de homologia \"até 43% de cobertura\" com a troca ri na, um ativador de protrombina do veneno de Tropidechis carinatus, esses dados foram confirmados com a análise de aminoácidos. De posse desses resultados, optou-se por testar a capacidade da fração purificada de ativar fator X e II, usando substratos sintéticos. Os resultados apontaram para uma ativação direta do fator X, uma vez que não houve ativação do fator II, atividade que também não foi detectada no veneno total. A mesma se mostrou um potente ativador da agregação de forma direta, uma vez que os ensaios de agregação plaquetária foram realizados com plaquetas lavadas, logo na ausência de fatores séricos. Quando os ensaios de agregação foram realizados na presença de alguns inibidores observou-se que nem a atividade metalo proteinase, nem a serino proteinase, tampouco um domínio lectina estavam envolvidos no processo, uma vez que EDTA, benzamidina e D-galactose não inibiram a atividade da proteína. No presente trabalho isolamos a Delta toxina do veneno de C. d. terrificus. A mesma se comportou como previsto por Vital Brazil em 1980, eluindo na posição por ele aventada, sendo uma proteína ativadora de Fator X que ativa agregação plaquetária mesmo em concentrações muito baixas e de massa molecular de 40 kDa levando nos a crer se tratar de um homotrímero cujos componentes são unidos por ligações fracas. / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:38:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:00:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 02759.pdf: 4084534 bytes, checksum: 9f566ae8144088d7793859fc3ba3a449 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:27:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Os acidentes causados por serpentes peçonhentas são considerados um problema de saúde pública no Brasil, e é muito importante que sejam feitos mais estudos para um melhor conhecimento desse agravo. O objetivo deste trabalho é descrever as características clínicas e epidemiológicas que foram observados no Hospital de Doenças Tropicais de Araguaína, Estado do Tocantins, Brasil, que é uma unidade de saúde que cuida de pacientes que sofrem de doenças tropicais, no período de 2007 a 2009. Foram estudados 556 indivíduos e as características mais comuns observadas foram: sexo masculino, idade entre 19-40 anos, picada em membros inferiores e os ferimentos causados por serpentes do gênero Bothrops. Os sinais e sintomas mais freqüentes foram dor, edema e hemorragia. A manifestação sistêmica mais observada foi alteração da coagulação sanguínea. As complicações mais freqüentes foram abscesso, insuficiência renal aguda, necrose e infecção bacteriana. Os principais microorganismos identificados foram Morganela morganii (17,1%), Pseudomonas aeruginosa (14,6%) e Staphylococcus epidermidis (4,9%). Esta flora bacteriana foi semelhante às descritas no veneno e na boca das serpentes por outros pesquisadores. Com base nos resultados dos testes de suscetibilidade sugere-se a continuidade no uso de ciprofloxacin para o tratamento desses abscessos que não respondem à simples drenagem. O conjunto dos resultados obtidos representa um completo levantamento da atual situação dos acidentes envolvendo serpentes no estado do Tocantins e arredores e certamente contribuirá para o aprimoramento das ações de combate aos problemas de Saúde Pública da região Norte. / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A variabilidade na composição e nas atividades biológicas dos venenos de serpentes vem sendo documentada por diversos autores e pode ser observada em diversos níveis. As diferenças na composição dos venenos apresentam relevância na terapêutica dos envenenamentos ofídicos, tornando o estudo da variação dos venenos de extrema importância para a confecção de antivenenos mais específicos e de maior eficácia nos tratamentos de envenenamentos ofídicos em humanos. Os estudos das variações do veneno de serpentes em populações isoladas são raros, sendo no Brasil os casos mais conhecidos os da Bothrops insularis e Bothrops alcatraz. Diversos estudos sugerem que as oscilações do nível marinho, ocorridas há 11.000 anos, teriam isolado populações de serpentes nas ilhas recentemente formadas, resultando em duas diferentes rotas evolutivas que deram origem a estas espécies. Tendo em vista que a formação da Ilha de São Sebastião-SP ocorreu no mesmo período, isolando populações de animais ali existentes, nos propusemos a avaliar a variação nas atividades do veneno de 80 exemplares de serpentes Bothrops jararaca provenientes da ilha e da sua área de distribuição continental, comparando-as com o Veneno Referência Nacional, para as atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica indireta, hemorrágica e amidolítica, assim como de seus perfis eletroforéticos (SDS-PAGE) e seu reconhecimento pelo soro antibotrópico comercial através da técnica de Western Blot. A análise eletroforética (SDS-PAGE 12,5%) através de densitometria óptica evidenciou, em sua maioria bandas protéicas de baixo peso molecular e a presença de duas áreas majoritárias com grande variação no número, disposição e intensidade das bandas nas faixas de pesos moleculares de 45 kDa e 25 kDa. A variação da disposição das bandas apresentadas nos géis correlacionou-se com a variação nas atividades. Amostras que apresentaram baixa atividade fosfolipásica foram exatamente aquelas que apresentaram poucas e tênues bandas com aproximadamente 14 kDa. A análise das atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica e esterásica apresentou um padrão de similaridade que nos permitiu estabelecer duas grandes subpopulações de venenos; uma ao norte da distribuição geográfica amostrada, apresentando altas atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica e amidolítica e outra ao sul apresentando menores valores para tais variedades. Não foi possível estabelecer uma relação direta entre o padrão de distribuição geográfica com a variação nas atividades hemorrágicas dos venenos amostrados. A técnica de Western Blot permitiu concluir que o soro antibotrópico comercial não apresenta um bom reconhecimento para proteínas de baixo peso molecular. A análise das atividades dos venenos dos exemplares insulares apresentou similaridade com as atividades das amostras de veneno de serpentes coletadas próximas à ilha, sugerindo que o intercâmbio gênico não tenha sido de todo interrompido, provavelmente devido à sua proximidade para com o continente. / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP