Orientador: Ricardo de Lima Zollner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T13:01:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Boechat_LuisHenriqueBarbosa_M.pdf: 3964442 bytes, checksum: 194b6af67da0b8cd39c6049b4cfb180d (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A tiroglobulina é a principal proteína sintetizada pelas células foliculares tiroidianas, representando um dos principais auto-antígenos envolvidos tanto nas doenças auto-imunes da tiróide quanto na indução de tiroidite em modelos experimentais. Vários trabalhos têm sido publicados relatando aspectos referentes à imunogenicidade da tiroglobulina humana e de outros animais, incluindo seu mapeamento epitópico e a descrição de oligopeptídeos imunogênicos sintéticos ou obtidos por tratamento enzimático. A síntese de hormônios tiroidianos envolve a recaptação da tiroglobulina presente no lúmen folicular e seu processamento por endoproteases lisosomais. Entre estas enzimas destacam-se as catepsinas B, D, H e L, cuja ação conjunta cliva o monômero de tiroglobulina em locais pré-determinados. Trabalhos recentes relatam a existência de sítios preferenciais de clivagem proteica por tripsina, demonstrando que estas áreas são correspondentes àquelas em que atuam as proteases endógenas tiroidianas. Portanto, a utilização do modelo de tripsinização limitada da tiroglobulina leva à obtençào de peptídeos análogos aos. resultantes do processamento intra-lisosomal tiroidiano. Neste trabalho realizamos a purificação de tiroglobulina porcina e humana a partir de extratos tiroidianos brutos através de cromatografia por exclusão de pesos moleculares, caracterizando eletroforética e imunologicamente tais proteínas. A tiroglobulina humana assim purificada foi submetida a tripsinização limitada com obtenção de peptídeos com pesos moleculares entre 29 kDa e >205 kDa. O reconhecimento destes peptídeos por auto-anticorpos antitiroglobulina foi estudadoatravés da técnica de immunobloting. Desta forma foi possível verificar que a freqüência de reconhecimento destes fragmentos proteicos por auto-anticorpos foi semelhante nos pacientes com doença de Basedow-Graves e tiroidite de Hashimoto, sendo estes reunidos em um único grupo referente à doença tiroidiana auto-imune. Ao compararmos os grupos com tiroidite subaguda (TSA) e doença tiroidiana auto-imune, verificamos que peptídeos de 80 kDa, 185 kDa e >205 kDa reagiram mais freqüentemente com soros provenientes de pacientes com TSA. A comparação de nossos achados com relatos da literatura sugerem que o peptídeo de 80 kDa corresponda à extremidade N-terminal da molécula de tiroglobulina humana, área pouco envolvida na gênese de auto-anticorpos em doença tiroidÜma auto-imune. Estes dados demonstram que, embora os auto-anticorpos antitiroglobulina reajam com todos os peptídeos obtidos por tripsinização limitada da Tg humana, os perfis de reconhecimento diferem entre as situações auto-imunes e não auto-imunes. O estudo destes peptídeos, sobretudo o de 80 kDa, poderá contribuir para a elucidação das relações entre endoproteases, peptídeos de tiroglobulina obtidos in vivo e resposta humoral à tiroglobulina / Abstract: Thyroglobulin is synthesized by thyroid epithelial cells and is one of the autoantigens involved in thyroid autoimmune diseases and the main one involved in thyroiditis in animal models. Many studies related to the immunogenicity of human thyroglobulin have been published, including those describing its epitopic mapping and the oligopeptides obtained by enzymatic proteolysis. Thyroid hormone synthesis involves thyroglobulin capture from follicular lumen and its processing by lysosomal proteases. Among these enzymes, cathepsins B, D, H and L have been described. The concerned action of these endoproteases leads to proteolysis in pre-determined sites. Recent papers describe the existence of preferential sites of trypsin action, demonstrating that these areas are the same involved in thyroglobulin lysis by endogenous proteases. Furthermore, the model of limited trypsinization could be used to obtain peptides analogous to those produced in vivo by thyroid proteases. In this study we have purified poreine and human thyroglobulin from thyroid erude extraets using moleeular weight exclusion ehromatography. Human thyroglobulin obtained by this method was used in limited proteolysis with trypsin, resulting in peptides ranging from 29 kDa to 2 205 kDa. The reaetion of these peptides with antithyroglobulin antibodies was analyzed by immunobloting / Mestrado / Mestre em Clinica Medica

Residente de 3º año de Medicina Nuclear, Hospital Clínico de la Universidad de Chile, Servicio de Medicina Nuclear, Departamento de Medicina / INTRODUCCIÓN: El cáncer diferenciado de tiroides (CDT) es la neoplasia maligna más frecuente del sistema endocrino. Su tratamiento incluye frecuentemente yodo radiactivo, el cual puede producir efectos secundarios indeseados. Actualmente existe controversia respecto a la indicación y actividad de radioyodo a administrar. OBJETIVO: Evaluar los efectos secundarios a corto y mediano plazo del tratamiento con 131I en pacientes con CDT y su relación con la actividad administrada; además, determinar la concordancia de las dosis indicadas localmente versus lo recomendado por la Guía ATA 2015. MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio prospectivo, que incluyó pacientes con CDT que ingresaron al Servicio de Medicina Nuclear del Hospital Clínico de la Universidad de Chile para tratamiento con radioyodoterapia posterior a tiroidectomía total. Se valoró la aparición de efectos secundarios a corto y mediano plazo a través de una encuesta, en 2 oportunidades: dentro de los 10 primeros días post radioyodo y a los 6 meses post terapia. Además, se catalogó a cada paciente según riesgo de recurrencia y se estableció la concordancia de la indicación de 131I con la Guía ATA 2015. RESULTADOS: Los síntomas secundarios más frecuentes a corto plazo fueron las náuseas (59 pacientes), dolor cervical (44 pacientes) y disgeusia (43 pacientes); mientras que a corto plazo fue la disgeusia (16 pacientes) xerostomía (9 pacientes) y sialoadenitis (7 pacientes). Existe una relación directamente proporcional entre la ocurrencia de efectos secundarios y la actividad administrada de yodo radiactivo. Hubo buena concordancia de riesgo de recurrencia vs indicación de 131I en los pacientes de riesgo intermedio y alto, a diferencia de los pacientes de bajo riesgo, en que se observó frecuentemente indicación de mayor actividad a la recomendada. CONCLUSIONES: Los efectos secundarios a la radioyodoterapia en los pacientes con CDT son frecuentes, habitualmente de corta duración y autolimitados. Existe cierta heterogeneidad en los criterios de indicación de 131I, especialmente en los casos de bajo riesgo.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-11-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / ABSTRACT:The measurement of serum thyroglobulin(sTg)has been considered the most sensitive tumor marker in the follow-up of patients with differentiated thyroid carcinoma (DTC) after total thyroidectomy and radioiodine therapy. However, sTg assays present some technical problems, specially, the interference by endogenous anti-thyroglobulin antibodies(TgAb), present in approximately 20 por cento of DTC patients' sera. Therefore, in order to enhance sensitivity and to hinder the interference by TgAb, several investigators have tried to quantify the mRNA Tg by Real-Time RT-PCR. However, the results have been variable and some of them did not report a correlation between mRNA Tg measurement and presence of metastases.The aim of this study was to evaluate TgmRNA expression, performed by a new sensitive and specific Real-Time PCR, in peripheral blood of 104 patients who previously undergone total thyroidectomy and radioiodine treatment. DTC patients were studied during L-T4 therapy.Eighty-two patients out of 104(78.8 por cento)were considered “free of disease”, and 22(21.2 por cento) presented metastases.The quantification of mRNA was significantly different between patients “free of disease”and those with metastases:TgmRNA(90.1 vs 951.3 ug/uL)(P<0,0001).In conclusion, the differences proposed in the TgmRNA quantification made it a reliable method, and allowed us to differentiate patients free of disease from patients with metastases and thus could be an appropriate molecular marker in the follow-up of patients with thyroid carcinoma, especially in patients with positive TgAb.. / FAPESP: 04/09934-7 / FAPESP: 05/55842-0 / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

No Brasil, a perspectiva de aumento do volume de exportações e a exigência dos diferentes mercados faz com que a adaptação da cadeia produtiva da carne seja necessária, assim como a mudança de conceitos e critérios de seleção dos animais, de forma a melhorar as características consideradas pelo consumidor como de primeira importância: aparência e a palatabilidade. Porém existem diversos fatores que podem influenciar na qualidade da carne: sexo, raça (genética), idade, nutrição e estresse durante a vida do animal. Esses fatores influenciam diretamente no produto final, pois têm relação com as mudanças que ocorrem durante o post mortem. Desta forma, este trabalho teve como objetivo geral avaliar a influencia do pH, da condição sexual e de polimorfismos genéticos em genes relacionados à qualidade da carne e a resposta ao estresse sobre a variação das características da carne em rebanho bovino comercial Simental Sul Africano x Nelore. Para isso o trabalho foi dividido em duas partes: (a) avaliar os parâmetros de qualidade da carne em dois diferentes tempos de maturação (48 horas e 15 dias), sendo estudadas as variações entre os sexos (fêmeas e machos castrados), e nos diferentes valores de pH (classe 1=pH &le; 5,79 e classe 2=pH &ge; 5,8). (b) Associar SNPs de diferentes genes ou marcadores (CAPN, UOGCAST, NR3C1_1, NR3C2_1, TG5) ligados a características de qualidade da carne, visando compreender melhor os efeitos genéticos desses marcadores sobre as características da carne. Para esta pesquisa foram avaliados 485 bovinos (182 fêmeas e 303 machos) recriados e terminados em confinamento. Os resultados mostraram haver relação do sexo como parâmetros de cor e maciez. As classes de pH mostraram relação significativa com a cor da carne. Verificou-se incidência de carnes DFD (pH&ge;5,8) da ordem de 5,3%. Dos polimorfismos estudados foram encontradas associações significativas apenas para CAPN, NR3C1_1 e TG. O CAPN relacionado à cor e, NR3C1_1 e TG com as perdas de água por cocção (PAC). Portanto, é possível inferir que tanto o sexo quanto as classes de pH tem influencia direta com os parâmetros de qualidade da carne. Os polimorfismos dos genes CAPN, NR3C1_1 e TG propiciaram mudanças nas características físico-químicas da carne. / In Brazil, the prospect of increased exports and the requirement of different markets makes necessary adaptation of the meat production chain, as the change of concepts and criteria in animal selection to improve the characteristics that the consumer consider as most important: appearance and palatability. However, there are some factors that could influence meat quality: sex, breed (genetics), age, nutrition and stress during the life of the animal. These factors directly influence the final product, since they are related to changes that occur during post mortem period. The aim was to evaluate the pH influence, sexual condition and genetic polymorphisms on genes related to meat quality and stress response on meat quality variation of South African Simmental x Nellore beef cattle. Therefore, this research were divided into two parts: (a) to evaluate the meat quality characteristics in two different aging times (2 and 15 days), being studied variations within the sexual condition (females and castrated males), as well as within the pH range (pH &le; 5.79 Class 1 and Class 2 &ge; pH 5.8). (b) Associate SNPs of different genes (CAPN, UOGCAST, NR3C1_1, NR3C2_1, TG5) with meat quality characteristics. For this research were evaluated 485 animals (182 heifers and 303 steers) recreated and finished in feedlot. The results shows relation of sex with color and tenderness and, from pH range with color. There was an incidence of DFD meat (pH&ge;5,8) of 5,3%. The CAPN polymorphism was associated with color meat and NR3C1_1 and TG with cooking loss. Therefore, it is possible to infer that both sex and pH value influence in the meat quality. The polymorphisms CAPN, NR3C1_1 and TG led to changes in the physicochemical characteristics of the meat.

No Brasil, a perspectiva de aumento do volume de exportações e a exigência dos diferentes mercados faz com que a adaptação da cadeia produtiva da carne seja necessária, assim como a mudança de conceitos e critérios de seleção dos animais, de forma a melhorar as características consideradas pelo consumidor como de primeira importância: aparência e a palatabilidade. Porém existem diversos fatores que podem influenciar na qualidade da carne: sexo, raça (genética), idade, nutrição e estresse durante a vida do animal. Esses fatores influenciam diretamente no produto final, pois têm relação com as mudanças que ocorrem durante o post mortem. Desta forma, este trabalho teve como objetivo geral avaliar a influencia do pH, da condição sexual e de polimorfismos genéticos em genes relacionados à qualidade da carne e a resposta ao estresse sobre a variação das características da carne em rebanho bovino comercial Simental Sul Africano x Nelore. Para isso o trabalho foi dividido em duas partes: (a) avaliar os parâmetros de qualidade da carne em dois diferentes tempos de maturação (48 horas e 15 dias), sendo estudadas as variações entre os sexos (fêmeas e machos castrados), e nos diferentes valores de pH (classe 1=pH &le; 5,79 e classe 2=pH &ge; 5,8). (b) Associar SNPs de diferentes genes ou marcadores (CAPN, UOGCAST, NR3C1_1, NR3C2_1, TG5) ligados a características de qualidade da carne, visando compreender melhor os efeitos genéticos desses marcadores sobre as características da carne. Para esta pesquisa foram avaliados 485 bovinos (182 fêmeas e 303 machos) recriados e terminados em confinamento. Os resultados mostraram haver relação do sexo como parâmetros de cor e maciez. As classes de pH mostraram relação significativa com a cor da carne. Verificou-se incidência de carnes DFD (pH&ge;5,8) da ordem de 5,3%. Dos polimorfismos estudados foram encontradas associações significativas apenas para CAPN, NR3C1_1 e TG. O CAPN relacionado à cor e, NR3C1_1 e TG com as perdas de água por cocção (PAC). Portanto, é possível inferir que tanto o sexo quanto as classes de pH tem influencia direta com os parâmetros de qualidade da carne. Os polimorfismos dos genes CAPN, NR3C1_1 e TG propiciaram mudanças nas características físico-químicas da carne. / In Brazil, the prospect of increased exports and the requirement of different markets makes necessary adaptation of the meat production chain, as the change of concepts and criteria in animal selection to improve the characteristics that the consumer consider as most important: appearance and palatability. However, there are some factors that could influence meat quality: sex, breed (genetics), age, nutrition and stress during the life of the animal. These factors directly influence the final product, since they are related to changes that occur during post mortem period. The aim was to evaluate the pH influence, sexual condition and genetic polymorphisms on genes related to meat quality and stress response on meat quality variation of South African Simmental x Nellore beef cattle. Therefore, this research were divided into two parts: (a) to evaluate the meat quality characteristics in two different aging times (2 and 15 days), being studied variations within the sexual condition (females and castrated males), as well as within the pH range (pH &le; 5.79 Class 1 and Class 2 &ge; pH 5.8). (b) Associate SNPs of different genes (CAPN, UOGCAST, NR3C1_1, NR3C2_1, TG5) with meat quality characteristics. For this research were evaluated 485 animals (182 heifers and 303 steers) recreated and finished in feedlot. The results shows relation of sex with color and tenderness and, from pH range with color. There was an incidence of DFD meat (pH&ge;5,8) of 5,3%. The CAPN polymorphism was associated with color meat and NR3C1_1 and TG with cooking loss. Therefore, it is possible to infer that both sex and pH value influence in the meat quality. The polymorphisms CAPN, NR3C1_1 and TG led to changes in the physicochemical characteristics of the meat.