Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. / Submitted by Fabrícia da Silva Costa Feitosa (fabriciascf@gmail.com) on 2010-01-13T22:33:36Z No. of bitstreams: 1 2007_TeresaCristinaFdeAssumpcao.pdf: 5027753 bytes, checksum: 74252b9c40fb1fc44905260342baea89 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-01-14T21:32:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_TeresaCristinaFdeAssumpcao.pdf: 5027753 bytes, checksum: 74252b9c40fb1fc44905260342baea89 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-14T21:32:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_TeresaCristinaFdeAssumpcao.pdf: 5027753 bytes, checksum: 74252b9c40fb1fc44905260342baea89 (MD5) Previous issue date: 2007-11-13 / O Triatoma infestans, um dos vetores mais importantes da Doença de Chagas na América Latina, alimenta-se do sangue de vertebrados em todos os seus estágios – ninfas e adultos. As glândulas salivares de insetos hematófagos produzem compostos farmacologicamente potentes que impedem a hemostasia do hospedeiro, incluindo moléculas anticoagulantes, antiplaquetárias e vasodilatadoras. A saliva de T. infestans medeia a hidrólise de NDBC6HPC, um substrato para PAF-AH (platelet-activating factor-acetilhidrolase), em pH neutro. A purificação dessa atividade foi obtida por cromatografia em FLPC utilizando colunas de troca catiônica e interação hidrofóbica. A atividade enzimática ótima foi descrita como independente de Ca+2 e associada a uma proteína de 17 kDa (PAF-AH de T. infestans; PATi) em SDS-PAGE sob condições redutoras. Experimentos de espectrometria de massa sugerem que PATi é membro da família de fosfolipases A2. Anticorpos específicos localizaram a enzima nas glândulas salivares D2. Esses dados sugerem que a hidrólise de PAF pelo inseto possa interferir nas respostas anti-hemostática e/ou nociceptiva do hospedeiro. Com o objetivo de compreender melhor a complexidade bioquímica e farmacológica deste inseto, uma biblioteca de cDNA de suas glândulas salivares foi seqüenciada. Proteínas salivares também foram submetidas à eletroforese bidimensional seguida de análise por espectrometria de massa. Neste trabalho, nós apresentamos a análise de um grupo de 1534 seqüências de cDNA das glândulas salivares, das quais 645 codificam para proteínas putativamente secretadas. A maioria das proteínas salivares descritas como lipocalinas – 55% da biblioteca de cDNA – coincidiram com seqüências peptídicas dos resultados proteômicos. Esperamos que a obtenção desses novos transcritos salivares possa auxiliar no esclarecimento da função de moléculas salivares nas interações entre o vetor e o hospedeiro e na descoberta de novos agentes farmacológicos. / Triatoma infestans is one of the most important vectors of Chagas Disease in Latin America, feeding on vertebrate blood in all life stages. Hematophagous insects’ salivary glands produce potent pharmacological compounds that counteract host hemostasis, including anti-clotting, anti-platelet, and vasodilatory molecules. The saliva of T. infestans mediates hydrolysis of NDBC6HPC, a substrate for Platelet-activating factor-acetylhydrolase (PAF-AH), at neutral pH. Purification of this activity was achieved by a two-step FPLC procedure using cation exchange and hydrophobic columns. Optimal enzyme activity was found to be Ca+2-independent and associated with a single 17-kDa protein (PAF-AH of T. infestans; PATi) on SDS-PAGE under reducing conditions. Results from mass spectrometry experiments suggest that PATi is a member of the phospholipase A2 family. Specific antibodies localized the enzyme in the luminal content of the salivary glands D2. These findings suggest that hydrolysis of PAF may facilitate the insect to avoid host hemostatic and/or nociceptive responses. To obtain a further insight into the salivary biochemical and pharmacological complexity of this insect, a cDNA library was randomly sequenced. Also, salivary proteins were submitted to 2D gel electrophoresis followed by MS analysis. We present the analysis of a set of 1,534 salivary gland cDNA sequences, 645 of which coding for proteins of a putative secretory nature. Most salivary proteins described as lipocalins – 55% of the cDNA library – matched peptides sequences obtained from proteomic results. We expect this work will contribute with new salivary transcripts that could help the understanding of the role of salivary molecules in host/vector interactions and the discovery of novel pharmacologic agents.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by mariana castro (nanacastro0107@hotmail.com) on 2009-12-01T14:19:16Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao VLADIMIR COSTA SILVA.pdf: 1643501 bytes, checksum: 6e9988053bc43a87fda35ed86d6e7320 (MD5) / Rejected by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com), reason: Falta abstract. on 2010-01-09T00:26:45Z (GMT) / Submitted by mariana castro (nanacastro0107@hotmail.com) on 2010-01-12T15:27:17Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao VLADIMIR COSTA SILVA.pdf: 1643501 bytes, checksum: 6e9988053bc43a87fda35ed86d6e7320 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-01-12T22:13:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao VLADIMIR COSTA SILVA.pdf: 1643501 bytes, checksum: 6e9988053bc43a87fda35ed86d6e7320 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-12T22:13:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao VLADIMIR COSTA SILVA.pdf: 1643501 bytes, checksum: 6e9988053bc43a87fda35ed86d6e7320 (MD5) Previous issue date: 2006-08-04 / Introdução: O estudo do conteúdo alimentar de vetores hematófagos é de reconhecida importância ecológica e epidemiológica. As metodologias atualmente empregadas nesse estudo não possibilitam a identificação de múltiplas fontes de sangue, caracterização de espécies filoganéticamente relacionadas bem como repastos tardios acima de 72 horas, no trato digestivo de insetos vetores. Objetivo: O presente trabalho tem por objetivo utilizar a espectrometria de massa para identificação de fontes de sangue em vetores de zoonoses tendo como modelo o flebótomo Lutzomyia longipalpis (Díptera – Psychodidae). Para identificação e diferenciação de espécies de animais vertebrados foi usada a hemoglobina que é a molécula mais abundante no trato digestivo dos insetos após alimentação. Material e Métodos: As amostras retiradas do trato digestivo de 250 insetos foram separadas por cromatografia líquida de alto desempenho e submetidas à identificação em espectrômetros de massa MALDI TOF/TOF e LC ESI-Q-TOF em escala de nanofluxo. Resultados: Dos cinco mil espectros gerados foram identificadas todas as espécies de animais vertebrados (homem, cão, galinha, porco, raposa e hamster) usados nos experimentos em laboratório incluindo múltiplos repastos. Foi possível também a identificação de espécies após 96 horas da primeira alimentação e o acompanhamento da digestão das hemoglobinas que revelaram diferentes perfis de clivagem para cada animal usado como fonte de sangue. As hemoglobinas identificadas em insetos capturados no campo foram as de cão doméstico, porco e galinha que correspondem a espécies presentes na residência onde foram feitas as coletas. Discussão: As técnicas mencionadas neste trabalho foram desenvolvidas para aplicação de forma inédita na identificação de reservatórios de zoonoses e demonstraram considerável sensibilidade e acurácia, podendo ser usadas para estudos de comportamento e preferências alimentares de vetores em áreas endêmicas e de risco, contribuindo assim para elaboração de medidas de controle mais eficazes no combate a doenças transmitidas por insetos hematófagos. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: The study of the food content of hematophagous insects is useful for ecological and epidemiological. The methods currently employed in this study did not allow the identification of multiple sources of blood, characterization of species and related filoganéticamente repasts late over 72 hours, the gut of insect vectors. Objective: This study aims to use mass spectrometry to identify sources of blood in vectors of zoonoses and based on the sandfly Lutzomyia longipalpis (Diptera - Psychodidae). For identification and differentiation of species of vertebrate animals used was the hemoglobin molecule is the most abundant in the digestive tract of insects after feeding. Methods: Samples taken from the digestive tract of 250 insects were separated by liquid chromatography high performance and submitted for identification in mass spectrometers MALDI TOF / TOF and LC-ESI Q-TOF-scale Nanoflow. Results: of the five thousand spectra generated were all identified species of vertebrates (humans, dogs, chicken, pig, fox and hamster) used in laboratory experiments including multiple blood meals. They also allowed the identification of species after 96 hours of first feeding and monitoring the digestion of hemoglobin, which revealed different patterns of cleavage for each animal used as a source of blood. Hemoglobins identified in insects were captured in the field of the domestic dog, pig and chicken that correspond to species present in the residence where the collections were made. Discussion: The techniques mentioned in this paper were developed for use in novel ways to identify reservoirs of zoonoses and demonstrated considerable sensitivity and accuracy, and can be used for studies of behavior and feeding preferences of vectors in endemic areas and risk, thus contributing to development control measures more effective in combating diseases transmitted by blood-sucking insects.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-28T21:53:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Abigail Marcelino dos Santos Silva.pdf: 4737414 bytes, checksum: 6d5e7224ed503576d6f5980323a0d5e5 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-06T22:53:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Abigail Marcelino dos Santos Silva.pdf: 4737414 bytes, checksum: 6d5e7224ed503576d6f5980323a0d5e5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-06T22:53:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Abigail Marcelino dos Santos Silva.pdf: 4737414 bytes, checksum: 6d5e7224ed503576d6f5980323a0d5e5 (MD5) Previous issue date: 2015-09-15 / A falta de padronizações sistemáticas deixa questões em aberto na identificação das espécies crípticas dos complexos Lutzomyia longipalpis e L. umbratilis, que incluem vetores dos agentes etiológicos das leishmanioses no Brasil. As metodologias de identificação taxonômica têm contribuído para um maior conhecimento da diversidade biológica. Porém o status taxonômico destes dois grupos de flebotomíneos ainda permanece incerto no Brasil. A filogenética molecular é uma ferramenta essencial para investigação de espécies crípticas. Para inferência filogenética com dados de sequências de nucleotídeos existem métodos estatísticos de inferência, inclusive métodos baseados em probabilidade. Estão disponíveis em duas abordagens: Máxima Verossimilhança (MV) e Bayesiana (BE). Neste trabalho foi avaliada a adequação destas abordagens na investigação das referidas espécies crípticas utilizando um marcador mitocondrial (citocromo oxidase I – COI) e um nuclear (gene period – per). Para o complexo L. umbratilis, o método BE apresentou árvores filogenéticas com maiores probabilidades, ou seja, com melhores resultados em relação às árvores inferidas por MV, principalmente com a utilização do marcador COI. Já para o complexo de espécies L. longipalpis, o método BE apresentou a melhor árvore filogenética em relação ao método MV e apenas utilizando o marcador nuclear period. Tendo alcançado melhores resultados com o marcador mitocondrial COI, para L. umbratilis, e period, para L. longipalpis, e com a abordagem BE, conclui-se que esta abordagem juntamente com os respectivos marcadores teve maior adequação do que a abordagem MV. / The lack of systematic standardization leaves open questions in the identification of cryptic species complex of Lutzomyia longipalpis and L. umbratilis, including vectors of etiological agents of leishmaniasis in Brazil. The taxonomic identification methodologies have contributed to a better understanding of biological diversity. But the taxonomic status of these two sandflies groups remains uncertain in Brazil. Molecular phylogenetics is an essential tool for research cryptic species. For phylogenetic inference nucleotide sequence data are statistical inference methods, including methods based on probability. two approaches are available: Maximum Likelihood (ML) and Bayesian (BE). This work evaluated the adequacy of these approaches in the investigation of these cryptic species using a mitochondrial marker (cytochrome oxidase I - COI) and nuclear (gene period - per). For the complex L. umbratilis the method presented phylogenetic trees BE with higher probability, that is, with better results in respect of trees inferred by MV, especially with the use of the COI marker. As for the species complex L. longipalpis, the BE method presented the best phylogenetic tree in relation to the MV method only using the nuclear period marker. Having achieved better results with the mitochondrial marker COI to L. umbratilis, and period to L. longipalpis, and with BE approach, it is concluded that this approach together with their markers had better match than the MV approach.

Orientador: Jose Lopes de Faria / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-17T06:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Velloni_Mario_D.pdf: 8511326 bytes, checksum: c8b7c57691a293c776f128da66bbd219 (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: Não informado. / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Anatomia Patologica

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-09-26Bitstream added on 2015-01-26T13:30:58Z : No. of bitstreams: 1 000806755.pdf: 1374249 bytes, checksum: e446f3e8307d735063830e24c3d915ae (MD5) / Tomato chlorosis virus (ToCV) é a única espécie de crinivírus relatada no Brasil. O vírus causa sintomas que incluem mosqueado clorótico irregular entre as nervuras que se desenvolve primeiramente nas folhas do baixeiro e é transmitido por moscas-brancas. ToCV já foi relatado nas principais áreas de produção de tomate do Sudeste e Centro-Oeste do Brasil. Tomateiros com sintomas típicos de ToCV foram encontrados em cultivo protegido no munícipio de Santa Maria – RS associados com uma alta infestação de moscas-brancas. Através de análise do gene mitochondrial cytochrome oxidase I (mtCOI) foi possível identificar Trialeurodes vaporariorum como a única espécie de mosca-branca presente no campo amostrado. A presença do ToCV nos tomateiros foi confirmada por RT-PCR e pelo sequenciamento de nucleotídeos do fragmento amplificado. Este é o primeiro relato de ToCV no Estado do Rio Grande do Sul. Considerando que 100% das plantas apresentavam o sintoma da doença, concluíse que T. vaporariorum é um vetor eficiente do ToCV e pode estar contribuindo para a dispersão desse vírus para outros países da América do Sul. / Tomato chlorosis virus (ToCV) é a única espécie de crinivírus relatada no Brasil. O vírus causa sintomas que incluem mosqueado clorótico irregular entre as nervuras que se desenvolve primeiramente nas folhas do baixeiro e é transmitido por moscas-brancas. ToCV já foi relatado nas principais áreas de produção de tomate do Sudeste e Centro-Oeste do Brasil. Tomateiros com sintomas típicos de ToCV foram encontrados em cultivo protegido no munícipio de Santa Maria – RS associados com uma alta infestação de moscas-brancas. Através de análise do gene mitochondrial cytochrome oxidase I (mtCOI) foi possível identificar Trialeurodes vaporariorum como a única espécie de mosca-branca presente no campo amostrado. A presença do ToCV nos tomateiros foi confirmada por RT-PCR e pelo sequenciamento de nucleotídeos do fragmento amplificado. Este é o primeiro relato de ToCV no Estado do Rio Grande do Sul. Considerando que 100% das plantas apresentavam o sintoma da doença, concluíse que T. vaporariorum é um vetor eficiente do ToCV e pode estar contribuindo para a dispersão desse vírus para outros países da América do Sul.

Orientador: Renate Krause Sakate / Coorientador: Julio Massaharu / Banca: Edson Luiz Baldin / Banca: Valdir Atsushi Yuki / Resumo: Tomato chlorosis virus (ToCV) é a única espécie de crinivírus relatada no Brasil. O vírus causa sintomas que incluem mosqueado clorótico irregular entre as nervuras que se desenvolve primeiramente nas folhas do baixeiro e é transmitido por moscas-brancas. ToCV já foi relatado nas principais áreas de produção de tomate do Sudeste e Centro-Oeste do Brasil. Tomateiros com sintomas típicos de ToCV foram encontrados em cultivo protegido no munícipio de Santa Maria - RS associados com uma alta infestação de moscas-brancas. Através de análise do gene mitochondrial cytochrome oxidase I (mtCOI) foi possível identificar Trialeurodes vaporariorum como a única espécie de mosca-branca presente no campo amostrado. A presença do ToCV nos tomateiros foi confirmada por RT-PCR e pelo sequenciamento de nucleotídeos do fragmento amplificado. Este é o primeiro relato de ToCV no Estado do Rio Grande do Sul. Considerando que 100% das plantas apresentavam o sintoma da doença, concluíse que T. vaporariorum é um vetor eficiente do ToCV e pode estar contribuindo para a dispersão desse vírus para outros países da América do Sul. / Abstract: Tomato chlorosis virus (ToCV) é a única espécie de crinivírus relatada no Brasil. O vírus causa sintomas que incluem mosqueado clorótico irregular entre as nervuras que se desenvolve primeiramente nas folhas do baixeiro e é transmitido por moscas-brancas. ToCV já foi relatado nas principais áreas de produção de tomate do Sudeste e Centro-Oeste do Brasil. Tomateiros com sintomas típicos de ToCV foram encontrados em cultivo protegido no munícipio de Santa Maria - RS associados com uma alta infestação de moscas-brancas. Através de análise do gene mitochondrial cytochrome oxidase I (mtCOI) foi possível identificar Trialeurodes vaporariorum como a única espécie de mosca-branca presente no campo amostrado. A presença do ToCV nos tomateiros foi confirmada por RT-PCR e pelo sequenciamento de nucleotídeos do fragmento amplificado. Este é o primeiro relato de ToCV no Estado do Rio Grande do Sul. Considerando que 100% das plantas apresentavam o sintoma da doença, concluíse que T. vaporariorum é um vetor eficiente do ToCV e pode estar contribuindo para a dispersão desse vírus para outros países da América do Sul. / Mestre

Orientador: Marcos Rogério André / Banca: Heitor Miraglia Herrera / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Lucia Helena O'dwyer de Oliveira / Banca: Estevam Guilherme Lux Hoppe / Resumo: As enfermidades transmitidas por artrópodes vêm sendo recentemente estudadas em animais selvagens brasileiros, os quais podem atuar como hospedeiros tanto para os vetores quanto para os patógenos, muitos dos quais apresentam potencial zoonótico. O presente estudo tem como objetivo investigar a ocorrência de agentes transmitidos por artrópodes (agentes Anaplasmataceae, Bartonella spp., mycoplasmas hemotróficos, Rickettsia spp., Hepatozoon spp. e piroplasmideos) em animais selvagens, cães domésticos e seus respectivos ectoparasitos, amostrados na região do Pantanal sul matogrossense, por meio de métodos sorológicos e moleculares. Para tal, 31 Nasua nasua, 78 Cerdocyon thous, sete L. pardalis, 42 cães, 110 roedores e 30 marsupiais foram capturados. Os carrapatos recolhidos (1582) dos animais pertenciam às espécies Amblyomma sculptum, Amblyomma parvum, Amblyomma ovale, Amblyomma tigrinum, Rhipicephalus microplus, Rhipicephalus sanguineus sensu lato e Amblyomma auricularium. Adicionalmente, 80 pulgas Polygenis (Polygenis) bohlsi bohlsi foram recolhidas. Quatorze (17,9%) C. thous, sete (16,6%) cães e um (3,2%) N. nasua mostraram-se soropositivos (títulos≥80) para Ehrlichia canis, com títulos de anticorpos variando de 80 a 1280. Nenhum animal mostrou-se soropositivo Anaplasma phagocytophilum. Nove cães, dois C. thous, um N. nasua, oito roedores, cinco marsupiais e um pool de pulgas P. (P.) b. bohlsi mostram-se positivos para Ehrlichia spp. Todos os cães e o pool de pulgas P. (P.) b.... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The diseases transmitted by arthropods have been recently studied in Brazilian wildlife, which can act as hosts for vectors and pathogens, many of which have zoonotic potential. The present work aimed to investigate the occurrence of tick-borne agents (Anaplasmataceae agents, Bartonella spp., hemotropic mycoplasmas, Rickettsia spp., Hepatozoon spp. and piroplasms) in wild animals, domestic dogs and their respective ectoparasites, in southern Pantanal region, central-western Brazil, by serological and molecular assays. For this reason, 31 Nasua nasua, 78 Cerdocyon thous, seven L. pardalis, 42 dogs, 110 rodents and 30 marsupials were captured. The ticks collected (1582) from animals belonged to the species Amblyomma sculptum, Amblyomma parvum, Amblyomma ovale, Amblyomma tigrinum, Rhipicephalus microplus, Rhipicephalus sanguineus sensu lato and Amblyomma auricularium. Additionally, 80 Polygenis (Polygenis) bohlsi bohlsi fleas were collected. Overall, 14 (17.9%) C. thous, seven (16.6%) dogs and one (3.2%) N. nasua were seroreactive (titer≥80) to Ehrlichia canis, with titers ranging from 80 to 1280. No animal showed to be seroreactive for A. phagocytophilum antigen. Nine dogs, two C. thous, one N. nasua, eight rodents, five marsupials and one P. (P.) b. bohlsi pool were positive for Ehrlichia spp. All positive dogs and the only P. (P.) b. bohlsi pool positive for Ehrlichia spp. were also positive in specific E. canis-qPCR based on dsb gene. Seven N. nasua, two dogs, one C. thous, ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2013-03-08T19:24:42Z No. of bitstreams: 1 TESE_PesquisaRickettsiaAnimais.PDF: 2788368 bytes, checksum: 2bae56a7ebc11ae8a045b81894ff639f (MD5) / Approved for entry into archive by Neide Nativa (neide@sisbin.ufop.br) on 2013-03-11T17:53:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE_PesquisaRickettsiaAnimais.PDF: 2788368 bytes, checksum: 2bae56a7ebc11ae8a045b81894ff639f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-11T17:53:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE_PesquisaRickettsiaAnimais.PDF: 2788368 bytes, checksum: 2bae56a7ebc11ae8a045b81894ff639f (MD5) Previous issue date: 2010 / A febre maculosa é uma doença transmitida por carrapatos e tem como agente etiológico bactérias do gênero Rickettsiia, envolvendo no ciclo da Febre Maculosa Brasileira, cães, roedores e marsupiais como reservatórios vertebrados e carrapatos e pulgas como seus vetores invertebrados com os humanos atuando como hospedeiros acidentais, e constituindo elo terminal no ciclo dessas bactérias. A patogenicidade atribuída a estes microorganismos é ainda desconhecida para varias espécies, bem como os fatores de risco, demográficos e sazonais relacionados às respectivas doenças ocasionadas. Para a realização deste estudo, foram selecionados dois municípios do estado de Minas Gerais com prévio histórico de ocorrência destas enfermidade em humanos, sendo dois casos recentes no município de Pingo D'água, localizado na região do Vale do Rio Doce e o município de Santa Cruz do Escalvado, localizado no Vale do Piranga, Zona da Mata Mineira, estado de Minas Gerais foco antigo para riquetsioses, que sofreu alteração recente em sua paisagem natural, devido a construção de uma usina hidrelétrica na localidade de Soberbo no ano de 2004. Assim, com o objetivo de melhor compreender a atual situação epidemiológica das riquetsioses nesses municípios, dentro de uma concepção de ocupação e transformação do espaço geográfico por ação antrópica, buscou-se avaliar o nível de contato destes agentes nas populações de animais domésticos e sinantrópicos, realizaram-se ensaios sorológicos e ferramentas da biologia molecular. Eqüinos, cães, roedores e gambás foram capturados e identificados, tendo sido ainda coletadas amostras de soro bem como ectoparasitas. Dos roedores capturados foram colhidas amostras de tecidos (fígado e baço), e dos gambás amostras de sangue total, sendo realizado ainda nestes animais colheita de material por swab anal. Das amostras de sangue, tecidos, ectoparasitas e swabs anal extraiu-se DNA, que foram amplificadas através de PCR usando oligonucleotídeos iniciadores para amplificação gênero específica do gene da citrato sintase (gltA). Os produtos amplificados obtidos foram visualizados em gel de agarose a 1,5%. Apenas amostras de ectoparasitas das espécies Amblyomma cajennense coletados de cães, eqüinos, gambás-Didelphis aurita e Ctenocefalides canis e Ctenocefalides felis em pulgas de gambás apresentaram resultados positivos à PCR. As amostras de soros de animais silvestres e domésticos foram investigadas quanto à presença de anticorpos reativos à antígenos de Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri, Rickettsia felis, Rickettsia belli, Ricketssia rhipicephali e Rickettsia amblyommii pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Amostras que apresentaram títulos iguais ou superiores a 1:64 foram considerados positivas para Rickettsia. No município de Pingo D’ Água das 46 amostras de soros de roedores analisadas, dentre estas 31 da espécie Rattus rattus, 7 Oryzomys subflavus, 7 Nectomys squamipes e 1 Bolomys sp. 26 (83,88%) das amostras de R. rattus, seis (85,72%) das amostras de Oryzomys e Nectomys e a única amostra de soro de Bolomys analisada apresentaram resultados positivos para bacterias do grupo da febre maculosa. No município de Santa Cruz do Escalvado das 62 amostras de soro de roedores analisadas, dentre estas 32 da espécie R. rattus, 2 Oryzomys subflavus, e 23 Nectomys squamipes e 5 Akodon sp. 30 amostras de R. rattus testadas, 30 foram reativas à RIFI para Rickettsia do Grupo das Febres Maculosas, totalizando 93,75% das amostras. Os dados sorológicos obtidos nos municípios de Pingo D’ Água e Santa Cruz do Escalvado, apontam a espécie R. rattus como a mais representativa entre os roedores, o que a credencia para participação no ciclo enzoótico das riquetsioses nas referidas regiões. Levando em consideração o agravante de essa ser a espécie mais sinantrópica em relação às outras estudadas neste projeto, é importante atentar-se para o possível risco de dispersão de organismos do gênero Rickettsia por esses animais no município. Foram analisadas ainda 42 amostras de soros de eqüinos e 24 amostras de soros de cães provenientes de Pingo D’ Água, com reatividade sorológica contra riquétsias do GFM em 16 (38,09%) dentre as amostras de eqüinos e em duas (8,33%) dentre as amostras de cães. Em Santa Cruz do Escalvado foram analisadas 66 amostras de soros de eqüinos e 67 amostras de soros de cães, verificando-se uma sororeatividade contra riquétsias do GFM em dez (15,15%) dentre as amostras de soros de eqüinos e em 14 (20,89%) dentre as amostras de soros de cães. Das 38 amostras de soro de D. aurita coletados no município de Santa Cruz do Escalvado, em 16 verificou-se a presença de Rickettsia, sendo que em 42,1% dos soros foram reativos contra R. rickettsii, 39,5% contra R. parkeri, 18,4% contra de R. amblyommi e 2,6% contra R. felis. Os achados sorológicos e de biologia molecular obtidos neste trabalho recomendam a manutenção de uma vigilância epidemiológica permanente nos municípios estudados, bem como em seu entorno, buscando-se desta maneira evitar a ocorrência de novos casos humanos causada pela invasão destes focos naturais pelo homem ou pela dispersão de potenciais reservatórios e vetores de agentes riquetsiais para novas áreas do estado ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________ / Spotted fever is a disease transmitted by ticks presenting as his etiological agent bacteria of the genus Rickettsia. Involved in her natural cycle, dogs, rodents, and marsupials actuated as vertebrate reservoirs, been ticks, and fleas the invertebrates vectors. Humans actuating as accidental hosts are becoming the final link in the cycle of these bacteria. The pathogenicity attributed to these microorganisms is still unknown for several of the Rickettsia species, including the involved factors of risk and the demographic and seasonal factors related. For this study, we selected two counties in the state of Minas Gerais, Brazil, that have prior history of occurrence of this disease in humans: Pingo D'Água, located in Vale do Rio Doce, with two recent cases reported, and Santa Cruz do Escalvado, located in Vale do Piranga, Zona da Mata Mineira, a former focus for rickettsial diseases, which has suffered recent change in their natural landscape due to the construction of a hydroelectric plant in the town of Superb in 2004. Thus, in order to better understand the current epidemiological situation of the rickettsial diseases in these municipalities, under a conception of occupation and transformation of geographic space by anthropic actions, we sought to evaluate the level of transmission of these agents in populations of domestic and synanthropic animals, realizing serological and molecular biology assays. Horses, dogs, rodents and opossums were captured and identified, from whom were collected serum samples and ectoparasites. From rodents captured were collected samples of tissues (liver and spleen). From opossums were collected samples of whole blood and anal swab. From blood, tissues, ectoparasites, and anal swabs were extracted DNA samples, which were subsequently amplified by PCR using primers for amplification of Rickettsia genus-specific citrate synthase gene (gltA). The amplified products obtained were visualized in agarose gel 1.5%. Only samples of parasites of the species Amblyomma cajennense collected from dogs, horses, and opossums, and fleas (Ctenocefalides canis and Ctenocefalides felis) collected from opossums tested positive by PCR. Serum samples from wild and domestic animals were investigated by Immunofluorescence Assay (IFA) for the presence of antibodies reactive to antigens of Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri, Rickettsia felis, Rickettsia belli, Rickettsia rhipicephali and Rickettsia amblyommii. Samples that had titers equal or greater than 1:64 in the IFA were considered positive for Rickettsia. In the municipality of Pingo D’Água, from 46 serum samples rodents tested, among these 31 species of Rattus rattus, seven Oryzomys subflavus, seven Nectomys squamipes, and one Bolomys sp., 26 (83.88%) samples of R. rattus, six (85.72%) samples of Oryzomys and Nectomys, and the single serum sample of Bolomys examined were positive for bacteria of the spotted fever group (SFG). In Santa Cruz do Escalvado, serum samples from 62 rodents tested, among these 32 species of R. rattus, two Oryzomys subflavus and five Nectomys squamipes, and 23 Akodon sp., 30 samples of R.rattus were reactive by IFA for Rickettsia agents from the SFG, totaling 93.75% of the samples. The serological data obtained in the municipalities of Pingo D'Água and Santa Cruz do Escalvado, indicated that the species R. rattus is the most representative among the rodents, which accredits to participate in the enzootic cycle of rickettsial diseases in these regions. Taking into account the aggravating factor that is the most synanthropic species over all others studied in this project, it is important to pay attention to the possible risk of dispersal of the genus Rickettsia by these animals in the municipalities. We also analyzed serum samples of 42 horses and 24 serum samples of dogs from Pingo D'Água, which showed serological reactivity against rickettsiae from SFG. Sixteen (38.09%) among the samples from horses and two (8, 33%) among the samples of dogs tested showed positive results. In Santa Cruz do Escalvado were we analyzed 66 serum samples from horses and 67 serum samples from dogs, were found a seroreactivity against rickettsiae organisms of SFG in ten (15.15%) among the serum samples of horses and in 14 (20 89%) among the serum samples of dogs tested. Of 38 serum samples from D. aurita collected in Santa Cruz do Escalvado, in 16 were verified the response against Rickettsia, been 42.1% of sera reactive against R. rickettsii, 39.5% against R. parkeri, 18.4% against R. amblyomma and 2.6% against R. felis. The findings of serological and molecular biology in this work recommend the maintenance of effective epidemiological surveillance in the municipalities studied, as well as its surroundings, searching in this way avoid the occurrence of new human cases of outbreaks caused by invasion by man or by natural dispersal of potential reservoirs and vectors for Rickettsia to new areas of the state.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-11-28Bitstream added on 2014-06-13T19:21:51Z : No. of bitstreams: 1 simao_fb_dr_rcla.pdf: 1851483 bytes, checksum: 4f667b0db3f8c30e9f84faf0b4bb1ca0 (MD5) / Unir/Riomar / O município de Porto Velho teve sua ocupação marcada por um sério desordenamento urbano, que resultou, entre outros, em aglomerados populacionais de baixa renda, originados de migrações externas e internas que se assentaram em locais impróprios para a urbanização. Isso deu origem a conflitos sócio-ambientais e de saúde pública, ou seja, contribuiu para uma crescente insuficiência dos serviços de saneamento e para o incremento da pobreza. A deterioração das condições de vida no município criou ambientes favoráveis à proliferação de vetores transmissores de doenças parasitárias, contribuindo para a intensificação da transmissão no meio urbano e para o agravamento do problema de saúde pública, em especial pela malária. A maioria da população portovelhense habita áreas com elevado risco de transmissão, pois vive em locais com ambientes propícios à formação de criadouros dos mosquitos que transmitem a malária, tais como: nascentes, drenagens, áreas alagadas e florestas remanescentes. Há também, em algumas áreas, evidência de vegetação equatorial úmida, de maneira a tornar a cidade vulnerável à proliferação de mosquitos anofelinos, vetores de malária, especialmente em áreas com freqüência de migrantes. O município, hoje, detém pouco mais de 25% dos casos de malária do Estado de Rondônia, isso porque o crescimento populacional acelerado cria uma série de problemas urbanos de infra-estrututa em todos os aspectos. O modelo de políticas públicas atuais não é eficiente na erradicação da doença na área urbana. Em razão dos problemas expostos, esse estudo teve por objetivo mapear as possíveis áreas de maior prevalência do vetor transmissor da doença, associando-as aos problemas sócio-ambientais para que essas informações possam orientar o poder público e a sociedade, com o fim de interferir no controle da endemia eficientemente. / Porto Velho municipal district had its occupation characterized by a serious disordering process, which has resulted in agglomerations of low income people, originated from external and internal migration which had been settled in improper areas, therefore this occupation originated social-environmental and public health conflicts, contributing to an increasing sewage inadequacy and poverty. The degradation process of life standards in the municipal district led to favorable conditions for the proliferation of vector transmitter parasitic diseases, contributing to the disease spreading in urban areas and the aggravation of public health problems, particularly malaria. The majority of Porto Velho's population inhabits areas where there are several transmission risks, due the high incidence of malaria transmitter mosquitoes that live in water nascent, drainage, flooded and forest remained areas. There is also, in some areas, equatorial humid vegetation, turning the place vulnerable to the proliferation of malaria mosquito transmitters, particularly in areas with high frequency of migrants. The municipal district has nowadays more than 25% of malaria cases in Rondonia, mainly because of disordered population increasing, which creates urban problems in all aspects. The public politics used nowadays aren't efficient on eradicating the disease in urban areas. Due to the exposed problems, this study aims to map the potential malaria prevalence areas, associating to the socio-environment problems in order to orientate government and society to control, properly, the endemic malaria. In order to accomplish this task, there was used specific statistical techniques of multiple correspondence analysis, applied to physical environment and adapted to the social area.

Resumo: A Rickettsia rickettsii, bactéria Gram-negativa intracelular obrigatória, é o principal agente etiológico da Febre Maculosa Brasileira (FMB) e da Febre Maculosa das Montanhas Rochosas nos Estados Unidos. A sua transmissão para o homem e para outros animais, ocorre principalmente pela picada do carrapato infectado. Os sintomas no hospedeiro aparecem depois de um período de incubação, que varia de 2 a 14 dias após a picada. As riquetsias são bactérias que se disseminam nos carrapatos ixodideos, por se multiplicarem no citoplasma das células intestinais, ovarianas, de glândulas salivares, e de túbulos de Malpighi sendo encontradas também na própria hemolinfa do ectoparasito. Na América Latina o carrapato Amblyomma cajennense tem sido considerado o principal vetor da R. rickettsii para humanos, todavia o Rhipicephalus sanguineus, por ser o principal carrapato que parasita os cães, e estando presente principalmente em áreas urbanas, pode ser também um possível portador do patógeno. Embora ainda não confirmado como vetor da Febre Maculosa para humanos no Brasil, o ixodideo é da R. rickettsii nos EUA, no México e, possivelmente na Colômbia. Sendo assim, este estudo teve por objetivo investigar como ocorre a disseminação e a distribuição da bactéria R. rickettsii em ovários e glândulas salivares de fêmeas adultas de carrapatos R. sanguineus, por meio de técnicas histológicas. A análise dos resultados revelou a presença da bactéria nos ovários e glândulas salivares das fêmeas do carrapato R. sanguineus. Nos ovários as bactérias estavam presentes em todos os estágios de desenvolvimento dos ovócitos (I, II, III, IV e V), preferencialmente, no pólo voltado para o pedicelo, produzindo lesão, bem como nas células do pedicelo. Nas glândulas salivares, a R. rickettsii foi observada em todos os tipos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Rickettsia rickettsii, a Gram negative bacterium, obligate intracellular, is the main pathogen of the Brazilian Spotted Fever (BSF) and Rocky Mountain Spotted Fever in the United States. Its transmission to humans and other animals occurs primarily through the bite of infected ticks. The symptoms in the host come after an incubation period of two to 14 days after the bite. Rickettsiae are bacteria that spread in ixodid ticks by multiplying in the cytoplasm of intestinal cells, ovary, salivary glands and Malpighian tubules and can be found also in the hemolymph of the ectoparasite. In Latin America the tick Amblyomma cajennense has been considered the main vector of R. rickettsii to humans, however Rhipicephalus sanguineus as the main tick that parasitizes dogs and largely present in urban areas, can become a possible vector. This ixodid has not been confirmed as a vector of spotted fever to humans in Brazil, but it can transmit R. rickettsii in the U.S., Mexico, and possibly in Colombia. Thus the main objective of this study was to investigate how R. rickettsii spreads and what is its behavior in different tissues of adult female ticks R. sanguineus, through application of histologic techniques. The results showed the presence of the bacterium in the ovaries and salivary glands of females of the tick. In the ovaries bacteria were present in all stages of development of oocytes (I, II, III, IV and V), and causing lesion preferably at the pole of oocytes, as well as in pedicel cells. In the salivary glands, R. rickettsii was observed in all acini types (agranular and granular), beyond the wall and the lumen of the excretory ducts. Histological analysis of ovaries showed that infection by the R. rickettsii negative impact the process of reproduction... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria Izabel Camargo Mathias / Coorientador: Marcelo Bahia Labruna / Banca: Gervasio Henrique Bechara / Banca: Solange Aparecida Rossini de Oliveira / Mestre