Determination of erythrocyte count in cerebrospinal fluid (CSF-EPC) is used to exclude various intracranial hemorrhage, especially subarachnoid hemorrhage (SAH). SAH means a bleeding between the pia mater and arachnoidea which occurs due to rupture of an aneurysm in the subarachnoid space. Manual counting of erythrocytes in the cerebrospinal fluid with Bürkers chamber and microscopy has been the gold standard for the past decades, but the manual method is time consuming and requires great experience. The purpose of this study was to evaluate if manual analysis of  CSF-EPC with counting chamber, and light microscopy can be replaced by automated analysis of CSF-EPC with Hematology Analyzer XN-1000 (Sysmex). Fortyeight cerebrospinal fluid samples with various concentrations of erythrocytes ware prepared by diluting known concentration of erythrocytes in cell-free CSF. Prepared CSF-samples with added erythrocytes were analyzed first on the XN-1000. Thereafter, manual counting of erythrocytes was performed using Bürkers counting chamber. A linear regression was established to describe the correlation between the automated analysis of the CSF-EPC and manual analysis of the CSF-EPC. Imprecision in the analysis of the CSF-EPC on the XN-1000 (Sysmex) was assessed by within-run imprecision. A very good correlation (r = 0.999) was found between the XN-1000 and manual counting. For results in the lower range, 100 - 5000 (106/L), correlation was also good (r = 0.997). The coefficient of variation was 19,8 % at CSF-EPC of 370 x 106/L and 3.1 % at CSF-EPC of 25 950 x 106/L. The sensitivity for analysis of CSF-EPC on XN-1000 was 370 x 106/L. The conclusion is that the analysis of Csv-EPC on XN-1000 can be used for clinical diagnostics of CSF- samples. However, it should be noted that XN-1000 has poor sensitivity for low CSF-EPC values < 370 x 106/L. To ensure high diagnostic quality even in CSF-samples with low erythrocyte counts are recommended a reference limit of < 500 x 106/L as a practical cut off for supplemental microscopic counting in routine healthcare laboratories. / SAMMANFATTNING Bestämning av antalet erytrocyter i cerebrospinalvätska (Csv-EPK) används för att utesluta olika intrakraniella blödningar, särskilt subaraknoidalblödning (SAB). SAB betyder en blödning mellan pia mater och araknoidea som uppstår på grund av ruptur av ett aneurysm i subaraknoidalrummet. Manuell räkning av antalet erytrocyter i cerebrospinalvätska med Bürkers kammare och mikroskopi har varit den gyllene standarden under de senaste decennierna, men den manuella metoden är tidskrävande och kräver stor erfarenhet. Syftet med detta examensarbete var att utvärdera om manuell analys av Csv-EPK med räknekammare och ljusmikroskopi kan ersättas med automatisk analys av Csv-EPK med hematologianalysatorn XN-1000 (Sysmex). Fyrtioåtta cerebrospinalvätskeprover med varierande koncentrationer av antalet erytrocyter framställdes genom att späda kända koncentrationer av erytrocyter i cellfri Csv. Framställda Csv-prover med tillsatta erytrocyter analyserades först på XN-1000. Efter detta utfördes manuell räkning av erytrocyter i Bürkers kammare. En linjär regression upprättades för att beskriva korrelation mellan automatiserad analys av Csv-EPK och manuell analys av Csv-EPK. Imprecisionen avseende analys av Csv-EPK på XN-1000 (Sysmex) bedömdes genom inom-serie-imprecision. En mycket god korrelation (r = 0,999) fanns mellan XN-1000 och manuell räkning. För analysresultat inom det lägre område 100 - 5000 (106/L) var korrelationen också god (r = 0,997). Variationskoefficienten var 19,8 % vid Csv-EPK på 370 x 106/L respektive 3,1 % vid Csv-EPK på 25950 x 106/L. Känsligheten för analys av Csv-EPK på XN-1000 var 370 x 106/L. Slutsatsen är att analys av Csv-EPK på XN-1000 kan användas för klinisk diagnostik av Csv-prover. Däremot bör det noteras att XN-1000 har sämre känslighet för låga Csv-EPK värden < 370 x 106/L. För att kunna säkerställa hög diagnostisk kvalitet även på Csv-prover med låga erytrocytantal rekommenderas en referensgräns på < 500 x 106/L som praktisk cut off för kompletterande mikroskopisk räkning vid rutinsjukvårdslaboratorier.

En subaraknoidalblödning (SAB) orsakas av ruptuerade aneurysmer mellan den mjuka hjärnhinnan och spindelvävshinnan (arachnoidea). Symptomen för SAB är allvarlig spontan huvudvärk, stelhet i nacken, kräkningar, förvirring och svimning. Vid erhållna symptom görs en datortomografi (CT) av hjärnan för påvisning av blod i subaraknoidalrummet. I 98 % av fallen påvisar CT blod om undersökning görs inom 12 timmar från uppvisat symtom. Sannolikheten att påvisa blod med CT minskar dock med tiden. Efter en vecka kan blod påvisas i drygt 50 % av fallen. Vid symptom för en SAB men där CT inte påvisar blod görs en lumbalpunktion för analys av cerebrospinalvätska (CSV). Provtagning bör ske minst 12 timmar efter uppvisat symptom för bilirubin ska ha hunnit bildats från oxihemoglobin via enzymatiska reaktioner. Spektrofotometri används vid 415 nm för detektion av oxihemoglobin och vid 476 nm för detektion av bilirubin. Denna studie kommer undersöka huruvida det finns någon skillnad i uppmätt absorbans vid 415 nm respektive 476 nm mellan glas- och plastkyvetter samt undersöka hur ett dygns extra förvaring av CSV-prover påverkar absorbansen vid 476 nm. Resultatet för 20 CSV-prover visade på att det inte fanns någon statistiskt signifikant skillnad mellan glas- och plastkyvetter (p=0,825 för 476 nm, p=0,632 för 415 nm) samt att absorbansen för 9 CSV-prover signifikant förändrades vid 476 nm efter ett dygns extra förvaring (p=0,01). / A subarachnoid haemorrhage (SAH) is caused by ruptured aneurysms between the soft meninges and arachnoid (arachnoid). Symptoms of an SAH is severe spontaneous headaches, stiff neck, vomiting, confusion and fainting. A computed tomography (CT) of the brain is used, on patients sustaining symptoms, to detect blood in the subarachnoid space. CT detects blood in 98% of the cases if examination is made within 12 hours from the shown symptoms. However, the probability of detecting blood with CT decreases with time. After a week, only 50 % of the CT-scans identifies blood. If patients suffers from typical symptoms but no detection of blood using CT-scan, a lumbar puncture is performed to analyse the cerebrospinal fluid (CSF). Sampling should be made at least 12 hours after presented symptoms because of the time-dependent creation of bilirubin from oxyhemoglobin via enzymatic reactions. Spectrophotometry is used in the wavelengths 415 nm for the detection of oxyhemoglobin and at 476 nm for detection of bilirubin. This study will examine whether there is any difference in the absorbance measured at 415 nm and 476 nm between glass-and plastic cuvettes as well as examine how 24 hours of extra storage of samples affect the absorbance at 476 nm. The result for 20 CSF-samples showed that there was no statistically significant difference between the glass and plastic cuvettes (p = 0,825 of 476 nm, p = 0,632 for 415 nm), and absorbance for 9 CSF-samples significantly changed at 476 nm after 24 hours of extra storage (p = 0.01).