Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_maikel_alan_goulart.pdf: 244034 bytes, checksum: 458e594d86ecd076dc3f12b7d9e46913 (MD5) Previous issue date: 2009-04-02 / The aim of this study was to evaluate the effects of feed restriction and of recombinant bovine somatotropin (bST) on energetic, proteic, enzymatic and mineral metabolic parameters of prepartum dairy heifers. Forty four pregnant heifers were used for this study. The experimental period ranged from 35 days prepartum to partum and from 60 days to 160 postpartum. These heifers were divided in four groups with 11 animals each: Control+bST: fed to allow 100% of the dry matter intake (DMI) plus bST injections; Restriction+bST: fed to allow 80% of the DMI plus bST injection; Control: fed to allow 100% of the DMI plus placebo injections and Restriction: fed to allow 80% of the DMI plus placebo injections. The heifers receive three injections in the prepartum period 14 days apart. Measurements of body condition score, weight, productive and reproductive performance were conducted during pre and postpartum periods, while blood parameters were measured only in the prepartum period. Glucose concentrations were higher (P<0.05) in the Control+bST groups compared to Control and Restriction groups, while urea concentrations were higher in Restriction group compared to Control and Control+bST. Non-esterified fatty acids concentrations were higher (P<0.05) for Restriction group compared to Control and Control+bST groups. There was not observed difference (P > 0.05) in the concentrations of calcium (Ca), phosphorus (P), Ca:P ratio, ketone bodies and liver enzymes, aspartate aminotransferase (AST) and gamma glutamil transferase (GGT) between groups. Regarding performance evaluations, no difference was observed for calf weight at birth, retention of fetal membranes, body condition score and reproductive performance, but a tendency (P = 0.06) to higher production in the Control+bST group compared to restriction group was observed. These results shown that prepatum management, including feed restriction and bST injection, could be efficient to allow metabolic and physiologic adaptation to the postpartum period. / O objetivo deste estudo foi determinar os efeitos da restrição alimentar e da somatotropina bovina recombinante (bST) sobre parâmetros do metabolismo energético, protéico, enzimáticos e mineral de novilhas leiteiras no pré-parto. Foram utilizadas no experimento 44 novilhas prenhes da raça holandês. O período experimental variou de 35 dias do pré-parto até o parto e dos 60 até 160 dias pós-parto. Estas novilhas foram divididas em 4 tratamentos com 11 animais cada: Controle+bST: alimentadas com 100% da ingestão de matéria seca (IMS) com aplicações de bST; Restrição+bST - alimentadas com 80% da IMS com aplicações de bST; Controle: alimentadas com 100% da IMS com aplicações de placebo; Restrição: alimentadas com 80% da IMS com aplicações de placebo. Foram realizadas no período pré-parto 3 aplicações de bST ou placebo a cada 14 dias. Realizaram-se avaliações de escore de condição corporal, peso ao nascer dos neonatos e desempenho produtivo e reprodutivo durante o pré e pós-parto e determinações dos parâmetros metabólicos energético, protéico, mineral e enzimático, somente no período pré-parto das novilhas. Os níveis de glucose foram maiores (P<0,05) para o grupo Controle+bST, comparado aos Grupos Controle e Restrição. Quanto aos níveis de ácidos graxos não esterificados, estes foram maiores (P<0,05) para o grupo Restrição+bST em comparação aos grupos Controle e Controle+bST. Em relação aos níveis de uréia, estes foram superiores (p<0,05) para o grupo Restrição comparado ao Controle e Controle+bST. Não foram observadas diferenças (P>0,05) entre os grupos experimentais quanto aos metabólitos, cálcio (Ca), fósforo (P), a relação Ca:P e corpos cetônicos, além das enzimas hepáticas, aspartato aminotransferase (AST) e gama-glutamiltransferase (GGT). Em relação às avaliações zootécnicas não foram observadas diferenças (P>0,05) entre os grupos quanto as variáveis, peso ao nascer dos neonatos, retenção de placenta, escore de condição corporal e desempenho reprodutivo, sendo observado tendências (P=0,06) de maior produção leiteira para vacas do grupo Controle+bST em comparação a vacas do grupo Restrição. Estes resultados demonstraram que as estratégias adotadas no pré-parto, utilizando a restrição alimentar e a administração de bST em novilhas leiteiras, podem ser eficientes na adaptação metabólica e fisiológica para o período pós-parto destes animas.

La ghréline est un peptide de 28 acides aminés, produit principalement par l’estomac et caractérisé par la présence d’un groupement octanoyl sur la sérine en position 3 (Kojima et al. 1999). La ghréline stimule la libération de l’hormone de croissance (GH) et régule la prise alimentaire et le métabolisme énergétique (Gualillo et al. 2003). Ces activités biologiques sont principalement médiées par le « growth hormone secretagogue receptor » (GHS-R). Deux sous-types de GHS-R, produits par épissage alternatif d’un même gène, ont été clonés :le GHS-R 1a, dont l’activation entraîne une libération de calcium via la formation d’inositol 1,4,5-trisphosphate (IP3), et le GHS-R 1b, qui ne semble pas lié à une activité biologique (Howard et al. 1996). <p>La première partie de mon travail de thèse consistait en l’étude de la dégradation de la ghréline. La ghréline circule dans le sang principalement sous forme de des-acyl ghréline, une forme de ghréline dépourvue du groupement octanoyl qui ne se lie pas au GHS-R 1a. Peu d’études ont été réalisées sur le catabolisme de la ghréline. Les enzymes impliquées dans la dégradation de la ghréline étant des régulateurs importants de son activité biologique, le but de cette étude était d’identifier les sites de clivage et les enzymes impliquées dans la dégradation de la ghréline par du sérum, des sous-fractions plasmatiques et des homogénats de tissus. Nous avons montré qu’au contact de sérum humain et de rat, la ghréline est désoctanoylée, sans protéolyse. Dans le sérum humain, nous avons montré que la butyrylcholinestérase et la « platelet-activating factor acetylhydrolase » (PAF-AH), une phospholipase associée aux lipoprotéines de basse densité (LDL), sont impliquées dans ce phénomène (articles n°1 et n°2). En parallèle, nous avons montré que la ghréline peut être transportée dans la circulation sanguine par les lipoprotéines riches en triglycérides (TRL), les LDL, et les lipoprotéines de haute et de très haute densité (HDL et VHDL) (article n°2). Dans le sérum de rat, la désoctanoylation de la ghréline implique une carboxylestérase (article n°1). Au contact d’homogénats de tissus, la ghréline est dégradée à la fois par désoctanoylation et protéolyse N-terminale, suggérant la participation d’estérases et d’aminopeptidases. Nous avons identifié cinq sites de clivage dans la ghréline :entre les résidus Ser2-(acyl)Ser3 (dans l’estomac et le foie), (acyl ?)Ser3-Phe4 (dans l’estomac, le foie et le rein), Phe4-Leu5 (dans l’estomac et le rein), Leu5-Ser6 et Pro7-Glu8 (dans le rein) (article n°1). <p>La deuxième partie de mon travail de thèse consistait à étudier l’expression et la production de ghréline par différentes lignées leucémiques (HEL, HL-60, THP-1, SupT1), par des leucocytes poly- et mononucléés et par des plaquettes sanguines, et à étudier l’effet de la ghréline sur la prolifération cellulaire. Pour cela, nous avons mis au point des dosages radioimmunologiques (RIA) permettant de quantifier et de distinguer les formes octanoylées et non octanoylées de la ghréline, et nous avons caractérisé en détail les anticorps SB801 et SB969 obtenus. Par HPLC en phase inverse suivie des RIAs, nous avons mis en évidence la présence de ghrélines octanoylée et non octanoylée dans chaque population de cellules. Plus de 80 % de la ghréline produite est octanoylée dans les cellules HEL, les leucocytes et les plaquettes. Nous avons montré que la ghréline endogène stimule la prolifération des cellules HEL de façon autocrine impliquant un récepteur encore non identifié, distinct du GHS-R 1a (article n°3). La ghréline et la des-acyl ghréline inhibent la prolifération des leucocytes mononucléés mais sont dépourvues d’effet sur les cellules HL-60, THP-1 et SupT1. Malgré la présence du GHS-R 1a dans les leucocytes mononucléés, cet effet pourrait être médié par un récepteur différent puisque la des-acyl ghréline exerce le même effet que la ghréline sur la prolifération (article n°4). <p><p><p> / Doctorat en sciences pharmaceutiques / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ronaldo sena e silva.pdf: 758805 bytes, checksum: 50ddd870dfedb208e155053c6ec67166 (MD5) Previous issue date: 2015-09-24 / The aim of this study was to verify the use of growth hormone (GH), with or without resisted exercise, the estrous cycle, the dosage of the estradiol and progesterone and Wistar rats endometrium thickness. The rats were divided into four groups (n = 10): CT (Control); Ex (resisted exercise - water jumps with 50% of body weight); GH (0,2UI / kg administered GH); and ExGH (GH and Ex groups combined treatment). The estrous cycle phase of rats were determined by vaginal cytology, daily for 29 days. The rats plasma was used for hormone dosage and the endometrium thicknesses were evaluated by histology. We used the Shapiro-Wilk normality presupposition. For samples that was parametric, ANOVA was used with Tukey, for no parametric samples, Kruskal-Wallis with Student-Newman-Keuls test was used (p<0.05). There are a greater reproductive cycles number in CT than in other groups during the 29 days period (p>0.05), no difference were found between the hormones dosage groups neither endometrial thickness. Therefore, it is concluded that GH and resisted exercises both combined affect females reproductive cycle, they reduced the number of cycles of rats but they do not change the estradiol and progesterone concentrations, neither endometrial thickness. / O objetivo deste estudo foi verificar o uso do hormônio do crescimento (GH), associado ou não ao exercício resistido, no ciclo estral, na dosagem do estradiol e progesterona e na espessura do endométrio de ratas Wistar. As ratas foram divididas em 4 grupos (n=10): CT (controle); Ex (exercício resistido - saltos em água com 50% do peso corporal); GH (0,2UI/Kg de GH administrado); e ExGH (tratamento combinado dos grupos GH e Ex). A fase do ciclo estral foi determinada por citologias vaginais nas ratas, diariamente, durante 29 dias. Foi realizado dosagem hormonal nas ratas e as espessuras dos endométrios foram avaliadas por histologia. Utilizou-se o pressuposto de normalidade de Shapiro-Wilk. Para as amostras paramétricas, utilizou-se ANOVA e Tukey e para não paramétricas Kruskal-Wallis e Student-Newman-Keuls (p<0,05). Houve maior número de ciclos reprodutivos no CT que nos demais grupos no período de 29 dias (p<0,05), nenhuma diferença foi encontrada entre os grupos na dosagem hormonal ou na espessura de endométrio. Portanto, conclui-se que o GH, o exercício resistido e os dois combinados interferem na ciclicidade reprodutiva das fêmeas, reduzindo o número de ciclos das ratas, sem alterar a concentração de estradiol e progesterona ou a espessura do endométrio.

Dans la région CA1 de l’hippocampe, une population d’interneurones exprimant la somatostatine (SOM-INs) est reconnue pour une potentialisation à long terme (PLT) dépendante des récepteurs métabotropes du glutamate de type 1a (mGluR1a) à leurs synapses excitatrices provenant des cellules pyramidales (CP). Il a récemment été démontré que cette PLT est induite par l’apprentissage contextuel lié à la peur, illustrant l’importance de cette PLT des SOM-INs dans l’apprentissage et la mémoire. Cependant, l’implication du neuropeptide somatostatine (SST) dans cette PLT demeure inconnue. Dans la présente étude, le rôle de la SST dans la PLT dépendante des mGluR1a a été étudié, tout comme, l’effet de la somatostatine-14 (SST-14) exogène aux synapses excitatrices des SOM-INs. Pour ce faire, des souris transgéniques exprimant la « enhanced yellow fluorescent protein » (eYFP) sous le contrôle du promoteur de la SST ont été utilisées. Des enregistrements électrophysiologiques jumelés à une approche pharmacologique ont été réalisés sur ces souris. Les résultats suggèrent que la SST-14 exogène engendre une PLT persistante grâce aux récepteurs à la somatostatine 1-5 (SST1-5), aux synapses excitatrices des SOM-INs, mais n’affecte pas les synapses des CP ou bien des interneurones exprimant la parvalbumine (PV-INs). Cette potentialisation induite par SST-14 était indépendante des récepteurs à l’acide N-méthyl-D-aspartique (NMDAR) et mGluR1a, dépendante de l’activité synaptique concomitante et inhibée par le blocage des récepteurs GABAA. De plus, la PLT dépendante des récepteurs mGluR1a a été affectée par l’inhibition des SST1-5 ou bien par un traitement avec de la cystéamine suggérant un rôle pour de la SST endogène dans cette PLT. Nos résultats suggèrent que la SST endogène pourrait contribuer à la PLT hébbienne aux synapses excitatrices des SOM-INs en contrôlant l’inhibition GABAA. La SST aurait alors un rôle dans la modulation de la plasticité à long terme des SOM-INs qui pourrait être important dans la mémoire dépendante de l’hippocampe. / The CA1 region of the hippocampus includes a population of GABAergic interneurons expressing somatostatin (SOM-INs). This type of interneurons displays a long-term potentiation (LTP) dependant on type 1a metabotropic glutamate receptors (mGluR1a) at their excitatory synapses from pyramidal cells (PC). It was recently demonstrated that mGluR1a dependent LTP can be induce by contextual fear learning showing an important role of this LTP in learning and memory. However, the implication of the peptide somatostatin (SST) in this LTP remains unknown. In the present study, the role of SST in mGluR1 dependent LTP and the effect of exogenous somatostatin-14 (SST-14) onto excitatory synapses of SOM-INs were investigated. To do this, transgenic mice expressing enhanced yellow fluorescent protein (eYFP) under the control of the promoter of SST were used. Patch clamp recordings and pharmacological approaches were used with these mice. Results suggested that application of exogenous SST-14 induces a LTP through type 1-5 somatostatin receptors (SST1-5) of excitatory synapses of SOM-INs but does not affect synapses of PC or parvalbumin-expressing interneurons (PV-INs). This LTP induced by SST-14 was independent of N-methyl-D-aspartate receptor (NMDAR) and mGluR1a, activity dependent, and prevented by blocking GABAA receptors. Furthermore, mGluR1a dependent LTP was prevented by inhibition of SST1-5 and by depletion of SST by cysteamine treatment, suggesting a role of endogenous SST in LTP. Our results indicate that endogenous SST may contribute to Hebbian LTP at excitatory synapses by controlling GABAA inhibition. SST would then have a role in regulating SOM-INs LTP that may be important for hippocampus dependent memory processes.