Introdução: A Hemodiluição normovolêmica Aguda (HNA) envolve a retirada do sangue total e concomitante infusão de fluidos de reposição volêmica para manutenção da normovolemia. É uma estratégia que restringe a transfusão de sangue e evita a transmissão de doenças, imunossupressão e outras complicações associadas à transfusão sanguínea. Objetivos: O objetivo deste estudo foi determinar os efeitos de diversos fluidos na resposta inflamatória durante o procedimento de HNA. Métodos: Foram utilizados 28 suínos (n=28; 7/grupo) randomizados nos seguinte grupos: Controle, grupo anestesiado sem HNA; HNA + Amido, os animais foram submetidos a HNA sendo a reposição volêmica realizada com amido hidroxietílico 6% (130/0,4) na taxa de 1 ml de fluido para 1 ml de sangue retirado; HNA + NaCl, animais submetidos a HNA com reposição volêmica realizada com solução de cloerto de sódio 0,9% na proporção de 3:1; HNA + GEL, procedimento de HNA realizado com infusão da gelatina fluida modificada na taxa de 1:1. Os animais foram hemodiluídos durante 30 minutos para o hematócrito de 15%. Foram mensurados os parâmetros hemodinâmicos e foram coletados sangue para realização da hemogasometria e determinação dos níveis plasmáticos de IL-1b, TNF-a, IL-6 e IL-10, além do burst oxidativo de neutrófilos e monócitos circulantes. O lavado broncoalveolar foi coletado para mensuração dos níveis da IL-8 e do burst oxidativo de células pulmonares. O tecido pulmonar foi coletado para análise histológica e para imunoistoquímica para detecção da expressão de COX-2 e Eselectina. A análise estatística foi realizada por meio de provas paramétricas como a análise de variância com medidas repetidas (ANOVA), seguido do teste de Tukey- Kramer e de provas não paramétricas, o teste de Kruskal-Wallis. O grau de significância estabelecido foi de 5% (p < 0,05). Resultados: Os principais resultados deste estudo demonstraram que os animais hemodiluídos tanto com gelatina, como solução de cloreto de sódio 0,9% apresentaram resposta inflamatória mais pronunciada quando comparado aos outros grupos, traduzida no aumento de citocinas (TNF-, IL-6 e IL-10), na expressão de COX-2 e E-selectina no tecido pulmonar, além da observação de edema pulmonar, congestão e colapso alveolar. Apesar destes fatos, a resposta inflamatória estudada no sangue foi considerada de baixa magnitude. Conclusão: Durante a HNA, tanto a gelatina quanto a solução de cloreto de sódio 0,9% promove resposta inflamatória mais intensa quando comparada ao amido hidroxietílico 6% / Background: Acute normovolemic hemodilution (ANH) involves intentional withdrawal of the whole blood with concurrent infusion of fluids to maintain normovolemia. ANH avoids blood transfusion and deleterious effects related with transfusion. Objective: The aim of this study was to determine the effects of diverse fluids on the inflammatory response during ANH. Methods: Twenty-eight pigs (n=28; 7/group) were randomized as follows: (Control) control group without ANH; (ANH + HES) ANH with 6% hydroxyethyl starch at a ratio of 1:1; (ANH + NS) ANH with normal saline at a ratio of 3:1; (ANH + GEL) ANH with gelatin 1:1. Animals were hemodiluted to a hematocrit of 15% in 30 min. Hemodynamic parameters were recorded, and blood samples were collected to determine plasma levels of IL-1, IL-6, TNF-, IL-10, as well as gas analysis. IL-8 was measured in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF). Neutrophil and macrophage oxidative burst activity were determined in the peripheral blood and BALF. Histophatological and immunohistochemistry to COX-2 and E-selectin expression were performed with the lung tissue. Data were submitted to analysis of Variance for repeated measures followed by the Tukey-Kramer test. To immunohistochemistry and histophatological scores the Kruskal-Wallis test was used to assess the significance. The p < 0.05 was considered significant. Results: The principal findings of this investigation showed that animals hemodiluted with GEL and NS had a more pronounced inflammatory response when compared to those hemodiluted with HES. The animals in the GEL and NS groups showed an increase in cytokines (TNF-, IL-6, IL-10), a strong expression of COX-2 and Eselectin in the lung tissue and pulmonary edema, congestion and alveoli collapse. However, the magnitude of this response was quite small showing that ANH does not substantially activate the inflammatory system. Conclusion: During ANH, GEL and NS but not HES could elicit an inflammatory response besides the effective plasma volume therapy

Introdução: A Hemodiluição normovolêmica Aguda (HNA) envolve a retirada do sangue total e concomitante infusão de fluidos de reposição volêmica para manutenção da normovolemia. É uma estratégia que restringe a transfusão de sangue e evita a transmissão de doenças, imunossupressão e outras complicações associadas à transfusão sanguínea. Objetivos: O objetivo deste estudo foi determinar os efeitos de diversos fluidos na resposta inflamatória durante o procedimento de HNA. Métodos: Foram utilizados 28 suínos (n=28; 7/grupo) randomizados nos seguinte grupos: Controle, grupo anestesiado sem HNA; HNA + Amido, os animais foram submetidos a HNA sendo a reposição volêmica realizada com amido hidroxietílico 6% (130/0,4) na taxa de 1 ml de fluido para 1 ml de sangue retirado; HNA + NaCl, animais submetidos a HNA com reposição volêmica realizada com solução de cloerto de sódio 0,9% na proporção de 3:1; HNA + GEL, procedimento de HNA realizado com infusão da gelatina fluida modificada na taxa de 1:1. Os animais foram hemodiluídos durante 30 minutos para o hematócrito de 15%. Foram mensurados os parâmetros hemodinâmicos e foram coletados sangue para realização da hemogasometria e determinação dos níveis plasmáticos de IL-1b, TNF-a, IL-6 e IL-10, além do burst oxidativo de neutrófilos e monócitos circulantes. O lavado broncoalveolar foi coletado para mensuração dos níveis da IL-8 e do burst oxidativo de células pulmonares. O tecido pulmonar foi coletado para análise histológica e para imunoistoquímica para detecção da expressão de COX-2 e Eselectina. A análise estatística foi realizada por meio de provas paramétricas como a análise de variância com medidas repetidas (ANOVA), seguido do teste de Tukey- Kramer e de provas não paramétricas, o teste de Kruskal-Wallis. O grau de significância estabelecido foi de 5% (p < 0,05). Resultados: Os principais resultados deste estudo demonstraram que os animais hemodiluídos tanto com gelatina, como solução de cloreto de sódio 0,9% apresentaram resposta inflamatória mais pronunciada quando comparado aos outros grupos, traduzida no aumento de citocinas (TNF-, IL-6 e IL-10), na expressão de COX-2 e E-selectina no tecido pulmonar, além da observação de edema pulmonar, congestão e colapso alveolar. Apesar destes fatos, a resposta inflamatória estudada no sangue foi considerada de baixa magnitude. Conclusão: Durante a HNA, tanto a gelatina quanto a solução de cloreto de sódio 0,9% promove resposta inflamatória mais intensa quando comparada ao amido hidroxietílico 6% / Background: Acute normovolemic hemodilution (ANH) involves intentional withdrawal of the whole blood with concurrent infusion of fluids to maintain normovolemia. ANH avoids blood transfusion and deleterious effects related with transfusion. Objective: The aim of this study was to determine the effects of diverse fluids on the inflammatory response during ANH. Methods: Twenty-eight pigs (n=28; 7/group) were randomized as follows: (Control) control group without ANH; (ANH + HES) ANH with 6% hydroxyethyl starch at a ratio of 1:1; (ANH + NS) ANH with normal saline at a ratio of 3:1; (ANH + GEL) ANH with gelatin 1:1. Animals were hemodiluted to a hematocrit of 15% in 30 min. Hemodynamic parameters were recorded, and blood samples were collected to determine plasma levels of IL-1, IL-6, TNF-, IL-10, as well as gas analysis. IL-8 was measured in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF). Neutrophil and macrophage oxidative burst activity were determined in the peripheral blood and BALF. Histophatological and immunohistochemistry to COX-2 and E-selectin expression were performed with the lung tissue. Data were submitted to analysis of Variance for repeated measures followed by the Tukey-Kramer test. To immunohistochemistry and histophatological scores the Kruskal-Wallis test was used to assess the significance. The p < 0.05 was considered significant. Results: The principal findings of this investigation showed that animals hemodiluted with GEL and NS had a more pronounced inflammatory response when compared to those hemodiluted with HES. The animals in the GEL and NS groups showed an increase in cytokines (TNF-, IL-6, IL-10), a strong expression of COX-2 and Eselectin in the lung tissue and pulmonary edema, congestion and alveoli collapse. However, the magnitude of this response was quite small showing that ANH does not substantially activate the inflammatory system. Conclusion: During ANH, GEL and NS but not HES could elicit an inflammatory response besides the effective plasma volume therapy

La tuberculose est une maladie contagieuse causée par les bactéries appartenant au complexe Mycobacterium tuberculosis. On estime près de neuf millions de nouveaux cas et un million de décès chaque année dans le monde. De plus, approximativement un tiers de la population mondiale est infecté de manière latente, donc à risque de développer la maladie. Le seul vaccin préventif jusqu’à présent disponible est le Bacille de Calmette-Guérin (BCG). Cependant, son efficacité contre la forme pulmonaire de la maladie, contagieuse et plus fréquente chez l’adulte, est extrêmement variable. Le développement de nouveaux vaccins prophylactiques contre la tuberculose est basé sur une stratégie de remplacement ou d’amélioration de l’actuel vaccin BCG. De nombreux candidats vaccins sous-unitaires sont évalués dans un protocole de vaccination de rappel après le BCG. Ce dernier est en effet administré à plus de 80% des nouveau-nés et des nourrissons des populations à haut risque.<p>Le présent travail a eu pour but principal d’étudier une nouvelle approche de vaccination combinant le Bacille de Calmette-Guérin avec des vaccins sous-unitaires à ADN plasmidique dans différents modèles précliniques.<p>Plusieurs hypothèses tentent d’expliquer la faible efficacité du vaccin BCG, comme la faible induction de réponses immunitaires de type cellulaire T CD8+, le déclin de l’immunité protectrice induite au cours du temps, ou son répertoire antigénique limité. Les vaccins à ADN plasmidique induisant de telles réponses, le travail proposé a consisté au développement d’un nouveau protocole de vaccination basé sur la coadministration par la voie intradermique du vaccin BCG formulé avec un vaccin à ADN plasmidique codant pour un antigène mycobactérien. Nous avons observé dans plusieurs modèles murins (adulte et néonatal) une augmentation significative des réponses cellulaires de type CD4+ Th1 et CD8+, ainsi que de la réponse humorale spécifique. L’immunogénicité de cette approche a également été analysée dans un modèle animal de grande taille, à savoir le modèle porcin. Les résultats obtenus indiquent que les vaccins à ADN plasmidique sont capables d’augmenter les réponses spécifiques à l’antigène codé par le plasmide mais également celles spécifiques à d’autres antigènes exprimés par le vaccin BCG. Enfin, dans la deuxième partie du travail, nous avons développé des vaccins plasmidiques codant pour des combinaisons d’antigènes phase-spécifiques de M. tuberculosis et nous avons analysé leur immunogénicité en modèle murin.<p>En conclusion, nous avons montré que la stratégie de coadministration par la voie intradermique du vaccin BCG avec un vaccin à ADN plasmidique encodant des antigènes mycobactériens s’avère être un protocole de vaccination réaliste et efficace pour améliorer l’immunité induite par le vaccin BCG. Elle offre par ailleurs des perspectives pour être appliquée avec des plasmides codant pour des antigènes caractéristiques de la tuberculose latente, peu reconnus après vaccination BCG, pour protéger à la fois contre la tuberculose active d’une primo-infection et contre la réactivation d’une infection latente. / Doctorat en Sciences / info:eu-repo/semantics/nonPublished